Methodenartikel

Snelle genotypering van Mouse weefsel met behulp van Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit

DOI:

10.3791/636

22 januari 2008

In dit artikel

Samenvatting

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De volledige genotypering van een muis staart monster, met inbegrip weefsel spijsvertering en PCR uitlezing, wordt gedaan in een en een half uur met behulp van Sigma's SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR kit.

Samenvatting

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Genomische detectie van DNA via PCR amplificatie en detectie van een elektroforetisch gel is een standaard manier dat het genotype van een weefselmonster wordt bepaald. Conventionele preparatie van de weefsels voor PCR-ready DNA vaak enkele uren tot dagen, afhankelijk van het weefselmonster. Het genotype van de steekproef kan dus vertraagd worden voor meerdere dagen, die niet is een optie voor veel verschillende soorten experimenten. Hier laten we zien de volledige genotypering van een muis staart monster, met inbegrip weefsel spijsvertering en PCR uitlezing, in een en een half uur met behulp van Sigma's SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. Eerst tonen we de vijftien minuten durende extractie van DNA uit het weefselmonster. Dan tonen we de real-time uitlezen van de PCR-amplificatie van het monster, die het mogelijk maakt voor de identificatie van een positief monster, zoals dit wordt versterkt. Samen met de snelle extractie en real-time uitlezing zorgen voor een snelle identificatie van genotype van een aantal verschillende types van weefsels door middel van de betrouwbare methode van PCR.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gelieve Klik hier om het protocol te bekijken.

Openbaarmakingen

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben niets te melden.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR KitReagentkitSigma-AldrichXNATGBevat: Extractie-oplossing, Neutralisatie-oplossing B, Weefselpreparatie-oplossing, Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Genotypering van muisweefselExtract N Amp KitDNA extractieReal Time PCRQPCR analyseweefseldigestieSigma KitPCR amplificatiesmeltcurve analysegenotyperingsprotocol

Gerelateerde artikelen