Methodenartikel

Ruimtelijke en temporele controle van muizen melanoom initiatie van mutant melanocyt stamcellen

DOI:

10.3791/59666

⸱

7 juni 2019

 ,  ,  ,  , 
1Department of Biomedical Sciences, Cornell University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De volgende procedure beschrijft een methode voor ruimtelijke en temporele controle van melanocytische tumor initiatie in muizen dorsale huid, met behulp van een genetisch gemanipuleerde muismodel. Dit protocol beschrijft macroscopische en microscopische cutane melanoom initiatie.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cutane melanoom is bekend als de meest agressieve huidkanker. Hoewel de risicofactoren en belangrijke genetische veranderingen nog steeds worden gedocumenteerd met toenemende diepte, de incidentie van cutane melanoom heeft aangetoond een snelle en continue toename in de afgelopen decennia. Met het oog op effectieve preventieve methoden te vinden, is het belangrijk om de vroege stappen van melanoom initiatie in de huid te begrijpen. Eerdere gegevens heeft aangetoond dat folliculaire melanocyt stamcellen (MCSCs) in de volwassen huid weefsels kunnen fungeren als melanoomcellen van herkomst bij het uitdrukken van oncogene mutaties en genetische veranderingen. Tumorigenesis die voortvloeien uit melanoom-gevoelige MCSCs kan worden geïnduceerd wanneer MCSCs overgang van een rustige naar actieve staat. Deze overgang in melanoom-gevoelige MCSCs kan worden bevorderd door de modulatie van ofwel haarfollikel stamcellen ' activiteit staat of door middel van Extrinsieke omgevingsfactoren zoals ultraviolet-B (UV-B). Deze factoren kunnen kunstmatig worden gemanipuleerd in het laboratorium door chemische ontharing, die de overgang van de haarfollikel stamcellen oorzaken en MCSCs van een rustige naar actieve toestand, en door UV-B blootstelling met behulp van een benchtop licht. Deze methoden bieden een succesvolle ruimtelijke en temporele controle van cutane melanoom initiatie in de muizen dorsale huid. Daarom, deze in vivo modelsystemen zal waardevol zijn om de vroege stappen van cutane melanoom initiatie te definiëren en kan worden gebruikt om mogelijke methoden voor de preventie van tumoren te testen.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Melanoom, de kwaadaardige vorm van melanocytische tumoren, is de meest agressieve kanker in de huid met cutane melanoom verantwoordelijk voor de meerderheid van de huidkanker sterfgevallen1. In de Verenigde Staten, melanoom wordt vaak gediagnosticeerd; het is naar verwachting de 5th tot 6e meest voorkomende vorm van kanker onder de geschatte nieuwe kankergevallen in 20182. Bovendien, terwijl de algehele incidentie van kanker hebben aangetoond dat de trend van geleidelijke vermindering van de afgelopen decennia, cutane melanoom incidentie percentages in de afgelopen decennia tonen een continue en snelle toename van beide geslachten2.

Om cutane melanoom efficiënter te bestrijden, is het belangrijk om de vroege gebeurtenissen van melanoom ontwikkeling van hun cellen van herkomst duidelijk te begrijpen om klinisch effectieve preventieve methoden beter te kunnen identificeren. Het is nu bekend dat volwassen stamcellen aanzienlijk kunnen bijdragen aan de vorming van tumoren als de cellulaire oorsprong van kanker in veel verschillende soorten organen, waaronder huid weefsels3,4,5. Evenzo, volwassen melanocyt stamcellen (MCSCs) in de muizen dorsale huid kan werken als melanoomcellen van herkomst bij afwijkende activering van de RAS/RAF en Akt paden6. Echter, deze oncogene mutaties alleen niet in staat zijn om efficiënt te induceren tumorvorming van rustige MCSCs. melanocytische tumoren ontwikkelen zich uiteindelijk wanneer MCSCs actief worden tijdens natuurlijk haar fietsen. Echter, in dit protocol, zullen we beschrijven methoden om kunstmatig induceren cellulaire activering van tumor-gevoelige MCSCs, waardoor de precieze controle van melanoom initiatie6,7.

Door middel van de hier beschreven methoden, ruimtelijke en temporele controle van cutane melanoom initiatie van tumor-gevoelige MCSCs uiten oncogene BrafV600E samen met het verlies van Pten expressie kan met succes worden uitgevoerd, zoals we hebben eerder gemeld6. Deze methode bevat eerdere bevindingen die aantonen haarfollikel stamcel activering door ontharing, alsmede hoe de blootstelling van muizen huid aan UV-B kan vergemakkelijken activering van MCSCs inwoner van de haarfollikel en de verplaatsing van deze cellulaire subpopulatie aan interfollicular epidermis6,8,9,10. Deze in vivo modelsystemen kunnen waardevolle informatie verschaffen over hoe fysiologische en milieuveranderingen de cellulaire status van melanoom-gevoelige MCSCs kunnen veranderen, wat op zijn beurt een significante initiatie van melanoom in de huid kan veroorzaken.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle dierlijke procedures worden uitgevoerd in overeenstemming met de Cornell University Institutional Animal Care en use Committee (DEC).

1. voorbereiding

  1. Verzamel de staart clips van 12 dagen postnatale muizen en Digest in 400 µ L van 0,05 N NaOH bij 95 °C voor 1 h. Vortex en voeg 32 µ L van 1 M Tris-HCl, pH 7. Genotype muizen volgens PCR protocollen die via het Jackson laboratorium en identificeren muizen met genotype van belang6.
    - Tyr-creer – hemizygous (+/CreER)
    - LSL-BrafV600E – zygoot (+/LSL-V600E)
    - Pten – homozygous flox (flox/flox)
    - LSL-tdTomato – hemizygous (+/LSL-tdTomato)
    Opmerking: Primer sequenties zijn voorzien in de tabel van materialen.
  2. Gebruik een tondeuse (elektrisch trimmer) te scheren de dorsale huid 2 tot 3 dagen voor alle experimenten hieronder beschreven, en wanneer muizen zijn ongeveer 7 weken oud. Zorg ervoor dat de dunne muis huid niet met behulp van de elektrische trimmer schade als elke verwonding kan een wondgenezing reactie die zal activeren haarfollikel stamcellen, met inbegrip van MCSCs.
  3. Bepaal of de haar cyclus in telogene is en of de huid tijdens de wachttijd wordt verwond. Als de huid een teken van verwonding toont, zou de muis niet voor deze procedures moeten worden gebruikt.
    Opmerking: Hoewel de haar cyclus enigszins kan verschillen tussen genetische achtergronden, op deze leeftijd de haar cyclus in de dorsale huid is meestal in de telogene staat11. De Tyr-creer transgene zal doelwit MCSCs in telogene huid, en de daaropvolgende genetische veranderingen zullen permanent worden uitgedrukt in alle geslachten van de MCSC, met inbegrip van gedifferentieerde melanocyten en melanocytische tumoren.

2. Tamoxifen behandeling voor CRE-Lox genetische recombinatie

  1. Voorbereiding van Tamoxifen voor intraperitoneale injectie (IP) of actuele toediening voor systemische of gelokaliseerde genetische recombinatie
    Opmerking: Om Tamoxifen te induceren recombinatie, moet eerst worden afgebroken door de lever tot 4-hydroxytamoxifen (4-OHT), die kunnen binden aan en activeer de creer. Actuele toepassing van Tamoxifen zal niet worden omgezet op deze manier en 4-OHT moet direct worden gebruikt. Voor voldoende recombinatie is slechts één methode van Tamoxifen-levering vereist.
    1. Tamoxifen: bereid tamoxifen bij een concentratie van 10 mg mL-1 opgelost in maïsolie voor. Om te helpen bij de ontbinding van het medicijn in oplossing, toe te voegen tot 10% totaal volume van 100% moleculaire ethanol aan de drug in poedervorm, Vortex voor 3 min en voeg vervolgens de resterende hoeveelheid maïsolie. Ga verder met Vortex totdat kristallijn materiaal niet meer zichtbaar is in oplossing. Tamoxifen oplossing kan worden gesteriliseerd door het passeren van een 0,2 µm filter. Ga verder met stap 2.2.1 voor behandeling.
    2. 4-OHT: bereid een stockoplossing van hydroxytamoxifen tot 3 mg mL-1 in 100% ethanol. Dan, kan een het werkoplossing zo veel worden toegepast zoals nodig om het huid gebied van belang (over het algemeen één enkele toepassing) te behandelen.
      Opmerking: Een stockoplossing van hydroxytamoxifen kan in 100% ethanol opgelost worden voor een eindconcentratie van 5 mM. Dan, om een werkende oplossing voor te bereiden, kan 5 µ L van 4OH-Tamoxifen voorraadoplossing in 15 µ L van 100% ethylalcohol worden verdund. Voor 4 mm2 ruimte, kan 1 tot 3 µ l van werkende oplossing plaatselijk worden toegepast.
  2. Het behandelen van muizen met tamoxifen hetzij systemisch of plaatselijk
    1. Voor systemische behandeling, het beheer van 2 mg Tamoxifen via IP-injectie eenmaal daags gedurende 3 dagen met behulp van een 26 G naald.
      Opmerking: Met behulp van dit model, ongeveer 93% ± 4% van rustige MCSCs zijn gelabeld met tdTomato6.
    2. Voor regionale activering, voert u een Topische behandeling met 4-OHT. Bedek de huid gebied van belang met de werkende oplossing. De hoeveelheid werkende oplossing kan worden bepaald door de grootte van de regio van belang zoals beschreven in stap 2.1.2.
  3. Bij 48 h na de laatste dosis van Tamoxifen, ga naar stap 3 voor chemische ontharing geïnduceerde tumor initiatie of naar stap 4 voor UV-B geïnduceerde tumor initiatie

3. chemische ontharing

  1. Voorzie een muis behandelkamer met een Isofluraan systeem met de volgende vereiste materialen: Ontharingscrème, wattenstaafjes, papieren doek en water.
  2. Plaats de muis in de inductie kamer en verdoven met 3,5 tot 4,5% Isofluraan en 1 L/min zuurstof.
  3. Zodra de ademhalingsfrequentie is gestabiliseerd, bevestigen dat de muis in het juiste vlak van anesthesie door het uitvoeren van een teen knijpen en de overdracht van de muis om de belangrijkste buis te handhaven anesthesie met 1 tot 1,5% Isofluraan en 1 L/min zuurstof. Toepassing Eye zalf om de ogen te houden van het drogen, terwijl onder narcose.
  4. Gebruik een wattenstaafje om een dun laagje van de Ontharingscrème toe te passen op de geschoren regio van de muis huid.
  5. Zodra de crème is gelijkmatig toegepast, gebruik schone wattenstaafjes om te beginnen met verwijderen. De totale tijd dat de crème in contact met de huid mag niet meer dan 1 min.
  6. Veeg de huid voorzichtig af met een vochtige papieren doek en zorg ervoor dat de rest crème is verwijderd.
    Opmerking: Ontharingscrème kan irritatie veroorzaken aan de huid als het niet volledig verwijderd. Sommige muizen, zoals die op een C57BL/6 achtergrond, kan gevoelig zijn voor het ontwikkelen van dermatitis12. Hoewel zeldzaam, sommige dieren zal ontwikkelen dermatitis binnen 24 uur na ontharing crème toepassing of mechanische ontharing. Zorg ervoor dat de muizen controleren de dag na de behandeling op zoek naar tekenen van regionale huidirritatie.
  7. Gooi de verwijderde haarschachten en alle materialen die worden gebruikt in een Biohazard bin.
  8. Plaats de muis in een lege, schone muis kooi tot de anesthesie is verslijt.
  9. De muizen terug te keren naar hun kooien.

4. UV-B bestraling

  1. Voorzie een muis behandelkamer met een Isofluraan systeem met de volgende vereiste materialen: UV-B licht systeem, UV-B licht meter, beschermende bekleding voor de muis, extra UV-B beschermingsmiddelen voor onderzoeker, en een timer.
  2. Muizen moeten worden bestraald op de UV-B-dosis van belang (dat wil zeggen, 0-180 mJ/cm2). Gebruik de UV-B licht meter om de juiste tijdsduur vast te stellen om de muizen te bestralen.
    Opmerking: MW/cm2 x tijd = dosis
  3. Verdoven de muis met Isofluraan. Terwijl in de inductie kamer, gebruik 3,5 tot 4,5% Isofluraan en 1 L/min zuurstof.
  4. Zodra de muis is gestabiliseerd, bevestig anesthesie effecten met een teen knijpen en breng de muis naar de belangrijkste anesthesie buis gelegen in UV-kamer. Toepassing Eye zalf om de ogen te voorkomen drogen, terwijl onder narcose. Onderhoud anesthesie met 1 tot 1,5% Isofluraan en 1 L/min zuurstof.
  5. Bedek de dorsale huid met UV-B beschermende materiaal, zodat alleen de gewenste regio zal worden blootgesteld.
    Opmerking: Op dit moment moet passende BESCHERMINGsmiddelen worden gebruikt. De lengte van de tijd die nodig is om de muis te bestralen is afhankelijk van de intensiteit van de gloeilamp gebruikt, maar anesthesie kan nodig zijn om te worden gecontroleerd als de vereiste tijd meer dan 30 s.
  6. Bedek de UV-kamer met behulp van UV-bestendig deksel of andere geschikte materialen.
  7. Zet de UV-B-lamp en bestraling van de muis voor de tijd bepaald door onderzoekers voor het specifieke doel.
  8. Zet de UV-systeem en Isofluraan, plaats dan de muis om een lege muis kooi totdat de anesthesie is verslijt.
  9. De muizen terug te keren naar hun kooien.

5. weefsel verwerking

  1. Huid isolatie
    1. Verkrijg de volgende voor aanvang: necropsie instrumenten, filtreerpapier en papieren handdoeken.
    2. Euthanaseren de muizen volgens dec goedgekeurde protocollen, en bevestig de dood voorafgaand aan de procedure.
    3. Met behulp van een tondeuse, scheren elk haar uit de dorsale huid gebied. Licht borstel het gebied met een pluisvrij weefsel om het gebied te ontruimen.
    4. Maak een kleine incisie met een scherpe schaar net boven de onderkant van de staart.
    5. Steek grote botte schaar in de incisie en scheid de subdermale bindweefsel.
    6. Zorgvuldig isoleren van de huid regio van belang door te snijden met een scherpe schaar langs de rand van het weefsel.
    7. Plaats de huidweefsel op een schone papieren handdoek en gebruik doffe tang om de huid te strekken, zodat het zich houdt aan de handdoek en wordt onderwezen. Deze stap dient om extra steun voor het weefsel te verstrekken zodat het kan worden gemanipuleerd en worden verwerkt terwijl het handhaven van zijn vorm.
      Opmerking: Wees voorzichtig om alleen omgaan met de buitenste regio's van het huidweefsel, als de Tang kan schade veroorzaken aan de huid die kan worden gezien histologisch.
  2. Weefsel fixatie
    1. Vouw een stuk filtreerpapier in de helft en het etiket op de juiste wijze. Plaats de huid samen met papieren handdoek backing in het gevouwen papier direct naast de plooi, ervoor te zorgen dat het monster glad is en niet gevouwen of gekreukt. Verzegel het filtreerpapier door de open kanten te nieten, en dan trim zodat het resterende document voor toekomstige steekproeven kan worden gebruikt.
      Opmerking: Deze stap wordt uitgevoerd, zodat de huid behoudt zijn vorm tijdens de fixatie.
    2. Dompel het weefselmonster volledig onder in 10% neutraal gebufferde formaline voor 3 tot 5 h bij kamertemperatuur of overnachting bij 4 °C.
    3. Na fixatie, verwijder de monsters van formaline, wassen in deioniseerde water (2x, 5 min elk) en gaan om weefsel blokken te maken. Verwijder zorgvuldig alle reststoffen uit het huidweefsel (dat wil zeggen, rest papier).
  3. Het maken van bevroren weefsel blokken (Figuur 1)
    1. Trim de randen van de huid monster, zodat ze niet zijn gekarteld en maak dan 3 sagittale bezuinigingen. De breedte van deze stroken mag niet meer zijn dan de hoogte van de cryomold (5 mm). Vervolgens maken transversale bezuinigingen te hebben stukjes van de huid die niet langer zijn dan de breedte van de cryomold (20 mm) en kan worden ingebed. Herhaal dit met de resterende helft van de dorsale huid, of sla het weefsel voor andere toepassingen (afwisselend, sparen de helft voorafgaand aan de fixatie).
      Opmerking: Het is belangrijk om de huid stukken te houden in de juiste oriëntatie.
    2. Oriënteer de cryomold (25 x 20 x 5 mm3) in een portret oriëntatie en plaats 4 tot 5 stukjes van de huid op de top van de okt. Zodra alle stukken op zijn plaats, gebruik 2 paren van fijne tang om de lange rand van huid aan de bodem van de cryomold te brengen. Huid moet nu opstaan in de LGO loodrecht op de basis van de mal. Zorg ervoor dat de vorming van luchtzakken te minimaliseren binnen de LGO tijdens deze stap (Figuur 1).
    3. Vul de mal met okt naar de tweede lip, en plaats op het platte oppervlak van droog ijs. Gebruik een tang om alle huid stukken die kunnen hebben verschoven tijdens de overdracht als het blok begint te bevriezen aan te passen. Zodra de onderste laag is verhard, manipulatie van weefsels zal onmogelijk zijn.
    4. Cut 8-10 µm dia's voor analyse.
  4. Het maken van formaline vaste paraffine embedded (FFPE) weefsel blokken
    1. Plaats 2 stukken van vaste huid in een geëtiketteerde cassette en droog in stijgende concentraties van ethylalcohol (75% ethylalcohol voor 30 min, 85% voor 30 min, 90% voor 30 min, 95% voor 30 min, 100% voor 2x 30 min, xyleen of xyleen substituut voor 2x 30 min). Incubeer met paraffine op 58-60 ˚, eerst voor 30 min, en dan 's nachts.
    2. Embed het weefsel in een 24 x 24 mm2 roestvrijstaal weefsel mal met vloeibare paraffine en stollen bij-5 ° c. Het weefsel oriëntatie moet vergelijkbaar zijn met die van bevroren weefsel blokken, zodat longitudinale secties over meerdere haarzakjes kunnen worden gevisualiseerd (Figuur 1).
    3. Zodra de paraffine heeft gestold, verwijder de mal en snijd ze in 5-10 μm secties voor analyse.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cutane melanoom initiatie geïnduceerd door chemische ontharing

De procedure van chemische ontharing is afgebeeld in Figuur 2. Wanneer muizen zijn 7-weken postnatale, hun dorsale huid is in telogene. Tijdens telogene, haarfollikel stamcellen en MCSCs staan bekend om in een rustige, rusttoestand. De huid moet tonen geen significante haargroei na het scheren. Aan de andere kant, chemis...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hallmark genetische veranderingen vaak gevonden in cutane melanoom tumoren zijn goed beschreven13. De meest dominante driver mutatie is BrafV600E, en een genetisch gemanipuleerde muismodel voor BrafV600E-gemedieerde melanoom werd gegenereerd door de Bosenberg groep14 en neergelegd in het Jackson Laboratory. Met behulp van deze muismodel, onze recente studie aangetoond dat de eis van cellulaire activering van tumor-gevoelige MCSCs voor...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren geen belangenverstrengeling.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd ondersteund door het Bureau van de adjunct-minister van defensie voor gezondheidszaken, via de peer reviewed kankeronderzoek programma onder gunning W81XWH-16-1-0272. Adviezen, interpretaties, conclusies en aanbevelingen zijn die van de auteurs en zijn niet noodzakelijkerwijs onderschreven door het ministerie van defensie. Dit werk werd ook gesteund door een zaad toelage van het Cornell programma van de stam cel aan A.C. wit. H. de maan werd gesteund door het Cornell centrum voor geleerden van het gewervelde Genomics programma.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
TamoxifenSigmaT5648-1GVoor systemische injectie
TamoxifenCayman Chemical13258Voor systemische injectie
Corn oilSigma45-C8267-2.5L-EA
4OH-tamoxifenSigmaH7904-25MGVoor topische behandeling
26 G 1/2" naaldendiverseVeterinaire kwaliteit
1 mL spuitdiverseVeterinaire kwaliteit
HuisdierhaartrimmerWahl09990-502
HaarverwijderingscrèmeNairn/aBeschikbaar in de meeste drogisterijen
Wattenstaafjesdiverse
Ultraviolette gloeilampUVP95-0042-08model XX-15M middenklasse UV-lamp
200 proof ethanoldiversezuiver ethanol
Histoplast PEFisher Scientific22900700paraffine pellets
Neutraal gebufferd formaline, 10%SigmaHT501128-4L
Clear-Rite 3Thermo Scientific6901xyleen vervanger
O.C.T. CompoundThermo23730571
WeefselcassetteSakura89199-430voor FFPE-verwerking
CryomouldsSakura455725 x 20 mm
FFPE metalen malLeica380308224 mm x 24 mm
IsofluraandiverseVeterinaire kwaliteit
Anesthesie-inhalatiesysteemdiverseVeterinaire kwaliteit
Fijne schaarFST14085-09Recht, scherp/scherp
Fijne schaarFST14558-09Recht, scherp/scherp
MetzenbaumFST14018-13Recht, stomp/stom
PincetFST11252-00Dumont #5
PincetFST11018-12Micro-Adson
Tyr-CreER; LSL-BrafV600E; Pten-f/fJackson Labs13590
LSL-tdTomatoJackson Labs007914ai14
Cre-1n/aGCATTACCGGTCGATGCAACGA
GTGATGAG
Cre-2n/aGAGTGAACGAACCTGGTCGAA
ATCAGTGCG
Braf-V600E-1n/aTGAGTATTTTTGTGGCAACTGC
Braf-V600E-2n/aCTCTGCTGGGAAAGCGGC
Kras-G12D-1n/aAGCTAGCCACCATGGCTTGAGT
AAGTCTGCA
Kras-G12D-2n/aCCTTTACAAGCGCACGCAGACT
GTAGA
Pten-1n/aACTCAAGGCAGGGATGAGC
Pten-2n/aAATCTAGGGCCTCTTGTGCC
Pten-3n/aGCTTGATATCGAATTCCTGCAGC
tdTomato-1n/aAAGGGAGCTGCAGTGGAGTA
tdTomato-2n/aCCGAAAATCTGTGGGAAGTC
tdTomato-3n/aGGCATTAAAGCAGCGTATCC
tdTomato-4n/aCTGTTCCTGTACGGCATGG

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wernli, K. J., Henrikson, N. B., Morrison, C. C., Nguyen, M., Pocobelli, G., Blasi, P. R. Screening for skin cancer in adults: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force. The Journal of the American Medical Association. 316 (4), 436-447 (2016).
  2. Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics, 2018. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (1), 7-30 (2018).
  3. White, A. C., Lowry, W. E. Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin. Trends in Cell Biology. 25 (1), 11-20 (2015).
  4. Moon, H., Donahue, L. R., White, A. C. Understanding cancer cells of origin in cutaneous tumors. Cancer Stem Cells. , 263-284 (2016).
  5. Blanpain, C. Tracing the cellular origin of cancer. Nature Cell Biology. 15 (2), 126-134 (2013).
  6. Moon, H., Donahue, L. R., et al. Melanocyte stem cell activation and translocation initiate cutaneous melanoma in response to UV exposure. Cell Stem Cell. 21 (5), 665-678 (2017).
  7. Moon, H., White, A. C. A path from melanocyte stem cells to cutaneous melanoma illuminated by UVB. Molecular & Cellular Oncology. 5 (2), e1409864(2018).
  8. Rabbani, P., Takeo, M., et al. Coordinated activation of Wnt in epithelial and melanocyte stem cells initiates pigmented hair regeneration. Cell. 145 (6), 941-955 (2011).
  9. Chou, W. C., Takeo, M., et al. Direct migration of follicular melanocyte stem cells to the epidermis after wounding or UVB irradiation is dependent on Mc1r signaling. Nature Medicine. 19 (7), 924-929 (2013).
  10. Keyes, B. E., Segal, J. P., et al. Nfatc1 orchestrates aging in hair follicle stem cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (51), E4950-9 (2013).
  11. Müller-Röver, S., Handjiski, B., et al. A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages. The Journal of Investigative Dermatology. 117 (1), 3-15 (2001).
  12. Kastenmayer, R. J., Fain, M. A., Perdue, K. A. A retrospective study of idiopathic ulcerative dermatitis in mice with a C57BL/6 background. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science : JAALAS. 45 (6), 8-12 (2006).
  13. Vultur, A., Herlyn, M. SnapShot: melanoma. Cancer Cell. 23 (5), 706-706.e1 (2013).
  14. Dankort, D., Curley, D. P., et al. Braf(V600E) cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma. Nature Genetics. 41 (5), 544-552 (2009).
  15. Viros, A., Sanchez-Laorden, B., et al. Ultraviolet radiation accelerates BRAF-driven melanomagenesis by targeting TP53. Nature. 511 (7510), 478-482 (2014).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Chemische depilatieUV B bestralingactivatie van haarfollikelsisolatie van huidweefselOCT inbeddingbereiding van cryomallentumorpreventiemodellendorsale huid van muizen

Gerelateerde artikelen