Methodenartikel

Een TNBS-geïnduceerd knaagdiermodel om de pathogene rol van mechanische stress bij de ziekte van Crohn te bestuderen

DOI:

10.3791/63499

⸱

1 maart 2022

 ,  ,  ,  , 
1Department of Internal Medicine, the University of Texas Medical Branch, 2Department of Pathology, the University of Texas Medical Branch

* These authors contributed equally

In dit artikel

Erratum-melding

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het huidige protocol beschrijft de ontwikkeling van een Crohn-achtig colitismodel bij knaagdieren. Transmurale ontsteking leidt tot stenose op de TNBS-instillatieplaats en mechanische vergroting wordt waargenomen in het segment proximaal met de stenose. Deze veranderingen maken het mogelijk om mechanische stress bij colitis te bestuderen.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Inflammatoire darmziekten (IBD) zoals de ziekte van Crohn (CD) zijn chronische ontstekingsaandoeningen van het maagdarmkanaal die ongeveer 20 per 1.00.000 in Europa en de VS beïnvloeden. CD wordt gekenmerkt door transmurale ontsteking, darmfibrose en luminale stenose. Hoewel ontstekingsremmende therapieën kunnen helpen bij het beheersen van ontstekingen, hebben ze geen werkzaamheid op fibrose en stenose in CD. De pathogenese van CD is niet goed begrepen. Huidige studies richten zich voornamelijk op het afbakenen van ontregelde immuunresponsmechanismen van de darm. Hoewel CD-geassocieerde transmurale ontsteking, darmfibrose en luminale stenose allemaal mechanische stress op de darmwand vertegenwoordigen, is de rol van mechanische stress in CD niet goed gedefinieerd. Om te bepalen of mechanische stress een onafhankelijke pathogene rol speelt bij CD, is een protocol van TNBS-geïnduceerd CD-achtig colitismodel bij knaagdieren ontwikkeld. Dit TNBS-geïnduceerde transmurale ontstekings- en fibrosemodel lijkt op pathologische kenmerken van CD in de dikke darm. Het wordt geïnduceerd door intrakolonische instillatie van TNBS in de distale dikke darm van volwassen Sprague-Dawley-ratten. In dit model leidt transmurale ontsteking tot stenose op de TNBS-instillatieplaats (site I). Mechanische uitzetting wordt waargenomen in het gedeelte proximaal tot de instillatieplaats (site P), wat mechanische stress vertegenwoordigt, maar geen zichtbare ontsteking. Colongedeelte distale tot ontsteking (site D) presenteert geen ontsteking of mechanische stress. Onderscheidende veranderingen van genexpressie, immuunrespons, fibrose en gladde spiergroei op verschillende plaatsen (P, I en D) werden waargenomen, wat een diepgaande impact van mechanische stress benadrukte. Daarom zal dit model van CD-achtige colitis ons helpen de pathogene mechanismen van CD beter te begrijpen, met name de rol van mechanische stress en mechanische stress-geïnduceerde genexpressie bij immuunontregeling, darmfibrose en weefselremodellering in CD.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Inflammatoire darmziekte (IBD), waaronder colitis ulcerosa (UC) en de ziekte van Crohn (CD), wordt gekenmerkt door chronische ontsteking in het maagdarmkanaal (GI). Het treft ~ 1-2 miljoen Amerikanen1. De geschatte jaarlijkse kosten voor IBD-zorg in de VS zijn $ 11,8 miljard. In tegenstelling tot UC wordt de CD gekenmerkt door transmurale ontsteking en strictuurvorming 2,3. Strictuurvorming (stenose) komt voor bij maximaal 70% van de CD-patiënten3 en kan worden veroorzaakt door transmurale ontsteking (inflammatoire stenose) of darmfibrose (fibrotische stenose)4,5. Darmfibrose wordt gekenmerkt door overmatige collageenafzetting en andere extracellulaire matrices (ECM) met gladde spiercellen (SMC) als een van de belangrijkste mesenchymale celtypen die betrokken zijn bij het proces 3,4. Gladde spierhyperplasie geassocieerd met hypertrofie is een andere significante histologische verandering in fibrotische stenose bij CD6. Hoewel strictuurvorming in CD geassocieerd is met chronische ontsteking, is geen ontstekingsremmende behandeling effectief, behalve chirurgische behandeling 2,6. Postoperatieve recidieven zijn echter bijna 100%, mits voldoende tijd 2,7. Als ontstekingsreactie kunnen fibrose en SMC-hyperplasie zich ook ontwikkelen bij niet-inflammatoire aandoeningen (d.w.z. darmobstructie) in de darm 8,9; er wordt aangenomen dat zowel ontstekingsafhankelijke als onafhankelijke mechanismen betrokken zijn bij strictuurvorming 3,4. Aangezien uitgebreid onderzoek naar de ontstekingsafhankelijke mechanismen zich niet heeft vertaald in een effectieve therapie voor strictuurvorming, zijn studies nodig naar de mogelijke rol van ontstekingsonafhankelijke mechanismen bij darmfibrose.

Als een niet-inflammatoire factor wordt mechanische stress (MS) geassocieerd met oedeem, inflammatoire celinfiltratie, weefselvervorming, fibrose en stenose 10,11,12,13 vaak aangetroffen bij IBD, vooral CD, die wordt gekenmerkt door transmurale ontsteking. Mechanische stress is het meest opmerkelijk bij stenotische CD, waar stenose (inflammatoir of fibrotisch) op de ontstekingsplaats mechanische stress in het lokale weefsel presenteert en leidt tot lumenuitzetting in het segment proximaal tot de obstructieplaats 10,14. Eerdere in vitro studies hebben aangetoond dat mechanische stress de genexpressie van specifieke ontstekingsmediatoren (d.w.z. COX-2, IL-6)8,14,15 en groeifactoren (d.w.z. TGF-β) in de gastro-intestinale weefsels, met name darm gladde spiercellen (SMC)16, verandert. Recente studies toonden ook aan dat de expressie van specifieke pro-fibrotische mediatoren zoals bindweefselgroeifactor (CTGF) zeer gevoelig is voor mechanische stress 17,18. Er werd verondersteld dat mechanische stress een onafhankelijke pathogene rol zou kunnen spelen bij CD-geassocieerde ontsteking, fibrose en weefselremodellering. De pathogene betekenis van mechanische stress bij darmontsteking, fibrose en gladde spierhyperplasie bij CD blijft echter grotendeels onontgonnen. Dit kan deels komen doordat ontsteking een zichtbaarder en beter bestudeerd proces is dan mechanische stress. Wat nog belangrijker is, er is geen goed gedefinieerd diermodel van IBD om het effect van mechanische stress te onderscheiden van dat van ontsteking.

Het huidige werk beschrijft een knaagdiermodel van Crohn-achtige colitis geïnduceerd door intrakolonische injectie van haptenreagens 2,4,6-trinitrobenzeensulfonzuur (TNBS)19,20, dat het doel kan dienen om de rol van mechanische stress in CD te bestuderen. Het bleek dat TNBS-instillatie een gelokaliseerde (~ 2 cm lengte) transmurale ontsteking veroorzaakte met lumenvernauwing (stenose) in de distale dikke darm. De stenose leidt tot duidelijke darmuitzetting (mechanische stress)14,15 maar niet zichtbare ontsteking in het colonsegment proximaal tot de instillatieplaats. Integendeel, het colonsegment distale naar de stenoseplaats vertoont geen ontsteking of mechanische stress. Significante site-specifieke veranderingen in genexpressie, ontsteking, fibrose en SMC-hyperplasie werden waargenomen op de drie verschillende locaties. De resultaten suggereren dat mechanische stress, met name mechanische stress-geïnduceerde genexpressie, een cruciale rol kan spelen bij het ontwikkelen van fibrose en hyperplasie bij colitis van Crohn.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle dierproeven werden uitgevoerd volgens de institutionele commissie voor dierverzorging en -gebruik van de University of Texas Medical Branch (#0907051C). Mannelijke of vrouwelijke Sprague-Dawley-ratten, ~ 8-9 weken oud, werden gebruikt voor de studie.

1. Bereiding van dieren

  1. Vast ratten gedurende 24 uur en behandel ze 's nachts met laxeermiddel (darmreiniger, zie Tabel met materialen).
  2. De volgende dag verdooft u ratten met behulp van een anesthesiesysteem (zie Materiaaltabel) door ze bloot te stellen aan 2% isofluraan samen met 1 L /min zuurstof tijdens toediening van TNBS. Controleer op reflexen of knijp tenen om de verdoving te bevestigen.
  3. Bereid verse TNBS-oplossing volgens lichaamsgewicht.
    OPMERKING: TNBS - 65 mg/kg lichaamsgewicht in 250 μL van 40% ethanol werd gebruikt.
  4. Zet ratten in rugligging op de anesthesietafel. Om colitis te induceren, brengt u via de anus een open polyurethaankatheter van medische kwaliteit in gedurende ~ 7-8 cm van de anale berm en brengt u TNBS (bereid in stap 1.3) voorzichtig in de dikke darm19 in. Dien de schijnbestrijdingsratten toe met slechts 250 μL zoutoplossing.
  5. Houd na het inbrengen van TNBS of zoutoplossing de ratten in rugligging en iets naar beneden (~ 30 °), met de anus gedurende 2 minuten gesloten om de TNBS-distributie te helpen en morsen te voorkomen.
  6. Voorzie ratten gedurende 7 dagen van voedsel en water ad libitum en observeer de ratten dagelijks op lichaamsgewicht, voedselopname, uitwerpselen en algemene gezondheidstoestand.

2. Weefselpreparaten

  1. Euthanasie op de dag van euthanasie de ratten met behulp van CO 2-inhalatie en bevestig euthanasie met cervicale dislocatie.
  2. Open de buik van de rat met een schaar en een tang van chirurgische kwaliteit.
  3. Verwijder voorzichtig de gehele dikke darm (boven het anale kanaal) en breng de dikke darm onmiddellijk over op ijskoude 1x HBSS-buffer.
  4. Maak de dubbele punt in de buffer recht en meet de colonlengte met behulp van een liniaal. Neem nylondraad en cirkel rond de dikke darm om de externe omtrek van de dikke darmsegmenten onder controle en met TNBS behandelde ratten te meten. Neem weefsels van volledige dikte voor histologie.
  5. Snijd de dikke darm langs de mesenteriale plank open en reinig de dikke darm goed met HBSS-buffer. Beoordeel de colon op macroscopische ontstekingsscore op basis van de criteria zoals eerder beschreven19 met minimale wijzigingen.
    OPMERKING: 0 = normaal slijmvlies; 1 = gelokaliseerde hyperemie maar geen erosies of zweren; 2 = zweer en stenose (getroffen gebied < 5 mm); 3 = ernstige maagzweer, litteken en stenose (getroffen gebied > 5 mm).
  6. Verzamel darmweefselmonsters van plaats P (deel 2-3 cm vóór de orale marge van de ontstekingsplaats), plaats I (ontstekingsplaats, meestal 4-6 cm van het einde van de dikke darm, waar TNBS wordt toegediend) en plaats D (deel 1-2 cm distaal naar de aborale marge van ontstekingsplaats), respectievelijk van met TNBS behandelde ratten.
    OPMERKING: Colonweefsel van ~ 1-2 cm lang werd uit elk segment genomen. Bovendien werden de colonweefsels van 2 cm lang (~ 4-6 cm van het einde van de dikke darm) van de met zoutoplossing behandelde ratten als schijncontrole (S) genomen (figuur 1).
  7. Neem weefselmonsters van elke plaats voor voorbereiding op volledige dikte en, indien gewenst, respectievelijk de lagen mucosa / submucosa en muscularis externa, evenals21,22.
  8. Vries weefselmonsters eerst in vloeibare stikstof in voordat ze bij -80 °C worden bewaard voor opslag tot één jaar en voor toekomstige doeleinden (d.w.z. RNA-preparaten).

3. Histopathologische beoordeling van darmontsteking en fibrose

  1. Fixeer de dikke darmweefsels van volledige dikte in 10% formaline gedurende 48 uur en breng vervolgens over op 70% ethanol gedurende 24-48 uur.
  2. Gebruik een microtoom om paraffinesecties van 5 μm dikte te snijden voor respectievelijk Hematoxyline en eosine (H & E) en Masson's Trichrome-vlekken 6,19,23 (zie Tabel met materialen).
  3. Verkrijg en bekijk beelden met een rechtopstaande microscoop die is uitgerust met een camera met hoge resolutie en compatibele software (zie Materiaaltabel).
  4. Graad ontsteking en fibrose indexen door twee onafhankelijke onderzoekers, waaronder een gastro-intestinale chirurgische patholoog volgens criteria eerder beschreven 6,23 met modificaties. Zie Aanvullend Dossier 1 voor de scores.
  5. Meet de dikte en het celaantal van de cirkelvormige en longitudinale spierlagen per doorsnede in vier weergaven van elk H & E-gekleurd monster en neem het gemiddelde van de vier metingen voor elk monster.

4. RNA-extractie en kwantitatieve RT-PCR

  1. Homogeniseren van weggesneden colonweefsel verkregen uit de schijncontrole en drie plaatsen (P, I, D) van TNBS colitis ratten in het extractiereagens van een RNA-extractiekit (zie Tabel met materialen).
  2. Isoleer RNA van elk monster met behulp van de kit. Eluteer de RNA-pellet in 30 μL RNase-vrij water.
  3. Kwantificeer de RNA-concentratie en controleer op zuiverheid met behulp van een UV-Vis-spectrofotometer met microvolume (zie Materiaaltabel).
  4. Gebruik 1 μg totaal RNA om cDNA21,22 te synthetiseren met behulp van de RNA-synthesekit (zie Tabel met materialen).
  5. Analyseer en kwantificeer genexpressieniveaus door real-time PCR uit te voeren met 50 ng cDNA als sjabloon, probes van IL-6 en CTGF met behulp van een commerciële PCR-kit voor real-time PCR-systeem (zie Tabel met materialen).
  6. Gebruik controlegenen 18S-rRNA om de monsters te normaliseren en relatieve genexpressie te kwantificeren met behulp van de verkregen Cq-waarden.

5. Statistische analyse

  1. Gebruik statistische analysesoftware (zie Tabel met materialen) om schijncontrole en TNBS colitis ratten te vergelijken.
  2. Beschouw de p-waarde < 0,05 als statistisch significant15,19.
  3. Om de verschillen tussen twee groepen te testen, gebruikt u de t-testanalyse van Student en voert u een ANOVA-test uit als vergelijkingen meer dan twee groepen zijn15,19.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Macroscopische weergave van Crohn-achtige colitis geïnduceerd door intra-colon instillatie van TNBS
Zoals te zien is in figuur 1, veroorzaakte intrakolonische instillatie van TNBS bij ratten een gelokaliseerde transmurale ontsteking (~ 2 cm lang) met verdikte darmwand en vernauwd lumen (stenose) op de plaats van instillatie in de distale dikke darm (figuur 1A). De site van TNBS instillatie wordt aangeduid als site I. Als gevolg van transmural...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

TNBS-geïnduceerde colitis werd geïntroduceerd in 1989 en wordt sindsdien gebruikt als een experimenteel model van de ziekte van Crohn 19,20,23. Belangrijke kenmerken van dit model bij knaagdieren zijn de ontwikkeling van een transmurale ontsteking die sterk lijkt op de histopathologische laesies die zijn ontwikkeld bij de ziekte van Crohn bij de mens19,20. Eerdere studie...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs melden geen belangenverstrengeling en hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk wordt gedeeltelijk ondersteund door subsidies van NIH (R01 DK124611 aan XZS) en het Amerikaanse ministerie van Defensie (W81XWH-20-1-0681 aan XZS). Het histologische werk werd gedaan met de hulp van het UTMB Surgical Pathology Lab.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
ACT-1 Control Software Ver2.63NikonDXM1200F
C1000 Touch Thermal Cycler with 96-Well Fast Reaction ModuleBIO-RAD1851196
CFX96 Optical Reaction Module for Real-Time PCR SystemsBIO-RAD1845097
Dako Agilent Artisan Link Pro Special stainerDakoAR310
Dako-Agilent Masson's Trichrome Kit ref# AR173DakoAR173
DXM1200 Digital Color HR CameraNikonDXM1200
Eukaryotic 18S rRNA Endogenous ControlThermoFisher Scientific4352930E
E-Z AnesthesiaE-Z Systems Inc.EZ-155
GraphPad Prism 9GraphPad9.0.2 (161)
Hard-Shell 96-Well PCR Plates, low profile, thin wall, skirted, white/clearBIO-RADHSP9601
HBSS (Corning Hank's Balanced Salt Solution, 1x without calcium and magnesium)CORNING21-021-CV
HM 325 MicrotomeThermo Scientific23-900-667
IsofluranePiramalNDC 66794-017-10
LI-COR Odyssey Digital Imaging SystemLI-COR9120
Mastercycler epGradient Thermal Cycler with Control Panel 5340 Thermal CyclerEppendorf5341
Medical grade open end polyurethane catheterCovidien8890703013
NanoDrop 2000/2000c SpectrophotometersThermo Fisher ScientificND2000CLAPTOP
Nikon Eclipse E800 Upright MicroscopeNikonE800
Nitrocellulose/Filter Paper Sandwiches Pkg of 50, 0.45 μm, 7 x 8.5 cmBIO-RAD1620215
Polyethylene Glycol 3350, Osmotic LaxativeMiralaxC8175Dose: 17g in 226 mL van water
RNeasy Mini Kit (250)
250 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 mL and 2 mL), RNase-free Reagents and Buffers		QIAGEN74106
SuperScript III First-Strand Synthesis SystemThermoFisher Scientific18080051
TaqMan Gene Expression Assays Rn00573960_g1 CTGF ProbeThermoFisher Scientific4331182
TaqMan Gene Expression Assays Rn99999011_m1 IL6 ProbeThermoFisher Scientific4331182
TaqMan Fast Advanced Master MixThermoFisher Scientific4444557
Tissue-Tek Prisma H&E Stain Kit #1Sakura6190
Tissue-Tek Prisma Plus Automated Slide StainerSakura6171
TNBS (Picrylsulfonic acid solution)SIGMA-ALDRICH92822

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kappelman, M. D., et al. The prevalence and geographic distribution of Crohn's disease and ulcerative colitis in the United States. Clinical Gastroenterology and Hepatology. 5 (12), 1424-1429 (2007).
  2. Hwang, J. M., Varma, M. G. Surgery for inflammatory bowel disease. World Journal of Gastroenterology. 14 (17), 2678-2690 (2008).
  3. Latella, G., Rieder, F. Intestinal fibrosis: Ready to be reversed. Current Opinion in Gastroenterology. 33 (4), 239-245 (2017).
  4. Rieder, F., Fiocchi, C., Rogler, G. Mechanisms, management, and treatment of fibrosis in patients with inflammatory bowel diseases. Gastroenterology. 152 (2), 340-350 (2017).
  5. Bettenworth, D., et al. Assessment of Crohn's disease-associated small bowel strictures and fibrosis on cross-sectional imaging: A systematic review. Gut. 68 (6), 1115-1126 (2019).
  6. Chen, W., Lu, C., Hirota, C., Iacucci, M., Ghosh, S., Gui, X. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. Journal of Crohn's and Colitis. 11 (1), 92-104 (2017).
  7. Olaison, G., Smedh, K., Sjödahl, R. Natural course of Crohn's disease after ileocolic resection: Endoscopically visualised ileal ulcers preceding symptoms. Gut. 33 (3), 331-335 (1992).
  8. Lin, Y. M., Li, F., Shi, X. Z. Mechanical stress is a pro-inflammatory stimulus in the gut: In vitro, in vivo and ex vivo evidence. PLoS One. 9, 106242(2014).
  9. Gabella, G., Yamey, A. Synthesis of collagen by smooth muscle in the hyertrophic intestine. Experimental Physiology. 62 (3), 257-264 (1977).
  10. Katsanos, K. H., Tsianos, V. E., Maliouki, M., Adamidi, M., Vagias, I., Tsianos, E. V. Obstruction and pseudo-obstruction in inflammatory bowel disease. Annals of Gastroenterology. 23 (4), 243-256 (2010).
  11. Johnson, L. A., et al. Matrix stiffness corresponding to strictured bowel induces a fibrogenic response in human colonic fibroblasts. Inflammatory Bowel Disease. 19 (5), 891-903 (2013).
  12. Gayer, C. P., Basson, M. D. The effects of mechanical forces on intestinal physiology and pathology. Cell Signalling. 21 (8), 1237-1244 (2009).
  13. Cox, C. S., et al. Hypertonic saline modulation of intestinal tissue stress and fluid balance. Shock. 29 (5), 598-602 (2008).
  14. Shi, X. Z. Mechanical regulation of gene expression in gut smooth muscle cells. Frontiers in Physiology. 8, 1000(2017).
  15. Shi, X. Z., Lin, Y. M., Powell, D. W., Sarna, S. K. Pathophysiology of motility dysfunction in bowel obstruction: Role of stretch-induced COX-2. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 300 (1), 99-108 (2011).
  16. Gutierrez, J. A., Perr, H. A. Mechanical stretch modulates TGF-beta1 and alpha1(I) collagen expression in fetal human intestinal smooth muscle cells. American Journal of Physiology. 277 (5), 1074-1080 (1999).
  17. Lipson, K. E., Wong, C., Teng, Y., Spong, S. CTGF is a central mediator of tissue remodeling and fibrosis and its inhibition can reverse the process of fibrosis. Fibrogenesis Tissue Repair. 5, Supp 1 24(2012).
  18. Chaqour, B., Goppelt-Struebe, M. Mechanical regulation of the Cyr61/CCN1 and CTGF/CCN2 proteins. The FEBS Journal. 273 (16), 3639-3649 (2006).
  19. Shi, X. Z., Winston, J. H., Sarna, S. K. Differential immune and genetic responses in rat models of Crohn's colitis and ulcerative colitis. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 300 (1), 41-51 (2011).
  20. Antoniou, E., et al. The TNBS-induced colitis animal model: An overview. Annals of Medicine and Surgery (London). 11, 9-15 (2016).
  21. Shi, X. Z., Sarna, S. K. Gene therapy of Cav1.2 channel with VIP and VIP receptor agonists and antagonists: A novel approach to designing promotility and antimotility agents. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 295 (1), 187-196 (2008).
  22. Lin, Y. M., Sarna, S. K., Shi, X. Z. Prophylactic and therapeutic benefits of COX-2 inhibitor on motility dysfunction in bowel obstruction: Roles of PGE2 and EP receptors. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 302 (2), 267-275 (2012).
  23. Morris, G. P., Beck, P. L., Herridge, M. S., Depew, W. T., Szewczuk, M. R., Wallace, J. L. Hapten-induced model of chronic inflammation and ulceration in the rat colon. Gastroenterology. 96 (3), 795-803 (1989).
  24. Mudter, J., Neurath, M. F. Il-6 signaling in inflammatory bowel disease: Pathophysiological role and clinical relevance. Inflammatory Bowel Disease. 13 (8), 1016-1023 (2007).
  25. Geesala, R., Lin, Y. M., Zhang, K., Shi, X. Z. Targeting mechano-transcription process as therapeutic intervention in gastrointestinal disorders. Frontiers in Pharmacology. 12, 809350(2021).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Erratum

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formal Correction: Erratum: A TNBS-Induced Rodent Model to Study the Pathogenic Role of Mechanical Stress in Crohn's Disease
Posted by JoVE Editors on 5/20/2022. Citeable Link.

An erratum was issued for: A TNBS-Induced Rodent Model to Study the Pathogenic Role of Mechanical Stress in Crohn's Disease. The Introduction and Protocol were updated.

The first sentence of the Introduction was updated from:

Inflammatory bowel diseases (IBD) such as Crohn's disease (CD) are chronic inflammatory disorders of the gastrointestinal tract affecting approximately 20 per 1,00,000 in Europe and USA. CD is characterized by transmural inflammation, intestinal fibrosis, and luminal stenosis.

to:

Inflammatory bowel diseases (IBD) such as Crohn's disease (CD) are chronic inflammatory disorders of the gastrointestinal tract affecting approximately 20 per 1,000,000 in Europe and USA. CD is characterized by transmural inflammation, intestinal fibrosis, and luminal stenosis.

Step 1.3 in the Protocol was updated from:

Prepare fresh TNBS solution according to body weights.
NOTE: TNBS - 65 mg/kg of body weight in 250 µL of 40% ethanol was used.

to:

Prepare fresh TNBS solution according to body weights.
NOTE: TNBS - 65 mg/kg of body weight in 250 µL of 40% ethanol/saline was used.

Trefwoorden

TNBS colitismodeltransmuraal ontstekingintestinale fibroseluminale stenosecoloneke distentieweefselremodelleringgenexpressie

Gerelateerde artikelen