Er werden twee reeksen tagging-evaluaties uitgevoerd om de werkzaamheid van het taggen van juveniele elften aan te pakken - voorlopige proeven in 2020 en een langetermijnonderzoek in 2021. In november 2020 werden bij PNNL voorlopige laboratoriumevaluaties uitgevoerd om een voorkeursmethode te bepalen voor het implanteren van Amerikaanse elft met een nieuwe akoestische microtransmitter. Prototype-zenderontwerpen (n = 4, P1-P4) werden gecombineerd met verschillende zenderlocaties (maag, borst, bekken en dorsaal) voor een gecombineerd totaal van 4 unieke akoestische zender-tagging-locatiebehandelingen (n = 40 vissen per behandeling, tabel 1). Alle testvissen werden willekeurig toegewezen aan een behandelings- en vuilwatertank. Testvissen werden gedurende 14 dagen in 2 opslagtanks gehouden met gelijke aantallen vissen van elke behandeling (d.w.z. 20 vissen per behandeling) per tank. Gedurende de eerste 2 dagen van de evaluatie werden elften gehouden in brak zout water (7,5 ppt) en mochten ze herstellen van het taggen en hanteren. Vervolgens werden de tanks voor de rest van de evaluatieperiode overgeschakeld op doorstromend zoet water.
Voor de voorlopige evaluatie varieerden de gemerkte vissen en de met vinnen geknipte bedieningselementen in grootte van 50-80 mm in vorklengte. De overleving van de juveniele elft en het vasthouden van de tag waren het hoogst voor vissen die via een incisie in de borst waren geïmplanteerd in vergelijking met de andere tagging-technieken (Figuur 3). Aanvullende pilotevaluaties toonden ook aan dat hanteringstechnieken zoals water-naar-water-overdrachten en het vasthouden van vis in brak zout water voor en na stressvolle gebeurtenissen, zoals taggen, van cruciaal belang waren voor het verhogen van de overlevingskansen.
Met behulp van de succesvolle tagging- en handlingprotocollen uit de voorlopige evaluatie werd in 2021 een laboratoriumstudie uitgevoerd bij PNNL om de overleving van 60 dagen op lange termijn en het behoud van tags te evalueren van juveniele Amerikaanse elft die was geïmplanteerd met een akoestische zender met behulp van de pectorale incisie-tagging-methode. Bij de evaluatie op lange termijn werd gebruik gemaakt van de dummyzender P5 (figuur 4), een verbeterd prototypeontwerp dat qua vorm en grootte vergelijkbaar is met het P1-ontwerp dat in de voorlopige evaluatie werd gebruikt. De gemiddelde afmetingen en het gewicht van de dummy P5-tag waren 7,6 mm lang × 2,3 mm in diameter en een gewicht in lucht van 0,058 g (standaarddeviatie 0,002 g), wat resulteerde in een tagbelasting van <1%. Het prototype van de akoestische zender met functionele componenten (afbeelding 4) heeft afmetingen van 7,6 mm lang x 2,0 mm in diameter en een gewicht in lucht van 0,050 g.
Jonge Amerikaanse elften die bij de langetermijnevaluatie werden gebruikt, waren op het moment van testen al 4 maanden in gevangenschap gehouden. Hoewel het experiment was ontworpen om gelijke aantallen behandelings- en controlevissen gedurende een periode van 60 dagen in twee tanks te houden, waren de resterende elften op het moment van taggen laag. Daarom werden er willekeurig meer elften toegewezen aan de getagde behandelingsgroep dan aan de controlegroep om een beter begrip te krijgen van de werkzaamheid op lange termijn van de tagging-techniek op elft. Elk van de twee tanks bevatte 27 behandelingsvissen en 9 of 10 controlevissen. Aangezien de overleving van tank A (13,8%) echter aanzienlijk slechter was dan die van tank B (78,4%; Fisher's exact-test, p < 0,001) en er was geen verschil in overleving tussen de getagde en controlegroepen binnen elke tank, alleen de resultaten voor tank B zijn hier opgenomen.
Elften (vorklengte 69-105 mm; gewicht 3,9-11,7 g) werden ofwel gelabeld met de P5-zender met behulp van de borstincisie (n = 27) of toegewezen aan de controlegroep (n = 10). Controlevissen werden behandeld met behulp van dezelfde procedures, waaronder ~ 20 s op het operatiekussen worden geplaatst, maar ze kregen geen vinclip of incisie en werden ook niet geïmplanteerd met een zender. Na het taggen werden beide behandelingsgroepen gedurende 1 dag in brak zout water (7,5 ppt) gehouden en vervolgens overgeschakeld op doorstromend rivierwater voor de rest van het onderzoek. De overleving na 60 dagen was 81,5% voor de getagde groep en 70% voor de niet-gelabelde controles (Figuur 5). Overleving voor getagde vissen in deze evaluatie werd gedefinieerd als zowel overleving als het vasthouden van tags, omdat het uitdrijven van tags niet kan worden onderscheiden van een sterftegebeurtenis in een telemetrieonderzoek. Er was geen significant verschil in overleving tussen de twee groepen (Fisher's exact-test, P = 0,884); Het vermogen om een verschil te detecteren was echter 38,4% vanwege de kleine steekproefomvang. Hoewel het vermogen om een verschil tussen de behandelingen te detecteren laag was, tonen de resultaten van de langetermijnevaluatie aan dat dit hanterings- en taggingprotocol met matig succes kan worden gebruikt om Amerikaanse elft te implanteren met akoestische zenders.

Figuur 1: Post-tagging recovery tank gevuld met brak zout water. Een airliftsysteem levert zuurstof aan de statische tank. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2: Akoestische transmitter implantatie van een Juveniele Amerikaanse elft. Juveniele Amerikaanse elft (A) met een incisie in de borst en (B) met de dummy P5-zender in de incisie. Let op, de mond van de elft is gedeeltelijk ondergedompeld in water dat uit de blauwe slang stroomt. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3: Overlevingspercentage over een voorlopige evaluatie van 14 dagen met één groep niet-gelabelde controles en vier getagde groepen juveniele Amerikaanse elft. De getagde behandelingen bestonden uit vier tagging-locaties (maag, borst, bekken en dorsaal) elk gekoppeld aan een uniek prototype van de zender (P1-P4). Overleving van de gezenderde vis werd gedefinieerd als zowel overleving als het behoud van de merktekens. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 4: Akoestische en dummyzenders voor het zenderen van jonge Amerikaanse elften. (A) Functionele akoestische microtransmitter en (B) het prototype van de dummy P5-zender, die werd gebruikt in het 60 d laboratoriumoverlevingsonderzoek. Merk op dat de cijfers 4-7 op de liniaal centimeters vertegenwoordigen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 5: Overlevingspercentage van Amerikaanse elften gedurende een langlopend onderzoek naar het vasthouden van 60 dagen. Juveniele elften werden ofwel ongelabeld (Untagged Controls; ononderbroken lijn) of getagd (Tagged [Pectoral P5]; stippellijn) met een dummyzender. Overleving van de getagde groep werd gedefinieerd als zowel overleving als tagbehoud. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
| Tag Type | Locatie taggen | N | Vork Lengte (mm) | Gemiddeld taggewicht (SD; g) | Tag-last (%) | Overleving (%) | Gemiddelde tijd om te taggen/knippen (s) |
| Bereik | Gemiddelde (SD) |
| Blz. 1 | Gastrisch | 40 | 50 - 76 | 60 (6.0) | 0.058 (0.003) | 1.5 - 5.2 | 45 | 12 |
| P2 | Pectoral | 40 | 50 - 78 | 60 (7.3) | 0.039 (0.001) | 1.0 - 3.2 | 80 | 23 |
| Blz.3 | Bekken | 40 | 50 - 70 | 58 (5.3) | 0.039 (0.001) | 1.0 - 4.1 | 55 | 26 |
| Blz. 4 | Dorsaal | 40 | 50 - 80 | 61 (6.8) | 0.088 (0.004) | 0 | 60 | 57 |
| Beheersen | N.v.t. (Clip) | 40 | 50 - 80 | 59 (5.7) | N.v.t. | 0 | 92.5 | 14 |
Tabel 1:Tagging- en overlevingsinformatie voor Amerikaanse elften die zijn geïmplanteerd met prototypezenders (P1-P4) of gemarkeerd met clips van de bovenste staartvin en de onderste staartvin (controle) als onderdeel van de voorlopige evaluatie. De locatie van de tag voor de controlegroep is niet van toepassing (NA) omdat deze vissen alleen vinclips (Clip) hebben ontvangen. Merk op dat het tagtype P4 een neutraal drijvend ontwerp was. De standaarddeviatie (SD) van het gemiddelde staat tussen haakjes.