Necrotiserende enterocolitis (NEC) is de ernstigste gastro-intestinale (GI) ziekte die vaak voorkomt bij premature baby's, vooral baby's met een zeer laag geboortegewicht, met een hoge mortaliteit en onduidelijke pathogenese. De oorzaak van NEC kan verband houden met inflammatoire immuunregulerende systeemafwijkingen. Een NEC-diermodel is een onmisbaar hulpmiddel voor nec-ziekte-immuunonderzoek. NEC-diermodellen gebruiken meestal C57BL / 6J neonatale muizen; BALB/c neonatale muizen worden zelden gebruikt. Gerelateerde studies hebben aangetoond dat wanneer muizen geïnfecteerd zijn, Th2-celdifferentiatie overheersend is bij BALB / c-muizen in vergelijking met C57BL / 6J-muizen. Studies hebben gesuggereerd dat het optreden en de ontwikkeling van NEC geassocieerd zijn met een toename van T-helper type 2 (Th2) cellen en over het algemeen gepaard gaan met infectie. Daarom gebruikte deze studie neonatale BALB / c-muizen om een NEC-model te induceren met vergelijkbare klinische kenmerken en intestinale pathologische veranderingen als die waargenomen bij kinderen met NEC. Verder onderzoek is gerechtvaardigd om te bepalen of dit diermodel kan worden gebruikt om Th2-celresponsen in NEC te bestuderen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een neonatale BALB / c muismodel van necrotiserende enterocolitis
* These authors contributed equally
In dit artikel
Erratum-melding
Samenvatting
Samenvatting
Necrotiserende enterocolitis (NEC) is de ernstigste gastro-intestinale (GI) ziekte die vaak voorkomt bij premature baby's, vooral baby's met een zeer laag geboortegewicht, met een hoge mortaliteit en onduidelijke pathogenese. De oorzaak van NEC kan verband houden met inflammatoire immuunregulerende systeemafwijkingen. Een NEC-diermodel is een onmisbaar hulpmiddel voor nec-ziekte-immuunonderzoek. NEC-diermodellen gebruiken meestal C57BL / 6J neonatale muizen; BALB/c neonatale muizen worden zelden gebruikt. Gerelateerde studies hebben aangetoond dat wanneer muizen geïnfecteerd zijn, Th2-celdifferentiatie overheersend is bij BALB / c-muizen in vergelijking met C57BL / 6J-muizen. Studies hebben gesuggereerd dat het optreden en de ontwikkeling van NEC geassocieerd zijn met een toename van T-helper type 2 (Th2) cellen en over het algemeen gepaard gaan met infectie. Daarom gebruikte deze studie neonatale BALB / c-muizen om een NEC-model te induceren met vergelijkbare klinische kenmerken en intestinale pathologische veranderingen als die waargenomen bij kinderen met NEC. Verder onderzoek is gerechtvaardigd om te bepalen of dit diermodel kan worden gebruikt om Th2-celresponsen in NEC te bestuderen.
Inleiding
Necrotiserende enterocolitis (NEC), de ernstigste gastro-intestinale (GI) ziekte, komt voor bij de meeste premature baby's (>90%), vooral die met een zeer laag geboortegewicht (VLBW)1. Bij VLBW-zuigelingen varieert de incidentie van de ziekte van 10% tot 12% en de mortaliteit van kinderen met de diagnose NEC ligt tussen 20% en 30%2,3. De oorzaak van NEC kan verband houden met mucosale verwondingen, invasie door pathogene bacteriën en darmvoeding, wat kan leiden tot ontstekingsreacties en de inductie van darmletsels bij gevoelige gastheren3. De pathogenese van NEC....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Dit onderzoek werd goedgekeurd door de Medical Ethics Committee van Guangzhou Women and Children's Medical Center (NO. 174A01) en de Animal Ethical Committee van het Guangzhou Forevergen Biosciences Laboratory Animal Center (IACUC-G160100). Alle dieren werden gefokt in dezelfde ruimte in een specifieke pathogeenvrije (SPF) omgeving en experimenten werden uitgevoerd in een conventionele omgeving. De muizen die voor de fokkerij werden gebruikt, waren 7-8 weken oud; de muizen voor het induceren van NEC (n = 72) werden op dag 4 van de dam gescheiden en de dammen (n = 14) werden in de oorspronkelijke kooi gehouden en verzorgden de controlegroepmuizen (Vervolg) (n = 24).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Het BALB/c muis NEC-model werd geïnduceerd door kunstvoeding, LPS-voeding, hypoxie en koudestimulatie. Tijdens de inductieperiode werden de muizen geobserveerd op darmpathologie, ontlastingskenmerken, veranderingen in lichaamsgewicht en dagelijkse overleving. Representatieve beelden van de dunne darm tijdens NEC-inductie; de getallen op de foto vertegenwoordigen de intestinale pathologiescore van 0 (normaal epitheel) tot 4 (de ernstigste) (figuur 3A). De intestinale pathologiescore was signi.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
NEC is de meest voorkomende gastro-intestinale systeem noodsituatie voor pasgeborenen, met een hoge incidentie en mortaliteit, vooral bij premature baby's1,2,3. De pathogenese is echter nog steeds onduidelijk. Er wordt momenteel aangenomen dat mucosale schade, pathogene invasie en enterale voeding risicofactoren zijn voor NEC3. Tot op heden zijn de dieren die voor het NEC-model worden gebruikt voornamelij.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben geen belangenconflicten te onthullen.
Dankbetuigingen
De auteurs bedanken de Clinical Biological Resource Bank van Guangzhou Women and Children's Medical Center voor het verstrekken van het klinische monster en Guangzhou Forevergen Biosciences Laboratory Animal Center voor het leveren van muizen. Dit onderzoek werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China grant 81770510 (R.Z.).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Absolute ethanol | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 100092683 | |
| Geitenmelkpoeder | Petag | 71795558417 | |
| HE kleurstofoplossing | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | G1003 | |
| Isofluraan | RWD, Shenzhen Reward Life Technology Co., LTD. | R510 | |
| LPS | Sigma-Adrich | L2880 | |
| Medische zuurstof | verscheidene | verscheidene | |
| Microscoop | NIKON | NIKON beeldvormingssysteem (DS-Ri2) | |
| Neutrale hars | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 10004160 | |
| Paraffine | verscheidene | verscheidene | |
| Premature babymelkpoeder | Abbott | 57430 | |
| XYleen | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 10023418 | |
| 1% Zoutzuuroplossing | verscheidene | verscheidene | |
| 10% Formaline | LEAGENE | DF0110 |
Referenties
- Horbar, J. D., et al. Mortality and neonatal morbidity among infants 501 to 1500 grams from 2000 to 2009. Pediatrics. 129 (6), 1019-1026 (2012).
- Stoll, B. J., et al. Neonatal outcomes of extremely preterm infants from the NICHD Neonat....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
Erratum
Formal Correction: Erratum: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis
Posted by JoVE Editors on 3/07/2022. Citeable Link.
An erratum was issued for: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis. The Representative Results section was updated.
Figure 1 was updated from:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
to:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
