Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Patiënten met ernstige peritoneale fibrose hebben een hoge morbiditeit en mortaliteit. Het mechanisme van peritoneale fibrose is onduidelijk. In deze studie beschrijven we een eenvoudig experimenteel muizenmodel van peritoneale fibrose geïnduceerd door de injectie van peritoneale dialysevloeistof.
Peritoneale fibrose kan optreden bij patiënten die peritoneale dialyse (PD) ondergaan en patiënten met ernstige peritoneale fibrose hebben een hoge morbiditeit en mortaliteit. Peritonitis, peritoneale dialysevloeistof met een hoog glucosegehalte en een lange periode van PD versnellen het begin van peritoneale fibrose. Een dierstudie van peritoneale fibrose is nodig vanwege de beperkingen van studies bij mensen en in vitro-studies . De meeste diermodellen bootsen echter geen klinische aandoeningen na. Om peritoneale fibrose te bestuderen, ontwikkelden we een klinisch relevant muizenmodel door een peritoneale katheter te implanteren en gedurende 21 dagen dagelijks 2,5% PD-vloeistof met een hoog glucosegehalte plus 20 mM methylglyoxal (MGO) in de peritoneale holte te injecteren. Implantatie van de peritoneale katheter voorkomt peritoneaal letsel door naalden en bootst klinische PD-patiënten na. Immunofluorescentiekleuring toonde aan dat myofibroblasten zich ophoopten in het fibrotische peritoneum. De experimentele groep had een lager ultrafiltratievolume en een lagere peritoneale membraantransportfunctie (peritoneale evenwichtstest). In dit artikel geven we een gedetailleerd protocol van het model.
Peritoneale dialyse (PD) is een vorm van niervervangende therapie die door ongeveer 11% van de patiënten met nierziekte in het eindstadium (ESRD) wordt ontvangen1. Studies hebben gemeld dat peritoneale fibrose zich ontwikkelt bij patiënten die PD2 krijgen. Het inkapselen van peritoneale sclerose (EPS), een ernstige vorm van peritoneale fibrose, resulteert in hoge morbiditeit en mortaliteit3. De risicofactoren van peritoneale fibrose zijn onder meer peritonitis, peritoneale dialysevloeistof met een hoog glucosegehalte, een lange periode van PD....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De experimenten werden goedgekeurd en uitgevoerd door het National Taiwan University College of Medicine en het College of Public Health Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC). Alle muizen werden gehuisvest onder de standaardzorg.
1. Dierproeven
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De histologie van het peritoneale weefsel werd onderzocht, waaruit bleek dat peritoneale fibrose met succes werd geïnduceerd in de PD-vloeistof plus MGO (PDF)-groep. Immunofluorescentiekleuring van het viscerale peritoneum van het leveroppervlak toonde meer myofibroblastaccumulatie in het beschadigde peritoneum van de PDF-groep dan in de controlegroep (Figuur 1). Zoals te zien is in figuur 2A, had de PDF-groep een lager ultrafil.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Het peritoneum heeft een visceraal en pariëtaal peritoneum, dat de buikorganen en buikwanden bedekt. Het is samengesteld uit een monolaag van mesotheelcellen, een submesotheellaag, serosa, fibroblasten, lymfocyten en uitgescheiden eiwitten14. Peritoneale fibrose is het verlies en de denudatie van mesotheelcellen, submesotheliale verdikking en de ophoping van veel ontstekingscellen, zoals myofibroblasten en macrofagen 4,14
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dit werk werd ondersteund door het National Taiwan University Hospital (NTUH) 111-UN0026.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| anti-wide spectrum Cytokeratin antibody | abcam | ab9377 | |
| Beckman Coulter | Beckman Coulter | AU5800 | Biochemische analyzer |
| DAPI, 4′,6-diamidino-2-fenylindole antilichaam | Sigma-Aldrich | 98718-90-3 | |
| Gordyn | elke | ||
| FITC geit anti-konijn | Jackson ImmunoResearch Secundair Antilichaam | 111-095-144 | |
| Handschoenen | elke | ||
| GraphPad Prizm | GraphPad Software | GraphPad Software 9.0 | |
| Kellys | elke | ||
| Methylglyoxal (MGO) | Sigma-Aldrich | ||
| Mini-UTE Muispoort | Access Technologies | MMP-4S 061108B | Muis 4-French siliconen poort |
| Monoklonaal anti-actine, α-gladde spier-Cy3 antilichaam | Sigma-Aldrich | C6198 | |
| Naalden | elke | ||
| Reflexklemmen 7 mm | elke | ||
| Hechtdraad 4-0 Nylon | elke |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Dit artikel is gepubliceerd
Video binnenkort beschikbaar