Hier beschreven is het gebruik van verschillende zelfgemaakte tools om volwassen Drosophilaover te dragen, te koelen en te doden, evenals om glazen cultuur flesjes schoon te maken en eieren te verzamelen. Deze gereedschappen zijn gemakkelijk te maken en zijn vrij efficiënt in het hanteren van Drosophila.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Eenvoudige zelfgemaakte gereedschappen voor het hanteren van fruit vliegjes-Drosophila melanogaster
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
De fruitvlieg, Drosophila melanogaster, wordt veel gebruikt zowel in biologisch onderzoek als in het biologie onderwijs. Het hanteren van volwassen vliegen is gebruikelijk, maar moeilijk in de praktijk, als volwassen vliegen vliegen. Hier wordt gedemonstreerd hoe u enkele eenvoudige en kosteneffectieve hulpmiddelen maakt om moeilijke problemen bij de behandeling van Drosophilaaan te pakken. Gaten in Foam stoppers worden gemaakt en pipetpunten of trechters worden in de gaten gestoken. Vliegen gaat dan slechts in één richting naar de pipetpunt/trechter assemblage, waardoor de overdracht van volwassen Drosophila in of uit een injectieflacon efficiënt kan worden besturen. Bestaande protocollen zijn aangepast voor koel-anesthetiserende vliegen door te koelen in gemalen ijs en ze over te dragen op een koud, hard icepack oppervlak. Het icepack is bedekt met een stukje medisch gaas dat geïmmobiliseerde vliegt uit het gecondenseerde water wanneer onderzocht onder een stereomicroscoop. De vliegen worden uiteindelijk geëerd voor het tellen en sorteren of weggegooid door Microwaving. Er is ook een fles vormige kooi ontwikkeld voor het verzamelen van eieren, evenals een arbeidsbesparend apparaat en een begeleidend protocol voor het reinigen van glazen kweek flesjes.
Inleiding
De fruitvlieg, Drosophila melanogaster, is een modelorganisme dat op grote schaal wordt gebruikt in biologisch onderzoek en biologie onderwijs om een breed scala aan onderwerpen1,2te bestuderen. De fundamentele problemen van de behandeling Drosophila zijn de overdracht van volwassenen van flacon naar injectieflacon en immobilisatie van de vliegen, zodat ze gemakkelijker te hanteren, als alle volwassenen (behalve voor sommige mutanten3,4) kan vliegen.
Conventioneel, een onderzoeker transfers vliegt van de en....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
1. gereedschappen en accessoires voorbereiden
- Tip/trechter stoppers
- Verkrijg twee spons pluggen (de diameter van de stekkers moet iets groter zijn dan de inwendige diameter van de flacons gebruikt voor het overbrengen van vliegen). Maak een gat in de centra van de spons pluggen met een verwarmde elektrische soldeerbout.
- Verkrijg twee pipetpunten van 1 mL, snijd één op de helft dwars met een scherp mes en gooi het puntige uiteinde weg. Snijd vervolgens 1,5 cm van het puntige uiteinde van de tweede pipetpunt. Lijm de resten van de twee pipetpunten samen met een multifunctionele lijm om een langwerpige pipetpunt te maken (<....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De T-en F-stoppers werden ontwikkeld als een set van eenvoudige gereedschappen die kunnen worden aangepast en gebruikt in elke Fly overdragen activiteiten. Het overdragen van vliegen van een oude cultuur in verschillende verse culturen omvat het verwijderen van de stekkers van de verse flesjes, vervangen door F-stoppers, dan aftappen van de vliegen in de oude injectieflacon, snel verwijderen van de stekker, en vervangen door een T-stopper. Als het oude voedsel compact is, dan is het belan.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
In dit artikel worden enkele zelfgemaakte hulpmiddelen beschreven voor het verwerken van basisactiviteiten die betrokken zijn bij het fokken en experimenteren met Drosophila . Deze tools zijn eenvoudig maar wel effectief. Praktisch, elk lab kan deze tools gemakkelijk te maken, en een onderzoek of een onderwijs laboratorium hoeft niet te vinden van een kant-en-klare alternatief dat is misschien niet beschikbaar lokaal.
Fly-overdracht is de meest voorkomende praktijk en een moeilijke ta.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteur heeft niets te onthullen.
Materialen
```html
```
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Een tang | |||
| Snoerloze boormachine | max snelheid: 500 rpm | ||
| Elektrisch soldeerbout | |||
| Vijlen | |||
| Trechter | diameter schijf<60mm | ||
| IJsbox | |||
| Insectspelden | |||
| Infraroodthermometer | HCIYET HT-830 | ||
| Lange rubberen handschoenen | |||
| Mechanica potloden | |||
| Medische gaas | |||
| Microcentrifugebuis | 100 ul | ||
| Microgolfoven | |||
| Parafilm | |||
| Peri schaal | interne diameter 60 mm | ||
| Pipettipjes | 1 ml | ||
| Kunststof film | |||
| Kunststof Peri schaal | Φ36 mm gebruikt om het lege glaasje te dekken | ||
| Spitse pincet | |||
| Beschermende werkhandschoenen | |||
| Opnieuw in te vriezen harde ijspacks | 26.5×14.5×2.5 cm of groter | ||
| Rubberen luchtblazer | |||
| Snap cutter | |||
| Frisdrankfles | 500 ml, interne diameter ca. 65 mm | ||
| Sponsdop | |||
| Roestvrijstalen sponzen | |||
| Buisborstel | |||
| Viooltje | Φ34 mm × 90 mm |
Referenties
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
