Methodenartikel

Vaststelling van een muis ernstig acuut pancreatitismodel met behulp van retrograde injectie van natrium taurocholaat in het biliopancreatische kanaal

DOI:

10.3791/63129

⸱

1 april 2022

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Soochow University, 2MOE Engineering Center of Hematological Disease, Soochow University, 3Cyrus Tang Hematology Center, Soochow University, 4National Clinical Research Center for Hematologic Diseases, the First Affiliated Hospital of Soochow University, 5MOH Key Lab of Thrombosis and Hemostasis, Jiangsu Institute of Hematology, The First Affiliated Hospital of Soochow University, 6Collaborative Innovation Center of Hematology, Soochow University

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Een muismodel van ernstige acute pancreatitis wordt hierin beschreven. De hier gepresenteerde procedure is zeer snel, eenvoudig en toegankelijk, waardoor de studie van de moleculaire mechanismen en verschillende therapeutische interventies bij acute pancreatitis op een handige manier mogelijk is.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De prevalentie van acute pancreatitis (AP), met name ernstige acute pancreatitis (SAP), neemt jaarlijks toe in jongere leeftijdsgroepen. Er is echter een gebrek aan effectieve behandelingen in de huidige klinische praktijk. Met de gemakkelijke toegankelijkheid van transgene en knock-out stammen en hun kleine formaat, waardoor minimale doses geneesmiddelen nodig zijn voor in vivo evaluatie, heeft een goed ingeburgerd experimenteel model bij muizen de voorkeur voor AP-onderzoek. Bovendien is SAP geïnduceerd door natrium taurocholaat (TC) momenteel een van de meest gebruikte en best gekarakteriseerde modellen. Dit model is onderzocht op nieuwe therapieën en mogelijke moleculaire gebeurtenissen tijdens het proces van AP. Hier presenteren we de generatie van een AP-muismodel met natrium taurocholaat en een eenvoudige zelfgemaakte microsyringe. Bovendien bieden we ook de methodologie voor de daaropvolgende histologie en serologische testen.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Acute pancreatitis (AP) is een acute ontsteking van de pancreas die wordt gekenmerkt door obstructie van het hoofdkanaal van de pancreas met daaropvolgende ductale opgezette en pancreasautodigestie door de abnormaal geactiveerde enzymen. De klinische manifestaties omvatten lokale of systemische ontsteking, buikpijn en verhoging van serum amylase1,2. Volgens de ernstclassificatie3 kan AP aanwezig zijn in milde, matige en ernstige vormen, en onder hen is ernstige acute pancreatitis (SAP) de meest zorgwekkende aandoening vanwege het hoge sterftecijfer van meer dan 30% 4

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle experimenten met dieren werden goedgekeurd door de Animal Ethics Committee van soochow University. Alle chirurgische ingrepen werden uitgevoerd onder volledige anesthesie. Pijnstillers werden volgens eerdere literatuur niet gebruikt om interferentie met het natuurlijke verloop van de ziekte te voorkomen28,29. Goedkeuring voor het ontbreken van analgesie werd ook verleend door de Animal Ethics Committee van Soochow University.

1. Voorbereiding

  1. Snel een C57BL/6 wild-type muis 8-12 uur voor de operatie.
  2. Bereid 5% (w/v) TC-oplossing (93 mM) verd....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Door de bovenstaande instructies zorgvuldig op te volgen, verkregen we een gemiddelde operatieduur van ongeveer 40 minuten. De muizen waren licht inactief en hadden ongeveer 0,5-1,75 g, 0,85-1,85 g en 0,5-4,73 g gewicht verloren na respectievelijk 24 uur, 48 uur en 72 uur na de operatie (figuur 2).

Vanaf het moment van voltooiing van de operatie tot 24 uur na de operatie, naarmate de ziekte zich ontwikkelde, werden de muizen inactief en vertoonden ze langzame reac.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het TC-geïnduceerde SAP-model is een uitstekend onderzoeksinstrument. Zoals in deze studie is aangetoond, is dit model zeer gemakkelijk te realiseren in algemene laboratoria zonder specifieke apparaten te gebruiken. Bij gebruik in combinatie met histologie en biochemische analyse biedt het een kostenbesparende (goedkope reagentia) en tijdbesparende (24-uurs tijdvenster) benadering voor het induceren en evalueren van AP. Het aanpassen van de concentratie van TC biedt ook de mogelijkheid om milde en matige AP te produceren.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We zijn dankbaar voor de steun van de volgende beurzen: een Translational Research Grant van NCRCH [2020WSA01], een KJXW Scientific Grant van Suzhou Commission of Health for Young Scholars [KJXW2020002], een Science and Technology Plan van Suzhou City (SKY2021038 en SKJY2021050), een beurs van de Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions (PAPD), en een Primary Research & Social Development Plan van de provincie Jiangsu (BE2018659).

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
0.5% iodofoorShanghai Likang Disinfectant3101024 mL/muis
0.9% natriumchlorideSinopharm Group Co., Ltd.100193180.8 mL/muis
1% Pentobarbital natriumSigmaP37610.2 -0.25 mL/muis
25 μL Microlietere spuit met platte puntGaoge, ShanghaiA124019
4% ParaformaldehydeBeyotime, Nantong, ChinaP0099-500ml
5% natrium taurocholaat (TC)AladdinS100834-5g10 μL/SAP muis
6-0 Sterile nylon microsuture met gedraaide naald (1/2 cirkel)Cheng-He20093
75% alcoholSinopharm Group Co., Ltd.100092184 mL/muis
8-0 Sterile nylon microsuture met gedraaide naald (3/8 cirkel)Cheng-He19064
ALT ActiviteitskitEPNK, Anhui, ChinaALT0012
Amylase ActiviteitskitEPNK, Anhui, ChinaAMY0012
Gekantelte kleine bulldogklem met 12 mm kaak (3 cm)Cheng-HeHC-X022
Espen spaanders of snippers voor muisbedBeijing Vital River Laboratory Animal TechnologyVR03015
AST ActiviteitskitEPNK, Anhui, ChinaAST0012
Blood Urea Nitrogen (BUN) ActiviteitskitEPNK, Anhui, ChinaBUN0011
C57BL/6 muisBeijing Vital River Laboratory Animal Technology213
Creatine ActiviteitskitEPNK, Anhui, ChinaCRE0012
Feature microtoombladBeyotime, Nantong, ChinaE0994
Hemostatische pincet (9,5 cm, gebogen)JZ, Shanghai Medical Instruments Co. Ltd.JC3901
Lipase ActiviteitskitJiancheng, Nanjing, ChinaA054-2-1
MicrotoomLeica biosystem, DuitslandRM2245
Mindray biochemische analyzerMindray, Shenzhen, ChinaBS-420
MPO ActiviteitskitJiancheng, Nanjing, ChinaA044-1-1
Normaal muisvoerTrophic, Nantong, ChinaLAD 1000
Fosfaat gebufferde zoutoplossingBeyotime, Nantong, ChinaC0221A
Rechte micro-bulldogklem met 5 mm kaak (1,5 cm)JZ, Shanghai Medical Instruments Co. Ltd.W40130
Rechte of gebogen pincet (11,0 cm)Cheng-HeHC-X091A of HC-X090A
Rechte schaar (10,0 cm)Cheng-He, Ningbo, ChinaHC-J039102
Thermo Scientific CentrifugeThermo Scientific, USAMultifuge X1R

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lee, P. J., Papachristou, G. I. New insights into acute pancreatitis. Nature Reviews Gastroenterology and Hepatology. 16 (8), 479-496 (2019).
  2. Mandalia, A., Wamsteker, E. J., DiMagno, M. J. Recent advances in understanding and managing acute pancreatitis. F1000Research.....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Muismodel voor PancreatitisInjectie van NatriumtaurocholaatHistologische EvaluatieSerologisch OnderzoekH E kleuringPancreasweefselDierchirurgie

Gerelateerde artikelen