Method Article

Een bipolaire elektrode gebruiken om een temporale kwab epilepsiemuismodel te maken door elektrische aanmaakhoutjes van de amygdala

DOI:

10.3791/64113

June 29th, 2022

* These authors contributed equally

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De amygdala speelt een sleutelrol bij temporale kwab epilepsie, die ontstaat in en zich voortplant vanuit deze structuur. Dit artikel geeft een gedetailleerde beschrijving van de fabricage van diepe hersenelektroden met zowel opname- als stimulerende functies. Het introduceert een model van mediale temporale kwab epilepsie afkomstig van de amygdala.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De amygdala is een van de meest voorkomende oorzaken van aanvallen en het amygdala-muismodel is essentieel voor de illustratie van epilepsie. Weinig studies hebben het experimentele protocol echter in detail beschreven. Dit artikel illustreert het hele proces van het maken van amygdala elektrische aanmaakhoutjes epilepsiemodellen, met de introductie van een methode van bipolaire elektrodefabricage. Deze elektrode kan zowel stimuleren als opnemen, waardoor hersenletsel wordt verminderd dat wordt veroorzaakt door het implanteren van afzonderlijke elektroden voor stimulatie en opname. Voor langdurige elektro-encefalogram (EEG) opnamedoeleinden werden slipringen gebruikt om de recordonderbreking veroorzaakt door kabelklitten en vallen te elimineren.

Na periodieke stimulatie (60 Hz, 1 s om de 15 min) van de basolaterale amygdala (AP: 1,67 mm, L: 2,7 mm, V: 4,9 mm) gedurende 19,83 ± 5,742 keer, werd volledige aanmaakhout waargenomen bij zes muizen (gedefinieerd als inductie van drie continue graad V-episodes geclassificeerd door de schaal van Racine). Een intracraniaal EEG werd geregistreerd gedurende het gehele aanmaakhoutproces en een epileptische afscheiding in de amygdala van 20-70 s werd waargenomen na aanmaakhout. Daarom is dit een robuust protocol voor het modelleren van epilepsie afkomstig van de amygdala en is de methode geschikt voor het onthullen van de rol van de amygdala bij temporale kwab epilepsie. Dit onderzoek draagt bij aan toekomstige studies naar de mechanismen van mesiale temporale kwab epilepsie en nieuwe anti-epileptogene geneesmiddelen.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Temporale kwab epilepsie (TLE) is de meest voorkomende vorm van epilepsie en heeft een hoog risico op omzetting in geneesmiddelresistente epilepsie. Chirurgie, zoals selectieve amygdalohippocampectomie, is een effectieve behandeling voor TLE en de epileptogenese en ictogenese van de ziekte worden nog onderzocht 1,2. Pathogenese van TLE blijkt niet alleen in de hippocampus voor te komen, maar ook uitgebreid in de amygdala 3,4. Bijvoorbeeld, zowel amygdala sclerose en amygdala vergroting zijn vaak gemeld als de oorsprong van TLE aanvallen

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit experiment werd goedgekeurd door de Experimental Animal Ethics Committee van het Xuanwu Hospital, Capital Medical University. Alle muizen werden gehouden in het dierenlaboratorium van het Xuanwu-ziekenhuis, Capital Medical University. Dit protocol is verdeeld in vier delen. De eerste twee delen introduceren de methode voor het bouwen van de elektrode en het elektrische circuit met behulp van een sleepring om de elektroden en de EEG-opname- / stimulatieapparatuur aan te sluiten. Het derde deel beschrijft de operatiemethode van elektrode-implantatie en het vierde deel presenteert de EEG-opname- en stimulatieparameters die worden gebruikt voor het amygdala-epilepsiem....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De elektrode en het circuit maken het mogelijk om het EEG te registreren en te functioneren als een stimulatie (figuur 1); Deze opstelling vermijdt de complexiteit van het afzonderlijk implanteren, opnemen en stimuleren van elektroden en minimaliseert schade aan het hersenweefsel. De toepassing van sleepringen maakt elektrodeverbinding met alle soorten apparaten mogelijk.

We voerden elektrode-implantatiechirurgie uit op zes gezonde volwassen mannelijke C57BL / 6-m.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Epilepsie is een groep ziekten met meerdere manifestaties en diverse oorzaken18; Opgemerkt moet worden dat geen enkel model kan worden gebruikt voor alle soorten epilepsie en dat onderzoekers een geschikt model moeten selecteren voor hun specifieke studie. De huidige studie introduceert een van de meest toegankelijke methoden voor elektrodefabricage. Verschillende onderdelen van deze methode kunnen worden aangepast aan verschillende experimentele omstandigheden.

Deze me.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben geen belangenconflicten bekend te maken.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het onderzoek werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (nr. 82030037, 81871009) en de Beijing Municipal Health Commission (11000022T0000000444685). Wij danken TopEdit (www.topeditsci.com) voor haar taalkundige hulp bij de voorbereiding van dit manuscript.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

```html

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Alexa Fluor 488-geconjugeerd Donkey anti-Rabbit IgGinvitrogenA-21206
c-Fos antilichaamab222699
Craniale boorSANSSA302
Tandheelkundig cementNISSIN
EEG-opname- en stimulatieapparatuurNeuracle Technology (Changzhou) Co., LtdNSHHFS-210803
loodvrije tindraadBAKON
Pin header/Vrouwelijke headerXIANMISIafstand van 1,27 mm
ZilverdraadA-M systemen786000
Slip ringSenring Electronics Co.,LtdSNM008-04
WolfraamdraadA-M systemen796000
Ultrafijne meervoudige standdraadShenzhen Chengxing draad en kabelUL10064-FEP
LasapparatuurBAKONBK881
```

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kurita, T., Sakurai, K., Takeda, Y., Horinouchi, T., Kusumi, I. Very long-term outcome of non-surgically treated patients with temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis: A retrospective study. PLoS One. 11 (7), 0159464(2016).
  2. Choy, M., Duffy, B. A., Lee, J. H.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Amygdala KindlingTemporal Lobe EpilepsyBipolar ElectrodeMouse Epilepsy ModelElectrical StimulationIntracranial EEGStereotaxic SurgerySeizure Monitoringc Fos ExpressionImmunohistochemistry

Related Articles