Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Bereiding van harde palmzaden voor matrix-geassisteerde laserdesorptie/ionisatie-beeldvorming massaspectrometrie-analyse

1.8K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/65650

⸱

30 juni 2023

 ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratório de Biocatálise (LABIC), Instituto Nacional de Tecnologia, 2Departamento de Bioquímica, Instituto de Química, Universidade Federal do Rio de Janeiro, 3Centro de Espectrometria de Massas de Biomoléculas, Instituto de Biofísica Carlos Chagas Filho, Universidade Federal do Rio de Janeiro

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol was bedoeld om gedetailleerde richtlijnen te beschrijven voor de voorbereiding van secties van harde zaadmonsters met een laag watergehalte voor MALDI-IMS-analyse, waarbij de oorspronkelijke verdeling en overvloed van analyten behouden blijft en signaal- en ruimtelijke resolutie van hoge kwaliteit wordt geboden.

Samenvatting

Matrix-assisted laser desorption/ionization-imaging mass spectrometry (MALDI-IMS) wordt toegepast om verbindingen in hun oorspronkelijke omgeving te identificeren. Momenteel wordt MALDI-IMS vaak gebruikt in klinische analyses. Toch bestaat er een uitstekend perspectief om deze techniek beter toe te passen om de fysiologische informatie van chemische verbindingen in plantenweefsels te begrijpen. De voorbereiding kan echter een uitdaging zijn voor specifieke monsters van botanisch materiaal, aangezien MALDI-IMS dunne plakjes (12-20 μm) nodig heeft voor de juiste gegevensverzameling en succesvolle analyse. In die zin hebben we eerder een protocol voor monstervoorbereiding ontwikkeld om dunne secties van Euterpe oleracea (açaí palm) harde zaden te verkrijgen, waardoor ze moleculair in kaart kunnen worden gebracht door MALDI-IMS.

Hier laten we zien dat het ontwikkelde protocol geschikt is voor het bereiden van andere zaden uit hetzelfde geslacht. In het kort was het protocol gebaseerd op het onderdompelen van de zaden in gedeïoniseerd water gedurende 24 uur, het inbedden van monsters met gelatine en het verdelen ervan in een geacclimatiseerde cryostaat. Vervolgens werd voor matrixafzetting een xy-bewegingsplatform gekoppeld aan een elektrospray-ionisatie (ESI) naaldspray met behulp van een 1:1 (v/v) 2,5-dihydroxybenzoëzuur (DHB) en methanoloplossing met 0,1% trifluorazijnzuur bij 30 mg/ml. E. precatoria en E. edulis zaadgegevens werden verwerkt met behulp van software om hun metabolietpatronen in kaart te brengen.

Hexose-oligomeren werden in kaart gebracht in plakjes monsters om de geschiktheid van het protocol voor die monsters aan te tonen, aangezien bekend is dat die zaden grote hoeveelheden mannan bevatten, een polymeer van de hexose-mannose. Als gevolg hiervan werden pieken van hexose-oligomeren, vertegenwoordigd door [M + K]+ adducten van (Δ = 162 Da), geïdentificeerd. Zo maakte het monstervoorbereidingsprotocol, dat eerder op maat was ontwikkeld voor E. oleracea-zaden , ook MALDI-IMS-analyse van twee andere harde palmzaden mogelijk. Kortom, de methode zou een waardevol hulpmiddel kunnen zijn voor onderzoek naar de morfo-anatomie en fysiologie van botanische materialen, met name uit snijbestendige monsters.

Inleiding

Matrix-assisted laser desorption/ionization-imaging mass spectrometry (MALDI-IMS) is een krachtige methode die tweedimensionale toewijzing van biomoleculen mogelijk maakt, ongericht onderzoek van ioniseerbare verbindingen mogelijk maakt en hun ruimtelijke verdeling bepaalt, vooral in biologische monsters 1,2. Al twee decennia lang maakt deze techniek de gelijktijdige detectie en identificatie mogelijk van lipiden, peptiden, koolhydraten, eiwitten, andere metabolieten en synthetische moleculen zoals therapeutische geneesmiddelen 3,4. MALDI-IMS vergemakkelijkt chemische analyse in een weefselmonsteroppervlak zonder extractie, zuivering, scheiding, etikettering of kleurstoffen van biologische monsters. Voor een succesvolle analyse is een cruciale stap in deze techniek echter de monstervoorbereiding, met name in plantenweefsels, die gespecialiseerd zijn en gemodificeerd zijn tot wijdverspreide complexe organen als gevolg van omgevingsacclimatisatie5.

Vanwege de inherente fysisch-chemische eigenschappen van plantenweefsel is er behoefte aan een aangepast protocol om te voldoen aan de vereisten van MALDI-IMS-analyse en om de oorspronkelijke vorm van het weefsel te behouden tijdens de voorbereiding van de secties 6,7. In het geval van onconventionele monsters, zoals zaden, zijn vastgestelde protocollen8 niet van toepassing omdat deze weefsels stijve celwanden en een laag watergehalte hebben, wat gemakkelijk kan leiden tot fragmentatie van secties en kan leiden tot delokalisatie van verbindingen9.

Onze onderzoeksgroep heeft experimentele gegevens gepubliceerd over moleculaire kartering en een aangepast protocol voor MALDI-IMS-analyse van açaí (Euterpe oleracea Mart.) zaad 10,11,12, een bijproduct dat in grote hoeveelheden wordt gegenereerd tijdens de productie van de verhuurbare açaí-pulp13. Het idee was om een protocol te ontwikkelen voor het in situ in kaart brengen van verschillende metabolieten in açaí-zaden, om mogelijke toepassingen voor dit landbouwafval voor te stellen die momenteel niet commercieel worden onderzocht. Vanwege de resistentie van het açaí-zaad was het echter noodzakelijk om een protocol op maat te maken om de juiste monstersecties te verkrijgen van MALDI-IMS-analyse.

In deze context heeft de economisch belangrijke açaí-pulp geleid tot de toenemende commercialisering van andere vruchten van palmbomen van het geslacht Euterpe met vergelijkbare sensorische kenmerken. De twee opkomende vruchten van palmbomen die op industriële schaal zijn geproduceerd als alternatief voor açaí14,15 zijn E. precatoria (bekend als açaí-do-amazonas), die groeit in het droge gebied van de Amazone, en E. edulis (bekend als juçara), die typisch is voor het Atlantische Woud. Desalniettemin leidt de consumptie van açaí-do-amazonas en juçara tot dezelfde opeenhoping van resistente en oneetbare zaden die niet worden gebruikt en tot nu toe niet zijn bestudeerd met betrekking tot hun gedetailleerde chemische samenstelling.

Zo tonen we hier aan dat het eerder bedachte protocol, met weinig aanpassingen, kan worden gebruikt om E. precatoria en E. edulis-zaden te analyseren voor moleculaire kartering door MALDI-IMS, wat een krachtig hulpmiddel blijkt te zijn dat kan worden gebruikt voor analyse van de samenstelling van deze bronnen en kan helpen bij het bepalen van hun potentiële biotechnologische toepassingen. Bovendien kan de gedetailleerde beschrijving die hier wordt gegeven, anderen helpen met soortgelijke problemen bij het voorbereiden van resistente materialen voor MALDI-IMS-analyse.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Euterpe precatoria zaden werden vriendelijk geschonken door het Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (Manaus, Brazilië), en Euterpe edulis-zaden werden vriendelijk geschonken door de Silo - Arte e Latitude Rural (Resende, Brazilië) na het industriële ontpulpingsproces. De zaden werden bewaard in verzegelde plastic dozen bij kamertemperatuur.

1. Matrix-geassisteerde laserdesorptie/ionisatie-beeldvorming massaspectroscopie (MALDI-IMS)

  1. Protocol voor het verdelen van zaden
    1. Laat drie zaden van elke soort 24 uur in gedeïoniseerd water staan.
    2. Zet de cryostaat de volgende dag aan (zie Materiaaltabel) en laat deze -20 °C bereiken.
    3. Haal de natte zaden uit het water. Snijd de zaden doormidden met behulp van een microtoommes (zie Tabel met materialen).
    4. Bereid een verse, warme (10%) gelatine-oplossing (zie Materiaaltabel).
    5. Leg de helft van het zaad op een vorm en vul deze met vers gemaakte gelatine. Vries in bij -80 °C gedurende 2 uur voordat u het naar de cryostaat brengt.
    6. Bevestig het ingebedde zaad aan de cryostaatdrager met behulp van een optimale snijtemperatuurverbinding (OCT, zie Materiaaltabel) en laat 10 minuten in de cryostaat staan voor OCT-uitharding.
    7. Voeg dubbelzijdig koperen plakband (zie Materiaaltabel) toe aan een met indiumtinoxide beklede glasplaat (ITO-objectglaasje; zie Materiaaltabel).
    8. Maak secties van 20 μm dik van elke soort en plaats ze op het koperen dubbelzijdige plakband dat op het ITO-glasplaatje is geplakt.
      NOTITIE: Op dit punt kunnen de plakjes die op de objectglaasjes zijn verzameld, worden bewaard in een vriezer van -80 °C; U kunt ook doorgaan met matrixafzetting. De objectglaasjes moeten in een houder worden geplaatst, worden gespoeld met gasvormigN2 en worden verzegeld met folie om oxidatie van het monster te voorkomen (zie Materiaaltabel).
  2. Matrix afzetting
    1. Plaats het glaasje met plakjes in een vacuümexsiccator totdat het op kamertemperatuur is.
    2. Maak leercijfers met een correctiepen in elke diahoek. Scan de dia met een tafelscanner. Stel in op de resolutie van 4.800 ppi.
    3. Gebruik een analytische balans om 30 mg 2,5-dihydroxybenzoëzuur (DHB; zie materiaaltabel) af te wegen en bereid 1 ml 1:1 methanol:0,1% trifluorazijnzuur (TFA; Tabel met materialen) oplossing om de DHB op te lossen.
    4. Vul een glazen spuit van 1 ml (zie Materiaaltabel) met DHB-oplossing en plaats deze in een spuitpomp (zie Materiaaltabel) die is ingesteld op een debiet van 0,8 ml/uur.
    5. Sluit de spuit met behulp van PEEK-slangen aan op een APCI-naald (Atmospheric Pressure Chemical Ionization) (zie Materiaaltabel).
    6. Sluit N2 aan op de APCI-naald en stel deze in op een stroomsnelheid van 12.5 psi .
    7. Bevestig de APCI-naald aan het xy-bewegingsplatform (zie Materiaaltabel). Zorg ervoor dat de punt van de APCI-naald zich 4 cm boven het glaasje bevindt.
    8. Gebruik de tekensoftware (zie Tabel met materialen en aanvullende afbeelding 1) om het xy-bewegingsplatform in te stellen om de sjabloon te volgen. De sjabloon bestaat uit horizontale parallelle lijnen met een tussenruimte van 1 mm.
    9. Om matrixafzetting te bereiken, wacht u tot het xy-bewegingsplatform de sjabloon 20 keer herhaalt.
      LET OP: Matrixafzetting moet worden uitgevoerd in een chemische zuurkast.
  3. Beeldvormende acquisitie
    1. Plaats het objectglaasje in de massaspectrometer (zie Materiaaltabel).
    2. Gebruik correctiepenmarkeringen om leerpunten in te stellen op de software waarnaar wordt verwezen (zie Materiaaltabel).
    3. Stel het laservermogen (60%), de laserfocus (gemiddeld), het aantal opnamen (100) en de polariteit in de software in (zie Materiaaltabel). Stel een gegevensreductiefactor van 99% in en sla het FID-bestand op voor latere gegevenskalibratie. Sla de methode op.
    4. Beperk het gebied dat moet worden geanalyseerd met behulp van de tool Polygoonmeetgebied toevoegen vanuit de software van de massaspectrometer. Bewerk de parameters van het meetgebied die de in de vorige stap opgeslagen methode en de rasterbreedte aangeven tot 100 μm (aanvullende figuur S4A).
    5. Begin met het verwerven van beeldvorming.
  4. Data-analyse
    1. Gebruik matrixcluster en bekende verontreinigingen om een massalijst te maken in de software waarnaar wordt verwezen (zie Materiaaltabel) op het tabblad Kalibratie (aanvullende afbeelding S4B).
      1. Open de gegevens die moeten worden gekalibreerd in de software waarnaar wordt verwezen (zie Materiaaltabel). Open op het tabblad Kalibratie de gemaakte massalijst en open een dialoogvenster door met de rechtermuisknop te klikken en de optie vergrendelingsmassa's instellen te kiezen (aanvullende afbeelding S4C).
      2. Selecteer de Gaussiaanse venstermodus met 0,5 Gaussiaanse verbreding en 3,5 lijnverbreding. Laat online kalibratie uitgeschakeld. Selecteer modus (enkelvoudig), drempelwaarde (1.000) en massatolerantie (5 ppm). Kalibreer gegevens met proces en sla de 2D-gegevenstool op (aanvullende afbeelding S4C).
    2. Exporteer de gegevens na kalibratie naar het SCiLS-lab of andere compatibele software en stel de gewenste m/z-waardedrempel in (gekozen bereik: 150 tot 2.500).
      OPMERKING: Afhankelijk van de bestandsgrootte of de kenmerken van de computer kan dit enige tijd duren.
    3. Kies een normalisatiemethode tussen het totale aantal ionen (TIC) of het gemiddelde kwadraat (RMS).
      LET OP: Voor deze analyse is gekozen voor TIC.
    4. Als de in kaart te brengen analyten bekend zijn, zet dan elke m/z-waarde voor elke analyt uit en sla de gegenereerde beelden en de spectrale gemiddelde grafiek op.
      OPMERKING: In dit werk werden m/z-waarden van hexose-oligomeren gekozen door rekening te houden met het kaliumadduct.

2. Energiedispersieve spectroscopie (EDS)

  1. Protocol voor het verdelen van zaden
    1. Koop een dun zaadschijfje in een snijzaagmachine (zie Tabel met materialen).
    2. Snijd de zaden met de volgende parameters: 500 RPM snijsnelheid, 100 N laadlading en 15 HC Diamond Wafering Blade (zie Tabel met materialen).
      NOTITIE: Behandel de handmatige verwijdering van vezels uit de zaden vanwege de noodzakelijke hechting aan het ruim in de precisiebankschroeven die aan de goniometer zijn bevestigd. Reinig het mes voor gebruik en snijd een deel van het zaad af om te voorkomen dat er tijdens de analyse ongewenste mineralen worden toegevoegd.
    3. Verwijder de monsters met perslucht om alle deeltjesresten uit de snede te verwijderen (zie Tabel met materialen).
    4. Bevestig een zaadgedeelte in dubbelzijdige koolstoftape (zie Materiaaltabel) in de steun.
  2. Analyse condities
    1. Bevestig de steun met een zaadgedeelte in de vacuümkamer van een scanning-elektronenmicroscoop (SEM) gekoppeld aan EDS (zie Materiaaltabel).
    2. Maak elektronenmicrofoto's op een modelmicroscoop met een versnelling van 20 kV en een spotgrootte van 4,0, met behulp van secundaire elektronensignalen (zie Tabel met materialen), terugverstrooide elektronen (vastestofdetector bevestigd op het polaire stuk) en mengsels van deze twee soorten signalen (MIX), waarbij kunstmatig gekleurde beelden worden opgebouwd.
    3. Gebruik voor het verkrijgen van EDS-spectra een spectrometer (zie Materiaaltabel) in combinatie met de eerder genoemde SEM. De conditieconfiguratie van de beeldacquisitie van EDS is hetzelfde als die van de SEM.
    4. Stel kantelgraden, elevatie en azimut in op respectievelijk 0,0, 35,0 en 0,0.
  3. Data-acquisitie
    1. Stel drie verschillende gebieden in met een vergroting van 91x van het zaadgedeelte om gegevens te verkrijgen.
    2. Identificeer de pieken in het spectrum bij beëindiging van de acquisitie of tijdens de acquisitie. Gebruik de stapknop Elementen bevestigen om de pieken handmatig te identificeren.
    3. Stel de acquisitietijd in op 60 s voor elk geselecteerd gebied. Stel de procestijd in op vijf; De parameters zijn beschikbaar voor een procestijd van één tot zes.
      OPMERKING: De tekenen van de elementen zijn constant en tellen op, terwijl de geluiden willekeurig en schadelijk zijn. Hoe langer de verwerkingstijd, hoe lager de ruis.
    4. De standaardinstellingen voor het weergeven van significante kwantitatieve resultaten zijn meer dan twee sigma's (standaarddeviatie). Zet twee sigma's op nul om ongewenste resultaten te verminderen.
    5. Normaliseer elke intensiteit van de elementen; dit is een gestandaardiseerde parameter in de software (zie Materiaaltabel).
    6. Als u de gegevens wilt analyseren, exporteert u deze in een DOC-bestand.
  4. Data-analyse
    1. Zorg voor de nauwkeurige meting van piekintensiteiten voor kwantitatieve elementaire analyse.
    2. Overlappende pieken vereisen deconvolutie voor een betere piekscheiding; Trek indien nodig een luidruchtige achtergrond af.
    3. Als er geen overlapping is, verhoogt u de versterking om de signalen te versterken en de spectrumkwaliteit te verbeteren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Het ontwikkelde protocol maakte MALDI-IMS-analyse van zaden van E. precatoria en E. edulis mogelijk. Als gevolg hiervan konden we het molecuulgewicht en de mate van polymerisatie (DP) van koolhydraten bevestigen als een gedeeltelijke structurele opheldering. De moleculaire informatie die door de MALDI-IMS-analyse werd verkregen (Figuur 1 en Figuur 2) vertoonde pieken die [M+K]+ adducten van hexose-oligomeren (Δ = 162...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Planten zijn samengesteld uit gespecialiseerde weefsels voor specifieke biochemische functies. Daarom moet het monstervoorbereidingsprotocol voor MALDI-IMS worden ontworpen op basis van verschillende plantenweefsels met specifieke fysisch-chemische eigenschappen, aangezien monsters hun oorspronkelijke analytverdeling en -overvloed moeten behouden voor een signaal van hoge kwaliteit en een ruimtelijke resolutie8.

Voorafgaand aan de MALDI-IMS-analyse is de primaire overwe...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren dat er geen sprake is van belangenverstrengeling.

Dankbetuigingen

Dit werk werd gefinancierd door het Serrapilheira Instituut (Serra-1708-15009) en de Carlos Chagas Filho Foundation for Supporting Research in the State of Rio de Janeiro (FAPERJ-JCNE-SEI-260003/004754/2021). Het Serrapilheira Instituut en de Nationale Raad voor Wetenschappelijke en Technologische Ontwikkeling (CNPq) hebben beurzen toegekend aan Dr. Felipe Lopes Brum en Dr. Gabriel R. Martins (Institutional Capacity Building Program/INT/MCTI). De Coördinatie voor de Verbetering van het Personeel in het Hoger Onderwijs (CAPES) wordt erkend voor het toekennen van een Masterbeurs voor de heer Davi M. M. C. da Silva. Centro de Espectrometria de Massas de Biomoléculas (CEMBIO-UFRJ) wordt erkend voor de diensten die worden geleverd met MALDI-IMS-analyses, en de heer Alan Menezes do Nascimento en het Centro de Caracterização em Nanotecnologia para Materiais e Catálise (CENANO-INT), gefinancierd door MCTI/SISNANO/INT-CENANO-CNPQ-subsidie nr. 442604/2019, worden bedankt voor de elementaire samenstellingsanalyse.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1 mL Gastight Syringe Model 1001 TLL, PTFE Luer LockHamilton Company81320
2,5-Dihydroxybenzoic acidSigma Aldrich Co, MO, USA149357
APCI needleBruker Daltonik, Bremen, Duitsland602193
AxiDraw V3 xy-bewegingsplatformEvil Mad Scientist, CA, VS2510
Koolstof dubbelzijdige geleidende tape
Compass Data Analysis software creatie van massa lijst
Perslucht
koperen dubbelzijdige kleefband3M, VS1182-3/4"X18YD
Cryostat CM 1860 UVLeica  Biosystems, Nussloch, Duitsland
Diamant Wafering Blade 15 HC
Everhart-Thornley detector
FlexImagingBruker Daltonik, Bremen, Duitslandbeeldverwerving
FTMS VerwerkingBruker Daltonik, Bremen, Duitslandgegevenskalibratie
Gelatine van runderhuidSigma Aldrich Co, MO, VSG9391
High Profile Microtome Blades Leica 818Leica  Biosystems, Nussloch, Duitsland0358 38926
Indium tin oxide gecoat glazen plaatBruker Daltonik, Bremen, Duitsland8237001
InkscapeInkscape Project c/o Software Freedom Conservancy, NY, VS
IsoMet 1000 precisiesnijderBuehler, Illinois, VS
MethanolJ.T.Baker9093-03
Mili-Q water18,2 MΩ.cm
Olie vacuümpomp
Optimal Cutting Temperature CompoundFisher HealthCare, Texas, VS4585
Parafilm "M" Sealing FilmAmcorHS234526B
Quanta 450 FEGFEI Co, Hillsboro, OR, VS
SCiLS Lab (Multi-vendor ondersteuning) MS Software Bruker Daltonik, Bremen, Duitsland
Software INCA Suite 4.14 VOxford Instruments, Ableton, UK
Solarix 7TBruker Daltonik, Bremen, Duitsland
SpuitpompkdScientific, MA, VS78-9100K
TrifluorazijnzuurSigma Aldrich Co, MO, VS302031
X-Max spectrometerOxford Instruments, Ableton, UK

Referenties

  1. Buchberger, A. R., DeLaney, K., Johnson, J., Li, L. Mass spectrometry imaging: a review of emerging advancements and future insights. Analytical Chemistry. 90 (1), 240-265 (2018).
  2. Heeren, R. M. A. MALDITechniques in Mass Spectrometry Imaging. Encyclopedia of Spectroscopy and Spectrometry. , Elsevier Ltd. (2017).
  3. Shariatgorji, M., Svenningsson, P., Andrén, P. E. Mass spectrometry imaging, an emerging technology in neuropsychopharmacology. Neuropsychopharmacology. 39 (1), 34-49 (2014).
  4. Zaima, N., Hayasaka, T., Goto-Inoue, N., Setou, M. Matrix-assisted laser desorption/ionization imaging mass spectrometry. International Journal of Molecular Sciences. 11 (12), 5040-5055 (2010).
  5. Qin, L., et al. Recent advances in matrix-assisted laser desorption/ionisation mass spectrometry imaging (MALDI-MSI) for in Situ analysis of endogenous molecules in plants. Phytochemical Analysis. 29 (4), 351-364 (2018).
  6. Bhandari, D. R., et al. High resolution mass spectrometry imaging of plant tissues: Towards a plant metabolite atlas. Analyst. 140 (22), 7696-7709 (2015).
  7. Boughton, B. A., Thinagaran, D., Sarabia, D., Bacic, A., Roessner, U. Mass spectrometry imaging for plant biology: a review. Phytochemistry Reviews. 15 (3), 445-488 (2016).
  8. Dong, Y., et al. Sample preparation for mass spectrometry imaging of plant tissues: a review. Frontiers in Plant Science. 7, 60(2016).
  9. Zhang, Y. X., Zhang, Y., Shi, Y. P. A reliable and effective sample preparation protocol of MALDI-TOF-MSI for lipids imaging analysis in hard and dry cereals. Food Chemistry. 398, 133911(2023).
  10. Brum, F. L., Martins, G. R., Mohana-Borges, R., da Silva, A. S. The acquisition of thin sections of açaí (Euterpe oleracea Mart.) seed with elevated potassium content for molecular mapping by mass spectrometry imaging. Rapid Communications in Mass Spectrometry. , e9474(2023).
  11. Martins, G. R., et al. Chemical characterization, antioxidant and antimicrobial activities of açaí seed (Euterpe oleracea Mart.) extracts containing A- and B-type procyanidins. LWT. 132, 109830(2020).
  12. Martins, G. R., et al. Phenolic profile and antioxidant properties in extracts of developing açaí (Euterpe oleracea Mart.) seeds. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 70 (51), 16218-16228 (2022).
  13. Jorge, F. T. A., Silva, A. S. A., Brigagão, G. V. Açaí waste valorization via mannose and polyphenols production: techno-economic and environmental assessment. Biomass Conversion and Biorefinery. , (2022).
  14. Carvalho, L. M. J., Esmerino, A. A., Carvalho, J. L. V. Jussaí (Euterpe edulis): a review. Food Science and Technology. 42, (2022).
  15. Yamaguchi, K. K. dL., Pereira, L. F. R., Lamarão, C. V., Lima, E. S., Veiga-Junior, V. F. d Amazon acai: chemistry and biological activities: A Review. Food Chemistry. 179, 137-151 (2015).
  16. Wu, R., et al. Copper adhesive tape attached to the reverse side of a non-conductive glass slide to achieve protein MALDI-imaging in FFPE-tissue sections. Chemical Communications. 57 (82), 10707-10710 (2021).
  17. Dufresne, M., Patterson, N. H., Norris, J. L., Caprioli, R. M. Combining salt doping and matrix sublimation for high spatial resolution MALDI imaging mass spectrometry of neutral lipids. Analytical Chemistry. 91 (20), 12928-12934 (2019).
  18. Aguiar, M. O., de Mendonça, M. S. Morfo-anatomia da semente de Euterpe precatoria Mart (Palmae). Revista Brasileira de Sementes. 25, 37-42 (2003).
  19. Panza, V., Láinez, V., Maldonado, S. Seed structure and histochemistry in the palm Euterpe edulis. Botanical Journal of the Linnean Society. 145 (4), 445-453 (2004).
  20. Alves, V. M., et al. Provenient residues from industrial processing of açaí berries (Euterpe precatoria Mart): nutritional and antinutritional contents, phenolic profile, and pigments. Food Science and Technology. 42, (2022).
  21. Inada, K. O. P., et al. Screening of the chemical composition and occurring antioxidants in jabuticaba (Myrciaria jaboticaba) and jussara (Euterpe edulis) fruits and their fractions. Journal of FunctionalFoods. 17, 422-433 (2015).
  22. Monteiro, A. F., Miguez, I. S., Silva, J. P. R. B., Silva, A. S. High concentration and yield production of mannose from açaí (Euterpe oleracea Mart.) seeds via mannanase-catalyzed hydrolysis. Scientific Reports. 9 (1), 10939(2019).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

MALDI imagingmonstervoorbereidingdunne coupesinbedding in gelatinecryostaat coupesmatrixdepositiehexose oligomerenmapping van zaadmetabolieten
Bereiding van harde palmzaden voor matrix-geassisteerde laserdesorptie/ionisatie-beeldvorming massaspectrometrie-analyse
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.