Vanwege de complexe anatomie kan een consistent reproduceerbaar dissectie- en oogstprotocol voor hartmonsters een uitdaging zijn om te implementeren. Dit manuscript presenteert de belangrijkste elementen van enkele standaard cardiale dissectieprotocollen, waarbij zowel de grove onderzoeksbenaderingen als de bemonsteringslocaties die vaak worden gebruikt voor histopathologisch onderzoek worden benadrukt.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Dissectietechnieken en histologische bemonstering van het hart in grote diermodellen voor hart- en vaatziekten
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Het standaard bruto onderzoek en de bemonstering zijn sleutelelementen in de reproduceerbaarheid en het succes van experimentele studies naar hart- en vaatziekten bij grote dieren. Gezien de complexe anatomie van het hart, interspecies verschillen en de soorten compenserende en pathologische reacties, zijn consistente protocollen een uitdaging om te implementeren. Het gebruik van meerdere dissectieprotocollen wordt meestal aangepast aan de ervaring van de prosector en persoonlijke voorkeur blijft een bron van experimentele en interobservervariabiliteit. Hier is het doel om de belangrijkste anatomische kenmerken en oriëntatiepunten, dissectieprotocollen en histologische bemonsteringsnormen van het hart in sommige veelgebruikte soorten (waaronder honden, varkens, herkauwers en katten) te presenteren als modellen van hart- en vaatziekten.
Hier worden twee standaard bruto examenprotocollen gepresenteerd. Ten eerste de instroom-uitstroommethode, die de fysiologische bloedstroomrichting door het hart en grote bloedvaten volgt (vaak gebruikt bij honden, herkauwers en varkens), en ten tweede de vierkamerdissectietechniek (geïllustreerd bij katten). Beide technieken kunnen worden aangepast aan elke soort in bepaalde experimentele omstandigheden. De bemonsteringsprotocollen omvatten alle interessegebieden (sinoatriale knoop, ventrikels, interventriculair septum, atria, kleppen en aorta) en verbeteren, indien correct uitgevoerd, zowel de reproduceerbaarheid als de betrouwbaarheid van experimentele studies.
Inleiding
Vanwege de complexe anatomie en vroege strengheid, die de beoordeling van de hartwanddikte kunnen verstoren, is het grove onderzoek van het hart uitdagend en vatbaar voor verschillende techniekgerelateerde of interpretatiefouten. Dit wordt versterkt door de interspecifieke morfologische variaties en door het feit dat veel klinische, belangrijke cardiale pathologieën (waaronder vroege gevallen van coronaire hartziekten, fibrose, arteritis en amyloïdose) niet geassocieerd zijn met grove veranderingen, in wezen histologische pathologieën. Een gestandaardiseerd dissectie- en histologisch monsteroogstprotocol kan consistentie tussen waarnemers en tegelijkertijd vergelijkba....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Het experimentele protocol ontving een bio-ethische overeenkomst (nr. 311 vanaf 2022) en werd goedgekeurd door de Commissie Bio-ethiek van de Universiteit voor Landbouwwetenschappen en Diergeneeskunde Cluj-Napoca, in overeenstemming met zowel nationale (wet nr. 43 van 2014) als Europese (EU-richtlijn nr. 63 uit 2010) wetgeving. Zie de tabel met materialen voor meer informatie over alle materialen en instrumenten die in dit protocol worden gebruikt.
1. Obductie protocol
OPMERKING: Het wordt aanbevolen om hetzelfde obductieprotocol te gebruiken voor alle soorten die worden gepresente....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Dit protocol werd gebruikt om anatomische kenmerken te visualiseren en monsters te verzamelen voor histologisch onderzoek van het hart bij vier verschillende soorten (hond, kat, varken en koe). Het obductieprotocol werd herhaald bij elk van de bovengenoemde soorten, maar alleen geïllustreerd bij honden. Het obductieprotocol begint met een uitgebreid extern onderzoek van het lichaam (figuur 1A) (inclusief de huid, verkenbare lymfeklieren en buitenslijmvlies), het meten van het totale gewicht .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Bij het uitvoeren van het huidige protocol moeten verschillende kritieke stappen zorgvuldig worden overwogen voor consistente resultaten. Bij jonge dieren verschillen hartmetingen van die bij volwassenen (inclusief ventriculaire wanddikte) en over het algemeen vertegenwoordigt het hart een groter deel van het lichaamsgewicht11,12. De mate van ventriculaire hypertrofie kan worden gekwantificeerd door een algemene gewichtsformule toe te passen, waarbij de verhoudin.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben geen belangenconflicten te onthullen.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 0.9% zoutoplossing | B. BRAUN MELSUNGEN AG | W04479004 | Voor het wassen van al het bloed en bloedstolsels uit het hart. |
| 10% neutraal gebufferd formaline (NBF) | Q Path | 11699404 | Materialen voor het verzamelen van histopathologische monsters. |
| Botsnijtang | HELEN SRL | LS109HV | Stevig instrument voor het snijden van bot. |
| Snijplank | Ambition | 86304 | Voor een gemakkelijkere manipulatie en het snijden van organen. |
| Decalcificerende oplossing | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | 1:1 mengsel van 8% mierenzuur en zoutzuur. |
| Digitale camera | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | Voor fotografische en videografische documentatie. |
| Pincet | MKD-Medicale | 15-430 | Dissectie-instrumenten. |
| Histologische cassettes | Q Path | 720-2215 | Materialen voor het verzamelen van histopathologische monsters. Afmetingen: 3 × 2.5 × 0.4 cm |
| Mes | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Scherp mes voor het snijden van zacht weefsel. |
| Latex handschoenen | MKD-Medicale | SANTEX-S | Beschermingsapparatuur. |
| Masker | MKD-Medicale | 21221 | Beschermingsapparatuur. |
| Petrischalen | MKD-Medicale | 0598-1V | Materialen voor het verzamelen van aanvullende testmonsters. |
| Kunststof recipiënten | Corning Gosselin | TP200-02 | Materialen voor het verzamelen van histopathologische monsters. |
| Weegschaal | ESPERANZA | MEEKS008 | Voor het wegen van de organen. |
| Weegschaal | White Deals | 72 | Voor het wegen van de proefpersonen. |
| Schaar | MKD-Medicale | 10322E | Scherp mes voor het snijden van zacht weefsel. |
| Schaar | MKD-Medicale | 13-260 | Dissectie-instrumenten. |
| Scrubba | MKD-Medicale | 410100-52 | Beschermingsapparatuur. |
| Spuiten | MKD-Medicale | 10573EU | Materialen voor het verzamelen van aanvullende testmonsters. |
Referenties
- Ashworth, M. Pathology of Heart Disease in the Fetus, Infant and Child: Autopsy, Surgical and Molecular Pathology. , Cambridge University Press. Cambridge. (2019).
- Barone, R. Anatomie Comparée des Mammifères Domestiques: Angiologie. Vigot, , Lyon. (2011).
- Basso,....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
