Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Sucrose voorkeur en nieuwheid-geïnduceerde Hypophagia Tests bij ratten met behulp van een geautomatiseerde voedselinname monitoring systeem

10.5K weergaven

DOI:

10.3791/60953

8 mei 2020

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Hier gepresenteerd is een protocol om depressie-achtig en anhedonisch gedrag bij ratten te bestuderen. Het combineert twee gevestigde gedragsmethoden, de sacharose voorkeur en nieuwheid-geïnduceerde hypofagie tests, met een geautomatiseerd voedsel en vloeibare inname monitoring systeem, om indirect te onderzoeken knaagdier gedrag met behulp van surrogaat parameters.

Samenvatting

De prevalentie en incidentie van depressieve stoornissen nemen wereldwijd toe, die ongeveer 322 miljoen individuen treffen, wat de noodzaak van gedragsstudies in diermodellen onderstreept. In dit protocol, om depressie-achtig en anhedonic gedrag bij ratten te bestuderen, worden de gevestigde sacharosevoorkeur en nieuwheid-geïnduceerde hypofagietests gecombineerd met een geautomatiseerd systeem van de voedsel en vloeibare opnamecontrole. Voorafgaand aan het testen, in de sacharose voorkeur paradigma, mannelijke ratten zijn opgeleid voor ten minste 2 dagen om een sacharose oplossing te consumeren in aanvulling op leidingwater. Tijdens de test worden ratten opnieuw blootgesteld aan water en sacharoseoplossing. Het verbruik wordt elke seconde geregistreerd door het geautomatiseerde systeem. De verhouding van sacharose tot totale waterinname (sucrose preferentuurverhouding) is een surrogaatparameter voor anhedonia. In de nieuwigheid-geïnduceerde hypofagie test, mannelijke ratten ondergaan een trainingsperiode waarin ze worden blootgesteld aan een smakelijke snack. Tijdens de training vertonen knaagdieren een stabiele baseline snackinname. Op de testdag worden de dieren van huiskooien overgebracht naar een verse, lege kooi die een nieuwe onbekende omgeving vertegenwoordigt met toegang tot de bekende smakelijke snack. Het geautomatiseerde systeem registreert de totale inname en de onderliggende microstructuur (bijvoorbeeld latentie bij het benaderen van de snack), waardoor inzicht wordt verhelderd in anhedonic en angstig gedrag. De combinatie van deze paradigma's met een geautomatiseerd meetsysteem biedt meer gedetailleerde informatie, samen met een hogere nauwkeurigheid door het verminderen van meetfouten. Echter, de tests gebruiken surrogaat parameters en alleen verbeelden depressie en anhedonia op een indirecte manier.

Inleiding

Gemiddeld wordt 4,4% van de wereldbevolking getroffen door depressie. Deze zijn goed voor 322 miljoen mensen wereldwijd, een stijging van 18% ten opzichte van tien jaar geleden1. Volgens schattingen van de Wereldgezondheidsorganisatie, depressie zal de tweede in de rangschikking van handicap aangepaste levensjaren in 20202. Om de toenemende prevalentie van affectieve stoornissen aan te pakken en nieuwe interventionele strategieën vast te stellen, is het noodzakelijk om dit gedrag verder te bestuderen. Voorafgaand en naast onderzoek bij mensen zijn dierproeven noodzakelijk.

Verschillende modell....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

De dierlijke zorg en de experimentele procedures volgden de specifieke institutionele ethiekrichtlijnen en werden goedgekeurd door de staatsinstantie voor dierlijk onderzoek.

1. Werking van het geautomatiseerde bewakingssysteem

OPMERKING: Bij het gebruik van het geautomatiseerde bewakingssysteem is het van cruciaal belang om elke actie in het opmerkingenvak dat in de software is opgenomen, vlak voor de actie te documenteren. De beschrijving moet worden getypt in het opmerkingenvak en door op Opslaante drukken, wordt deze opgeslagen met een specifiek tijdpunt. De tijdpunten zijn aanzienlijk bij het ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Om de gegevensdistributie te testen, werd de Kolmogorov-Smirnov-test gebruikt. T-tests werden gebruikt toen gegevens normaal werden verspreid en Mann-Whitney-U test werd gebruikt, zo niet. One-way ANOVA gevolgd door Tukey post-hoc test werd gebruikt voor normaal verdeeld meerdere groep vergelijking. One-way ANOVA gevolgd door Dunn's meervoudige vergelijkingstest werd gebruikt in gevallen van niet-normale distributie. Verschillen tussen groepen werden als significant beschouwd wanneer p < 0,05.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De sacharose voorkeur en nieuwheid-geïnduceerde hypofagie tests zijn twee gevestigde technieken voor de evaluatie van anhedonia bij ratten. Hun combinatie met het geautomatiseerde voedselinname monitoring systeem zorgt voor een meer gedetailleerde analyse bij ongestoorde ratten en vermindert foutieve meting.

De incidentie van fouten wordt verminderd door verschillende benaderingen. Ten eerste, om de fout die optreedt als gevolg van morsen aan te pakken, de kloof tussen de voedselhopper en de p.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

A.S. is consultant voor a & r Berlin, Boehringer-Ingelheim, Takeda en Schwabe. Er zijn geen belangenconflicten.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door financiering van de German Research Foundation (STE 1765/3-2) en Charité University Funding (UFF 89/441-176, A.S.).

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Assembly LH Cage Mount - RAT-FOOD - includes Stainless cage mount, hopper, blocker, couplingResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABCMPRF01
Assembly LH Cage Mount unplugged - RAT - FOOD includes stainless steel cage mount, hopper, blocker, unplugged adapter, couplingResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABCMUPRF01
cage w/ 2 openings - RAT - costum modified cage - includes cage top and standard water bottleResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABCR02enkele huisvesting
Data collection Laptop Windows - Configured w/ BioDAQ SoftwareResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABLT003
verrijking (plastische buizen, knaaghout)verdeeld door de dierenfaciliteit
HoneyMaid Graham Cracker CrumbsNabisco, East Hanover, NJ, USAASIN: B01COWTA98smakelijk tussendoortje voor NIH-test
lage vibratie polymeerrekResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABRACKR
mannelijke Sprague Dawley-rattenEnvigoBestelcode: 002
Model #2210 32x Port BioDAQ Central Controller - includes cables, and calibration kitResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABCC32_03
Perifere sensorcontroller - inclusief kabelResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABPSC01
SigmaStat 3.1Systat Software, San Jose, CA, USAstatistische analyse
Roestvrijstalen blockerResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABBLKR
standaard knaagdierdeet met 10 kcal% vetResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USAD12450B
sucrose poederRoth4621.1voor SPT

Referenties

  1. World Health Organization. Depression. , Available from: https://www.who.int/health-topics/depression (2018).
  2. Reddy, M. S. Depression: the disorder and the burden. Indian Journal of Psychological Medicine. 32 (1), 1-2 (2010).
  3. Cryan, J. F., Mombereau, C.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Sucrosevoorkeurstestsucrosevoorkeursratioanhedonia beoordelinginname van smakelijke snacksanalyse van innamemicrostructuurdepressiemodellen bij knaagdierenprotocol voor gedragstesten