Methodenartikel

Inductie- en diverse beoordelingsindicatoren van experimentele auto-immuun encefalomyelitis

DOI:

10.3791/63866

⸱

9 september 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Putuo People's Hospital, Shanghai Key Laboratory of Signaling and Disease Research, School of Life Sciences and Technology, Tongji University, 2National Laboratory of Biomacromolecules, CAS Center for Excellence in Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, 3Department of Infectious Diseases, Shanghai Key Laboratory of Infectious Diseases and Biosafety Emergency Response, National Medical Center for Infectious Diseases, Huashan Hospital, Fudan University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het huidige protocol beschrijft de inductie van experimentele auto-immune encefalomyelitis in een muismodel met behulp van myeline oligodendrocytenglycoproteïne en het monitoren van het ziekteproces met behulp van een klinisch scoresysteem. Experimentele auto-immuun encefalomyelitis-gerelateerde symptomen worden geanalyseerd met behulp van muis femur micro-computertomografie analyse en open veld test om het ziekteproces uitgebreid te beoordelen.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Multiple sclerose (MS) is een typische auto-immuunziekte van het centrale zenuwstelsel (CZS) gekenmerkt door inflammatoire infiltratie, demyelinisatie en axonale schade. Momenteel zijn er geen maatregelen om MS volledig te genezen, maar er zijn meerdere ziektemodificerende therapieën (DMT) beschikbaar om de progressie van de ziekte te beheersen en te verminderen. Er zijn significante overeenkomsten tussen de pathologische kenmerken van het CZS van experimentele auto-immune encefalomyelitis (EAE) en MS-patiënten. EAE is op grote schaal gebruikt als een representatief model om de werkzaamheid van MS-geneesmiddelen te bepalen en de ontwikkeling van nieuwe therapieën voor MS-ziekte te onderzoeken. Actieve inductie van EAE bij muizen heeft een stabiel en reproduceerbaar effect en is bijzonder geschikt voor het bestuderen van de effecten van geneesmiddelen of genen op auto-immuun neuro-inflammatie. De methode voor het immuniseren van C57BL/6J-muizen met myeline-oligodendrocytenglycoproteïne (MOG35-55) en de dagelijkse beoordeling van ziektesymptomen met behulp van een klinisch scoresysteem wordt voornamelijk gedeeld. Gezien de complexe etiologie van MS met diverse klinische manifestaties, kan het bestaande klinische scoresysteem niet voldoen aan de beoordeling van de behandeling van de ziekte. Om de tekortkomingen van een enkele interventie te voorkomen, worden nieuwe indicatoren gecreëerd om EAE te beoordelen op basis van klinische manifestaties van angstachtige stemmingen en osteoporose bij MS-patiënten om een uitgebreidere beoordeling van ms-behandeling te bieden.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Auto-immuunziekten zijn een spectrum van aandoeningen veroorzaakt door de immuunrespons van het immuunsysteem op zijn eigen antigenen, wat resulteert in weefselbeschadiging of disfunctie1. Multiple sclerose (MS) is een chronische auto-immuunziekte van polyneuropathie in het centrale zenuwstelsel (CZS), gekenmerkt door inflammatoire infiltratie, demyelinisatie en neuronale axonale degeneratie 2,3. Op dit moment heeft MS maar liefst 2,5 miljoen mensen over de hele wereld getroffen, voornamelijk jonge en middelbare leeftijden van 20-40 jaar, die vaak de ruggengraat vormen van hun familie en samenleving. Dit heeft aanzienlijke impact en schade veroorzaakt voor gezinnen en de samenleving 2,4.

MS is een multifactoriële ziekte met diverse en complexe klinische manifestaties. Naast klassieke neurologische aandoeningen die worden gekenmerkt door inflammatoire infiltratie en demyelinisatie, vertoont MS vaak visuele beperkingen, limb dyskinesie en cognitieve en emotionele stoornissen 5,6,7. Als MS-patiënten niet de juiste en juiste behandeling krijgen, zal de helft van hen na 20 jaar in een rolstoel leven en bijna de helft van hen zal depressieve en angstsymptomen ervaren, wat leidt tot veel hogere niveaus van zelfmoordgedachten dan de algemene bevolking 8,9.

Ondanks een lange onderzoeksperiode blijft de etiologie van MS ongrijpbaar en is de pathogenese van MS nog niet opgehelderd. Diermodellen van MS hebben het mogelijk gemaakt om te dienen als testinstrumenten om ziekteontwikkeling en nieuwe therapeutische benaderingen te verkennen, ondanks de aanzienlijke verschillen tussen het knaagdier en het menselijke immuunsysteem, terwijl tegelijkertijd enkele basisprincipes worden gedeeld. Experimentele auto-immune encefalomyelitis (EAE) is momenteel het ideale diermodel voor het bestuderen van MS, dat autoantigeenimmuniteit van myeline-eiwitten gebruikt om auto-immuniteit te induceren voor CZS-componenten bij gevoelige muizen, met de toevoeging van complete Freund's adjuvans (CFA) en kinkhoesttoxine (PTX) om de humorale immuunrespons te verbeteren. Afhankelijk van de genetische achtergrond en immuunantigenen worden verschillende ziekteprocessen, waaronder acute, relapsing-remitting of chronisch, verkregen om verschillende klinische vormen van MS 10,11,12 na te bootsen. De relevante immunogenen die vaak worden gebruikt bij de constructie van EAE-modellen zijn afkomstig van zelf-CZS-eiwitten, zoals myeline-basiseiwit (MBP), proteolipide-eiwit (PLP) of myeline-oligodendrocytenglycoproteïne (MOG). MBP- of PLP-geïmmuniseerde SJL / L-muizen ontwikkelen een relapsing-remitting-cursus en MOG triggert chronische progressieve EAE bij C57BL / 6-muizen 11,12,13.

Het belangrijkste doel van disease-modifying therapy (DMT) is het minimaliseren van ziektesymptomen en het verbeteren van functie6. Verschillende geneesmiddelen worden klinisch gebruikt om MS te verlichten, maar er is nog geen medicijn gebruikt om het volledig te genezen, wat de noodzaak van synergetische behandeling onthult. C57BL / 6-muizen zijn momenteel de meest gebruikte om transgene muizen te construeren, en in dit werk werd een EAE-model geïnduceerd door MOG35-55 in C57BL / 6J-muizen met een 5-puntsschaal gebruikt om de progressie van de ziekte te volgen. EAE-modellen lijden ook aan angstachtige stemmingen en botverlies, en de alom bekende demyeliniserende laesies. Hier wordt ook de methode beschreven om de symptomen van EAE vanuit meerdere perspectieven te beoordelen met behulp van open-veldtest en micro-computertomografie (Micro-CT) -analyse.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het Animal Care Committee van tongji University keurde het huidige werk goed en alle richtlijnen voor dierenverzorging werden gevolgd. Mannelijke of vrouwelijke C57BL/6J muizen tussen 8-12 weken oud werden gebruikt voor de experimenten. Er werd voor gezorgd dat de leeftijd en het geslacht in de experimentele groepen hetzelfde waren; anders werd de gevoeligheid voor de ziekte aangetast. Muizen werden gehuisvest in een specifieke pathogeenvrije omgeving met afwisselend 12 uur lichte en donkere cycli onder constante omstandigheden (kamertemperatuur 23 ± 1 °C, vochtigheid 50% ± 10%), met vrije toegang tot muizenvoer en water.

1. Bereiding van MOG35-55 emulsie

  1. Voeg warmte-geïnactiveerde gelyofiliseerde Mycobacterium tuberculosis (MTB, H37Ra) toe om het adjuvans adjuvans van Freund te voltooien (zelf bevat het 1 mg / ml warmte-geïnactiveerde MTB, H37Ra), wat resulteert in een uiteindelijke MTB-concentratie van 5 mg / ml (zie materiaaltabel).
    OPMERKING: De hele operatie moet worden voltooid in de bioveiligheidskast; open de blaaslucht niet.
  2. Los het gelyofiliseerde MOG35-55-peptide (zie materiaaltabel) op met steriele voorgekoelde fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) (zonder calcium- en magnesiumionen, pH 7,4) om de antigeenoplossing te bereiden in de concentratie van 2 mg / ml.
  3. Neem een schone microcentrifugebuis van 2 ml en voeg een gesteriliseerde stalen kogel van 5 mm (zie materiaaltabel) toe aan elke buis.
  4. Voeg 500 μL compleet Freund's adjuvans met 5 mg/ml MTB en 500 μL MOG35-55 antigeenoplossing toe aan de bovenstaande microcentrifugebuis die één stalen kogel bevat.
  5. Oscilleer de bovenstaande buis op een TissueLyser (zie Tabel van Materialen) gedurende 10 minuten, koel af op ijs gedurende 10 minuten en herhaal vier keer om het goed te mengen en uiteindelijk een witte viskeuze oplossing te vormen.
    OPMERKING: Goede emulgering is een belangrijke stap bij het bereiden van MOG35-55-emulsie , dus grondig mengen is vereist. De TissueLyser is ingesteld op een snelheid van 28 Hz.

2. Bereiding van kinkhoesttoxine (PTX)

  1. Bereid PTX met ddH2O in een concentratie van 100 μg/ml en bewaar bij 4 °C.
  2. Verdun de PTX-stamoplossing 50 keer met steriele 1x PBS (zonder calcium- en magnesiumionen, pH 7,4) om een oplossing van 200 ng/100 μL te maken voor gebruik.

3. Vaststelling van het EAE-diermodel

  1. Bouw het EAE-model met behulp van de 8-12 weken oude mannelijke of vrouwelijke C57BL / 6J-muizen. Zorg ervoor dat de muizen voldoende zijn geacclimatiseerd aan de voedingsomgeving voorafgaand aan immunisatie.
  2. Centrifugeer de bereide MOG35-55 emulsie (stap 1) bij 4 °C gedurende 2-3 s door op de pulseknop van de apparatuur te drukken (zie Materiaaltabel) om alle emulsies aan de onderkant van de buis neer te slaan.
    OPMERKING: MOG35-55 emulsie kan enkele dagen bij -20 °C worden bewaard. Om falen van geneesmiddelen te voorkomen, wordt het aanbevolen om het zo snel mogelijk te gebruiken.
  3. Bevestig een naald van 22 G aan een spuitvat van 1 ml, zuig de MOG35-55-emulsie aan en breng de MOG35-55-emulsie over in een nieuw spuitvat van 1 ml. Beveilig de verbinding tussen de spuithouder van 1 ml en een naald van 26 G met afdichtingsfolie (zie materiaaltabel).
    OPMERKING: Vermijd luchtbellen bij het laden van MOG35-55 emulsie in spuitvaten van 1 ml.
  4. Veeg en desinfecteer de injectieplaats met 70% ethanol.
  5. Injecteer de MOG35-55 emulsie subcutaan aan elke kant van de dorsale wervelkolom van de muizen, 100 μL aan elke kant. Observeer de automatische vorming van bolvormige massa's onder de huid van de dorsum van de muizen nadat de injectieoperatie is voltooid.
    OPMERKING: Zorg ervoor dat ervaren experimentatoren het immunisatieproces uitvoeren en dat de injectie voorzichtig en langzaam wordt uitgevoerd om de druk op muizen te minimaliseren.
  6. Injecteer de bovenstaande muizen intraperitoneaal met 100 μL PTX (stap 2).
    OPMERKING: De dag van immunisatie is dag 0. Zorg er ook voor dat de muizen nauwkeurig kunnen worden geïdentificeerd voor latere dagelijkse evaluatie, zoals het gebruik van een kleurmarker op de staart van de muizen.
  7. Injecteer dezelfde dosis PTX op dag 2 na immunisatie.
  8. Bereid een groep niet-gevaccineerde muizen voor als wild-type (WT) muizen.

4. Klinische monitoring van muizen

  1. Noteer dagelijks het lichaamsgewicht van EAE- en WT-muizen.
    OPMERKING: De ernst van EAE is positief gecorreleerd met het gewichtsverlies van muizen, dus lichaamsgewicht is ook een zeer belangrijke monitoringindex.
  2. Controleer de status van muizen van 0-21 dagen na immunisatie met behulp van het 0-5 scoresysteem vermeld in tabel 1.
    OPMERKING: Symptomen tussendoor worden geteld als plus of min 0,5 punt.

5. Open veld test

OPMERKING: De proefdieren die voor deze stap zijn geselecteerd, zijn EAE-muizen in de vroege aanvangs-, piek- en remissieperioden. Daarnaast werden WT-muizen gebruikt als controle. Opgemerkt moet worden dat alle muizen werden getest op angstachtig gedrag voorafgaand aan het modelleren om muizen met angststoornissen uit te sluiten voor EAE-modellering. Bovendien werden EAE-muizen in piek- en remissieperioden met volledige motorische onbekwaamheid uitgesloten van de test.

  1. Bereid een 40 × 40 × 40 cm3 open veld reactiekamer en een locomotie activiteit (open veld) video analysesysteem (zie Tabel van materialen).
    OPMERKING: De camera is geïnstalleerd in een positie die de doos volledig bedekt, de reactieruimte is gelijkmatig verlicht en de testruimte moet een rustige ruimte zijn.
  2. Plaats de testmuizen 1 uur voor aanvang van het experiment in de testruimte voor gewenning.
  3. Spuit het hele gebied in met 70% ethanol en veeg af met een schone papieren handdoek om ervoor te zorgen dat de reactiekamer schoon is voordat u met de test begint.
  4. Verwijder elke muis afzonderlijk uit zijn kooi en plaats hem in dezelfde hoek van de arena voordat je begint te verkennen.
    OPMERKING: De onderkant van het vak is verdeeld in 16 rasters, waarvan het middelste vier rastergebied het centrale gebied is en het omliggende gebied het perifere gebied.
  5. Klik op de knop Start Capture in de menubalk van het video-analysesysteem, neem de tijd op en begin met fotograferen.
  6. Blijf rustig in de testruimte.
  7. Laat de muis gedurende 5 minuten vrij bewegen tijdens het opnameproces.
  8. Stop het acquisitiesysteem en sla de video op.
  9. Haal de muis uit de arena, zet hem terug in de kooi en ga verder met de volgende muis.
    OPMERKING: Reinig het testgebied met 70% ethanol tussen de runs om geuren en andere stoffen te verwijderen.
  10. Analyseer de resultaten met behulp van het video-analysesysteem.

6. Analyse van botfenotype

  1. Euthanaseer de EAE- en WT-muizen door cervicale dislocatie op de 21e dag.
    OPMERKING: Personeel dat cervicale dislocatieoperaties uitvoert, moet goed worden opgeleid om de pijn tijdens de dood van het dier te minimaliseren.
  2. Laat de muis plat in een ontleedbak liggen en fixeer de ledematen.
  3. Houd de huid van de achterpoten van de muis vast met een tang en open de muizenhuid en het spierweefsel met een schaar.
  4. Scheid het dijbeen voorzichtig van het scheenbeen en heupbot met een schaar.
  5. Verwijder de spier die zich met een schaar aan het dijbeen hecht en plaats het dijbeen in 70% ethanol bij kamertemperatuur.
  6. Scan het distale dijbeen met behulp van een micro-CT-systeem (zie Materiaaltabel) met een isotrope voxelgrootte van 10 μm, met een piek röntgenbuisspanning van 70 kV en een röntgenintensiteit van 0,114 mA.
    OPMERKING: Een 3D Gauss-filter maakt het denoïseren van 2D-drempelafbeeldingen mogelijk.
  7. Analyseer de 100 plakjes gescand vanaf de middelste femurschacht om femurparameters te meten, waaronder botvolume, weefselvolume, botmineraaldichtheid, trabeculaire scheiding, trabeculair getal, trabeculaire verbindingsdichtheid en trabeculaire en corticale dikte.
    OPMERKING: Vanaf het proximale uiteinde van de distale femurgroeischijf bij muizen werden secties gevonden die volledig verstoken waren van epifysaire kapstructuren en bleven 100 plakjes uitstrekken naar het proximale dijbeen, die handmatig contouren werden geschetst op verschillende voxels weg van het binnenste corticale oppervlak om epifysaire trabeculae te identificeren.
  8. Maak de 3D-reconstructies door drempel 2D-afbeeldingen van contourgebieden in het micro-CT-systeem te stapelen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Na immunisatie van de muizen wordt het lichaamsgewicht van de muizen dagelijks geregistreerd en worden hun klinische symptomen geëvalueerd volgens het hierboven beschreven protocol (stap 4). Bij C57BL /6J-muizen geïmmuniseerd met MOG-peptide, omdat de locatie van de laesie voornamelijk beperkt is tot het ruggenmerg, verspreidt de pathogenese van EAE-muizen zich van het staarteinde naar het hoofd. Aan het begin van de ziekte vertonen EAE-muizen zwakte en hangen van de staart, gevolgd door zwakte van de achterpoten, ongeco...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MS is een demyeliniserende ontstekingsziekte van het CZS en is een van de meest voorkomende neurologische aandoeningen die chronische invaliditeit bij jongeren veroorzaken, waardoor gezinnen en de samenleving een enorme last krijgen 3,4. MS is altijd geclassificeerd als een orgaanspecifieke T-cel-gemedieerde auto-immuunziekte, waardoor het auto-immuunsysteem langzaam het CZS uitholt, waarbij meerdere systemen in het hele lichaam betrokken zijn27...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs erkennen de steun van de National Natural Science Foundation of China (32070768, 31871404, 31900658, 32270754) en het State Key Laboratory of Drug Research.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1 mL spuit(met 26 G naald)Shanghai Kindly Medical Instruments Co., Ltd60017031
2 mL microcentrifugebuisjeHAIKELASIKY-LXG2A
22 G naaldShanghai Kindly Medical Instruments Co., Ltd60017208
Complete Freund’s AdjuvantSigmaF5881Bewaard bij 4 °C, 1 mg van hitte-inactiveerde MTB (H37Ra) per mL
Geconditioneerd plaatsvoorkeurssysteemShanghai Jiliang Software Technology Co., LtdDiergedrag
EthanolSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd10009218Bewaard bij RT
Video-analysesysteem voor bewegingsactiviteit (open veld)Shanghai Jiliang Software Technology Co., LtdDigBehv-002Diergedrag
MOG35-55 peptideGill Biochemical Co., LtdGLS-Y-M-03590Bewaard bij -20 °C
Mycobacterium tuberculosis H37RaBD231141Bewaard bij 4 °C
Open veld reactiekamerShanghai Jiliang Software Technology Co., LtdDiergedrag
Pertussis toxineCalbiochem516560Bewaard bij 4 °C
Fosfaat gebufferde zoutoplossingGemaakt in ons laboratorium
SchaarShanghai Medical Instrument (groep) Co., LtdJ21010
Sealing filmHeathrow ScientificHS 234526B
Sorvall Legend Micro 21R MicrocentrifugeThermo Scientific75002447
Stalen balQIAGEN69975
TissueLyser IIQIAGEN85300
PincetShanghai Medical Instrument (groep) Co., LtdJD1060
μCT 35 desktop microCT scannerScanco Medical AG, Bassersdorf, Zwitserland

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhernakova, A., Withoff, S., Wijmenga, C. Clinical implications of shared genetics and pathogenesis in autoimmune diseases. Nature Reviews Endocrinology. 9 (11), 646-659 (2013).
  2. Filippi, M., et al. Multiple sclerosis. Nature Reviews Disease Primers. 4 (1), 43(2018).
  3. Dobson, R., Giovannoni, G. Multiple sclerosis - a review. Europen Journal of Neurology. 26 (1), 27-40 (2019).
  4. Rietberg, M. B., Veerbeek, J. M., Gosselink, R., Kwakkel, G., van Wegen, E. E. Respiratory muscle training for multiple sclerosis. Cochrane Database of Systematic Reviews. 12 (12), (2017).
  5. O'Brien, K., Gran, B., Rostami, A. T-cell based immunotherapy in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis. Immunotherapy. 2 (1), 99-115 (2010).
  6. Feinstein, A., Freeman, J., Lo, A. C. Treatment of progressive multiple sclerosis: what works, what does not, and what is needed. Lancet Neurology. 14 (2), 194-207 (2015).
  7. Li, H., Lian, G., Wang, G., Yin, Q., Su, Z. A review of possible therapies for multiple sclerosis. Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (9), 3261-3270 (2021).
  8. Lewis, V. M., et al. depression and suicide ideation in people with multiple sclerosis. Journal of Affective Disorders. 208, 662-669 (2017).
  9. Boeschoten, R. E., et al. Prevalence of depression and anxiety in Multiple Sclerosis: A systematic review and meta-analysis. Journal of the Neurological Sciences. 372, 331-341 (2017).
  10. Constantinescu, C. S., Farooqi, N., O'Brien, K., Gran, B. Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) as a model for multiple sclerosis (MS). British Journal of Pharmacology. 164, 1079-1106 (2011).
  11. Glatigny, S., Bettelli, E. Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) as Animal Models of Multiple Sclerosis (MS). Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 8 (11), 028977(2018).
  12. Procaccini, C., De Rosa, V., Pucino, V., Formisano, L., Matarese, G. Animal models of Multiple Sclerosis. European Journal of Pharmacology. 759, 182-191 (2015).
  13. Mix, E., Meyer-Rienecker, H., Hartung, H. P., Zettl, U. K. Animal models of multiple sclerosis-potentials and limitations. Progress in Neurobiology. 92 (3), 386-404 (2010).
  14. DiToro, D., et al. Insulin-like growth factors are key regulators of T helper 17 regulatory T cell balance in autoimmunity. Immunity. 52 (4), 650-667 (2020).
  15. Jain, R., et al. Interleukin-23-induced transcription factor Blimp-1 promotes pathogenicity of T helper 17 cells. Immunity. 44 (1), 131-142 (2016).
  16. Du, C., et al. Kappa opioid receptor activation alleviates experimental autoimmune encephalomyelitis and promotes oligodendrocyte-mediated remyelination. Nature Communications. 7, 11120(2016).
  17. Yang, C., et al. Betaine Ameliorates Experimental Autoimmune Encephalomyelitis by Inhibiting Dendritic Cell-Derived IL-6 Production and Th17 Differentiation. The Journal of Immunology. 200 (4), 1316-1324 (2018).
  18. McGinley, A. M., et al. Interleukin-17A serves a priming role in autoimmunity by recruiting IL-1β-producing myeloid cells that promote pathogenic T cells. Immunity. 52 (2), 342-356 (2020).
  19. Kocovski, P., et al. Differential anxiety-like responses in NOD/ShiLtJ and C57BL/6J mice following experimental autoimmune encephalomyelitis induction and oral gavage. Laboratory Animals. 52 (5), 470-478 (2018).
  20. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434(2015).
  21. Walsh, R. N., Cummins, R. A. The Open-Field Test: a critical review. Psychological Bulletin. 83 (3), 482-504 (1976).
  22. Tauil, C. B., et al. Depression and anxiety disorders in patients with multiple sclerosis: association with neurodegeneration and neurofilaments. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 54 (3), 10428(2021).
  23. Gentile, A., et al. Interaction between interleukin-1beta and type-1 cannabinoid receptor is involved in anxiety-like behavior in experimental autoimmune encephalomyelitis. Journal of Neuroinflammation. 13, 231(2016).
  24. Hearn, A. P., Silber, E. Osteoporosis in multiple sclerosis. Multiple Sclerosis. 16, 1031-1043 (2010).
  25. Gibson, J. C., Summers, G. D. Bone health in multiple sclerosis. Osteoporosis International. 22, 2935-2949 (2011).
  26. Ye, S., Wu, R., Wu, J. Multiple sclerosis and fracture. The International Journal of Neuroscience. 123, 609-616 (2013).
  27. Zamvil, S. S., et al. Lupus-prone' mice are susceptible to organ-specific autoimmune disease, experimental allergic encephalomyelitis. Pathobiology. 62 (3), 113-119 (1994).
  28. Oh, J., Vidal-Jordana, A., Montalban, X. Multiple sclerosis: clinical aspects. Current Opinion in Neurology. 31 (6), 752-759 (2018).
  29. Smith, P. Animal models of multiple sclerosis. Current Protocols. 1 (6), 185(2021).
  30. Aharoni, R., Globerman, R., Eilam, R., Brenner, O., Arnon, R. Titration of myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG)-Induced experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) model. Journal of Neuroscience Methods. 351, 108999(2021).
  31. Lassmann, H., Bradl, M. Multiple sclerosis: experimental models and reality. Acta Neuropathological. 133 (2), 223-244 (2017).
  32. Goverman, J., Perchellet, A., Huseby, E. S. The role of CD8(+) T cells in multiple sclerosis and its animal models. Current Drug Targets. Inflammation and Allergy. 4 (2), 239-245 (2005).
  33. Schultz, V., et al. Acutely damaged axons are remyelinated in multiple sclerosis and experimental models of demyelination. Glia. 65 (8), 1350-1360 (2017).
  34. McRae, B. L., et al. Induction of active and adoptive relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) using an encephalitogenic epitope of proteolipid protein. Journal of Neuroimmunology. 38 (3), 229-240 (1992).
  35. Zamvil, S., et al. T-cell clones specific for myelin basic protein induce chronic relapsing paralysis and demyelination. Nature. 317 (6035), 355-358 (1985).
  36. Jackson, S. J., Lee, J., Nikodemova, M., Fabry, Z., Duncan, I. D. Quantification of myelin and axon pathology during relapsing progressive experimental autoimmune encephalomyelitis in the Biozzi ABH mouse. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 68 (6), 616-625 (2009).
  37. Gudi, V., Gingele, S., Skripuletz, T., Stangel, M. Glial response during cuprizone-induced de- and remyelination in the CNS: lessons learned. Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 73(2014).
  38. Yu, Q., et al. Strain differences in cuprizone induced demyelination. Cell & Bioscience. 7, 59(2017).
  39. Dehghan, S., Aref, E., Raoufy, M. R., Javan, M. An optimized animal model of lysolecithin induced demyelination in optic nerve; more feasible, more reproducible, promising for studying the progressive forms of multiple sclerosis. Journal of Neuroscience Methods. 352, 109088(2021).
  40. Kuypers, N. J., James, K. T., Enzmann, G. U., Magnuson, D. S., Whittemore, S. R. Functional consequences of ethidium bromide demyelination of the mouse ventral spinal cord. Experimental Neurology. 247, 615-622 (2013).
  41. Haji, N., et al. TNF-alpha-mediated anxiety in a mouse model of multiple sclerosis. Experimental Neurology. 237, 296-303 (2012).
  42. Butler, E., Matcham, F., Chalder, T. A systematic review of anxiety amongst people with Multiple Sclerosis. Multiple Sclerosis and Related Disorders. 10, 145-168 (2016).
  43. Peres, D. S., et al. TRPA1 involvement in depression- and anxiety-like behaviors in a progressive multiple sclerosis model in mice. Brain Research Bulletin. 175, 1-15 (2021).
  44. Bouxsein, M. L., et al. Guidelines for assessment of bone microstructure in rodents using micro-computed tomography. Journal of Bone and Mineral Research. 25 (7), 1468-1486 (2010).
  45. Chappard, D., Retailleau-Gaborit, N., Legrand, E., Baslé, M. F., Audran, M. Comparison insight bone measurements by histomorphometry and microCT. Journal of Bone and Mineral Research. 20 (7), 1177-1184 (2005).
  46. Akhter, M. P., Lappe, J. M., Davies, K. M., Recker, R. R. Transmenopausal changes in the trabecular bone structure. Bone. 41 (1), 111-116 (2007).
  47. Wei, H., et al. Identification of Fibroblast Activation Protein as an Osteogenic Suppressor and Anti-osteoporosis Drug Target. Cell Reports. 33 (2), 108252(2020).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Model voor multiple sclerosemyelino oligodendrocyten glycoprote neklinisch scoresysteemopen veldtestbotmineraaldichtheidflowcytometrieanalyse van immuuncellenangstachtig gedragbeoordeling van osteoporose

Gerelateerde artikelen