Methodenartikel

Laser Doppler Perfusion Imaging in de hindlimb van de muis

DOI:

10.3791/62012

⸱

18 april 2021

 , 
1Division of Vascular Surgery, University of Washington, 2VA Puget Sound Health Care System

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier presenteren we een protocol dat de techniek en noodzakelijke controles demonstreert voor Laser Doppler perfusiebeeldvorming om de bloedstroom in de achterpoten van de muis te meten.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bloedstroomherstel is een kritische uitkomstmaat na experimentele hindlimb ischemie of ischemie-reperfusie. Laser Doppler perfusion imaging (LDPI) is een veelgebruikte, niet-invasieve, herhaalbare methode voor het beoordelen van het herstel van de bloedstroom. De techniek berekent de totale bloedstroom in het bemonsterde weefsel van de Doppler-verschuiving in frequentie veroorzaakt wanneer een laser bewegende rode bloedcellen raakt. Metingen worden uitgedrukt in willekeurige perfusie-eenheden, dus de contralaterale niet-ingegrepen op het been wordt meestal gebruikt om metingen te helpen controleren. Meetdiepte ligt tussen 0,3-1 mm; voor hindlimb ischemie betekent dit dat dermale perfusie wordt beoordeeld. Huidperfusie is afhankelijk van verschillende factoren - het belangrijkste is de huidtemperatuur en het verdovingsmiddel, dat zorgvuldig moet worden gecontroleerd om betrouwbare metingen te kunnen opleveren. Bovendien kan haar- en huidpigmentatie het vermogen van de laser veranderen om de dermis te bereiken of door te dringen. Dit artikel demonstreert de techniek van LDPI in de muis hindlimb.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Huidzweren met onvoldoende wondgenezing is een belangrijke oorzaak van amputaties bij menselijke patiënten1. Adequate wondgenezing vereist hogere niveaus van arteriële perfusie dan nodig is om een intacte huid te behouden, die wordt aangetast bij patiënten met perifere arteriële ziekte2,3,4. Verschillende andere rheumatologische aandoeningen en diabetes kunnen ook leiden tot een verstoorde en ontoereikende huidmicrocirculatie om wonden te genezen5,6. Veel diabetespatiënten hebben gelijktijdige ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dierproeven werden uitgevoerd volgens een protocol goedgekeurd door de University of Washington Institutional Animal Care and Use Committee.

1. Scannervoorbereiding

  1. Stel de scannerhoogte zo in dat de afstand tot het gescande onderwerp ongeveer 30 cm is.
  2. Schakel de imager in en start de bijbehorende software.
  3. Open het meetprogramma. Als de software correct communiceert met de scanner, verschijnt de waarschuwing voor het inschakelen van de infraroodlaser.
  4. Kalibreer de machine met de door de fabrikant verstrekte normen (niet weergegeven in de video en is afhankelijk van het specifieke m....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Succesvolle LDPI moet resulteren in consistente scans met herhaalde metingen, met niet meer dan 100-150 variatie perfusie-eenheid (overeenkomend met ongeveer 10% van de gebruikelijke gemiddelde perfusie voor het muisvoetkussen) tussen de drie scans (figuur 2). Zoals aangetoond in figuur 2,helpen herhaalscans te bepalen dat de muis op de juiste manier is geëquilibreerd, zodat de ischemische/controleverhouding het beste de onderliggende bloedstroom weerspiegelt in.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Consistente techniek is van cruciaal belang voor het verkrijgen van betrouwbare resultaten met LDPI. Dezelfde verdoving, temperatuurinstellingen, muispositie en interessegebied moeten gedurende de hele tijd worden gebruikt. Verschillende anesthesiemiddelen resulteren in hogere of lagere perfusiewaarden9. Isofluraan anesthesie is handig vanwege het snelle begin en de opkomst, evenals de algehele veiligheid. Een consistent percentage isofluraan moet worden gebruikt als diepte van anesthesie met dit .......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dr Tang heeft geen belangenverstrengeling te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd uitgevoerd met behulp van faciliteiten en middelen in het VA Puget Sound Health Care Center. Het werk is dat van de auteur en weerspiegelt niet noodzakelijkerwijs de positie of het beleid van het Department of Veterans Affairs of de regering van de Verenigde Staten. Dr Tang wordt momenteel gefinancierd via de VA (Merit 5 I01 BX004975-02).

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Zwart niet-reflecterend materiaalStofwinkel, zwart neopreen aanbevolen door bedrijf
F/air-busA.M. Bickford Inc80120
Homeotherme deken met star metalen sondeHarvard ApparatusKomt ook met flexibele sonde, maar deze is minder duurzaam
IsofluraangeanesthesietoestelDragerMeerdere fabrikanten
IsofluraaninductiekamerVetEquip9414442 L kamer
Moor laser Doppler perfusie imagerMoor InstrumentsMoorLDI2-IRImager met hogere resolutie (MoorLDI2-HIR)
Muisanesthesie snuitkapMeerdere fabrikanten
NairNair
ZuurstoftankMeerdere fabrikanten
SurgilubeMeerdere distributeurs

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Varma, P., Stineman, M. G., Dillingham, T. R. Epidemiology of limb loss. Physical Medicine and Rehabilitation Clinics of North America. 25 (1), 1-8 (2014).
  2. Farber, A. Chronic Limb-Threatening Ischemia. New England Journal of Medicine. 379 (2), 171-180 (2018).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

AchterpotischemieHerstel van de bloedstroomBeelding van de achterpoot van de muisHuidmicrocirculatiePerfusiemetingIschemie reperfusieAnesthesiecontroleArteriele perfusieOntwikkeling van collaterale arteri n

Gerelateerde artikelen