Methodenartikel

Oprichting van acute Pontine Infarct in Ratten door elektrische stimulatie

5.6K weergaven

DOI:

10.3791/60783

27 augustus 2020

In dit artikel

Samenvatting

Hier gepresenteerd is een protocol voor het vaststellen van acute pontine infarct in een rat model via elektrische stimulatie met een enkele puls.

Samenvatting

Pontine infarct is de meest voorkomende slag subtype in de achterste circulatie, terwijl er ontbreekt een knaagdier model nabootsen pontine infarct. Mits hier is een protocol voor het succesvol vaststellen van een rat model van acute pontine infarct. Ratten met een gewicht van ongeveer 250 g worden gebruikt, en een sonde met een geïsoleerde schede wordt geïnjecteerd in de pons met behulp van een stereotaxic apparaat. Een laesie wordt veroorzaakt door de elektrische stimulatie met een enkele puls. De Longa score, Berderson score, en balk balans test worden gebruikt om neurologische tekorten te beoordelen. Daarnaast wordt de kleefverwijdering somatosensorische test gebruikt om de sensorimotorische functie te bepalen, en de ledemaat plaatsing test wordt gebruikt om proprioceptie te evalueren. MRI-scans worden vervolgens gebruikt om het infarct in vivo te beoordelen, en TTC-kleuring wordt gebruikt om het infarct in vitro te bevestigen. Hier wordt een succesvol infarct geïdentificeerd dat zich in de anterolaterale basis van de rostralpons bevindt. Tot slot wordt een nieuwe methode beschreven om een acuut pontïneinfarct rat model vast te stellen.

Inleiding

Sinds de jaren 1980, de middelste cerebrale slagader occlusie (MCAO) model geïnduceerd door siliconen filamenten is op grote schaal gebruikt in de fundamentele slag onderzoek1. Er zijn ook andere methoden gebruikt (d.w.z. het hechten van één tak van de MCA2 en fotochemisch geïnduceerde focale infarcten). Deze modellen zijn genoemd MCA-gebaseerde slagmodellen en hebben sterk bijgedragen aan onderzoeken van de pathofysiologische mechanismen die ten grondslag liggen aan beroerte en potentiële therapieën. Hoewel er beperkingen van deze experimentele modellen3,4, deze....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Het protocol werd beoordeeld en goedgekeurd door de Institution Animal Care and Use Committee van the Second Affiliated Hospital van guangzhou Medical University, een instelling geaccrediteerd door AAALACi. De ratten werden geleverd door het Animal Center van de Southern Medical University.

1.

  1. Gebruik volwassen mannelijke Sprague-Dawley ratten met een gewicht van 250 ± 10 g.
  2. Bij transport huisvesten de ratten ten minste 1 week voor de operatie onder gecontroleerde omgevingsomstandigheden met een omgevingstemperatuur van 25 °C, relatieve vochtigheid van 65%, en 12 h/12 h licht/donker cyclus.
  3. Zorg voor voedsel en....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Zes dieren werden onderworpen aan het hierboven beschreven operatieprotocol. De controlegroep zoals weergegeven in figuur 4 bestond uit zes ratten. De hersenplakjes in figuur 4 zijn afgeleid van één rat per groep.

Uit de MRI-scan bleek dat het infarct zich bevond in de basis van de pons(figuur 4A). Aangezien de sonde 2 mm aan de linkerkant van de middellijn werd geïnjecteerd, werd het infarct zijdelings g.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De huidige studie biedt een protocol voor het genereren van een acute pontine infarct rat model. Dit model kan worden gebruikt voor onderzoek naar prognose en revalidatie (inclusief chronische pijn na beroerte) bij patiënten met een pausstreekstreek.

Er zijn verschillende sterke punten van deze methode. Ten eerste biedt het een ratmodel van een acuut pontïneinfarct voor toekomstige studies. Zoals hierboven vermeld, pontine infarct is een veel voorkomende beroerte subtype dat minder aandacht he.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Geen belangenverstrengeling.

Dankbetuigingen

Deze studie werd financieel ondersteund door de National Science Foundation of China (81471181 en 81870933) aan Y. Jiang en de National Science Foundation of China (nr. 81601011), Natural Science Foundation van de provincie Jiangsu (nr. BK20160345) aan J. Zhu en door het Wetenschappelijk Programma van Guangzhou Municipal Health Commission (20191A011083) aan Z. Qiu.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
4-0 suctureShanghai JinzhongChirurgische instrumenten
PlasterShanghai JinzhongChirurgische instrumenten
Dier anesthesie systeemRWDDraag een masker bij het gebruik van het systeem
BotcementShanghai JinzhongChirurgisch instrument
Genezen klemShanghai JinzhongChirurgisch instrument
Algemene weefselschaarShanghai JinzhongChirurgisch instrument
IndoPhorsGuoyao van ChinaSterilisatie
IsofluraanRWD217181101
Lesie-aanmaakapparaatShanghai YuyanHet maken van een lesie
MRI-systeemBruker BiospinBevestiging van infarct in vivo
NaaldhaakShanghai JinzhongChirurgisch instrument
PenicillineGuoyao van ChinaInfectinebestrijding
SondesAnkeEnige modificatie nodig
Q-tipsShanghai JinzhongChirurgisch instrument
Schaar voor snijdenShanghai JinzhongChirurgisch instrument
Stereotaxisch apparaatRWD
NaainaaldShanghai JinzhongChirurgisch instrument
Weefselhoudende pincettenShanghai JinzhongChirurgisch instrument
TTCSigma-AldrichBCBW5177Voor infarctbevestiging in vitro

Referenties

  1. Zhu, J., et al. Suppression of local inflammation contributes to the neuroprotective effect of ginsenoside Rb1 in rats with cerebral ischemia. Neuroscience. 202, 342-351 (2012).
  2. Xu, X., et al.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Rattenmodelstereotaxisch apparaatMRI scanningTTC kleuringneurologische tekortengedragstestenhersenlaesieanterolaterale pons

Gerelateerde artikelen