Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Nabootsing van Ding's Roll-methode op door notexine geïnduceerde spierblessure bij ratten

1.9K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/65820

⸱

25 augustus 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol beschrijft een eenvoudig apparaat dat de rolmethode van Ding nabootst, een rattenmodel van skeletspierletsel vaststelt en hematoxyline-eosinekleuring gebruikt om de pathologie van beschadigd weefsel en enzymgekoppelde immunosorbenttest te observeren om veranderingen in serumschademarkers te detecteren.

Samenvatting

De rolmethode van Ding is een van de meest gebruikte manipulaties in traditionele Chinese massageklinieken (Tuina) en een van de meest invloedrijke hedendaagse Tuina-manipulaties in China. Het is gebaseerd op de traditionele rolmethode die vaak wordt gebruikt in het Zen-genre met één vinger en wordt de rolmethode van Ding genoemd. Vanwege de ontstekingsremmende en bloedsomloopbevorderende effecten heeft de rolmethode van Ding een goed therapeutisch effect op myopathie. Vanwege het grote krachtoppervlak dat op de menselijke huid wordt uitgeoefend, is de rolmethode van Ding een uitdaging om uit te voeren op proefdieren met kleine huidgebieden, zoals ratten en konijnen. Bovendien verschilt de sterkte van Tuina toegepast op het menselijk lichaam van die toegepast op proefdieren, dus het kan voorkomen dat de sterkte te hoog of te laag is om het therapeutische effect van Tuina tijdens het experiment te bereiken. Dit experiment heeft tot doel een eenvoudige stimulator te maken die geschikt is voor ratten op basis van Ding's rolmanipulatieparameters (sterkte, frequentie, Tuina-duur). Het apparaat kan manipulatie in dierproeven standaardiseren en de variatie in Tuina-kracht die op verschillende dieren wordt uitgeoefend als gevolg van subjectieve factoren verminderen. Er werd een rattenmodel van door notexine geïnduceerde skeletspierbeschadiging opgesteld en plasmaletselmarkers creatinekinase (CK) en vetzuurbindend proteïne 3 (FABP3) werden gebruikt om het therapeutische effect van Tuina op skeletspierletsel te beoordelen. De resultaten toonden aan dat deze Tuina-stimulator de niveaus van CK- en FABP3-expressie kon verminderen en de mate van skeletspierletsel kon vertragen. Daarom draagt de hier beschreven Tuina-stimulator, die de rolmethode van Ding nabootst, bij aan het standaardiseren van Tuina-manipulatie in experimenteel onderzoek en is het een grote hulp voor vervolgonderzoek naar het moleculaire mechanisme van Tuina voor myopathie.

Inleiding

Spierletsels zijn veel voorkomende traumatische letsels in het klinische en dagelijkse leven, veroorzaakt door uitwendige slagen (kneuzingen) of chronische overbelasting van spiervezels (verrekkingen), enz., resulterend in spierdisfunctie en pijn, die zelfs de kwaliteit van leven van de patiënt ernstig aantasten1. Zo vroeg mogelijk beginnen met revalideren na een acute overbelastingsblessure is de sleutel tot het verkorten van de tijd om terug te keren naar sport2 en het verminderen van pijn 3,4. In de moderne westerse geneeskunde volgt klinische eerste hulp bij ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Procedures waarbij dieren betrokken zijn, zijn goedgekeurd door de Institutional Care and Use Committee van de Hunan University of Chinese Medicine.

1. Montage van de rollende stimulator

  1. Kies een stimulator die bestaat uit een rubberen rol, vorkhouder, veer, limietschot, afstelspalk, schroef en acrylhandvat (Figuur 1). Zorg ervoor dat de rubberen rol 3 cm lang en 1.6 cm in diameter is, de veer 3 cm lang en 0.9 cm in diameter, het eindschot 3 cm lang en 2 cm breed en het handvat 12 cm lang en 0.9 cm in diameter is.
  2. Krachtbeheersing: Volgens de literatuurresultaten

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Om de morfologische eigenschappen van de skeletspier van ratten na letsel te observeren, werd de gastrocnemiusspier gekleurd met hematoxyline en eosine en werden de gekleurde beelden gelezen met analysesoftware zoals beschreven in het protocol voor 8 ratten per groep. Bij ratten met gastrocnemius-spierletsel veroorzaakt door notexine (NTX-groep) waren veel spiercellen gescheurd, atrofisch, necrotisch en onregelmatig gerangschikt. Er was ook een hoge infiltratie van neutrofielen en lymfocyten rond het getroffen gebied (

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Hier beschreven we een protocol voor Tuina-behandeling van skeletspierletsel bij ratten en analyseerden vervolgens de mate van skeletspierletsel na behandeling om de effectiviteit van de methode te verifiëren. Met name modellen van skeletspierletsel bij ratten, inclusief maar niet beperkt tot geneesmiddelinductie (notexine, bupivacaïne)16, stompe kneuzing 26, crush 27 en ischemie-reperfusie28, kunnen worden ingegrepen met Tuina.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit onderzoek werd ondersteund door subsidies van de National Natural Science Foundation of China (subsidienrs. 82174521), innovatieproject voor afgestudeerde studenten van de Hunan University of Chinese Medicine (2022CX109)

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1 mL spuitJIANGXI FENGLIN20220521
1.5 microtubes ServicebioEP-150X-J
15 mL centrifugebuisServicebioEP-1501-J
30G naaldCONPUVON220318
5 mL bloedafnamebuisServicebioQX0023
Acrylen handvatGuangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd65643645
AanpassingsspatbordCREROMEM20220729
WattenstaafjeINOHV22080215
Enzym-gelabeld instrumentRaytoRT-6100 
EthanolINOHV211106
VorkhoudYongkang Kangzhe Health Technology Co., LtdJL001
HaarverwijderingscrèmeVeet, FranceLOTC190922002
Hematoxyline kleuroplossing setWuhan Google BiotechG1005
Beeldvormingssysteem Nikon, JapanNikon DS-U3
IODOPHOR ontsmettingsoplossingHale&Hearty20221205
LichtmicroscoopNikon, JapanNikon Eclipse E100
BegrenzingsschotCREROMEM20220724
NotextineLatoxan S.A.S.L8104-100UG
Pentobarbital natriumMerck KGaAP3761
Rat creatine kinase (CK) ELISA kitLunChangShuoBiotechYD-35237
Rat vetzuur-bindend eiwit 3 (FABP3) ELISA kitLunChangShuoBiotechYD-35730
RubberwalsHebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd202207
SchroefWeiyan HardwareB05Z122
Sprague Dawley rattenHunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.SYXK2019-0009
VederBingzhang HardwareTH001
Chirurgisch mesCovetrus#23
WeegcontrollerIyoysHY-XSQ

Referenties

  1. Lempainen, L., et al. Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide. BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41(2022).
  2. Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kjær, M. Trea....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Notexine-spierletselTuina-manipulatieskeletspierletselrattenspiermodelrollende masseurmarkers voor spierletselcreatinekinasevetzuurbindend eiwithematoxyline-eosin-kleuring