Optimalisatie van de Epimedii Folium Mutton-Oil Processing Technology en het testen van het effect ervan op de embryonale ontwikkeling van zebravissen

Summary

In dit protocol werd de schapenolieverwerkingstechnologie van Epimedii folium (EF) geoptimaliseerd door een Box-Behnken experimentele ontwerp-respons oppervlaktemethodologie toe te passen, en het effect van ruwe en geoptimaliseerde watergeëxtraheerde EF op de embryonale ontwikkeling van zebravissen werd voorlopig onderzocht.

Abstract

Als een traditionele Chinese geneeskunde (TCM) heeft Epimedii folium (EF) een geschiedenis in geneeskunde en voedsel die > 2.000 jaar oud is. Klinisch wordt EF verwerkt met schapenolie vaak gebruikt als geneesmiddel. In de afgelopen jaren zijn de meldingen van veiligheidsrisico's en bijwerkingen van producten die EF als grondstof gebruiken geleidelijk toegenomen. Verwerking kan de veiligheid van TCM effectief verbeteren. Volgens de TCM-theorie kan de verwerking van schapenolie de toxiciteit van EF verminderen en het tonificerende effect op de nieren versterken. Er is echter een gebrek aan systematisch onderzoek en evaluatie van EF-technologie voor de verwerking van schapenolie. In deze studie gebruikten we de Box-Behnken experimentele ontwerp-respons oppervlaktemethodologie om de belangrijkste parameters van de verwerkingstechnologie te optimaliseren door de inhoud van meerdere componenten te beoordelen. De resultaten toonden aan dat de optimale verwerking van schapenolie van EF als volgt was: de schapenolie verwarmen bij 120 °C ± 10 °C, de ruwe EF toevoegen, voorzichtig roerbakken tot 189 °C ± 10 °C totdat deze gelijkmatig glanzend is, en vervolgens verwijderen en afkoelen. Voor elke 100 kg EF moet 15 kg schapenolie worden gebruikt. De toxiciteiten en teratogeniciteiten van een waterig extract van ruwe en schapenolie verwerkte EF werden vergeleken in een zebravisembryo-ontwikkelingsmodel. De resultaten toonden aan dat de ruwe kruidengroep meer kans had om zebravismisvormingen te veroorzaken en dat de half-maximale dodelijke EF-concentratie lager was. Kortom, de geoptimaliseerde schapenolieverwerkingstechnologie was stabiel en betrouwbaar, met een goede herhaalbaarheid. Bij een bepaalde dosis was het waterige extract van EF giftig voor de ontwikkeling van zebravisembryo's en de toxiciteit was sterker voor het ruwe medicijn dan voor het verwerkte medicijn. De resultaten toonden aan dat de verwerking van schapenolie de toxiciteit van ruwe EF verminderde. Deze bevindingen kunnen worden gebruikt om de kwaliteit, uniformiteit en klinische veiligheid van met schapenolie verwerkte EF te verbeteren.

Introduction

Epimedii folium (EF) is het gedroogde blad van Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim., Epimedium pubescens Maxim., of Epimedium koreanum Nakai. EF kan worden gebruikt voor de behandeling van osteoporose, menopauzale syndroom, borstknobbels, hypertensie, coronaire hartziekten en andere ziekten¹. Als traditionele Chinese geneeskunde (TCM) heeft EF een geschiedenis in geneeskunde en voedsel van meer dan 2.000 jaar. Vanwege de lage prijs en het opmerkelijke effect van tonificatie van de nieren, wordt het veel gebruikt in medicijnen en gezonde voedingsmiddelen. EF wordt verwerkt ....

Protocol

Alle diergerelateerde experimenten werden uitgevoerd met goedkeuring van de Experiment Ethics Committee van het Chongqing Institute of TCM (proefdierethiek review certificaatnummer: ZJS2022-03).

1. Bepaling van de bioactieve bestanddelen

OPMERKING: De soort die in dit onderzoek werd gebruikt was Epimedium sagittatum en de monsters werden verzameld in Fengdu County, Chongqing. Het monster werd geïdentificeerd als een droog bovengronds deel van E. sagittatum (Sieb. et Zucc.) Spreuk. door onderzoekers van The Institute of Biological Medicine, Chongqing Institute of Traditional Chines....

Results

Resultaten methodologisch onderzoek
Er werd een lineair verband waargenomen tussen de concentratie van icariin, EA, EB, EC, BI en chromatografische piekgebieden (zie tabel 3). De RSD%-waarden (n = 6) van de chromatografische piekgebieden van icariin, EA, EB, EC en BI waren respectievelijk 0,28%, 1,22%, 0,65%, 1,67% en 1,06%, wat aangeeft dat de precisie van de HPLC-metingen goed was. De RSD%-waarden (n = 6) van de inhoud van icariin, EA, EB, EC en BI waren respectievelijk 1,59%, 1,46%.......

Discussion

Onafhankelijke variabelen en de bepaling van hun niveaus
De EF-verwerkingstechnologie wordt alleen beschreven in de 2020-editie van de Chinese Farmacopee en de lokale Chinese medicijnverwerkingsspecificaties die zijn gepubliceerd door 26 provincies, gemeenten en autonome regio's in het hele land¹. De beschrijving omvat de volgende stappen: schapenolie nemen en verwarmen om te smelten, EF-snippers toevoegen, roerbakken met een langzaam vuur tot het uniform en glanzend is, het er.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrile	Fisher	197164
Baohuoside (B )	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-20042402
Chromatographic column	Waters Corporation	Symmetry C18
Design Expert software	Stat- Ease Inc., Minneapolis, MN	Trial Version8.0.6.1
Detector	Waters Corporation	2998
Disintegrator	Hefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd.	S-FS553
Electronic analytical balance	Mettler-Toledo International Inc.	MS205DU
Epimedin A (EA)	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-21112118
Epimedin B (EB)	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-20080403
Epimedin C (EC)	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-20080310
Ethanol	Chongqing Chuandong Chemical ( Group ) Co., Ltd.	20180801
Graphpad software	GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA	6.02
High Performance Liquid Chromatography (HPLC)	Waters Corporation	2695
Icariin	Chengdu Glip Biotechnology Co., Ltd.	21091401
Methanol	Chongqing Chuandong Chemical (Group) Co., Ltd.	20171101
Microporous membrane	Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd.	0.22μm
Mutton oil	Kuoshan Zhiniu Fresh Food Store	20211106
Office Excel office software	Microsoft	Office Excel 2021
Pharmacopoeia sieve	Shaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd.	R40/3
Pure water machine	Chongqing Andersen Environmental Protection Equipment Co., Ltd.	AT Sro 10A
Qualitative filter paper	Shanghai Leigu Instrument Co., Ltd.	18cm
Stereomicroscope	Carl Zeiss, Oberkochen, Germany	Stemi 2000
Ultrasonic cleaner	Branson Ultrasonics (Shanghai) Co.,Ltd.	BUG25-12
Zebrafish	China Zebrafish Resource Center (CZRC)	The AB strain