Om nieuwe therapeutische interventies te ontwikkelen voor de preventie en het beheer van rugpijn, zijn diermodellen nodig om de mechanismen en effectiviteit van deze therapieën vanuit een translationeel perspectief te onderzoeken. Het huidige protocol beschrijft de BMS-test, een gestandaardiseerde methode om de mechanische gevoeligheid van de rug bij de rat te beoordelen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Beoordeling van de mechanische gevoeligheid van de rug bij de rat voor mechanistisch onderzoek naar chronische rugpijn
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Lage rugpijn is wereldwijd de belangrijkste oorzaak van invaliditeit, met dramatische persoonlijke, economische en sociale gevolgen. Om nieuwe therapieën te ontwikkelen, zijn diermodellen nodig om de mechanismen en effectiviteit van nieuwe therapieën vanuit een translationeel perspectief te onderzoeken. Verschillende knaagdiermodellen van rugpijn worden gebruikt in lopende onderzoeken. Verrassend genoeg werd er echter geen gestandaardiseerde gedragstest gevalideerd om de mechanische gevoeligheid in rugpijnmodellen te beoordelen. Dit is van cruciaal belang om te bevestigen dat dieren met veronderstelde rugpijn lokale overgevoeligheid voor nociceptieve stimuli vertonen en om de gevoeligheid te controleren tijdens interventies die zijn ontworpen om rugpijn te verlichten. Het doel van deze studie is om een eenvoudige en toegankelijke test te leggen om de mechanische gevoeligheid in de rug van ratten te beoordelen. Speciaal voor deze methode is een testkooi vervaardigd; lengte x breedte x hoogte: 50 x 20 x 7 cm, met een roestvrijstalen gaas aan de bovenkant. Deze testkooi maakt het mogelijk om mechanische stimuli aan de achterkant toe te passen. Om de test uit te voeren, wordt de achterkant van het dier geschoren in het gebied van belang en wordt het testgebied gemarkeerd om de test op verschillende dagen te herhalen, indien nodig. De mechanische drempel wordt bepaald met Von Frey-filamenten aangebracht op de paraspinale spieren, met behulp van de eerder beschreven up-down-methode. De positieve reacties omvatten (1) spiertrekkingen, (2) boogvorming (rugverlenging), (3) rotatie van de nek (4) krabben of likken aan de rug en (5) ontsnappen. Deze gedragstest (Back Mechanical Sensitivity (BMS) test) is nuttig voor mechanistisch onderzoek met knaagdiermodellen van rugpijn voor de ontwikkeling van therapeutische interventies voor de preventie en behandeling van rugpijn.
Inleiding
Lage rugpijn (LBP) is wereldwijd de belangrijkste oorzaak van invaliditeit, die dramatische persoonlijke, economische en sociale gevolgen heeft 1,2,3,4. Elk jaar wordt ongeveer 37% van de bevolking getroffen door LBP5. LBP verdwijnt meestal binnen een paar weken, maar komt terug bij 24% -33% van de individuen en wordt chronisch in 5% -10% van de gevallen2. Om de mechanismen en effecten van LBP en de effecten van verschillende therapeutische interventies te begrijpen, zijn verschillende diermode....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Het experimentele protocol werd goedgekeurd door de dierverzorgingscommissie van de Université du Québec à Trois-Rivières en voldeed aan de richtlijnen van de Canadian Council on Animal Care en de richtlijnen van de Committee for Research and Ethical Issues van de International Association for the Study of Pain (IASP). De huidige studie gebruikte zes mannelijke Wistar-ratten (lichaamsgewicht: 320-450 g; leeftijd: 18-22 weken). De dieren werden verkregen uit een commerciële bron (zie tabel met materialen). Gegevens van deze ratten zijn afkomstig uit de grotere steekproef van een eerdere studie30.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De methode werd gebruikt in een eerdere studie, waarin volledige gegevens en statistieken werden gepresenteerd om de mechanische gevoeligheid tussen CFA en controleratten te vergelijken30. Representatieve individuele gegevens (gemiddelde van linker- en rechterdrempels) van zes ratten die in het vorige onderzoek zijn opgenomen, zijn weergegeven in figuur 3 en tabel 1. Bij baseline was de mechanische gevoeligheid vergelijkbaar tussen de groepen. Intramu.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Kritieke stappen
De BMS-test is een eenvoudige methode om de mechanische gevoeligheid in de rug van ratten te beoordelen, hetzij op één tijdstip of herhaaldelijk gedurende dagen of weken, wanneer veranderingen worden verwacht (pijnmodellen) of na farmacologische of niet-farmacologische interventie. Kritieke problemen van de methode zijn de testkooi, waarvan de afmetingen ervoor moeten zorgen dat de rat comfortabel is, maar niet te veel beweegt. De rug van het dier moet toegankelijk blijven via het gaa.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs verklaren geen tegenstrijdige belangen of relaties te hebben die tot belangenconflicten kunnen leiden.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door een subsidie van de Fondation Chiropratique du Québec en de Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (MP: grant #06659). De bijdrage van HK werd ondersteund door de Université du Québec à Trois-Rivières (PAIR-programma). De bijdrage van BP werd ondersteund door het Fonds de recherche du Québec en Santé (FRQS) en de Fondation Chiropratique du Québec. De bijdrage van TP werd ondersteund door de Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada. De bijdrage van NE en EK werd ondersteund door de Fondation Chiropratique du Québec. De bijdrage van MP werd ondersteund door de FRQS.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Aerrane (isoflurane, USP) - Veterinary Use Only | Baxter | NDC 10019-773-60 | Inhalatieanestheticum ; DIN 02225875, voor het induceren van anasthesie |
| Complete Freund Adjuvant (CFA) | Fisher Scientific | #77140 | Water-in-olie emulsie van Complete Freund Adjuvant (CFA) met gedode cellen van Mycobacterium butyricum. |
| Male Wistar Rats | Charles River Laboratories | lichaamsgewicht: 320–450 g; leeftijd: 18-22 weken. | |
| Penlon Sigma Delta Verdamper | Penlon | 990-VI5K-SVEEK | Penlon Sigma Delta Verdamper gebruikt voor anasthesie |
| Sharpie Permanent Marker | Sharpie | BC23636 | Permanente stift, fijne punt, zwart |
| Testkooi | Op maat gemaakt | Breedte: 20 cm; Lengte: 50 cm; Hoogte van de bodem tot de bovenkant: 40 cm; Hoogte van de bodem mesh tot de bovenkant van de kooi: 7 cm; Wanddikte: 5 mm; Mesh: 1 mm draad met een 8 mm draadafstand | |
| Von Frey Filaments | Aesthesio, Precise Tactile Sensory Evaluator | 514000-20C | Filamenten van 0,07 g tot 26 g |
| Wahl Professional Animal, ARCO snoerloze Huisdier Clipper, Trimmer Grooming | Wahl | Kit #8786-1201 | Dierlijke haarkapper, voor scheerdoeleinden, nul blad |
Referenties
- Hartvigsen, J., et al. What low back pain is and why we need to pay attention. Lancet. 391 (10137), 2356-2367 (2018).
- Manchikanti, L., Singh, V., Falco, F. J., Benyamin, R. M., Hirsch, J. A. Epidemiology of low back pain in adults. Neuromodulation. 17, Suppl 2 3-10 (2014).
- Urits....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
