Methodenartikel

Verbetering van de betrouwbaarheid van biobanking van prostaattumoren met verbeterde bemonsteringstechniek en histologische karakterisering

DOI:

10.3791/65635

⸱

17 november 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pathology, Hospital Universitario y Politécnico La Fe, 2Department of Urology, Hospital Universitario y Politécnico La Fe, 3Biobanco La Fe, Instituto de Investigación Sanitaria La Fe, 4Department of Medicine, Jaume I University of Castellon, 5Department of Surgery, University of Valencia, 6Department of Pathology, University of Valencia

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit protocol beschrijft een methode om het verzamelen van monsters van radicale prostatectomiemonsters te vergemakkelijken. Het doel is om weefselmonsters van de monsters in kaart te brengen, te karakteriseren en micro-macro te ontleden op basis van anatomopathologische criteria voordat ze in een biobank worden opgeslagen.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het verkrijgen van verse en goed gekarakteriseerde tumorweefselmonsters is van cruciaal belang voor het uitvoeren van hoogwaardige "omics"-onderzoeken. Het kan echter bijzonder uitdagend zijn in de context van prostaatkanker (PC) vanwege de unieke aard van dit orgaan en de hoge heterogeniteit die met deze tumor gepaard gaat. Aan de andere kant is het histopathologisch karakteriseren van monsters vóór hun opslag zonder significante weefselveranderingen te veroorzaken ook een intrigerende uitdaging. In deze context presenteren we een nieuwe methode voor het verkrijgen, in kaart brengen, karakteriseren en micro-ontleden van gereseceerd prostaatweefsel op basis van anatomopathologische criteria.

In tegenstelling tot eerder gepubliceerde protocollen, verkort deze methode de tijd die nodig is voor histopathologische analyse van het prostaatmonster zonder de structuur ervan in gevaar te brengen, wat cruciaal is voor het beoordelen van chirurgische marges. Bovendien maakt het de afbakening en micro-macrodissectie van verse prostaatweefselmonsters mogelijk, met een focus op histologische tumorgebieden die worden gedefinieerd door pathologische criteria zoals Gleason-score, voorloperlaesies (hooggradige prostaat intra-epitheliale neoplasie - PIN) en inflammatoire laesies (prostatitis). Deze monsters worden vervolgens opgeslagen in een Biobank voor latere onderzoeksanalyses.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Prostaatkanker (PC) is de 2emeest voorkomende vorm van kanker bij mannen en de 5ebelangrijkste doodsoorzaak wereldwijd1. De behandeling en prognose van de patiënt zijn afhankelijk van de stadiëring en beoordeling (Gleason-score) van de tumor, zoals blijkt uit de hogere 5-jaarsoverleving van gelokaliseerde en laaggradige tumoren (Gleason graad 6) (99%) in vergelijking met hoge Gleason-graden en gemetastaseerde tumoren (31%)2.

PC lokale recidief en falen van de behandeling zijn in verband gebracht met de kenmerkende hoge genetische intratumorheterogeniteit van dit tumortype3. Bovendien wordt PC beschouwd als een multifocale ziekte met verschillende tumorfoci die verschillende morfologische, histologische en moleculaire kenmerken vertonen4, die onafhankelijk kunnen ontstaan of kunnen voortkomen uit een gemeenschappelijke tumorcelvoorouder5. Eerdere studies hebben aangetoond dat de evolutie van de tumor verschilt tussen patiënten op basis van specifieke genetische drijfveren die metastase kunnen bevorderen of de cellijn kunnen beperken tot de prostaat. Daarom is moleculaire karakterisering van de verschillende tumorfoci crucia, niet alleen voor het stellen van een nauwkeurigere diagnose en prognose, maar ook voor het afstemmen van een effectieve en gepersonaliseerde behandeling op de patiënt.

In deze context bieden biomedisch onderzoek en integratieve multi-omics-benaderingen ongekende mogelijkheden om kankers in verschillende subtypen in te delen, diagnostische en prognostische biomarkers te identificeren en markers te ontdekken die verband houden met de respons op de behandeling. Bovendien dragen deze benaderingen bij aan een beter begrip van de biologie van deze ziekte 6,7. Biologische monsters, of het nu weefsels of biovloeistoffen zijn, kunnen worden geanalyseerd met behulp van verschillende multi-omics-platforms (genomics, transcriptomics, proteomics, metabolomics, enz.) om de biologische kenmerken bloot te leggen die ten grondslag liggen aan de pathofysiologie van kanker, waardoor de huidige beperkingen met betrekking tot genetische en fenotypische heterogeniteit worden aangepakt6. Het is echter belangrijk om te bedenken dat de kwaliteit van de gegevens die zijn afgeleid van omics-onderzoeken afhangt van de kwaliteit van de monsters die van tumoren zijn verzameld, hun nauwkeurige karakterisering en de daaropvolgende verwerking en opslag8.

In deze context vormt het verkrijgen van vers PC-weefsel voor onderzoek een methodologische uitdaging vanwege de moeilijkheid om met succes tumorbemonstering te nemen9. Eerdere methoden omvatten willekeurige steekproeven na radicale prostatectomie, wat slechte resultaten opleverde10. Recentere benaderingen bevatten echter gerichte protocollen op basis van zowel magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) als biopsiegegevens, wat resulteert in een verbeterde werkzaamheid bij het verzamelen van tumormonsters11.

Aan de andere kant vormt histopathologische karakterisering van monsters voorafgaand aan hun opslag zonder significante weefselverandering ook een interessante uitdaging. Bijgevolg wordt in veel gevallen de histopathologische bepaling van monsters uitgevoerd na hun analyse (bijv. HR 1H NMR-metabolomische analyse)12. Deze praktijk brengt onnodige kosten, tijdsbesteding en het verlies van een aanzienlijk aantal monsters met zich mee die uiteindelijk van de analyse worden uitgesloten (bijvoorbeeld monsters die na histopathologische analyse geen tumormonsters blijken te zijn). In andere gevallen wordt de histopathologische karakterisering van monsters uitgevoerd voordat ze worden geanalyseerd. In feite hebben sommige eerdere studies geprobeerd methoden te standaardiseren voor het verstrekken van representatieve onderzoeksmonsters van hoge kwaliteit van radicale prostatectomiemonsters voor genomica en metabolomics 13,14. Desalniettemin is de bemonsteringsefficiëntie significant hoger wanneer deze wordt uitgevoerd op reeds histologisch bevestigde secties (88%) die het weefsel verstoren, vergeleken met wanneer deze wordt uitgevoerd op basis van onbevestigde secties (45%)1.

Hier wordt een nieuwe methodologie gepresenteerd om deze beperkingen te overwinnen, met als doel verse en goed gekarakteriseerde PC-monsters te verkrijgen voordat ze in de Biobank worden opgeslagen. Deze methode is ontwikkeld door samenwerking tussen verschillende klinische diensten (urologie, pathologie en de biobank van het La Fe-ziekenhuis). Het is belangrijk om te benadrukken dat biobanken een essentiële rol spelen bij het verzamelen, verwerken, bewaren en bewaren van biologische monsters, terwijl ze de hoge kwaliteit van monsters en gegevens waarborgen, evenals de naleving van ethische en wettelijke vereisten 8,15,16.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze methode is ontwikkeld door samenwerking tussen verschillende klinische diensten (urologie, pathologie en de biobank van het La Fe-ziekenhuis). De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met institutionele, nationale en internationale richtlijnen voor menselijk welzijn en kreeg goedkeuring van de Ethische Commissie voor Biomedisch Onderzoek van het Instituto de Investigación Sanitaria Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia, Spanje). Alle monsters werden opgeslagen in de biobank van het La Fe Hospital (PT13/0010/0026). De algemene procedure is gedetailleerd in figuur 1.

figure-protocol-1
Figuur 1: Algemeen procedureschema. Schematische weergave van de stapsgewijze procedure die wordt beschreven in het protocolgedeelte. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

1. Tumor targeting

  1. Gebruik vóór de operatie multiparametrische of biparametrische magnetische resonantiebeeldvorming (mpMRI of bpMRI)17,18 om de tumor te lokaliseren en de positie ervan in de prostaatklier in kaart te brengen. Combineer de informatie verkregen uit MRI met bevindingen van transrectale echografie of rectaal onderzoek als dit laatste tegenstrijdige resultaten oplevert.
  2. Om de lokalisatie van de tumor te verbeteren, bekijkt u de resultaten van preoperatieve echogeleide en MRI-geleide transrectale prostaatbiopten.
    OPMERKING: In de diagnostische procedure voor prostaatkanker worden biopsieën rechtstreeks uit de prostaat genomen via transrectale toegang. Deze biopsieën omvatten systematische bemonstering van de prostaat (met cilinders die over de hele klier zijn verdeeld) en cilinders die rechtstreeks gericht zijn op verdachte bevindingen op MRI. Om het ophalen van deze monsters gericht te houden, wordt transrectale echografie gebruikt, die wordt gecombineerd met MRI-bevindingen op een cognitieve manier ("cognitieve fusie") of met "echte MRI-ultrasone fusiesoftware" indien beschikbaar.

2. Radicale prostatectomie en prostaatcollectie

  1. Voer een gestandaardiseerde, robotgeassisteerde radicale prostatectomie uit via een transperitoneale benadering, volgens de stappen beschreven door Huynh et al.19.
    1. Begin met abdominale toegang, insufflatie en plaatsing van de camerapoort (zie Materiaaltabel). Plaats de overige vijf poorten onder direct zicht. Stel het pneumoperitoneum in op 12 mm.
    2. Laat de blaas los door het buikvlies in te snijden en ontleed de perirectale ruimte.
    3. Open de bekkenfascia aan elke kant.
    4. Voer een volledige dissectie uit van de voorste en laterale aspecten van de prostaat en blaas.
    5. Voer de opening van de blaashals uit, identificeer en snijd de proximale urethra in om toegang te krijgen tot de achterste aspecten van de prostaat en de blaas.
    6. Ontleed de zaadblaasjes en de rectumruimte19.
    7. Ontleed de laterale aspecten van de prostaat en spaart de neurovasculaire bundels.
    8. Zorg voor hemostase van bloedvaten in de retropubische ruimte.
    9. Ontleed de apex en snijd de distale urethra door.
    10. Voltooi de vesicourethrale anastomose.
    11. Extraheer de prostaat en voer de sluiting van de incisieuit 19.
  2. Verzamel de verse prostaat in een droge container. Het is van cruciaal belang om het monstermonster niet te fixeren of met paraffine in te bedden.
  3. Transporteer het verse chirurgische monster, dat de gehele prostaat omvat, naar de Biobank voor monsterverwerking.

3. Prostaatverwerking en monsterafname

  1. Selecteer gerichte prostaatzones voor bemonstering op basis van informatie over de locatie van de tumor die is opgehaald uit preoperatieve mpMRI, preoperatieve biopsieresultaten en directe palpatie van prostatectomiemonsters. Noteer deze informatie op een formulier met identificatiegegevens van de patiënt, prostaatgebieden die uiteindelijk zijn bemonsterd en het aantal verzamelde monsters.
    OPMERKING: Wanneer MRI-bevindingen, preoperatieve biopsieresultaten en directe palpatie van prostatectomiemonsters concordant zijn, richt u alle monsters op die of die locaties (tussen 4 en 6 cilinders). Als er een discrepantie is, verhoog dan het aantal cilinders en richt u afzonderlijk op alle zones die verdacht zijn van beïnvloeding door een van deze methoden.
  2. Gebruik een wegwerpnaald (chirurg) om cilindrische monsters uit de geselecteerde gebieden te halen (stap 1.1). Identificeer vervolgens (patholoog) de buitenste zone van de cilinder, klem de cilinder vast met een weefselpincet, plaats deze op een objectglaasje en markeer de buitenste zone met tissue-inkt. Herhaal dit proces met alle cilinders bezet.
  3. Plaats de verzamelde cilinders horizontaal op een monsterhouderschijf (zie Materiaaltabel) gevuld met cryostaat-inbeddingsmedium en breng ze over naar de microtoomkoelplaat om te snijden.
  4. Eenmaal op de plaat geplaatst, bevestigt u de schijf van de monsterhouder aan de monsterhouder en snijdt u deze met voorzichtige bewegingen van het wiel volgens de volgende stappen:
    1. Gebruik de verbinding met de optimale snijtemperatuur (OCT-verbinding, zie Materiaaltabel) om het weefselmonster in te bedden voordat het wordt ingevroren op een microtoom-cryostaat.
    2. Snijd het monster vervolgens met behulp van een cryostaat-microtoom bij -25 °C. Verzamel dunne cilindervormige stukjes weefsel (10 μm) op behandelde microscoopglaasjes. Zorg ervoor dat u slechts een paar micron weefsel verzamelt om ervoor te zorgen dat er voldoende intact tumorweefsel is voor opslag in de biobank.
    3. Verzamel twee of drie dunne secties per dia en beits ze handmatig om de uiteindelijke kleuring te regelen. Het oog van de technicus zorgt voor een optimale kleuring en indien nodig kan er opnieuw worden gekleurd. Volg deze stappen
      1. Fixeer de objectglaasjes in 96% ethanol, hydrateer in gedestilleerd water en kleur met Harris hematoxyline (zie materiaaltabel) gedurende 1 minuut om de kernen te kleuren. Verwijder overtollige hematoxyline door de objectglaasjes af te spoelen met gedestilleerd water.
      2. Behandel objectglaasjes met 30% ammoniumhydroxide om de hematoxyline blauw te kleuren. Verwijder overtollige oplossing door gedestilleerd water te spoelen.
      3. Objectglaasjes met eosine (zie Materiaaltabel) gedurende 30 s.
      4. Dehydrateer vervolgens de objectglaasjes met toenemende titraties van alcohol, helder met xyleen (100%) en monteer ze met DPX (een mengsel van distyreen, een weekmaker, en xyleen, gebruikt als montagemedium van kunsthars dat xyleenbalsem vervangt, zie Materiaaltabel). Dompel tijdens deze stappen de objectglaasjes in en verwijder ze uit de pot met Coplin-oplossing.
      5. Plaats ten slotte een dekglaasje op het gekleurde weefsel en gebruik een medium met een geschikte brekingsindex (zie Materiaaltabel) om onder een microscoop te bekijken.

4. Karakterisering van de steekproef

  1. Analyseer het monster onder een lichtmicroscoop (patholoog), onderscheid de gebieden van carcinoom en bepaal de Gleason-score van de tumor. Documenteer al deze gegevens en markeer de precieze tumorzones op de objectglaasjes.
  2. Label tijdens deze stap het objectglaasje met de precieze locatie van de tumor en de respectievelijke Gleason-score20. Markeer ook de locatie van PIN (prostaat intra-epitheliaal neoplasma) op basis van morfologische identificatie.

5. Micro-macro-dissectie en opslag van monsters

  1. Markeer duidelijk verschillende histologische componenten met duidelijke markers op het objectglaasje (patholoog) en correleer ze direct met bevroren weefsel op de schijf.
  2. Ontleed vervolgens, met behulp van een chirurgisch mes, de gebieden van het monster die op het glaasje zijn gemarkeerd in de OCT-schijf en verdeel ze in tumoraal, peritumoraal, PIN en normaal prostaatweefsel.
  3. Terwijl het inbeddingsmedium begint te ontdooien, pakt u het weefsel met een tang vast en plaatst u het in correct geëtiketteerde cryobuizen.
    OPMERKING: Bewaar elk ontleed fragment zorgvuldig in de overeenkomstige buis, volgens de histologische diagnose van de cryo-plakjes.
  4. Bewaar de gelabelde cryobuisjes met volledig gekarakteriseerde histologische monsters in de Biobank bij -80 °C voor later gebruik in onderzoeksstudies.
    OPMERKING: De stappen die in dit gedeelte worden beschreven, kunnen worden uitgevoerd door een getrainde technicus onder toezicht van de patholoog. Het chirurgische monster moet zo snel mogelijk naar de Biobank worden vervoerd om weefsel- en nucleïnezuurafbraak te voorkomen. Volgens de naslagwerken moeten inspanningen worden geleverd om een langere ischemietijd (>30 min) te voorkomen21. De monsters kunnen voor onbepaalde tijd in de Biobank worden bewaard zolang de principes van monsterkwaliteit worden gehandhaafd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uit de resultaten blijkt dat deze techniek het mogelijk heeft gemaakt om in 61% van de onderzochte gevallen (25 van de 41 gevallen) tumormateriaal te verkrijgen (tabel 1).

Tabel 1: Histopathologische gegevens van onderzoeksmonsters. Samenvatting van de histopathologische gegevens voor de monsters die in het onderzoek zijn gebruikt. De diagnostische cilinder verwijst naar het prostaatbiopsiemonster dat is verkregen voor diagnostische doeleinden, terwijl de bewe...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In elk onderzoek is het verkrijgen van kwaliteitsmonsters een essentiële vereiste om systematische vooroordelen te verminderen en betrouwbare resultaten te verkrijgen22. Daarom moet in elk protocol met betrekking tot biologische monsters rekening worden gehouden met de controle van preanalytische variabelen, zoals de temperatuur waarbij monsters worden verwerkt en opgeslagen, de tijd die is verstreken tussen het verzamelen en opslaan van monsters, het gebruik van gesteriliseerde materialen of de e...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren dat er geen sprake is van belangenverstrengeling.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

A.L. erkent een postdoctoraal contract "Margarita Salas" (nummer 21-076) en MAM-T een "Maria Zambrano" onderzoekscontract (nummer MAZ/2021/03 UP2021-021). Beide contracten zijn gefinancierd door de Europese Unie-Next Generation EU.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Cadiere forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 471049. 18 gebruiken.
Conventional slidesKnittel Glass2021Grond/ Frosted einde
Cryostat microtomeThermo Fisher Scientific---Criostato CryoStar NX50
CryotubesGreiner Bio-One GmbHRef.: 122280.CRYO S. PP, met schroefdop, steriel. 
Da Vinci chirurgisch systeemIntuitivePN1052082-US 10/2021XI model
Dissectie-instrumentenBayer---Twee pincetten en een chirurgisch mes 
DPX Eukitt Medizin- und Labortechnik GmbH6.00.01.0001.06.01.01
EosinAgilent157252
Fenestrated bipolar forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 471205. 14 levens.
Force bipolarIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 471405. 12 gebruiken.
FreezersThermo ScientificMODEL 907. -80 ºC
HematoxylinenAgilent157251
Immuunohistochemie SlidesAgilent-DakoK802021-2
Large needle driverIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 471006. 15 gebruiken.
Maryland bipolar forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 471172. 14 gebruiken.
MicroscopeOlympus---Olympus cx40
Microtome bladesPFM Medicala35
Monopolar gebogen schaarIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 470179. 10 gebruiken.
OCT compoundNEG-50LOT.117340
PlusSpeed S Single-use Biopsy Device met afgeschuinde tipPeter Pflugbeil GmbH PSS-1825-S
ProGasp forcepsIntuitivePN1052082-US 10/2021Artikelnummer: 471093. 18 gebruiken.
Sample holder DiscDavidson Cryo Chuck. BradleyProducts30 mm 
Weefsel inktPelikan2021Inkt 4001 briljant zwart (301168)
XylolQuimipurRef. 169

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Rawla, P. Epidemiology of prostate cancer. World Journal of Oncology. 10 (2), 63-89 (2019).
  2. Epstein, J. I. The 2019 Genitourinary Pathology Society (GUPS) white paper on contemporary grading of prostate cancer. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 145 (4), 461-493 (2021).
  3. Zhang, W. Intratumor heterogeneity and clonal evolution revealed in castration-resistant prostate cancer by longitudinal genomic analysis. Translational Oncology. 16, 101311(2022).
  4. Haffner, M. C., et al. Genomic and phenotypic heterogeneity in prostate cancer. Nature Reviews Urology. 18 (2), 79-92 (2021).
  5. Woodcock, D. J. Prostate cancer evolution from multilineage primary to single lineage metastases with implications for liquid biopsy. Nature Communications. 11 (1), 5070(2020).
  6. Heo, Y. J., Hwa, C., Lee, G. H., Park, J. M., An, J. Y. Integrative multi-omics approaches in cancer research: from biological networks to clinical subtypes. Molecules and Cells. 44 (7), 433-443 (2021).
  7. Menyhárt, O., Győrffy, B. Multi-omics approaches in cancer research with applications in tumor subtyping, prognosis, and diagnosis. Computational and Structural Biotechnology Journal. 19, 949-960 (2021).
  8. Annaratone, L. Basic principles of biobanking: from biological samples to precision medicine for patients. Virchows Archiv. 479 (2), 233-246 (2021).
  9. King, C. R., Long, J. P. Prostate biopsy grading errors: A sampling problem. International Journal of Cancer. 90 (6), 326-330 (2000).
  10. Jayadevan, R., Zhou, S., Priester, A. M., Delfin, M., Marks, L. S. Use of MRI-ultrasound fusion to achieve targeted prostate biopsy. Journal of Visualized Experiments. 146, e59231(2019).
  11. Heavey, S., et al. Use of magnetic resonance imaging and biopsy data to guide sampling procedures for prostate cancer biobanking. Journal of Visualized Experiments. 152, 60216(2019).
  12. Panach Navarrete, J. Estudio metabolómico en tejido prostático y orina para el diagnóstico y pronóstico del cáncer de próstata. , https://roderic.uv.es/handle/10550/81853 (2022).
  13. Bertilsson, H., et al. A new method to provide a fresh frozen prostate slice suitable for gene expression study and MR spectroscopy. The Prostate. 71 (5), 461-469 (2011).
  14. Show SOP - Biospecimen Research Database. , https://brd.nci.nih.gov/brd/sop/show/522 (2022).
  15. Dagher, G. Quality matters: International standards for biobanking. Cell Proliferation. 55 (8), e13282(2022).
  16. Yüzbaşıoğlu, A., Özgüç, M. Biobanking: sample acquisition and quality assurance for "omics" research. New Biotechnology. 30 (3), 339-342 (2013).
  17. Carpagnano, F. A. Multiparametric MRI: local staging of prostate cancer. Current Radiology Reports. 8 (12), 27(2020).
  18. Christophe, C. Prostate cancer local staging using biparametric MRI: assessment and comparison with multiparametric MRI. European Journal of Radiology. 132, 109350(2020).
  19. Huynh, L. M., Ahlering, T. E. Robot-assisted radical prostatectomy: a step-by-step guide. Journal of Endourology. 32 (S1), S28-S32 (2018).
  20. van Leenders, G. J. L. H., et al. The 2019 International Society of Urological Pathology (ISUP) consensus conference on grading of prostatic carcinoma. The American Journal of Surgical Pathology. 44 (8), e87-e99 (2020).
  21. Liu, A., Collins, C. C., Diemer, S. M. Biobanking metastases and biopsy specimens for personalized medicine. Journal of Biorepository Science for Applied Medicine. 3, 57-67 (2015).
  22. Ellervik, C., Vaught, J. Preanalytical variables affecting the integrity of human biospecimens in biobanking. Clinical Chemistry. 61 (7), 914-934 (2015).
  23. Arellano, H. L., Castillo, C. O., Metrebián, B. E. Diagnostic agreement of the Gleason score in needle biopsy and radical prostatectomy and its clinical consequences. Rev Méd Chile. 132 (8), 971-978 (2004).
  24. Torres Caparó, D. A. Concordancia en los valores de gleason en biopsia prostática transrectal y en prostatectomia radical en pacientes con cáncer de próstata del Hospital Cirujano Mayor Santiago Távara entre enero 2010 - junio del 2018. , Universidad Ricardo Palma. https://repositorio.urp.edu.pe/handle/20.500.14138/1886 (2019).
  25. Chavolla-Canal, A. J., et al. Concordancia del puntaje de Gleason en biopsia transrectal de próstata vs prostatectomía radical. Revista Mexicana de Urología. 81 (2), 1-10 (2021).
  26. Fan, X. J., et al. Impact of cold ischemic time and freeze-thaw cycles on RNA, DNA and protein quality in colorectal cancer tissues biobanking. Journal of Cancer. 10 (20), 4978-4988 (2019).
  27. Vaswani, A., et al. Comparative liquid chromatography/tandem mass spectrometry lipidomics analysis of macaque heart tissue flash-frozen or embedded in optimal cutting temperature polymer (OCT): Practical considerations. Rapid communications in Mass Spectrometry: RCM. 35 (18), e9155(2021).
  28. Zhang, W., Sakashita, S., Taylor, P., Tsao, M. S., Moran, M. F. Comprehensive proteome analysis of fresh frozen and optimal cutting temperature (OCT) embedded primary non-small cell lung carcinoma by LC-MS/MS. Methods (San Diego, Calif). 81, 50-55 (2015).
  29. Boyd, A. E., Allegood, J., Lima, S. Preparation of human tissues embedded in optimal cutting temperature compound for mass spectrometry analysis. Journal of Visualized Experiments. 170, e62552(2021).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Prostaatkankerweefseltumorbemonsteringmoleculaire karakteriseringbiobankopslagGleason scoreintratumorale heterogeniteitmicrodissectietechniekgepersonaliseerde geneeskunde

Gerelateerde artikelen