$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Alle experimentele procedures werden beoordeeld en goedgekeurd door de Institutional Review Board van het Seoul National University Bundang Hospital. Voor de experimenten in deze studie werden 34 deelnemers met een beroerte gerekruteerd. Van alle deelnemers werd ondertekende geïnformeerde toestemming verkregen. Een ondertekende geïnformeerde toestemming werd verkregen van een wettelijke vertegenwoordiger als een deelnemer aan de criteria voldeed, maar het toestemmingsformulier niet kon ondertekenen vanwege een handicap.
1. Experimentele opzet
- Werving van patiënten
- Voer het screeningsproces uit aan de hand van de volgende inclusiecriteria:
Leeftijd van 18 tot 85 jaar met de aanwezigheid van verminderde functies van de bovenste ledematen;
Eerste ischemische of hemorragische beroerte ooit, bevestigd door computertomografie van de hersenen of beeldvorming met magnetische resonantie;
Het vermogen van de deelnemer om de instructies voor klinische beoordeling en het EEG-onderzoek op te volgen;
Afwezigheid van een voorgeschiedenis van andere psychiatrische of neurologische aandoeningen behalve beroerte.
- Sluit patiënten uit op basis van het volgende:
Eerdere ziekte waarbij het centrale zenuwstelsel betrokken is (bijv. traumatisch hersenletsel, hersentumor, ziekte van Parkinson);
Onvermogen om de EEG-dop te dragen; en
Onvermogen om de instructies voor de klinische beoordeling en het EEG-onderzoek op te volgen.
OPMERKING: De in- en uitsluitingscriteria zijn gekozen om de deelnemers te selecteren die in staat zijn om deel te nemen aan het experiment en om de demografische factoren te reguleren die de resultaten kunnen beïnvloeden.
- Geef alle gerekruteerde deelnemers informatie over de details van de experimentele procedure.
- Experimenteel systeem: EEG
- Gebruik een EEG-systeem bestaande uit 32 Ag/AgCl-hoofdhuidelektroden, een EEG-dop van textiel en EEG-opnamesoftware voor gegevensregistratie.
- Gebruik een pc (pc) waarop EEG-opnamesoftware is geïnstalleerd en verbind de pc via Bluetooth met het EEG-apparaat.
- Gebruik een andere pc met een softwaretoepassing voor numerieke analyse en programmering voor engineering (zie Tabel met materialen).
- Sluit voor de presentatie van stimuli de pc aan op een speciale triggerbox (Figuur 1).
OPMERKING: De gedetailleerde specificaties van de twee pc's vindt u in de Materiaaltabel.
- Experimenteel paradigma op basis van programmeersoftware
OPMERKING: De deelnemers voerden een handextensietaak uit met behulp van de aangedane en niet-aangedane handen, waarbij EEG-gegevens werden gemeten. Figuur 2 toont het experimentele paradigma van deze studie.- Presenteer twee visuele stimuli, CLOSE en OPEN, elk gedurende 30 seconden, in het midden van een monitor om de EEG-gegevens in rusttoestand te meten, waarbij de deelnemer de ogen sluit en opent.
OPMERKING: Omdat EEG-gegevens in rusttoestand relatief minder vervuild zijn door ongewenste fysiologische artefacten, zijn ze nuttig voor het verifiëren van de kwaliteit van EEG-gegevens en het identificeren van individuele EEG-kenmerken met betrekking tot de rusttoestand.
- Presenteer een handbewegingsbeeld gedurende 3 s om de deelnemer te instrueren een handextensiebeweging te maken, gevolgd door een fixatiemarkering gedurende 5 s om te rusten.
OPMERKING: Deze procedure werd beschouwd als een proef en werd 10 keer herhaald in één sessie. Elke deelnemer onderging 4 sessies voor elke hand. De deelnemer had na het uitvoeren van elke sessie een pauze wanneer hij/zij maar wilde om overmatige vermoeidheid te voorkomen.

Figuur 1: Schema van de opstelling van de apparatuur. Een pc (PC1) met experimentele stimuli werd aangesloten op een triggerbox en een andere pc (PC2) werd aangesloten op een EEG-versterker. Stimulatiegebeurtenissen die in PC1 werden gegenereerd, werden aan de EEG-versterker geleverd via de triggerbox die op PC1 was aangesloten. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2: Experimenteel paradigma gebruikt in deze studie. Een enkele proef bestond uit een handstrekbeweging van 3 s, gevolgd door een ontspanning van 5 s. Dit patroon werd 10 keer herhaald in één sessie. In totaal werden er acht sessies uitgevoerd; Vier sessies betroffen beïnvloede handbewegingen, terwijl de andere vier onaangetaste handbewegingen betroffen. Deze figuur is een bewerking van Shim et al.17 met toestemming van Mary Ann Liebert, Inc. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
2. Registratie van bewegingsgerelateerde EEG-gegevens
- EEG-opstelling
- Zet de deelnemer in een comfortabele fauteuil voor een monitor.
NOTITIE: De afstand tussen de deelnemer en de monitor moet minimaal 60 cm zijn om vermoeidheid van de ogen te voorkomen. Een te grote afstand moet echter worden vermeden (bijv. >150 cm) omdat dit de concentratie van de deelnemer zou kunnen afleiden.
- Om de dop nauwkeurig te dragen voor EEG-metingen, definieert u de Cz-locatie op basis van het internationale 10-20-systeem met behulp van het snijpunt van de longitudinale lijn die de nasion en inion verbindt en de transversale lijn die het bovenste deel van beide oorschelpen verbindt.
NOTITIE: Een EEG-dop is mogelijk niet vereist, afhankelijk van de EEG-meetapparatuur. In dat geval worden EEG-elektroden rechtstreeks op de hoofdhuid bevestigd volgens het internationale 10-20-systeem15.
- Gebruik voor een nauwkeurige EEG-meting een EEG-dop van de juiste maat volgens de hoofdomvang van de deelnemer en plaats deze zo dat de positie van de Cz-elektrode op de individuele Cz-locatie wordt geplaatst.
- Bevestig de kinband met de juiste strakheid; Dit voorkomt dat de deelnemer zich ongemakkelijk voelt tijdens het slikken en knipperen in het experiment. Controleer daarna of de T9- en T10-elektrodeposities van de EEG-dop zich in het temporale gebied boven beide oorschelpen bevinden en dat de Fpz-elektrodepositie van de EEG-dop zich in het midden van het voorhoofd bevindt.
NOTITIE: Als die elektroden zich buiten de aangewezen locatie bevinden, overweeg dan om de dop te vervangen. In ons onderzoek werden drie EEG-kapmaten gebruikt (54 cm: klein, 56 cm: medium, 58 cm: groot).
- Nadat u de EEG-dop correct hebt geplaatst, bevestigt u 32 Ag/AgCl-hoofdhuidelektroden op de hoofdhuid volgens het uitgebreide internationale 10-10-systeem, met de aardings- en referentie-elektroden op respectievelijk Fpz en FCz16.
OPMERKING: De locatie van de referentie-elektrode (FCz) wordt relatief minder beïnvloed door verschillende fysiologische artefacten, zoals die van elektro-oculografie, elektromyografie en elektrocardiografie, omdat deze zich rond het centrale gebied (Cz) van de hoofdhuid bevindt.
- Pas het impedantieniveau tussen de EEG-elektroden en de hoofdhuid aan met behulp van geleidende gel en fixeer het haar met de gel om obstructie tussen de EEG-elektroden en de hoofdhuid te voorkomen.
OPMERKING: Het is belangrijk om te bevestigen of er een brug ontstaat tussen aangrenzende EEG-elektroden als gevolg van gellekkage.
- Gebruik de software voor EEG-opname.
- Schakel het EEG-systeem in en voer de configuratie uit > selecteer Amplifier. Kies Liveamp > > versterker > aansluiten. Zoek naar de Liveamp-functie voor de draadloze verbinding (Afbeelding 3).
- Voer de impedantiecontrolefunctie uit om het impedantieniveau voor elke elektrode te bewaken.
OPMERKING: Het wordt aanbevolen om het experiment uit te voeren met een impedantieniveau van <20 KΩ (Figuur 4).
- Voer de bewakingsfunctie uit om te bevestigen of de EEG's van alle elektroden vergelijkbare amplitudeniveaus hebben door middel van real-time EEG-signaalbewaking (Figuur 5).
OPMERKING: De amplitude van het EEG-signaal ligt over het algemeen tussen 10 μV en 100 μV, en het alfavermogen (8-12 Hz) neemt toe rond het occipitale gebied wanneer de ogen gesloten zijn. Daarom kan de kwaliteit van EEG-gegevens kwalitatief worden bevestigd door het amplitudeniveau en alfa-oscillaties op de kanalen rond het occipitale gebied te bewaken terwijl de ogen gesloten zijn.
- Paradigma opstelling
- Gebruik voor stabiele EEG-gegevensverzameling twee afzonderlijke pc's voor het presenteren van externe stimuli en het registreren van EEG-gegevens (zie figuur 1).
- Om experimentele stimuli aan de deelnemers te presenteren, maakt u een stimulatieprogramma op basis van het experimentele paradigma met behulp van programmeersoftware (geïntroduceerd in stap 1.3).
OPMERKING: In dit onderzoek is een op software gebaseerd stimulatieprogramma gemaakt, maar andere software kan worden gebruikt, afhankelijk van hun compatibiliteit met de EEG-apparatuur die voor het experiment wordt gebruikt, evenals het gebruiksgemak. Het op programmeersoftware gebaseerde stimulusscript is te vinden in Supplementary File 1 (Experimental_stimulus.m). De gebeurtenisinformatie, die het beginpunt van stimuli aangeeft, wordt gegenereerd door de interne programmeersoftware, verzonden naar de EEG-versterker via de triggerbox en uiteindelijk naar de EEG-opnamesoftware (Figuur 1).
- Voer het programma uit dat de experimentele stimuli in de bewakingsmodus presenteert (zie substap 2.1.10). Controleer vervolgens of de gebeurtenisinformatie tijdig en correct is gemarkeerd aan de onderkant van de EEG-opnamesoftware telkens wanneer een stimulus wordt gepresenteerd, zoals weergegeven in afbeelding 6.
OPMERKING: Informatie over het tijdstip wordt geregistreerd wanneer een nieuwe stimulus wordt gepresenteerd en wordt vervolgens gebruikt voor gegevenssegmentatie. Daarom is het belangrijk om zoveel mogelijk de exacte tijdstippen van experimentele gebeurtenissen te verkrijgen om onnauwkeurige gegevenssegmentatie te voorkomen, wat zou leiden tot onbetrouwbare resultaten in de analyse.
- Start de EEG-opnamesoftware en voer vervolgens zelfstandig het stimuluspresentatieprogramma uit dat is ontwikkeld op basis van het experimentele paradigma met behulp van programmeersoftware om het weglaten van gegevens te voorkomen.
OPMERKING: Voor het gemak van gegevensanalyse wordt aanbevolen om bestandsnamen te maken met een consistente regel voor gegevensopslag (bijv. Sub1_Session1).
- EEG-opname
- Meet EEG met een bemonsteringsfrequentie van 1.000 Hz volgens het experimentele paradigma dat in stap 1.3 is geïntroduceerd.
OPMERKING: De bemonsteringsfrequentie kan worden gewijzigd afhankelijk van het bereik van EEG-frequenties dat de onderzoeker wil onderzoeken. Over het algemeen wordt aanbevolen om een bemonsteringsfrequentie van >200 Hz te gebruiken, waarbij EEG-informatie kan worden onderzocht bij ≤100 Hz op basis van de stelling van Nyquist. Dit komt omdat de meeste EEG-informatie onder de 100 Hz bestaat.
- Handhaaf zoveel mogelijk dezelfde experimentele omgevingen (bijv. experimentele plaats, apparatuur, kamertemperatuur, enz.) tussen de deelnemers en instrueer hen om onnodige bewegingen tijdens de EEG-meting tot een minimum te beperken.

Afbeelding 3: Draadloze verbindingsprocedure tussen een EEG-versterker en pc met de EEG-opnamesoftware. Volg de stappen in volgorde: (A) selecteer versterker, (B) sluit versterker aan, (C) zoek naar de aangesloten versterker voor draadloze verbinding, (D) verbinding voltooid. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 4: Impedantiecontroleprocedure voor elk kanaal. Alle kanalen moeten worden afgesteld op groene kleur voor een stabiele EEG-meting. Het wordt aanbevolen om het experiment uit te voeren met een impedantie van minder dan 20 KΩ. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 5: Real-time procedure voor het monitoren van gegevens voor elk kanaal. Signalen van alle kanalen die worden gemeten, kunnen in real-time worden gemonitord en kunnen worden in- en uitgezoomd met behulp van de optie (rood vak) op de bovenste balk. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Afbeelding 6: Screenshot voor het monitoren van gebeurtenisinformatie. De rode balken geven gebeurtenismakers aan die worden gepresenteerd telkens wanneer een stimulus door PC1 wordt gegeven. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
3. Analyse van EEG-gegevens
OPMERKING: Deze studie biedt nauwkeurige richtlijnen voor het repliceren van het onderzoeksconcept. Daarom geeft het een korte schets van het analyseproces en representatieve resultaten. De gedetailleerde processen en de bijbehorende resultaten zijn te vinden in een eerdere studie17. Dit dient als een indicatie dat Mary Ann Liebert, Inc. toestemming heeft verleend voor het gebruik van auteursrechtelijk beschermd materiaal.
- Preprocessing
- Verwijder ooggerelateerde artefacten uit de ruwe EEG-gegevens met behulp van wiskundige procedures op basis van analyse van de hoofdcomponenten die zijn geïmplementeerd in EEG-gegevensvoorverwerkingssoftware18,19 (zie Tabel met materialen).
OPMERKING: Als een epoche prominente artefacten (± 100 μV) vertoonde, zelfs na voorbewerking in een van de elektroden, werd deze uitgesloten van verdere analyse. Het gemiddelde aantal afgewezen epochs, inclusief hun standaarddeviatie, was 3,69 ± 7,15 voor de betrokken handbewegingstaak en 1,62 ± 3,95 voor de niet-beïnvloede handbewegingstaak.
- Pas een banddoorlaatfilter toe tussen 0,1 Hz en 55 Hz. Segmenteer de voorbewerkte EEG-gegevens van -1 s tot 3,5 s voor elke proef op basis van het begin van de taak om de basislijnperiode te bevatten die wordt gebruikt voor gebeurtenisgerelateerde spectrale verstoring (ERSP) en functionele netwerkanalyses.
- ERSP-analyse
OPMERKING: De gemeten EEG-gegevens werden gevalideerd via ERSP-analyse voor een lage bètafrequentieband (12-20 Hz) geassocieerd met vrijwillige bewegingen.- Voer voor elke proef een kortstondige Fouriertransformatie uit om EEG-spectrale vermogens te berekenen, waarvoor de newtimef-functie van de EEGLAB-toolbox in de programmeersoftware werd gebruikt 20 (een niet-overlappend Hanning-venster,250 ms venstergrootte).
- Normaliseer het vermogensspectrum van elke proef door het gemiddelde vermogen van de basislijnperiode (-1 tot 0 s) af te trekken om de veranderingen in spectrale vermogens tussen de handbewegingstaak en de basislijnperiode te onderzoeken.
- Maak een schatting van baseline-genormaliseerde ERSP-kaarten voor elke patiënt door het gemiddelde te nemen van de genormaliseerde vermogensspectra in verschillende onderzoeken.
- Functionele netwerkanalyse
OPMERKING: Er is een functionele netwerkanalyse uitgevoerd om EEG-veranderingen te onderzoeken vanuit het perspectief van een hersennetwerk. Om gewogen netwerkindices voor het hele brein te berekenen op basis van grafentheorie, werd eerst de hersenconnectiviteit tussen verschillende regio's berekend met behulp van de fasevergrendelingswaarde (PLV). Vervolgens werd een functionele connectiviteitsmatrix berekend met behulp van de resultaten van de op PLV gebaseerde connectiviteitsanalyse, die vervolgens werd gebruikt om netwerkindices voor het hele breinte berekenen 17. Alle functionele netwerkanalyses werden uitgevoerd met behulp van de programmeersoftware.- Bereken de Hilberttransformatie-gebaseerde fasevergrendelingswaarde (PLV) voor een lage bètafrequentieband (12-20 Hz) met behulp van een interne functie21,22. De interne functie voor het berekenen van de op Hilberttransformatie gebaseerde PLV is beschikbaar in Supplementary File 2 (myPLV.m).
- Beoordeel de PLV's tussen alle mogelijke paren van de 32 EEG-elektroden op elk tijdstip tijdens de taakperioden (0-3,5 s) en creëer een symmetrische adjacency-matrix (32 x 32, aantal elektroden = 32) door het gemiddelde te nemen van de PLV's over de taakperiode. Gebruik de PLV-matrix als invoergegevens voor netwerkanalyse17,23.
- Evalueer vier gewogen netwerkindices op mondiaal niveau op basis van grafentheorie met behulp van de Brain Connectivity Toolbox (https://sites.google.com/site/bctnet): (1) sterkte, (2) clustercoëfficiënt, (3) padlengte en (4) kleinschaligheid 17,24,25.