Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Inductie van urethrale strictuur gevolgd door uretroplastiek van het buccaal slijmvliestransplantaat in een rattenmodel

2.2K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/65094

⸱

28 april 2023

In dit artikel

Samenvatting

In het huidige protocol werd een urethrale strictuurinductie ontwikkeld bij Wistar-ratten, gevolgd door urethrale reconstructie met een buccaal slijmvliestransplantaat. Er werd een retrograde urethrogram en laser-Doppler-beoordeling uitgevoerd, waarbij de urethrale reconstructie (na strictuurvorming) en de plaatsing van het transplantaat werden gevalideerd.

Samenvatting

Urethrale reconstructie is een belangrijk expertisegebied voor urologen. Het mondslijmvlies wordt als de beste optie beschouwd wanneer urethrale transplantatie noodzakelijk is, hoewel het in sommige gevallen ongepast is of moet worden geoptimaliseerd om een bepaalde vernauwing te herstellen. Daarom is het ontwikkelen van innovatieve procedures en het evalueren van hun vermeende succes in experimentele modellen van cruciaal belang om aan de klinische behoefte te voldoen. Met dit doel beschrijft deze studie een protocol waarbij urethrale strictuur werd geïnduceerd door elektrocauterisatie bij Wistar-ratten. Urethrale reconstructie werd 1 week later uitgevoerd met een buccaal slijmvliestransplantaat, geoogst uit de onderlip en op een ventrale onlay-manier geplaatst. Een retrograde urethrogram toonde een significante verbetering van de urethrale diameter na urethroplastiek in vergelijking met de respectieve waarde na strictuurinductie. Bovendien werd de plaatsing van het transplantaat beoordeeld door middel van bloedperfusieanalyse met behulp van laserdoppler. Zoals verwacht kwam een donkerblauw gebied overeen met het niet-gevasculariseerde buccale slijmvliestransplantaat. Deze procedure kan met succes het normale pathofysiologische proces van urethrale beschadiging en weefselmodulatie simuleren, evenals urethrale reconstructie met behulp van een buccaal slijmvliestransplantaat op een reproduceerbare manier, en dienen als basis voor toekomstig onderzoek op basis van weefselmanipulatie of urethrale transplantaten.

Inleiding

Urethrale reconstructie is een grote uitdaging voor urologische chirurgen bij de behandeling van urethrale schade in het kader van vernauwingen, trauma of aangeboren afwijkingen1. Met curatieve intentie is uretroplastiek de voorkeursbehandeling voor de meeste patiënten, met lange (>2 cm) en anterieure urethrale defecten die een vorm van substitutie vereisen uretroplastiek2. Veel weefsels zijn gebruikt als urethrale vervangers, waaronder huidtransplantaten van volledige of gespleten dikte van genitale of extragenitale gebieden, blaaswandslijmvlies of het wijdverspreide mondslijmvlies2. Buccale slij....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle dierproeven zijn uitgevoerd in overeenstemming met Richtlijn 2010/63/EU. De procedures zijn goedgekeurd door de institutionele instantie voor dierenwelzijn, met een vergunning van DGAV, de Portugese bevoegde autoriteit voor dierenbescherming (vergunningsnummer 0421/000/000/2021). Voor het huidige onderzoek werden mannelijke Wistar Han IGS (Crl:WI(Han)-ratten (400-500 g) op de leeftijd van 12-14 weken gebruikt. De dieren zijn afkomstig van een commerciële bron (zie Materiaaltabel).

1. Bereiding van oplossingen

  1. Verdovende oplossing
    1. Vul een spuit van 3 ml met 2,3 ml medetomidine (1 mg/ml;....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

In totaal werden 12 mannelijke Wistar-ratten, met een gewicht van 400-500 g en 12-14 weken oud, gebruikt voor urethrale strictuurinductie. Een retrograde urethrogram (RUG1) werd 1week later 8 uitgevoerd, wat het succes van de techniek bevestigde. De urethrale diameter werd gemeten in millimeters ter hoogte van de strictuurinductie. Hierna werd een urethroplastiek met een buccaal slijmvliestransplantaat uitgevoerd in het ventrale vlak van de urethra van de rat. Dezelfde ratten werden 14 dagen na de.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Urethroplastiek met buccale slijmvliestransplantaten is een belangrijke hoeksteen bij urethrale reconstructie. Er moeten echter innovatieve procedures worden ontwikkeld om de reeds beschreven procedures te optimaliseren en nieuwe vast te stellen, zoals weefselmanipulatiematerialen en biologische transplantaten, om complicaties en morbiditeit te verminderen. Er zijn verschillende procedures gepubliceerd om preklinische modellen op te stellen en chirurgische technieken te definiëren. Souza et al.1 v.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Wij danken João Leitão, hoofd van de afdeling Radiologie van het Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, en Catia Fernandes, technicus van de afdeling Radiologie van het Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, voor hun medewerking bij de realisatie van urethrogrammen.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

```html
Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
AtipamezoleOrionPharmaANTISEDAN (atipamezole) is geïndiceerd voor de omkering van de sedatieve en analgetische effecten.
BuprenorfineRichterPharmaBuprenorfine is een derivaat van het opioïde alkaloïde thebaïne dat een krachtiger (25-40 keer) en langer werkend analgeticum is dan morfine.
Carl Zeiss Opmi-1 FC chirurgisch stereomicroscoopCarl Zeiss Microscopy, DuitslandOPMI 1 FC van ZEISS symboliseert kwaliteit, precisie en betrouwbaarheid. Het handmatige systeem is eenvoudig te gebruiken en levert beelden met hoge getrouwheid met de legendarische ZEISS-optica.
CarprofenZoetisCarprofen is een niet-steroïdale anti-inflammatoire drug (NSAID) van de propionzuurklasse.
Catheter 22 G. x 1''B BraunIntrocan SafetyIV-catheter van gefluoreerd ethyleenpropyleen (FEP) met stevigere constructie voor
arteriële toegang.
EnrofloxacineBayerEnrofloxacine is een fluorquinolon-antibioticum.
FentanylBraun3644960Fentanyl is een krachtig synthetisch opioïde analgeticum.
FlumazenilFresenius KabiBenzodiazepine-antagonist wordt gebruikt voor de volledige of gedeeltelijke omkering van de sedatieve effecten veroorzaakt door benzodiazepinen.
Hoge temperatuur cauterFiabF7244Sterke dispositief cauter, steriele, hoge temperatuur (1200 °C), 28 mm fijne tip.
Instillagel gelFarco-pharmaCellulose-gebaseerd glijmiddel met lokale anesthetische en desinfecterende eigenschappen.
IopromideBayerNiet-ionisch injecteerbaar contrastmiddel, met jodium.
Laser Doppler beeldvormingssysteem (perfusie imager moorLDI2-HIR en toegewijde software)MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, UK5710De angiogenesemodellen gebruiken Laser Doppler beeldvorming om de bloedperfusie in de achterste ledematen te beoordelen, waarvan er één chirurgisch wordt geligeerd. Toegewijde meet- en vergelijkingssoftware maakt de definitie van interessegebieden mogelijk voor bloedstroombeoordeling op het ischemische versus niet-ischemische ledemaat om een ​​'reperfusion ratio' vast te stellen die zo vaak als nodig kan worden beoordeeld en gedurende een aantal dagen op hetzelfde onderwerp.
Lubrithal ooggelDechraOoggel gebruikt bij dieren voor preventie van droge ogen tijdens anesthesie. Smeer- en vochtinbrengende werking op het hoornvlies en bindvlies.
Mannelijke Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) rattenCharles River Laboratories, SpanjeTwaalf tot veertien weken oud
MetedomidinVirbac037/01/07RFVPTMedetomidine is een synthetisch geneesmiddel dat als chirurgisch anestheticum wordt gebruikt.
MidazolamLabesfalBenzodiazepinemedicatie wordt gebruikt voor anesthesie en procedurele sedatie.
Monoplan angiografiesysteemPhilips Medical SystemsAzurion 7 M20Een stationair diagnostisch fluoroscopisch röntgensysteem dat specifiek is ontworpen om de mogelijkheden van gebruikers te optimaliseren om de anatomie en functie van de bloedvaten van het hart, de hersenen en andere organen, evenals het lymfestelsel visueel en kwantitatief te evalueren.
MuggentangHenry Schein102-4346Hartman-Muggentang Hemostatic Forcep Gebogen 3-1/2" Roestvrij staal
NadelhouderHenry Schein100-2570Nadelhouder Mayo-Hegar, roestvrij staal, 14 cm
Ophtalmische naaldhouderAsicoAE-6143Naaldhouder barranquer meest delicaat zonder vergrendeling
Pentobarbital NatriumEcupharPentobarbital Natrium is het natriumzout van pentobarbital dat wordt gebruikt voor euthanasie.
Gescherpte pincettenAesculapBD335RMicroforceps, 0,30 mm tip
Polysorb 6.0Medtronic (Covidien)UL-101Gescotteerde synthetische absorbeerbare hechtdraad gericht op het verminderen van de ontstekingsreactie in weefsels, gevolgd door geleidelijke inkapsing van de hechtdraad door bindweefsel.
Providoon-jodiumMylanPovidon-jodium 10% is een antisepticum, gebruikt als ontsmettingsmiddel voor en na een operatie.
Scalpelmesje nr. 11B BraunBB511Koolstofstaal, sterieel
VerenschaarHenry Schein600-4826Chirurgische schaar 31 castroviejo
Chirurgische pincettenAesculapBD33RMicroforceps, 0,20 mm tip
Chirurgische schaarAesculapMA873RMicro Iris Scissor, gebogen punten
SurgiPro 7.0Medtronic (Coviden)VP-702-XNiet-absorbeerbare monofilamentpolypropyleen hechtdraad geïndiceerd voor gebruik bij algemene zachte weefselligatie.
```

Referenties

  1. Souza, G. F., Calado, A. A., Delcelo, R., Ortiz, V., Macedo, A. Histopathological evaluation of urethroplasty with dorsal buccal mucosa: an experimental study in rabbits. International Brazilian Journal of Urology. 34 (3), 345-354 (2008).
  2. Andrich, D. E., Mundy, A. R.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Urethroplastiek ratmodelurethrale reconstructieinductie van stricturen via electrocauterisatieventrale onlay-transplantatieretrograde urethrogrambloedperfusieanalysetissue engineeringplaatsing van transplantaten