Methodenartikel

Procesontwikkeling voor het sproeidrogen van probiotische bacteriën en evaluatie van de productkwaliteit

DOI:

10.3791/65192

⸱

7 april 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, 2Faculdade de Farmácia, Universidade Federal De Goiás

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit protocol beschrijft de stappen die betrokken zijn bij de productie en fysisch-chemische karakterisering van een gesproeidroogd probiotisch product.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Probiotica en prebiotica zijn van groot belang voor de voedings- en farmaceutische industrie vanwege hun gezondheidsvoordelen. Probiotica zijn levende bacteriën die gunstige effecten kunnen hebben op het welzijn van mens en dier, terwijl prebiotica soorten voedingsstoffen zijn die de gunstige darmbacteriën voeden. Poeder probiotica hebben aan populariteit gewonnen vanwege het gemak en de bruikbaarheid van hun inname en opname in het dieet als voedingssupplement. Het droogproces interfereert echter met de levensvatbaarheid van cellen, omdat hoge temperaturen probiotische bacteriën inactiveren. In deze context was deze studie gericht op het presenteren van alle stappen die betrokken zijn bij de productie en fysisch-chemische karakterisering van een gesproeidroogd probioticum en het evalueren van de invloed van de beschermende stoffen (gesimuleerde magere melk en inuline: maltodextrine associatie) en droogtemperaturen bij het verhogen van de poederopbrengst en de levensvatbaarheid van de cel. De resultaten toonden aan dat de gesimuleerde magere melk een hogere probiotische levensvatbaarheid bevorderde bij 80 °C. Met dit beschermmiddel verminderen de probiotische levensvatbaarheid, het vochtgehalte en de wateractiviteit (Aw) zolang de inlaattemperatuur toeneemt. De levensvatbaarheid van de probiotica neemt omgekeerd af met de droogtemperatuur. Bij temperaturen dicht bij 120 °C vertoonde het gedroogde probioticum levensvatbaarheid rond 90%, een vochtgehalte van 4,6% w / w en een Aw van 0,26; waarden die toereikend zijn om de stabiliteit van het product te garanderen. In dit verband zijn sproeidroogtemperaturen van meer dan 120 °C vereist om de levensvatbaarheid en houdbaarheid van de microbiële cellen in de poedervormige bereiding en overleving tijdens de verwerking en opslag van levensmiddelen te waarborgen.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Om als probiotica te worden gedefinieerd, moeten micro-organismen die aan voedingsmiddelen (of supplementen) worden toegevoegd, levend worden geconsumeerd, kunnen overleven tijdens passage in het maagdarmkanaal van de gastheer en de plaats van actie in voldoende hoeveelheden bereiken om gunstige effecten uit te oefenen 1,2,7.

De groeiende interesse in probiotica is te wijten aan de verschillende voordelen voor de menselijke gezondheid die ze bieden, zoals de stimulatie van het immuunsysteem, de verlaging van het serumcholesterolgehalte en de verbetering van de darmbarrièrefunctie door op te treden tegen schadelijke microben, evenals hun gunstige effecten bij de behandeling van het prikkelbare darmsyndroom, onder andere 2,3. Bovendien hebben verschillende studies aangetoond dat probiotica een positieve invloed kunnen hebben op andere delen van het menselijk lichaam waar onevenwichtige microbiële gemeenschappen infectieziekten kunnen veroorzaken 3,4,5.

Om probiotica therapeutisch effectief te laten zijn, moet het product tussen 10 6-107 CFU / g bacteriën bevatten op het moment van consumptie6. Aan de andere kant heeft het Italiaanse ministerie van Volksgezondheid en Volksgezondheid Canada vastgesteld dat het minimumniveau van probiotica in voedsel 109 CFU / g levensvatbare cellen per dag of per portie moet zijn, respectievelijk7. Aangezien hoge belastingen probiotica nodig zijn om te garanderen dat ze gunstige effecten zullen hebben, is het essentieel om hun overleving te garanderen tijdens verwerking, schapopslag en passage door het maagdarmkanaal (GI). Verschillende studies hebben aangetoond dat micro-inkapseling een effectieve methode is om de algehele levensvatbaarheid van probioticate verbeteren 8,9,10,11.

In deze context zijn verschillende methoden ontwikkeld voor de micro-inkapseling van probiotica, zoals sproeidrogen, vriesdrogen, sproeikoelen, emulsie, extrusie, coacervatie en, meer recent, gefluïdiseerde bedden11,12,13,14. Micro-inkapseling door sproeidrogen (SD) wordt veel gebruikt in de voedingsmiddelenindustrie omdat het een eenvoudig, snel en reproduceerbaar proces is. Het is eenvoudig op te schalen en heeft een hoge productieopbrengst bij lage energiebehoefte11,12,13,14. Niettemin kan de blootstelling aan hoge temperaturen en een laag vochtgehalte de overleving en levensvatbaarheid van de probiotische cellen beïnvloeden15. Beide parameters kunnen voor een bepaalde stam worden verbeterd door de effecten van de kweekleeftijd en -omstandigheden te bepalen om de cultuur vooraf aan te passen en de sproeidroogomstandigheden (inlaat- en uitlaattemperaturen, vernevelingsproces) en de inkapselingssamenstelling 8,14,16,17,18 te optimaliseren.

De samenstelling van de inkapselende oplossing is ook een belangrijke factor tijdens SD, omdat het het beschermingsniveau tegen ongunstige omgevingsomstandigheden kan bepalen. Inuline, Arabische gom, maltodextrines en magere melk worden veel gebruikt als inkapselingsmiddelen voor probiotische droging 5,17,18,19. Inuline is een fructooligosaccharide die een sterke prebiotische activiteit vertoont en de darmgezondheid bevordert19. Magere melk is zeer effectief in het handhaven van de levensvatbaarheid van gedroogde bacteriële cellen en genereert een poeder met goede reconstitutie-eigenschappen17.

Lactiplantibacillus paraplantarum FT-259 is een melkzuurbacterie die bacteriocine produceert en antilisteriale activiteit vertoont, naast probiotische eigenschappen20,21. Het is een facultatieve heterofermentatieve staafvormige Gram-positieve bacterie die groeit van 15 °C tot 37 °C20 en compatibel is met de homeostatische lichaamstemperatuur. Deze studie was bedoeld om alle stappen te presenteren die betrokken zijn bij de productie en fysisch-chemische karakterisering van een gesproeidroogd probioticum (L. paraplantarum FT-259) en de invloed van de beschermstoffen en droogtemperaturen te evalueren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Productie van de probiotische cellen

  1. Bereid De Man Rogosa en Sharpe (MRS) bouillon.
  2. Reactiveer 1% (v/v) van de interessecultuur in de MRS-bouillon (hier werd Lactiplantibacillus paraplantarum FT-259 gebruikt).
  3. Incubeer gedurende 24 uur bij een adequate temperatuur (we gebruikten 37 °C).

2. Scheid de bacteriën van de cultuur

  1. Centrifugeer de bacteriecultuur bij 7.197 x g gedurende 5 minuten bij 4 °C met behulp van 50 ml conische buizen. Het is belangrijk dat het gewicht van de buizen vóór de procedure in evenwicht is.
  2. Verwijder met behulp van een pipet het supernatant en gooi het weg in een geschikte container. Was de pellets met een fosfaatbuffer (pH 7) en homogeniseer de oplossing.
  3. Herhaal het centrifugatieproces zoals eerder vermeld.
  4. Om de pellet te verkrijgen, gebruikt u een pipet om het supernatant te verwijderen en weg te gooien in een geschikte container.

3. Toevoeging van drooghulpmiddelen

  1. Selecteer de combinatie van twee drooghulpsamenstellingen (beschermstoffen): inuline:maltodextrinemengsel en gesimuleerde magere melk (tabel 1)22,23.
  2. Weeg 5 g inuline en 5 g maltodextrine af om de eerste combinatie van beschermende middelen te verkrijgen.
  3. Weeg 3 g inuline, 3 g lactose, 0,4 g colloïdaal SiO2 en 3,6 g wei-eiwit af om de tweede combinatie van beschermende stoffen te verkrijgen.
  4. Voeg elk van de drooghulpmiddelen toe aan ultrapuur water (1:10) en onderwerp je aan magnetisch roeren tot oplosbaarheid.
  5. Zorg ervoor dat de beschermstoffen en het water homogeen zijn, voeg vervolgens de probioticakorrels toe aan het mengsel en roer matig gedurende 20 minuten.
DrooghulpmiddelenInuline en maltodextrineGesimuleerde magere melk
Maltodextrine5%-
Wei-eiwit-3.60%
Lactose-3%
Inuline5%3%
Colloïdaal SiO2-0.40%

Tabel 1: Samenstelling van de drooghulpmiddelen.

4. Sproeidrogen

  1. Schakel de sproeidroger (SD) in en stel het drooggasdebiet, de inlaatdroogtemperatuur en het verstuivergasdebiet en de druk als volgt in:
    Inlaattemperatuur: 80 °C
    Luchtstroom: 60 m³/h
    Voedingssnelheid: 4 g/min
    Vernevelingsstroom: 17 L/min
    Verstuivingsdruk: 1,5 kgf/cm²
    Diameter van het spuitmondstuk van de verstuiver: 1 mm
  2. Bereid de samenstelling van de beschermende middelen voor en voeg de geconcentreerde probiotische pellets toe.
  3. Start de voeding van de probiotische samenstelling (cellen plus beschermstoffen) via een peristaltische pomp.
  4. Start de timer en plaats het productverzamelvat wanneer de oplossing de verstuiver binnenkomt.
  5. Registreer de uitlaattemperatuur elke 5 minuten om mogelijke temperatuurinstabiliteiten bij te houden.
  6. Stop de timer wanneer alle probiotische samenstelling aan de SD is gevoerd.
  7. Weeg het productverzamelvat om de hoeveelheid samenstelling te bepalen die aan het systeem wordt gevoerd en de hoeveelheid droog product die wordt verzameld, om de droogopbrengst (teruggewonnen product) te berekenen via een massabalans in de droger.
  8. Gebruik gesimuleerde magere melk om het effect van temperatuur op de levensvatbaarheid van de probiotische cellen te evalueren door vijf verschillende sproeidroogtemperaturen in te stellen (80 °C, 100 °C, 120 °C, 140 °C en 160 °C versus uitlaattemperaturen van 59 °C, 70 °C, 83 °C, 96 °C en 108 °C).

5. Poederkarakterisering

  1. Vochtgehalte van het product
    1. Weeg precies 100 mg van het gedroogde product af en plaats het in het titratievat van de Karl-Fischer-apparatuur.
    2. Druk op de initiatieknop om de bi-amperometrische titratie van het in het monster aanwezige water te initiëren.
  2. Wateractiviteit
    1. Weeg 0,6 g van het gedroogde product af in het monstercompartiment van de hygrometer bij 25 °C.
    2. Sluit de klep van de apparatuur.
      OPMERKING: De test wordt automatisch gestart en stopt wanneer het monster de evenwichtsdampdruk in het monstercompartiment bereikt.

6. Probiotische levensvatbaarheid

  1. Verdun de eerder bereide bacteriële suspensies in 9 ml peptonwater (0,1%, v/v).
  2. Vortex tot volledige dispersie.
  3. Voer seriële decimale verdunningen (1:10) uit in 9 ml zoutoplossing (0,9% NaCl).
  4. Zaai de verdunningen op MRS-agarplaten en incubeer bij 37 °C gedurende 24-48 uur.
  5. Tel de kolonievormende eenheden (CFU/g) met behulp van een kolonieteller met vergrootglas.
  6. Bereken de probiotische levensvatbaarheid in het gedroogde product volgens de volgende vergelijking:
    EE (%) = (N∕N o) × 100
    waarbij N het aantal levensvatbare cellen is na sproeidrogen en No het aantal bacteriële cellen vóór het sproeidrogen.
  7. Druk het aantal levensvatbare cellen in kve/g productdispersie uit.

7. Data-analyse

  1. Tabel de verkregen gegevens in statistische software en voer de analyse uit met behulp van een meervoudige vergelijkingstest (ANOVA).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In deze studie werd L. paraplantarum ingekapseld door SD met behulp van food-grade inkapselingsmiddelen (inuline:maltodextrine en gesimuleerd melkpoeder), wat een hoge productkwaliteit en werkzaamheid aantoonde bij het behoud van de bacteriële levensvatbaarheid van de cel17,19.

De resultaten van de SD van probiotica bij 80 °C toonden aan dat de verschillende beschermende systemen (inuline: maltodextrine en gesimuleerde magere ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L. paraplantarum FT-259 is een Gram-positieve, staafvormige bacterie, is een producent van bacteriocines met antilisteriële activiteit en heeft een hoog probiotisch potentieel20. Son et al.24 toonden eerder de immunostimulerende en antioxiderende capaciteit van L. paraplantarum-stammen aan. Bovendien hebben ze een groot probiotisch potentieel, met eigenschappen zoals stabiliteit onder kunstmatige maag- en galomstandigheden, gevoeligheid voor antibiotica en...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie werd gedeeltelijk gefinancierd door de Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Finance Code 001. Deze studie werd ook gedeeltelijk ondersteund door FAPESP - São Paulo Research Foundation. E.C.P.D.M. is dankbaar voor een Researcher Fellowship van de National Council for Scientific and Technological Development (CNPq) 306330/2019-9.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Aqua Lab 4TEVDecagon Devices-Wateractiviteitsmeter
Centrifuge (mod. 5430 R )Eppendorf-Centrifuge
Colloïdaal SiO2 (Aerosil 200)Evokik7631-86-9drooghulpmiddel
Fructooligosacchariden uit cichoreiSigma-Aldrich9005-80-5drooghulpmiddel
GraphPad Prism (versie 8.0) softwareGraphPad Software-San Diego, California, USA
Karl Fischer 870 Titrino PlusMetrohm-Vochtgehalte
LactoseMilkaut63-42-3 drooghulpmiddel
MaltodextrineIngredion9050-36-6drooghulpmiddel
Milli-QMerk-Ultrapuur watersysteem
MRS AgarOxoid-Kweekmedium
MRS BrothOxoid-Kweekmedium
OriginPro (versie 9.0) softwareOriginLab-Northampton, Massachusetts, USA
Spray dryer SD-05Lab-Plant Ltd-Spraydroger
Wei-eiwitArla Foods Ingredients S.A.91082-88-1drooghulpmiddel

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Food and Agricultural Organization of the United Nations and World Health Organization. Probiotics in food: Health and nutritional properties and guidelines for evaluation. FAO Food and Nutrition Paper 85. Food and Agricultural Organization. , Rome, Italy. At https://www.fao.org/3/a0512e/a0512e.pdf (2006).
  2. Sharma, R., Rashidinejad, A., Jafari, S. M. Application of spray dried encapsulated probiotics in functional food formulations. Food and Bioprocess Technology. 15, 2135-2154 (2022).
  3. Reid, G. Probiotic use in an infectious disease setting. Expert Review of Anti-Infective Therapy. 15 (5), 449-455 (2017).
  4. Alvarez-Olmos, M. I., Oberhelman, R. A. Probiotic agents and infectious diseases: a modern perspective on a traditional therapy. Clinical Infectious Diseases. 32 (11), 1567-1576 (2001).
  5. He, X., Zhao, S., Li, Y. Faecalibacterium prausnitzii: A next-generation probiotic in gut disease improvement. Canadian Journal of Infectious Diseases and Medical Microbiology. 2021, 6666114(2021).
  6. Corona-Hernandez, R. I., et al. Structural stability and viability of microencapsulated probiotic bacteria: A review. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 12 (6), 614-628 (2013).
  7. Hill, C., et al. The International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics consensus statement on the scope and appropriate use of the term probiotic. Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology. 11 (8), 506-514 (2014).
  8. Chávez, B. E., Ledeboer, A. M. Drying of probiotics: Optimization of formulation and process to enhance storage survival. Drying Technology. 25 (7-8), 1193-1201 (2007).
  9. Wang, G., Chen, Y., Xia, Y., Song, X., Ai, L. Characteristics of probiotic preparations and their applications. Foods. 11 (16), 2472(2022).
  10. Baral, K. C., Bajracharya, R., Lee, S. H., Han, H. -K. Advancements in the pharmaceutical applications of probiotics: Dosage forms and formulation technology. International Journal of Nanomedicine. 16, 7535(2021).
  11. Bustamante, M., Oomah, B. D., Rubilar, M., Shene, C. Effective Lactobacillus plantarum and Bifidobacterium infantis encapsulation with chia seed (Salvia hispanica L.) and flaxseed (Linum usitatissimum L.) mucilage and soluble protein by spray drying. Food Chemistry. 216, 97-105 (2017).
  12. Tran, T. T. A., Nguyen, H. V. H. Effects of spray-drying temperatures and carriers on physical and antioxidant properties of lemongrass leaf extract powder. Beverages. 4 (4), 84(2018).
  13. Oliveira, W. P. Standardisation of herbal extracts by drying technologies. Phytotechnology:A Sustainable Platform for the Development of Herbal Products. Oliveira, W. P. , CRC Press. Boca Raton, FL. 105-140 (2021).
  14. Burgain, J., Gaiani, C., Linder, M., Scher, J. Encapsulation of probiotic living cells: From laboratory scale to industrial applications. Journal of Food Engineering. 104 (4), 467-483 (2011).
  15. Boza, Y., Barbin, D., Scamparini, A. R. P. Survival of Beijerinckia sp. microencapsulated in carbohydrates by spray-drying. Journal of Microencapsulation. 21 (1), 15-24 (2004).
  16. De Castro-Cislaghi, F. P., dos Reis e Silva, C., Fritzen-Freir, C. B., Lorenz, J. G., Sant’Anna, E. S. Bifidobacterium Bb-12 micro encapsulated by spray drying with whey: survival under simulated gastrointestinal conditions, tolerance to NaCl, and viability during storage. Journal of Food Engineering. 113 (2), 186-193 (2012).
  17. Fu, N., Huang, S., Xiao, J., Chen, X. D. Producing powders containing active dry probiotics with the aid of spray drying. Advances in Food and Nutrition Research. 85, 211-262 (2018).
  18. Barbosa, J., Teixeira, P. Development of probiotic fruit juice powders by spray-drying: A review. Food Reviews International. 33 (4), 335-358 (2017).
  19. Waterhouse, G. I. N., Sun-Waterhouse, D., Su, G., Zhao, H., Zhao, M. Spray-drying of antioxidant-rich blueberry waste extracts; Interplay between waste pretreatments and spray-drying process. Food and Bioprocess Technology. 10 (6), 1074-1092 (2017).
  20. Tulini, F. L., Winkelströter, L. K., De Martinis, E. C. P. Identification and evaluation of the probiotic potential of Lactobacillus paraplantarum FT259, a bacteriocinogenic strain isolated from Brazilian semi-hard artisanal cheese. Anaerobe. 22, 57-63 (2013).
  21. Ribeiro, L. L. S. M., et al. Use of encapsulated lactic acid bacteria as bioprotective cultures in fresh Brazilian cheese. Brazilian Journal of Microbiology. 52 (4), 2247-2256 (2021).
  22. Písecký, J. Handbook of Milk Powder Manufacture. , GEA Process Engineering A/S. (2012).
  23. Patel, K. C., Chen, X. D., Kar, S. The temperature uniformity during air drying of a colloidal liquid droplet. Drying Technology. 23 (12), 2337-2367 (2005).
  24. Son, S. -H., et al. Antioxidant and immunostimulatory effect of potential probiotic Lactobacillus paraplantarum SC61 isolated from Korean traditional fermented food, jangajji. Microbial Pathogenesis. 125, 486-492 (2018).
  25. Choi, E. A., Chang, H. C. Cholesterol-lowering effects of a putative probiotic strain Lactobacillus plantarum EM isolated from kimchi. LWT- Food Science and Technology. 62 (1), 210-217 (2015).
  26. Kiepś, J., Dembczyński, R. Current trends in the production of probiotic formulations. Foods. 11 (15), 2330(2022).
  27. Kiekens, S., et al. Impact of spray-drying on the pili of Lactobacillus rhamnosus GG. Microbial Biotechnology. 12 (5), 849-855 (2019).
  28. Huang, S., et al. Spray drying of probiotics and other food-grade bacteria: A review. Trends in Food Science and Technology. 63, 1-17 (2017).
  29. Wang, N., Fu, N., Chen, X. D. The extent and mechanism of the effect of protectant material in the production of active lactic acid bacteria powder using spray drying: A review. Current Opinion in Food Science. 44, 100807(2022).
  30. Broeckx, G., Vandenheuvel, D., Claes, I. J. J., Lebeer, S., Kiekens, F. Drying techniques of probiotic bacteria as an important step towards the development of novel pharmabiotics. International Journal of Pharmaceutics. 505 (1-2), 303-318 (2016).
  31. Zheng, X., et al. The mechanisms of the protective effects of reconstituted skim milk during convective droplet drying of lactic acid bacteria. Food Research International. 76, 478-488 (2015).
  32. Kolida, S., Tuohy, K., Gibson, G. R. Prebiotic effects of inulin and oligofructose. British Journal of Nutrition. 87 (S2), S193-S197 (2002).
  33. Teferra, T. F. Possible actions of inulin as prebiotic polysaccharide: A review. Food Frontiers. 2 (4), 407-416 (2021).
  34. Labuza, T. P., Altunakar, B. Water activity prediction and moisture sorption isotherms. Water Activity in Foods: Fundamentals and Applications. Barbosa-Canovas, G. V., Fontana, A. J., Schmidt, S. J., Labuza, T. P. , John Wiley & Sons, Inc. Hoboken, NJ. 161-205 (2020).
  35. Misra, S., Pandey, P., Mishra, H. N. Novel approaches for co-encapsulation of probiotic bacteria with bioactive compounds, their health benefits and functional food product development: A review. Trends in Food Science & Technology. 109, 340-351 (2021).
  36. Misra, S., Pandey, P., Dalbhagat, C. G., Mishra, H. N. Emerging technologies and coating materials for improved probiotication in food products: A review. Food and BioprocessTechnology. 15 (5), 998-1039 (2022).
  37. Martins, E., et al. Determination of ideal water activity and powder temperature after spray drying to reduce Lactococcus lactis cell viability loss. Journal of Dairy Science. 102 (7), 6013-6022 (2019).
  38. Vock, S., Klöden, B., Kirchner, A., Weißgärber, T., Kieback, B. Powders for powder bed fusion: A review. Progress in Additive Manufacturing. 4, 383-397 (2019).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

PoederprobioticaMicro inkapselingCellevensvatbaarheidMagere Melk BeschermingsmiddelInuline MaltodextrineDroogtemperatuurVochtgehalteWateractiviteit

Gerelateerde artikelen