Een aangepaste eenvoudige methode voor het opwekken van een hartinfarct bij muizen

Summary

Onder adequate anesthesie werd het muizenhart geëxternaliseerd door de intercostale ruimte en werd een myocardinfarct met succes geïnduceerd door de linker voorste dalende slagader (LAD) af te binden met behulp van materialen die in de meeste laboratoria gemakkelijk verkrijgbaar zijn.

Abstract

Myocardinfarct (MI) is een van de belangrijkste doodsoorzaken. MI-modellen worden veel gebruikt voor het onderzoeken van de pathomechanismen van post-MI-remodellering en evaluatie van nieuwe therapieën. Er zijn verschillende methoden (bijv. behandeling met isoproterenol, cryoletsel, ligatie van de kransslagader, enz.) gebruikt om MI te induceren. Vergeleken met behandeling met isoproterenol en cryoletsel, kan het afbinden van de kransslagader de ischemische respons en chronische remodellering na MI beter weerspiegelen. Traditionele methoden voor coronaire ligatie bij muizen zijn echter technisch uitdagend. De huidige studie beschrijft een eenvoudig en efficiënt proces voor inductie van MI in muizen met direct beschikbare materialen. De borsthuid van de muis werd onder stabiele narcose opengesneden. Het hart werd onmiddellijk geëxternaliseerd door de intercostale ruimte na stompe scheiding van de pectoralis major en pectoralis minor. De linker voorste dalende tak (LAD) werd vastgebonden met een 6-0 hechting op 3 mm van de oorsprong. Na LAD-ligatie duidde kleuring met 2,3,5-trifenyltetrazoliumchloride (TTC) op succesvolle inductie van MI en temporele veranderingen van post-MI-littekengrootte. Ondertussen toonden de resultaten van de overlevingsanalyse openlijke sterfte binnen 7 dagen na MI, voornamelijk als gevolg van hartruptuur. Bovendien toonde echocardiografische beoordeling na MI een succesvolle inductie van contractiele disfunctie en ventriculaire remodellering aan. Eenmaal onder de knie, kan binnen 2-3 minuten een MI-model in muizen worden vastgesteld met direct beschikbare materialen.

Introduction

Myocardinfarct (MI) is wereldwijd een van de belangrijkste doodsoorzaken en invaliditeit 1,2,3,4,5. Ondanks tijdige reperfusie is er momenteel een gebrek aan effectieve therapieën om post-MI cardiale remodellering te behandelen. Dienovereenkomstig zijn er aanzienlijke inspanningen geleverd voor mechanistische exploratie en therapie-exploitatie voor MI ^6,7,8. Merk op dat de vaststelling van MI-modellen een voorwaard....

Protocol

De experimenten met dierarbeid worden uitgevoerd met alle nodige goedkeuringen van de Laboratory Animal Welfare Ethics Committee van het Renji Hospital, Shanghai Jiao Tong University, School of Medicine (R52021-0506). Vrouwelijke en mannelijke C57BL/6J-muizen in de leeftijd van 8-10 weken werden in het onderzoek gebruikt.

1. Voorbereiding van de vereenvoudigde anesthesieapparatuur (OPTIONEEL)

OPMERKING: Dit is een optionele preoperatieve opstelling en kan worden vervangen door titreerbare anesthesie zoals vermeld in rubriek 2. De institutionele ethische commissie voor dieren en dierenarts(en) moete....

Results

Het experimentele protocol en enkele van de kritieke stappen zijn weergegeven in figuur 1. De vereenvoudigde anesthesieapparatuur induceerde anesthesie. Zoals te zien is in figuur 2A, was de geïnduceerde anesthesie stabiel, zoals blijkt uit de regelmatige ademhalingsfrequenties (variërend van 90-107 ademhalingen/min bij de geteste muizen). Na het afbinden van de kransslagader duidde TTC-kleuringsanalyse op succesvolle inductie van een myocardinfarct en temporele.......

Discussion

Het huidige rapport demonstreerde een eenvoudig protocol voor MI-inductie in muizen met direct beschikbare materialen, dat werd aangepast van een methode gerapporteerd door Gao¹⁶. Muizen MI-modellen zijn onmisbaar voor mechanistische exploratie en medicijnscreening voor post-MI-disfunctie en remodellering¹². Van de bestaande technieken voor MI-inductie is het afbinden van de kransslagader de meest toegepaste. Ligatie van de kransslagader recapituleert getrouw de ischemieaar.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride	SIGMA	T8877-25G	TTC staining
4-0 silk suture	YUANKANG	4-0	Surgical instrument
Autoclave	HIRAYAMA	HVE-50	Sterilization for the solid
Buprenorphine	Qinghai Pharmaceutical FACTORY Co., Ltd.	H10940181	reduce post-operative pain
Centrifugation tube	Biological Hope	1850-K	15ML
Depilatory cream	ZIKER BIOTECHNOLOGY	ZK-L2701	Depilation agent for laboratory animals
Forcep	RWD	F12028	Surgical instrument
Gas filter	ZHAOXIN	SA-493	Operator protection
Isoflurane	RWD	20071302	Used for anesthesia
Light source	Beijing PDV	LG-150B	Operating lamp
Micro-mosquito hemostat	FST	13011-12	Surgical instrument
Needle	BINXIONG	42180104	Surgical instrument
Needle and the 6-0 silk suture	JIAHE	SC086	Surgical instrument
Needle holder	ShangHaiJZ	J32030	Surgical instrument
Needle holder	ShangHaiJZ	J32010	Surgical instrument
Povidone-iodine swabs	SingleLady	GB26368-2010	Skin disinfection
Scissors	CNSTRONG	JYJ1030	Surgical instrument
Sterile eye cream	Shenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd.	H10940177	prevent corneal dryness
Ultra-high resolution ultrasound imaging system for small animals	VisualSonics	Vevo 2100	Echocardiographic analysis