We presenteren een ECG-protocol dat technisch eenvoudig, goedkoop, snel en betaalbaar is in kleine muizen en kan worden uitgevoerd met verbeterde gevoeligheid. We stellen deze methode voor als een screeningsbenadering voor het bestuderen van farmacologische agentia, genetische modificaties en ziektemodellen bij muizen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Electrocardiogram Opnames in verdoofde muizen met lead II
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Het elektrocardiogram is een waardevol hulpmiddel voor de evaluatie van het cardiale geleidingssysteem. Dierlijk onderzoek heeft bijgedragen aan het genereren van nieuwe genetische en farmacologische informatie over het elektrocardiogram. Het maken van elektrocardiogrammetingen bij kleine dieren in vivo, zoals muizen, was echter een uitdaging. Hiertoe gebruikten we een elektrocardiogram opnamemethode bij verdoofde muizen met vele voordelen: het is een technisch eenvoudige procedure, is goedkoop, heeft een korte meettijd en is betaalbaar, zelfs bij jonge muizen. Ondanks de beperkingen met het gebruik van anesthesie, kunnen vergelijkingen tussen controle en experimentele groepen worden uitgevoerd met verbeterde gevoeligheid. We behandelden muizen met agonisten en antagonisten van het autonome zenuwstelsel om de geldigheid van dit protocol te bepalen en vergeleken onze resultaten met eerdere rapporten. Ons ECG-protocol detecteerde verhoogde hartslag- en QTc-intervallen bij de behandeling met atropine, verminderde hartslag en QTc-intervallen na de behandeling met Carbachol en hogere hartslagen en QTc-intervallen met isoprenaline, maar merkten geen verandering in ECG-parameters op het toedienen van propranolol. Deze resultaten worden ondersteund door eerdere rapporten, die de betrouwbaarheid van dit ECG-protocol bevestigen. Deze methode kan dus worden gebruikt als een screeningbenadering voor het uitvoeren van ECG-metingen die anders niet zouden worden geprobeerd vanwege hoge kosten en technische problemen.
Inleiding
Het elektrocardiogram (ECG), een test die de elektrische activiteit van iemands hartslag meet, is een waardevol hulpmiddel voor de evaluatie van het cardiale geleidingssysteem. De parameters die worden gemeten door een ECG zijn hartslag, PR-interval, QRS-duur en QT-interval. In het kort, PR-interval komt overeen met de tijd die nodig is voor een elektrische impuls om te reizen van de atriumsinusknoop door de atrioventriculaire knooppunt naar de Purkinje vezels; QRS duur is de tijd voor ventriculaire depolarisatie optreden via de Purkinje systeem en ventriculaire myocardium; en QT-interval is de duur van ventriculaire repolarisatie.
ECG-opna....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierprocedures werden goedgekeurd door het plaatselijke comité voor de verzorging en het gebruik van proefdieren, de Kyung Hee University (licentienummer: KHUASP(SE)-18-108) en in overeenstemming met de Us National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.
1. Proefdieren
- Houd alle muizen (39 muizen, Balb/c, man, 7\u20129 weken oud) in een ziekteverwekkervrije faciliteit volgens de gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren.
- Houd de muizen op een 12 uur licht/donkere cyclus op constante temperatuur met vrije toegang tot voedsel en water.
2. Bere....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Farmacologische experimenten
Om te bepalen of onze niet-invasieve ECG-meting de invloed van autonome modulatie op het cardiale geleidingssysteem weerspiegelt, werden normale Balb/c-muizen uitgedaagd met agonisten en antagonisten van het autonome zenuwstelsel (ANS). Atropine en carbachol werden gebruikt om parasympathische autonome blokkade en stimulatie effect, respectievelijk, terwijl propranolol en isoprenaline werden toegediend aan sympathische autonome blokkade en stimulat.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Er zijn verschillende kritieke stappen in het protocol. De omgeving moet vrij zijn van lawaai en trillingen. De ECG-elektroden moeten stabiel en consequent onder de huid worden ingebracht, waarvan de invoegstap voorlopige experimenten vereist totdat de onderzoeker technisch ervaren is. Verder moet de verdoving op de juiste manier worden bereid en opgeslagen en bij de juiste dosis worden gebruikt. Ten slotte moeten de PQRS-golven zich op de juiste manier in afzonderlijke ECG-beats in het venster Gemiddelde weergave bevind.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Er worden geen belangenconflicten, financieel of anderszins, verklaard door de auteurs.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door de Basic Science Research Programs die worden beheerd door de National Research Foundation of Korea (NRF) (2015R1C1A2A01052419 en 2018R1D1A1B07042484).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 2,2,2-tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | anesthetics, Avertin |
| Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan | Balb/c muizen, mannelijk, leeftijd 7-9 weken | |
| Atropine | Sigma-Aldrich | A0123 | parasympathisch antagonist |
| BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Australië | ML132 | bio versterker |
| Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | parasympathisch agonist |
| Elektroden met acupuncturnaalden | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea | DB106 | 0,20 x 15 mm |
| Isoprenaline | Sigma-Aldrich | I2760 | sympathisch agonist |
| LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Australië | data-analysesoftware | |
| Muizenvoer | LabDiet, St. Louis, MO, VS | 5L79 | Muizenvoer |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Australië | data-acquisitiesysteem | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | sympathisch antagonist |
| SPSS Statistics programma | SPSS | SPSS 25.0 | statistiekprogramma |
Referenties
- Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
- Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiol....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
