Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Opstelling van een oronasale fistelmuizen

2.3K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/65578

⸱

8 september 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

Dit artikel schetst een stapsgewijze procedure voor het opstellen van een muizenmodel met een oronasale fistel. De oronasale fistel werd gecreëerd door gebruik te maken van verwarmde oftalmologische cauterisatie om het middellijngedeelte van het harde gehemelte te beschadigen, wat resulteerde in de vorming van een opening tussen de mond- en neusholte.

Samenvatting

Deze studie presenteert een methode die gebruik maakt van verwarmde oftalmologische cauterisatie om een levensvatbaar model te ontwikkelen voor het onderzoeken van oronasale fistels. C57BL/6-muizen werden gebruikt om het oronasale fistelmodel (ONF) vast te stellen. Om de ONF te creëren, werden de muizen verdoofd, geïmmobiliseerd en werden hun harde gehemelte blootgesteld. Tijdens de chirurgische ingreep werd een slijmvliesbeschadiging van 2,0 x 1,5 mm over de volledige dikte geïnduceerd in de middellijn van het harde gehemelte met behulp van oftalmologische cauterisatie. Het was van cruciaal belang om de grootte van het ONF onder controle te houden en bloedingen tot een minimum te beperken om het succes van het experiment te garanderen. Verificatie van de effectiviteit van het ONF-model werd uitgevoerd op de 7e dag na de operatie, met zowel anatomische als functionele beoordelingen. De aanwezigheid van het neustussenschot in de mondholte en de uitstroom van steriel water uit de neusgaten bij injectie in de mondholte bevestigden de succesvolle oprichting van het ONF-model. Het model toonde een praktische en succesvolle oronasale fistel, gekenmerkt door een laag sterftecijfer, significante gewichtsveranderingen en minimale variatie in ONF-grootte. Toekomstige studies kunnen overwegen om deze methodologie toe te passen om de mechanismen van gehemeltewondgenezing op te helderen en nieuwe behandelingen voor oronasale fistels te onderzoeken.

Inleiding

Oronasale fistel (ONF), een abnormale opening tussen de mond- en neusholte, manifesteert zich klinisch als een defect in een structureel gebied van de processus alveolair naar de huig, dat vaak optreedt als een complicatie na herstel van het gespleten gehemelte. Patiënten met ONF ervaren voedselreflux, articulatiestoornissen en een verminderde velofaryngeale functie, wat een aanzienlijke invloed heeft op hun kwaliteit van leven 2,3,4. Het percentage postoperatieve ONF varieert van 2.4% tot 55% als gevolg van factoren zoals gespleten breedte, Veau-type ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle dierproeven in deze studie werden beoordeeld en goedgekeurd door de ethische commissie van de West China School of Stomatology, Sichuan University. Volwassen C57BL/6 muizen (vrouwtjes) werden gebruikt voor de huidige studie.

1. Chirurgische voorbereiding

  1. Verzamel de benodigde chirurgische instrumenten voor de procedure: kiemer, oftalmologische cauterisatie, microchirurgische schaar, microchirurgisch pincet, spuiten en naalden (26 g x 0.63 inch) (Figuur 1A,B) (zie Materiaaltabel).
    OPMERKING: Voorafgaand aan de chirurgische ingreep autoclaveren ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Om de haalbaarheid en stabiliteit van deze experimentele methode te beoordelen, werd dezelfde procedure uitgevoerd op tien muizen en werden observaties gedaan met betrekking tot mortaliteit, veranderingen in wondgrootte, lichaamsgewicht en histologische analyse. De muizen werden op dag 7 geëuthanaseerd.

De procedure vertoonde een laag sterftecijfer. De oftalmologische cauterisatie en kiemer, afgebeeld in figuur 1A-C, waren de bela.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Onderzoekers hebben verschillende materialen, medicijnen en nieuwe technieken onderzocht voor de behandeling van ONF 10,11,12,13,14,15,16,17. Met de vooruitgang in chirurgische ingrepen zijn de incidentie en herhaling van ONF verminderd. Vanwege de unieke k.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door het onderzoeks- en ontwikkelingsprogramma, het West China Hospital of Stomatology, Sichuan University (RD-02-202107), het Sichuan Province Science and Technology Support Program (2022NSFSC0743) en de Sichuan Postdoctoral Science Foundation (TB2022005) subsidie aan H. Huang.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
GerminatorElectron Microscopy Sciences 66118-20Verwarmings- en desinfectieapparatuur
Latex handschoenenAllmedof soortgelijk
LichtenOlympusA1813
MeloxicamMedChemExpressHY-B0261gemalen; 5 mg/kg
Microchirurgische instrumenten (schaar en pincet)Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.M-Y-0087Chirurgisch instrument
Oogheelkundig cauterisatieSuqian Wenchong Medical Equipment Co.1.00234E+13Chirurgisch instrument
Steriele katoen,Yancheng Begu Technology Co.of soortgelijk
Steriele metaalfolieBiosharpof soortgelijk
Steriele lakens3MXH003801129of soortgelijk
Chirurgische schermenYancheng Begu Technology Co.of soortgelijk
SpuitenYancheng Begu Technology Co.S-015301of soortgelijk
TapeBkmamlabof soortgelijk
TemperatuurbehoudapparaatHarvard Apparatus LE-13-2104
Zoletil50Virbac80 mg/kg

Referenties

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Letsel aan het harde gehemelteoogheelkundige cauterisatiewondgenezing van het gehemelteslijmviesletselC57BL/6-muizenhistologische analyseontstekingsreactiechirurgische techniek