Method Article

Operatieprocedure en voorzorgsmaatregelen van draad-embedding acupunctuurtherapie bij Alzheimer

DOI:

10.3791/65895

⸱

May 10th, 2024

 ,  ,  ,  ,  , 
1College of Acupuncture and Orthopedics, Hubei University of Chinese Medicine, 2Hubei Shizhen Laboratory, 3Hubei International Science and Technology Cooperation Base of Preventive Treatment by Acupuncture and Moxibustion, 4Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie presenteert een protocol voor draad-inbedding acupunctuurtherapie bij ratten die lijken op de ziekte van Alzheimer.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Thread-embedding therapy (TEAT) is een behandeling die ziekten voorkomt en beheert door een biologisch afbreekbare hechting in een acupunt in te brengen, wat zorgt voor langdurige stimulatie. TEAT is een eenvoudige aanpak die het ongemak van regelmatige acupunctuur vermijdt en duurzame therapeutische effecten biedt. Dit artikel bespreekt de mogelijke impact van TEAT op het leer- en geheugenvermogen van ratten met symptomen die lijken op de ziekte van Alzheimer. Aangezien chemisch geïnduceerde neuronale degeneratie en cognitieve stoornissen bij ratten niet volledig de werkelijke pathologische veranderingen weerspiegelen die zijn waargenomen bij de ziekte van Alzheimer. Daarom heeft onze onderzoeksgroep deze manifestaties aangeduid als symptomen die lijken op de ziekte van Alzheimer. Er is een protocol opgesteld om de selectie van acupunten, het operatieproces en de nodige voorzorgsmaatregelen voor het hoofd en de onderrug te beschrijven. Het experiment werd uitgevoerd op drie groepen: een controlegroep, een modelgroep en een TEA-groep, elk met 6 ratten. Om symptomen van de ziekte van Alzheimer op te wekken, werden ratten gedurende 7 weken (49 dagen) intraperitoneaal geïnjecteerd met D-galactose. De ratten in de TEA-groep kregen een acupunt catgut-inbeddingsbehandeling. Na de interventieperiode werd een Morris Water Maze (MWM) uitgevoerd om het leervermogen en het geheugen van de ratten te evalueren. Vervolgens werden de ratten geofferd en werd hun hersenweefsel onderzocht. Er werd een histologisch onderzoek uitgevoerd om de effecten van TEAT op de pathologie van ratten die symptomen van de ziekte van Alzheimer vertoonden, te begrijpen. Deze studie suggereert dat TEAT het leren en geheugen kan verbeteren bij ratten met symptomen die lijken op de ziekte van Alzheimer, wat wijst op een potentieel veelbelovende nieuwe behandelingsbenadering voor deze neurodegeneratieve aandoening.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Draadinbeddingsacupunctuur (TEA) omvat het inbedden van catgut of resorbeerbare hechtingen in acupunten met behulp van een speciale naald. Deze techniek heeft een langdurig effect totdat de hechtingen zijn geabsorbeerd en afgebroken. Het biedt continue en aanhoudende stimulatie van de acupunten gedurende een week of langer1, waardoor een vergelijkbaar resultaat wordt bereikt zonder de noodzaak van dagelijkse repetitieve procedures2. Dit vermindert het aantal patiënten dat medische behandeling zoekt, waardoor medische middelen tot op zekere hoogte worden bespaard. In de afgelopen jaren wordt TEAT steeds vaker gebruikt in verschillende medische gebieden in China, waaronder interne geneeskunde, externe geneeskunde, dermatologie, gelaatstrekken, gynaecologie en kindergeneeskunde. Studies hebben aangetoond dat het effectief is bij het produceren van langdurige en betrouwbare effecten voor bepaalde chronische en complexe ziekten, zoals epilepsie4 en aangezichtszenuwverlamming5. Het heeft de voordelen van minimaal trauma en eenvoudige bediening6. Bovendien zijn de behandelingskosten van TEAT lager dan die van elektro-acupunctuur (EA)7. Daarom wordt TEAT steeds meer gewaardeerd in klinisch en wetenschappelijk onderzoek.

De ziekte van Alzheimer (AD) is een neurodegeneratieve aandoening die in de loop van de tijd vordert. Het pathofysiologische proces begint zich ongeveer 20 jaar voordat de klinische symptomen verschijnen op te hopen, maar het mechanisme wordt nog steeds niet volledigbegrepen8. Gezien de beperkte beschikbaarheid van effectieve geneesmiddelen voor AD, richt het onderzoek zich steeds meer op de prodromale en preklinische stadia van de ziekte. Preventie is een cruciale strategie om de ontwikkeling en progressie van AD 9,10 aan te pakken. In de afgelopen jaren heeft de traditionele Chinese geneeskunde (TCM) aanzienlijke vooruitgang geboekt en wordt verwacht dat het nieuwe mogelijkheden zal bieden voor het voorkomen en behandelen van AD11,12. Als subtype van acupunctuur heeft TEAT de voorkeur boven andere therapieën vanwege het brede behandelingsbereik, het minimale trauma, de eenvoudige bediening, de lage behandelingsfrequentie en de langdurige werkzaamheid6. Opkomende literatuur suggereert dat TEAT gunstig kan zijn voor mensen met obesitas13,14, diabetes15, slapeloosheid16, postmenopauzale osteoporose17 en depressie18, allemaal risicofactoren voor AD. Het verbetert ook de veroudering bij ouder wordende ratten door mitofagie2 te reguleren, verbetert het ruimtelijk leren en geheugenstoornissen, verlicht pathologische schade aan de hippocampus en remt de ontstekingsreactie bij ratten met vasculaire dementie (VD)19. Het leek aantrekkelijk om uit te zoeken of TEAT ook zou kunnen inwerken op pathologische processen tijdens AD.

Het huidige onderzoek mist uniformiteit en standaardisatie in verschillende kritieke elementen van de TEA-werking, waaronder de inbeddingsmethode, de inbeddingstool, de draad en de inbeddingsintervalperiode. Dit gebrek aan standaardisatie beïnvloedt de evaluatie van het effect van de therapie en de verkenning van gerelateerde mechanismen en beperkt externe promotie en communicatie. Eerder onderzoek20,21 heeft aangetoond dat intraperitoneale toediening van D-galactose (D-gal) pathologische veranderingen bij ratten kan veroorzaken die lijken op de ziekte van Alzheimer, waaronder neuronale degeneratie en cognitieve stoornissen. Bovendien is aangetoond dat elektro-acupunctuur bij de Baihui (GV20) en Shenshu (BL23) effectief cognitieve achteruitgang verbetert, neuro-inflammatie vermindert en neuronale schade vermindert. Deze studie neemt de ziekte van Alzheimer-achtige modelratten als voorbeeld om de selectie van acupunten en het operatieproces en de voorzorgsmaatregelen van TEAT onder dit model te introduceren. Het bespreekt de kritieke operationele elementen van TEAT in experimenteel onderzoek om een referentie te bieden voor toekomstige studies.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle experimenten werden uitgevoerd volgens de National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals en werden goedgekeurd door het Hubei Provincial Center for Disease Control and Prevention Laboratory Animal Management and Use Committee. Voor de test werden in totaal 18 vrouwelijke Sprague-Dawley (SD) ratten van 3 maanden oud met een gewicht van 220-250 g gebruikt. Alle ratten werden gehouden op een licht/donkercyclus van 12 uur bij 23 ± 1 °C en een luchtvochtigheid van 40%-50%, met vrije toegang tot voedsel en water. Na een acclimatisatieperiode van een week, waarin de ratten mochten wennen aan de laboratoriumomstandigheden, werden de experimenten gestart.

1. Modelontwikkeling

  1. De experimentele opzet is weergegeven in figuur 1. Verdeel willekeurig 18 Sprague-Dawley vrouwelijke ratten van 3 maanden oud met een gewicht van 220-250 g in controle-, model- en TEA-groepen. Elke groep bestaat uit 6 ratten.
  2. Injecteer de modelgroep en de TEA-groep dagelijks met D-galactose (D-gal; 120 mg/kg/dag), terwijl de controlegroep gedurende 7 weken (49 dagen) injecties met zoutoplossing (120 mg/kg/dag) krijgt in het onderste ventrale gebied22. De injectie moet dagelijks tussen 8.00 en 9.00 uur worden toegediend.
  3. Weeg de ratten op de 7e dag van elke week tussen 9.00 en 10.00 uur. Het experiment duurde 49 dagen. Begraaf de draden elke 14 dagen op de 14e, 28e en 42edag. Stel de tijd voor elke draadinbedding vast tussen 9:00-12:00 uur.
  4. Ga door met intraperitoneale toediening van D-galactose gedurende 7 weken om aan de ziekte van Alzheimer gerelateerde pathologische manifestaties bij ratten te induceren22.

2. Voorbereiding op de speen

  1. Steriliseer chirurgische instrumenten zoals oogscharen, trays en pincetten en desinfecteer. Reinig de oppervlakken in de operatiekameromgeving grondig en desinfecteer.
  2. Bereid het chirurgisch platform voor door een verwarmingskussen voor kleine dieren plat op het oppervlak te leggen, gevolgd door te draperen met een steriele handdoek. Leg vervolgens de gereinigde en gedesinfecteerde operatieplank er soepel op, met de ruwe kant naar boven. Schakel vervolgens het verwarmingskussen in en stel de temperatuur in op 32 °C.
  3. Kies voor de procedure een wegwerpnaald met schroefdraad nr. 6 met een diameter van 0,6 mm en een 5-0 resorbeerbare chirurgische hechtdraad (collageenhechtdraad) met een lengte van 2 cm. Knip de resorbeerbare chirurgische hechtdraad van 2 cm 5-0 met een oogheelkundige schaar in stukken van 0,5 cm en 0,2 cm. Week de afgeknipte draad in 0,9% zoutoplossing en zet opzij.
  4. Was de handen gedurende 20 s met water en zeep en droog ze daarna af. Draag daarna steriele handschoenen.
  5. Verdoof de ratten met een IP-injectie van chloraalhydraat (300 mg/kg) in het onderste ventrale gebied, zorg ervoor dat de anesthesie wordt bevestigd wanneer dieren niet reageren in een operatievliegtuig, op basis van het gebrek aan respons van een teenknijptest, en het handhaven van een stabiele fysiologische toestand. Om uitdroging van het hoornvlies en mogelijke schade te voorkomen terwijl de ratten onder narcose zijn, brengt u bovendien een ruime hoeveelheid veterinaire zalf aan op de ogen, zodat ze tijdens de procedure gesmeerd blijven.
    LET OP: Het wordt aanbevolen om de rat te verdoven, omdat het pijnlijk voor hen is om de piercing te ervaren.

3. Draad-inbedding voor Baihui (GV 20)

  1. Lokaliseer het acupunt Baihui (GV 20) bij ratten rechts in het midden van het pariëtale bot (Figuur 2A). Plaats de ratten om het hoofd volledig bloot te leggen, met de oren naar voren getrokken om ongeveer de methode te benaderen die bij mensen wordt gebruikt voor het verbinden van de oortoplijnen. Identificeer het Baihui-punt (GV 20) door de centrale longitudinale kam van de schedel te palperen en de locatie ongeveer in het midden aan te wijzen. Bevestig dit acupunt verder op het niveau waar de oren contact zouden maken met het hoofd als ze plat zouden worden gelegd, op één lijn met de kruising van de sagittale hechting en het pariëtale bot. Gebruik een stift om Baihui (GV 20) te markeren.
  2. Scheer het hoofdgebied rond het acupunt van de rat met behulp van een trimmer (meestal een elektrische baardtrimmer voor mannen).
  3. Desinfecteer vóór de operatie de acupunten en de omliggende huid door een 0,5% jodiumoplossing in cirkelvormige bewegingen aan te brengen, beginnend vanuit het midden en naar buiten toe bewegend. Voer vervolgens een drievoudig desinfectieproces uit: gebruik de jodofoor 3x, elk gevolgd door een toepassing van alcohol om een goede ontsmetting te garanderen en de plaats voor te bereiden op een aseptische techniek.
  4. Gebruik een tang om de in zoutoplossing gedrenkte chirurgische hechtdraad van 0,2 cm uit te klemmen en plaats deze in het voorste uiteinde van de naaldbuis. Sluit het vervolgens aan op de naaldkern.
  5. Knijp in het gebied rond Baihui (GV 20) met duim en wijsvinger aan de ene hand, terwijl je met de andere hand de naald vasthoudt.
  6. Steek de naald horizontaal en snel in een hoek van 15° ten opzichte van het huidoppervlak, 0,1 cm onder het Baihui-punt (GV 20), terwijl u in de huid knijpt (Figuur 3A).
  7. Nadat de punt van de naald 0,1 cm boven het Baihui-punt (GV 20) is bereikt, duwt u op de naaldkern terwijl u de naaldbuis terugtrekt om de 0,2 cm resorbeerbare chirurgische hechting volledig in het onderhuidse weefsel van het acupunt te implanteren (Figuur 3B).
  8. Verwijder de naald langzaam en zorg ervoor dat er geen hechting zichtbaar is. Druk het naaldgat met steriel droog katoen 10 s aan om bloeden te voorkomen. Als de draad zich buiten het lichaam bevindt nadat de lijn op acupunten is ingebed, trek deze dan uit en bedien deze opnieuw.

4. Draadinbedding voor Shenshu (BL 23)

  1. Het acupunt Shenshu (BL 23) bevindt zich bij ratten 5 mm lateraal van de 2e lendenwervel (figuur 2B). Lokaliseer eerst de 6e lendenwervel op basis van de heupknobbel van de rat. Lokaliseer vervolgens de 2e lendenwervel door vier wervellichamen naar boven te tellen. Shenshu (BL 23) zal 5 mm lateraal zijn van het23.
    OPMERKING: De combinatie van de Baihui (GV 20) en Shenshu (BL 23) acupunten is een veel gebruikte set in de theorie van de Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM) voor de preventie en behandeling van cerebrale aandoeningen. Zoals bevestigd door eerder onderzoek 20,21, is deze acupuntkoppeling vastgesteld vanwege zijn werkzaamheid.
  2. Gebruik een stift om Shenshu te markeren (BL 23). Scheer de rug en taille rond het acupunt van de rat met behulp van een trimmer (meestal een elektrische baardtrimmer).
  3. Desinfecteer vóór de operatie de acupunten en de omliggende huid door 0,5% jodiumoplossing in een cirkelvormige beweging aan te brengen, beginnend vanuit het midden en naar buiten toe bewegend. Voer vervolgens een drievoudig desinfectieproces uit: gebruik de jodofoor drie keer, elk gevolgd door een toepassing van alcohol om een goede ontsmetting en voorbereiding van de plaats op aseptische techniek te garanderen.
  4. Gebruik een tang om de 0,5 cm resorbeerbare chirurgische hechtdraad gedrenkt in zoutoplossing uit te klemmen en plaats deze in het voorste uiteinde van de naaldbuis. Sluit het vervolgens aan op de naaldkern.
  5. Rek de huid uit met de wijs- en middelvinger van de drukkende hand of de duim en wijsvinger. Houd de naald vast met de prikkende hand.
  6. Steek de naald snel loodrecht in de punt 0,25 cm onder de Shenshu (BL 23). Zie figuur 4A.
  7. Nadat de naaldpunt 0,5 cm onder de huid is bereikt, past u de naaldpunt aan, waarbij u de inbrengrichting centripetaal maakt, een hoek van 45° vormt met het huidoppervlak en schuin 0,5 cm inbrengt (Figuur 4B).
    OPMERKING: Het is belangrijk om voorzichtig te zijn bij het needen van de Shenshu (BL 23), die zich in de buurt van de nier bevindt. Diep inbrengen of herhaaldelijk optillen en stoten van de naald kan schade veroorzaken. Daarom adviseren wij een insteekdiepte van ongeveer 0,3-0,6 cm.
  8. Duw de naaldkern terwijl u de buis terugtrekt en implanteer de resorbeerbare chirurgische hechtdraad van 0.5 cm volledig in het spierweefsel van het acupunt van het acupunt (Figuur 4C).
  9. Trek de naald er langzaam uit en zorg ervoor dat er geen hechting zichtbaar is. Druk vervolgens het naaldgat met steriel droog katoen gedurende 10 s om bloeden te voorkomen. Als de draad zich buiten het lichaam bevindt nadat de lijn op acupunten is ingebed, trek deze dan uit en bedien deze opnieuw.

5. Postoperatieve zorg

  1. Plaats de rat postoperatief op een verwarmingskussen voor kleine dieren dat is ingesteld op een temperatuur van 32°C om het herstel na de anesthesie te vergemakkelijken. Zorg ervoor dat het dier volledig bij bewustzijn is en dat zijn conditie bevredigend is voordat u het terugbrengt naar zijn verblijf.
  2. Observeer na de operatie binnen een week tekenen van steriele ontstekingsreacties in het getroffen gebied. Deze tekenen kunnen roodheid, zwelling of een pusachtige afscheiding zijn. Meestal vereisen deze symptomen geen behandeling. Als er echter een overmatige hoeveelheid exsudaat is, laat het getroffen gebied dan weglopen en desinfecteren. Breng in dergelijke gevallen erytromycinezalf aan totdat de wond volledig is hersteld.

6. Gedragstesten en histologisch onderzoek

  1. Voer na de interventie in week 8 het Morris Water Maze (MWM) experiment 2,24 uit om hun leer- en geheugenvermogen te evalueren. Voer de leerproeven uit gedurende 5 dagen, met vier proeven per dag. Voer vervolgens een sondeproef uit na 24 uur vanaf de laatste acquisitiedag.
  2. Voer statistische vergelijkingen uit met behulp van statistische analysesoftware. Analyseer de gedragsgegevens van leervermogen door middel van eenrichtingsanalyse van variantie (ANOVA) en post-hoc Tukey's test. Beoordeel de significantie van gegevens over ontsnappingslatentie door middel van tweerichtingsanalyse van herhaalde metingen van variantie (ANOVA), gevolgd door de post-hoc Bonferroni-test. Een waarde van p <0,05 wordt in alle tests als significant beschouwd.
  3. Verdoof de ratten na de gedragsbeoordeling zoals hierboven en euthanaseer ze met intraperitoneale injecties van 150 mg/kg lichaamsgewicht pentobarbitalnatrium.
  4. Repareer de hersenen van de rat door middel van perfusie met behulp van 4% paraformaldehyde geperfundeerd via het vasculaire systeem25.
    1. Inbrengen en fixeren van de sondenaald
      1. Bereid een naald van 12 G voor en zorg ervoor dat deze recht is en geschikt om door het ventrikel van de rat te gaan. Zoek de ventrikel van de rat, meestal de linker hartkamer, en steek de naald erdoorheen in de opgaande aorta. Deze stap vereist precisie en een goed begrip van de anatomie van ratten.
      2. Zodra de naald op zijn plaats zit, gebruikt u een hemostaat om de sondenaald vast te klemmen in de buurt van het punt waar deze de aorta binnengaat. Dit zal helpen om de naald vast te zetten en te voorkomen dat deze beweegt.
      3. Zorg ervoor dat de klem strak genoeg is om de naald stevig vast te houden, maar niet zo strak dat de aorta wordt beschadigd of de bloedstroom wordt belemmerd. De sondenaald moet tijdens de procedure in de opgaande aorta blijven om een goede perfusie te behouden.
    2. Perfusie met normale zoutoplossing
      1. Bereid een spuit van 50 cc voor zonder naald voor de perfusie. Bevestig het andere uiteinde van de maagsondenaald, die zich buiten het lichaam van de rat bevindt, aan de spuit gevuld met normale zoutoplossing.
      2. Maak een kleine incisie om het rechter atriale aanhangsel door te snijden, zodat het bloed uit het hart kan stromen. Deze stap zorgt ervoor dat het bloed tijdens de perfusie wordt verdrongen door de zoutoplossing.
      3. Begin met het injecteren van de normale zoutoplossing in de opgaande aorta met een gestage en constante snelheid. Dit zal het bloed wegspoelen en de weefsels voorbereiden op fixatie.
      4. Houd de vloeistof in de gaten die uit het rechter atriumaanhangsel komt en wees voorbereid om de spuit indien nodig te vervangen om een continue perfusie met verse zoutoplossing te behouden.
        geplaatst, bereid je voor om te doordrenken met het fixeermiddel.
      5. Vervang de spuit met zoutoplossing door een spuit met 4% paraformaldehyde, een veelgebruikt fixeermiddel in de histologie. Ga verder met de perfusie met behulp van de paraformaldehyde om de weefsels op hun plaats te fixeren voor verdere verwerking en analyse.
        OPMERKING: Tijdens deze procedure is het van cruciaal belang om aseptische technieken te handhaven om infectie te voorkomen en om de rat voorzichtig te behandelen om letsel tot een minimum te beperken. Bovendien moet al het betrokken personeel worden getraind in de techniek om consistentie en effectiviteit te garanderen.
  5. Verwijder de hersenen van de rat en doe deze in een monsterflesje met 4% paraformaldehyde gedurende 24-48 uur bij 4 °C25,26. Voer stap voor stap ethanoldehydratie en xyleenbehandeling uit, gevolgd door conventionele continue coronale secties (4-5 μm) voor meting. Evalueer de morfologie en het verlies van hippocampusneuronen in elke groep met behulp van hematoxyline en eosine (H&E) kleuring (200x).
    OPMERKING: Een obductieonderzoek om te beoordelen op gastro-intestinale (GI) laesies werd niet uitgevoerd op de knaagdieren op basis van de afwezigheid van klinische tekenen die wijzen op gastro-intestinale stoornissen gedurende de experimentele periode. De dieren vertoonden geen openlijke bijwerkingen die de aanwezigheid van dergelijke pathologieën zouden suggereren.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit artikel introduceert de specifieke werkingsmethode van TEAT bij ratten die lijken op de ziekte van Alzheimer. Het bespreekt de kritieke operationele elementen van TEAT in experimenteel onderzoek om een referentie te bieden voor toekomstige studies.

TEAT verbetert het leren bij ratten die lijken op de ziekte van Alzheimer
Zoals geïllustreerd in het stroomdiagram (figuur 5), werd tijdens de adaptieve trainingsperiode waargenomen dat ratten in elke groep de omgeving observeerden tijdens het zwemmen. De analyse van de zwemsnelheid (figuur 6) toonde geen significant verschil tussen de groepen, wat wijst op consistente basisniveaus van bewegingssnelheid en visuele waarneming. Eventuele waargenomen verschillen in experimentele resultaten waren niet te wijten aan variaties in bewegingsvermogen of visuele waarneming.

De ratten ondergingen 5 dagen training in het zoeken naar platforms. In figuur 7A is te zien dat de bewegingstrajecten van elke groep ratten verschilden in de vroege en late stadia van de training. Op dag 2 zwommen de meeste groepen ontsnapte ratten willekeurig. Op dag 5 zwommen de ratten in de controlegroep echter met richting, terwijl de modelgroep ratten willekeurig langs de zwembadwand zwommen. De beweging van de TEA-groep ratten werd dichter in het doelkwadrant. Het experiment mat de ontsnappingslatentie, waarbij een kortere latentie sterkere capaciteiten aangeeft. Figuur 7B laat zien dat de modelgroep een verminderd leer- en geheugenvermogen vertoonde in vergelijking met de controlegroep. De TEA-groep vertoonde echter een significante verbetering van de verslechtering van het ruimtelijk referentiegeheugen bij ratten met AD-achtige pathologie.

TEAT verbetert het ruimtelijk geheugen bij ratten die lijken op de ziekte van Alzheimer
In de sondeproef geeft de locatie waar het dier tijd doorbrengt ruimtelijke biasaan 27. Ratten gebruiken vier primaire methoden om naar platforms te zoeken: edge-based, random-based, trend-based en lineair-based28. De resultaten geven aan dat elke groep ratten verschillende zoekstrategieën gebruikte (Figuur 8A). De controlegroep gebruikte voornamelijk lineaire en directionele zoekstrategieën, wat wijst op een sterk geheugen en het vermogen om de locatie van het platform te onthouden. Daarentegen vertoonden de ratten in de modelgroep een randachtige hoofdzoekstrategie, wat wijst op een significante afname van hun geheugenvermogen. Ze hebben niet geleerd om het platform te vinden of de locatie ervan te onthouden. De ratten in de TEA-groep vertoonden een op trends gebaseerde zoekstrategie. De baandichtheid was het hoogst in het kwadrant waar het oorspronkelijke platform zich bevond, evenals in de aangrenzende kwadranten. Dit geeft een geheugenverbetering aan ten opzichte van de modelgroep.

Figuur 8B en Figuur 8C tonen de resultaten van de verblijfsduur in het kwadrant van het oorspronkelijke platform en het aantal keren dat de ratten het platform overstaken. De ratten uit de modelgroep vertoonden een significante vermindering van hun verblijftijd in het oorspronkelijke platformkwadrant en het aantal keren dat ze het platform overstaken in vergelijking met de controlegroep (p <0,01). Vergeleken met de modelgroep vertoonden de ratten uit de TEA-groep een significante toename van hun verblijftijd in het oorspronkelijke platformkwadrant en het aantal keren dat ze het platform overstaken (p <0,01). Deze resultaten suggereren dat TEAT het ruimtelijk leren en geheugenstoornissen kan verbeteren bij ratten met AD-achtige pathologie.

De speen verhelpt de veroudering van de hippocampus bij ratten (Figuur 9). Vergeleken met de controlegroep vertoonden ratten in de modelgroep ernstige pathologische veranderingen, waaronder een significante vermindering van het aantal piramidale cellen en hun onregelmatige opstelling. Daarnaast werden nucleaire condensatie, neuronale degeneratie en andere afwijkingen waargenomen. Na de behandeling met TEAT nam het aantal hippocampale piramidale cellen bij ratten echter toe en waren ze beter georganiseerd. Hoewel sommige kernen condensatie vertoonden, leek de algehele celmorfologie normaler. Cellen waren dichter verdeeld en geordend, cytoplasmatische kleuring was consistenter en het oedeem rond de cellen was aanzienlijk verminderd. Met name normale piramidale cellen werden waargenomen.

figure-results-1
Figuur 1: Stroomdiagram van het experiment. Na 1 week aanpassing (week 0) werden 18 ratten in drie groepen ingedeeld: Controle, Model en TEAT. In week 1 tot en met week 7 kreeg de controlegroep injecties met zoutoplossing, terwijl de model- en TEA-groepen D-galactose kregen toegediend. De TEA-groep onderging bovendien draad-embedding acupunctuurtherapie in week 2, 4 en 6. Alle ratten werden in week 8 onderworpen aan de Morris waterdoolhoftest, gevolgd door euthanasie. Afkortingen: Adapt = adaptatie, Con = Controlegroep, Mod = Modelgroep, TEAT = Thread-embedding Acupunctuurtherapie groep, D-gal = D-galactose, MWM = de Morris waterdoolhoftest. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-2
Figuur 2: De locatie van het acupunt. (A) Het acupunt Baihui (GV 20) bij ratten. Het bevindt zich in het rechter midden van het pariëtale bot. (B) Het acupunt Shenshu (BL 23) bij ratten. Het bevindt zich 5 mm lateraal van de tweede lendenwervel. Afkortingen: GV = Governor Vessel, een concept in de Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM) dat verwijst naar de hoofdmeridiaan die langs de middellijn van het achterste aspect van het lichaam loopt, BL = Blaas, staat voor de Blaasmeridiaan, die in TCM overeenkomt met de Foot-Taiyang-meridiaan, een van de zes yang-meridianen, die langs de achterkant van het lichaam en de benen loopt. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-3
Figuur 3: Gedetailleerde draadinbedding van Baihui (GV 20). (A) De naald wordt horizontaal ingebracht in een hoek van 15° ten opzichte van het huidoppervlak, 0,1 cm onder het Baihui (GV 20) acupunt, waarbij de huid wordt samengeknepen om de procedure te vergemakkelijken. (B) Zodra de punt van de naald een positie van 0,1 cm boven het Baihui (GV 20) acupunt bereikt, wordt de naaldkern ingedrukt terwijl de naaldbuis wordt ingetrokken om de 0,2 cm resorbeerbare chirurgische hechtdraad volledig in het onderhuidse weefsel bij het acupunt te implanteren. Afkortingen: GV = Governor Vessel, een concept in de Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM) dat verwijst naar de hoofdmeridiaan die langs de middellijn van het achterste aspect van het lichaam loopt. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-4
Figuur 4: Gedetailleerde draadinbedding van Shenshu (BL 23). (A) De naald wordt snel loodrecht in het acupunt gestoken tot een diepte van 0,25 cm onder de Shenshu (BL 23). (B) Zodra de punt van de naald een diepte van 0,5 cm onder het huidoppervlak heeft bereikt, wordt de naald naar het midden van het acupunt geleid, waardoor een hoek van 45° met de huid ontstaat, en vervolgens schuin ingebracht tot een diepte van 0,5 cm. (C) Terwijl de naaldschacht naar voren wordt gebracht, wordt de buis ingetrokken, waardoor de volledige implantatie van een segment van 0,5 cm resorbeerbare chirurgische hechtdraad in het spierweefsel bij de Shenshu (BL 23) Acupunt. Afkortingen: BL = Blaas, staat voor de Blaasmeridiaan, die in TCM overeenkomt met de Voet-Taiyang meridiaan, een van de zes yang meridianen, die langs de achterkant van het lichaam en de benen loopt. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-5
Figuur 5: Het stroomschema van de WMW-test. De aanpassingstraining voorafgaand aan het experiment wordt aangeduid als dag 0, waarbij de motorische capaciteiten van de ratten worden geobserveerd en de zwemsnelheid statistisch wordt geanalyseerd. Dit wordt gevolgd door een vijfdaagse plaatsnavigatiefase (dag 1 tot 5), waarin de latentie om te ontsnappen (ontsnappingslatentie) wordt vergeleken en geanalyseerd tussen de verschillende groepen. Op dag 6 wordt een ruimtelijke sondeproef uitgevoerd om de tijd te beoordelen die in het doelkwadrant wordt doorgebracht (verblijftijd van het doelkwadrant) en het aantal perronkruisingen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-6
Figuur 6: Vergelijking van de zwemsnelheid (m/s) tussen de groepen. Deze figuur geeft de gemiddelde zwemsnelheden (in meters per seconde) weer van ratten in verschillende experimentele groepen, elk bestaande uit zes dieren (n=6). De foutbalken geven de standaarddeviatie aan. Er werden geen verschillen tussen groepen verkregen, zoals aangegeven door ns (p > 0,05). De statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van SPSS-software, waarbij alle gegevens zich aan een normale verdeling hielden. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-7
Figuur 7: De resultaten van WMW's plaatsnavigatie. (A) Dit panel presenteert de representatieve bewegingstrajectdiagrammen, die de navigatiepaden van ratten binnen elke experimentele groep illustreren tijdens de plaatsnavigatieproeven. (B) De ontsnappingslatentie, gemeten in seconden (s), wordt vergeleken tussen de groepen, waarbij elke groep bestaat uit zes ratten (n=6). Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van tweerichtingsherhaalde metingen ANOVA om de effecten binnen de proefpersonen in de loop van de navigatieproeven en de verschillen tussen de proefpersonen tussen de groepen te beoordelen. De gegevens voldoen aan de aannames voor de normale verdeling en worden weergegeven als het groepsgemiddelde ± de standaarddeviatie. Significante verschillen worden aangegeven met sterretjes (*p < 0,05, **p < 0,01) ten opzichte van de controlegroep en met hashtags (#p < 0,05, ##p < 0,01) ten opzichte van de modelgroep. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-8
Figuur 8: De resultaten van het sondespoor van WMW. (A) Het paneel toont representatieve bewegingstrajectdiagrammen die het ruimtelijke verkenningsgedrag van ratten in de sondeproef binnen elke experimentele groep vastleggen. (B) Deze grafiek vergelijkt de verblijftijd (in seconden, s) binnen het doelkwadrant tussen de groepen, waarbij het geheugen van de ratten van de platformlocatie wordt weerspiegeld. (C) De grafiek illustreert de frequentie (freq) waarmee ratten het platformgebied overstaken, wat hun ruimtelijke geheugenprestaties aangeeft. Elke groep bestond uit zes ratten (n=6) en de gegevens werden statistisch geanalyseerd met behulp van eenrichtings-ANOVA om de verschillen tussen de groepen te beoordelen. De gegevens houden zich aan een normale verdeling en worden gepresenteerd als de gemiddelde ± standaarddeviatie. Significante verschillen worden aangegeven met sterretjes (**p < 0,01) ten opzichte van de controlegroep en met hashtags (#p < 0,05, ##p < 0,01) ten opzichte van de modelgroep. **P < 0,01 vs. controlegroep, #p < 0,05 vs. modelgroep, ##p < 0,01 vs. modelgroep. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-9
Figuur 9: Beoordeling van hematoxyline- en eosinekleuring van het CA1-gebied van de hippocampus in rattengroepen bij een vergroting van 200x. (A) De controlegroep vertoont een typische neuronale structuur met goed bewaarde piramidale cellen. (B) De modelgroep vertoont uitgesproken pathologische veranderingen, gekenmerkt door een duidelijke afname van de dichtheid van piramidale cellen, donker gekleurde gedegenereerde neuronen en ongeordende rangschikking. (C) De TEA-groep vertoont een verbeterde hippocampusarchitectuur, met een verhoogd aantal piramidale cellen die ordelijker zijn en een meer normatieve morfologie bezitten. Ondanks incidentele nucleaire condensatie zijn de cellen dichter opeengepakt, vertonen ze uniforme cytoplasmatische kleuring en vertonen ze een significante vermindering van pericellulair oedeem. De aanwezigheid van normatieve piramidale cellen wordt met name waargenomen. Schaalbalk = 50 μm. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Interventie tijd
De etiologie van AD is complex en de pathogenese ervan blijft onzeker. Momenteel is er geen effectieve behandeling voor de ziekte en het verloop ervan is onomkeerbaar. Daarom is de academische gemeenschap het erover eens dat het belangrijk is om te focussen op de preventie en behandeling van AD. De preventie- en behandelingsstrategieën voor AD leggen de nadruk op vroege interventie, volgens het TCM-concept van het behandelen van aandoeningen voordat ze zich voordoen, met de nadruk op behandeling vóór het begin, overdracht en recidief. Het verzamelde onderzoek bij mensen 29,30 en knaagdieren31,32 heeft aangetoond dat vroege acupunctuur- en moxibustie-interventie significante resultaten kan opleveren zonder duidelijke bijwerkingen, waardoor het een veelbelovende potentiële methode is voor het voorkomen en behandelen van AD. Daarom werd in deze studie de behandeling toegediend tijdens het modelleringsproces. TEAT werd geïmplementeerd aan het begin van de D-gal intraperitoneale injectie.

Acupunt selectie
AD is een ernstige neurodegeneratieve ziekte die voornamelijk de hersengebieden aantast die verantwoordelijk zijn voor geheugen, taal, redeneren en sociaal gedrag. De hersenen (Nao) worden in de TCM beschouwd als de zee van merg (Sui). Het merg (Sui) is gemaakt van essentie (Jing), een stof die uniek is in TCM en waarvan wordt aangenomen dat het de essentiële constitutionele kracht, vitaliteit en weerstand van het lichaam is. Essence (Jing) wordt voornamelijk opgeslagen in de nieren (Shen). Als de essentie van de nieren (Shen Jing) zwak is, kunnen de hersenen (Nao) te weinig voeding krijgen en kunnen cognitieve stoornissen optreden. Daarom suggereert TCM dat het versterken van de nieren en het profiteren van de essentie (Jing) kan helpen de hersenfunctie te verbeteren. De hersenen kunnen direct worden beïnvloed door bepaalde meridianen, zoals het Governor-vat (GV) en de blaasmeridiaan van voet Taiyang (BL), wanneer ze de hersenen binnenkomen. De combinatie van het Governor-vat (GV) en de blaasmeridiaan van voet Taiyang (BL) die wordt gebruikt voor het voorkomen en behandelen van AD wordt veel gebruikt 33,34. Baihui (GV 20) is een acupunt gelegen op het hoekpunt van het hoofd en maakt deel uit van het Governor-schip. Volgens de literatuur heeft Baihui (GV 20) in onderzoeken waarbij acupunctuur en moxibustie worden gebruikt voor de preventie en behandeling van AD, de hoogste frequentie van voorkomen en wordt het beschouwd als een kritiek punt in de formule35. De Shenshu (BL 23) is een acupunt op de blaasmeridiaan van voet Taiyang. Het bevindt zich 1,5 cun lateraal van de ondergrens van de processus spinosus van de tweede lendenwervel. Als het nier terug transporteren-Shu-punt, kan het alle aspecten van de nieren versterken, inclusief nier yin, yang, essentie (Jing) en qi. Acupunctuur en moxibustie in Baihui (GV 20) en Shenshu (BL 23) kunnen de cognitieve functie verbeteren en de symptomen van AD op verschillende manieren verlichten36,37.

Intervaltijd
De operationele normen van TEAT38 schrijven voor dat het behandelingsinterval en het verloop van de behandeling moeten worden bepaald op basis van de toestand van de ziekte en de geselecteerde operatieplaats, met een interval van 1 week tot 1 maand. Het verloop van de behandeling kan variëren van 1 tot 5 keer. Deze suggestie kan ook worden gevolgd in proefdieronderzoek. Op basis van de beoordeelde literatuur39 wordt de behandeling over het algemeen eenmaal per week of om de 2 weken toegediend, waarbij het in de meeste gevallen gaat om 4-8 opeenvolgende behandelingen. Het experiment duurde 49 dagen, waarin de draden werden begraven op de 14e, 28e en 42edag.

Hulpmiddel en methoden
In het huidige proefdieronderzoek worden verschillende draadinbeddingstools gebruikt. Deze omvatten nr. 740 of nr. 941 wegwerpnaalden voor het inbedden van draad, zelf-opnieuw uitgevonden naalden en nr. 12 lumbaalpunctienaald42. De zelf opnieuw uitgevonden naalden gebruiken spuiten nr. 5-7 als buis en een geschikte filiforme naald voor de naaldkern. De punt van de naald is van tevoren al gladgestreken. Bijvoorbeeld, in een onderzoek met SD-ratten met een gewicht van 250 ± 20 g (maandleeftijd niet gespecificeerd in de tekst), kiest u de spuit nr. 7 en de filiforme naald van 0,30 x 0,40 mm43,44. De zelf opnieuw uitgevonden naalden moeten echter strikt worden gedesinfecteerd, waardoor ze niet op grote schaal kunnen worden gebruikt. Als de punt van de naald te groot of te scherp is, kan dit bloedvaten en zenuwen beschadigen, waardoor de kans op blauwe plekken toeneemt45. Lumbaalpriknaalden, die een grote diameter en scherpe punten hebben, hebben meer kans om bloedvaten en zenuwen te beschadigen. De wegwerp inbeddingsnaald wordt het meest gebruikt in de klinische praktijk39. Het is handiger in gebruik en veiliger in gebruik in vergelijking met zelf opnieuw uitgevonden naalden en lumbaalpunctienaalden, waardoor het ideaal is voor TEAT. Bovendien is het doel van het experiment om de menselijke gezondheid te verbeteren. Daarom moeten dierstudies de klinische situatie weerspiegelen. Daarom is het raadzaam om wegwerpnaalden voor het inbedden van schroefdraad te gebruiken als hulpmiddelen voor het inbedden van draad.

Catgut was het primaire draadmateriaal dat in TEAT werd gebruikt, maar vanwege weefselafstoting en dierlijke ingrediënten is het vervangen door biosynthetisch opneembare chirurgische hechtingen. Hechtingen zijn verkrijgbaar in verschillende maten en moeten worden afgestemd op de naald, zoals nr. 7 voor 4-0 of 3-0 hechtingen. In dieronderzoek worden voornamelijk 3-041, 4-046 en 5-047 gebruikt. De meeste hechtingen zijn 1-2 cm lang. Knaagdieren hebben echter veel kleinere lichamen dan mensen, dus er is een gebrek aan de juiste maat voor hun lichaamsgrootte. Daarom moeten onderzoekers hechtingen in segmenten van 0,2-0,5 cm snijden om ze geschikt te maken voor knaagdieren. Daarom wordt aanbevolen om hechtingen na het snijden en voor het weken af te spoelen met schoon en steriel gedestilleerd water of zoutoplossing voor later gebruik of onmiddellijke toepassing om het risico op infectie te verminderen46.

Sommige studies hebben gedetailleerde vereisten voorgesteld voor de inbeddingsmethode, zoals het snel inbrengen van naalden in het acupunt van ongeveer 0,5 cm onder het acupunt naar het acupunt48. Dit is belangrijk omdat knaagdieren klein zijn. Naast het hebben van overvloedig spierweefsel in hun onderste ledematen, is hun onderhuidse weefsel en spierlagen in het hoofd, de rug en de buik relatief zwak. Daarom moet hier de kwestie van de insteekpunten en de insteekhoek van de TEAT in dierproeven worden benadrukt. Bij het uitvoeren van speen op de onderste ledematen van knaagdieren is directe needling op de acupunten mogelijk. Wat het lichaam betreft, wordt aanbevolen om de naald onder de acupunten in te brengen (de afstand kan flexibel worden aangepast aan de lengte van het draadlichaam) met behulp van schuine naalden (<45°) of platte naalden (<15°) om schade aan de inwendige organen te voorkomen.

Potentieel van TEAT voor de preventie en behandeling van de ziekte van Alzheimer
De laatste tijd is er onderzoek naar TEAT in opkomst, hoewel de effecten en mechanismen ervan ongrijpbaar blijven. Zoals hierboven vermeld, kan TEAT AD-gerelateerde risicofactoren verbeteren, zoals obesitas13,14, diabetes15, slapeloosheid16, postmenopauzale osteoporose17 en depressie18. Het heeft een gunstig effect op leer- en geheugenstoornissen bij VD-ratten19. TEAT reguleert het lipidenmetabolisme via de PPAR-route om weefselbeschadiging te verbeteren bij door inspanning veroorzaakte vermoeide ratten49 en oefent ontstekingsremmende en pijnstillende effecten uit bij intermitterende muizen die door koude stress worden geïnduceerd via de TRPV1-route50. In de huidige studie toonden we aan dat draad-embedding behandeling bij AD-achtige ratten leer- en geheugenstoornissen zou kunnen verlichten door ruimtelijk geheugenverlies te verbeteren en gedegenereerde cellen in hippocampus CA1-regio's te verminderen. Vanwege het gebrek aan uniformiteit en standaardisatie van het huidige onderzoek in verschillende kritieke elementen van de TEA-werking, waaronder de inbeddingsmethode, de inbeddingstool, de draad en de inbeddingsintervalperiode, bespreekt dit artikel echter voornamelijk de kritieke operationele elementen van TEAT in experimenteel onderzoek. Dit onderzoek was slechts een voorlopige verkenning van het effect van TEAT op AD, waarvoor veel meer aanvulling en verbetering nodig was om de exacte moleculair en interactie tussen hen te verduidelijken. Desalniettemin bood het een nieuwe proef voor het onvermijdelijke AD-proces, dat op de een of andere manier de zware last op het openbare gezondheidszorgsysteem zou kunnen verlichten.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren dat ze niets te onthullen hebben.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd ondersteund met fondsen van de National Natural Science Foundation of China (NSFC) nrs. 82374564 (naar YJD) en nrs. 82074566 (naar YJD) en van Sun Guojie Inheritance Base for TCM Acupuncture-Moxibustion van de World Federation of Acupuncture-Moxibustion Societies in Wuhan, China (World Federation of Acupuncture-Moxibustion Societies [2019] nr. 26) (naar YJD) en het National Famous TCM Inheritance Studio-bouwproject van de National Administration of Traditional Chinese Medicine, China (de Nationale Administratie van Traditionele Chinese Geneeskunde [2022] nr. 5) (naar YJD).

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
0.9% saline, 4% paraformaldehyde, Hematoxylin, Eosin Y (water-soluble), absolute ethanol, 0.01M PBS powder, xylene, hydrochloric acid, embedded paraffin, neutral gumsinopharm (www.sinopharm.com)
5-0 absorbable surgical suturebodamedical (www.bodamedical.com)
70% alcohol, iodophor, cotton ballUsed for disinfection.
chloral hydratesigmaC8383
coverslips, glass slidesGuangzhou Wuqiang Experimental Equipment Co., Ltd
DehydratorWuhan Junjie JT-12J Computerized Biological Tissue Dehydrator
DELUXE THERMOSTAT HEAT MATZhenhua InstrumentsFor maintaining the body temperature of rats.
D-galactosesigmaG0750
electric men's beard trimmerUsed for shaving rats.
Electronic scale for small animals (ZK-DST)Henan Zhike Information Technology Co., Ltd
erythromycin ointmentfrontpharm
glass dishUsed to place cut absorbable sutures.
High-Pressure Steam Sterilization Pot (YM100Z)Shanghai Sanshen medical equipment factoryFor sterilization of surgical instruments.
Ice Maker (CMB40)Shanghai Sheyan Instrument Co., Ltd.
Microscope (BX-53)OLYMPUS
milk powderUsed for the MWM test.
Morris Water Maze Video Tracking System & Data Analysis Software (Version: Watermaze 2.0)Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd
No.6 thread-embedding needlebodamedical (www.bodamedical.com)
ophthalmic scissors, trays, tweezers
Pathology Microtome  (RM 2016)LEICA, Germany
pentobarbitalGermanyP11011
permanent markerUsed to mark the acupoint.
Slicing knives (R35)Feathers, Japanese
soapUsed to wash hands.
sterile gloves

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Acupoint catgut embedding for obesity: A protocol systematic review. Medicine (Baltimore). 99 (51), e23728(2020).">Huang, W., et al. Acupoint catgut embedding for obesity: A protocol systematic review. Medicine (Baltimore). 99 (51), e23728(2020).
  2. Acupoint catgut embedding improves senescence in a rat model of ageing by regulating mitophagy via the pink1 pathway. J Cell Mol Med. 25 (8), 3816-3828 (2021).">Zhou, M., et al. Acupoint catgut embedding improves senescence in a rat model of ageing by regulating mitophagy via the pink1 pathway. J Cell Mol Med. 25 (8), 3816-3828 (2021).
  3. Acupoint catgut-embedding therapy: Superiorities and principles of application. Zhongguo Zhen Jiu. 32 (10), 947-951 (2012).">Zhang, X., et al. Acupoint catgut-embedding therapy: Superiorities and principles of application. Zhongguo Zhen Jiu. 32 (10), 947-951 (2012).
  4. Observation on therapeutic effect of 160 cases of epilepsy treated with acupoint catgut embedding therapy. Zhongguo Zhen Jiu. 36 (11), 14-15 (2001).">Lin, J., Deng, Q. Observation on therapeutic effect of 160 cases of epilepsy treated with acupoint catgut embedding therapy. Zhongguo Zhen Jiu. 36 (11), 14-15 (2001).
  5. Acupuncture combined with catgut embedding therapy for treatment of 158 cases of facial paralysis. Zhongguo Zhen Jiu. 25 (3), 23-24 (2005).">Li, L. Acupuncture combined with catgut embedding therapy for treatment of 158 cases of facial paralysis. Zhongguo Zhen Jiu. 25 (3), 23-24 (2005).
  6. Questionnaire investigation on cost-effectiveness analysis of acupuncture for migraine. Zhongguo Zhen Jiu. 35 (4), 377-383 (2015).">Wang, J., Wu, Z., Huo, J., Yuan, Y. Questionnaire investigation on cost-effectiveness analysis of acupuncture for migraine. Zhongguo Zhen Jiu. 35 (4), 377-383 (2015).
  7. Comparation of effect and cost-benefit analysis between acupoint catgut-embedding and electroacupuncture on simple obesity. Zhongguo Zhen Jiu. 31 (10), 883-886 (2011).">Huang, L., Pan, W. Comparation of effect and cost-benefit analysis between acupoint catgut-embedding and electroacupuncture on simple obesity. Zhongguo Zhen Jiu. 31 (10), 883-886 (2011).
  8. Tracking pathophysiological processes in alzheimer's disease: An updated hypothetical model of dynamic biomarkers. Lancet Neurol. 12 (2), 207-216 (2013).">Jack, C. R., et al. Tracking pathophysiological processes in alzheimer's disease: An updated hypothetical model of dynamic biomarkers. Lancet Neurol. 12 (2), 207-216 (2013).
  9. Toward defining the preclinical stages of alzheimer's disease: Recommendations from the national institute on aging-alzheimer's association workgroups on diagnostic guidelines for alzheimer's disease. Alzheimer's Dementia. 7 (3), 280-292 (2011).">Sperling, R. A., et al. Toward defining the preclinical stages of alzheimer's disease: Recommendations from the national institute on aging-alzheimer's association workgroups on diagnostic guidelines for alzheimer's disease. Alzheimer's Dementia. 7 (3), 280-292 (2011).
  10. New frontiers in the prevention, diagnosis, and treatment of alzheimer's disease. J Alzheimers Dis. 82, S51-S63 (2021).">Guzman-Martinez, L., et al. New frontiers in the prevention, diagnosis, and treatment of alzheimer's disease. J Alzheimers Dis. 82, S51-S63 (2021).
  11. Chinese herbal medicine for alzheimer's disease: Clinical evidence and possible mechanism of neurogenesis. Biochem Pharmacol. 141, 143-155 (2017).">Yang, W. T., et al. Chinese herbal medicine for alzheimer's disease: Clinical evidence and possible mechanism of neurogenesis. Biochem Pharmacol. 141, 143-155 (2017).
  12. A review of the pathogenesis and chinese medicine intervention of alzheimer's disease. J Integr Neurosci. 22 (1), 2(2022).">Zhao, J. L., Yang, J., Ding, L., Wang, F., Lin, L. A review of the pathogenesis and chinese medicine intervention of alzheimer's disease. J Integr Neurosci. 22 (1), 2(2022).
  13. Therapeutic effect of acupoint catgut embedding in abdominally obese women: A randomized, double-blind, placebo-controlled study. J Womens Health (Larchmt). 27 (6), 782-790 (2018).">Chen, I. J., Yeh, Y. H., Hsu, C. H. Therapeutic effect of acupoint catgut embedding in abdominally obese women: A randomized, double-blind, placebo-controlled study. J Womens Health (Larchmt). 27 (6), 782-790 (2018).
  14. Effect of catgut embedding at acupoints versus non-acupoints in abdominal obesity: A randomized clinical trial. J Tradit Chin Med. 43 (4), 780-786 (2023).">Zhang, X., et al. Effect of catgut embedding at acupoints versus non-acupoints in abdominal obesity: A randomized clinical trial. J Tradit Chin Med. 43 (4), 780-786 (2023).
  15. Acupoint catgut embedding for diabetic gastroparesis: A protocol of systematic review. Medicine (Baltimore). 98 (43), e17718(2019).">Xia, T., Yang, Y., Li, W., Tang, Z., Guo, Y. Acupoint catgut embedding for diabetic gastroparesis: A protocol of systematic review. Medicine (Baltimore). 98 (43), e17718(2019).
  16. Acupoint catgut embedding alleviates insomnia in different chinese medicine syndrome types: A randomized controlled trial. Chin J Integr Med. 25 (7), 543-549 (2019).">Xu, F., et al. Acupoint catgut embedding alleviates insomnia in different chinese medicine syndrome types: A randomized controlled trial. Chin J Integr Med. 25 (7), 543-549 (2019).
  17. Effects of acupoint catgut embedding on the postmenopausal osteoporosis patients and related mechanism. Am J Transl Res. 13 (3), 1789-1798 (2021).">Shi, N., et al. Effects of acupoint catgut embedding on the postmenopausal osteoporosis patients and related mechanism. Am J Transl Res. 13 (3), 1789-1798 (2021).
  18. The efficacy and safety of acupoint catgut embedding therapy for depression: A protocol for systematic review and meta-analysis. Front Psychiatry. 14, 1331780(2023).">Li, Y., Zhou, J., Wei, Z., He, X., Kejimu, S. The efficacy and safety of acupoint catgut embedding therapy for depression: A protocol for systematic review and meta-analysis. Front Psychiatry. 14, 1331780(2023).
  19. Acupoint catgut embedding improves learning and memory impairment in vascular dementia rats. Ann Transl Med. 11 (2), 108(2023).">Zhu, S., et al. Acupoint catgut embedding improves learning and memory impairment in vascular dementia rats. Ann Transl Med. 11 (2), 108(2023).
  20. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like pathology and memory deficits probably via inhibition of gsk3β/mtor signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 1428752(2020).">Yu, C. C., et al. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like pathology and memory deficits probably via inhibition of gsk3β/mtor signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 1428752(2020).
  21. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like inflammation and memory deficits, probably via modulating the microbiota-gut-brain axis. Iran J Basic Med Sci. 24 (3), 341-348 (2021).">He, C., et al. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like inflammation and memory deficits, probably via modulating the microbiota-gut-brain axis. Iran J Basic Med Sci. 24 (3), 341-348 (2021).
  22. Puerarin ameliorates d-galactose induced enhanced hippocampal neurogenesis and tau hyperphosphorylation in rat brain. J Alzheimers Dis. 51 (2), 605-617 (2016).">Hong, X. P., et al. Puerarin ameliorates d-galactose induced enhanced hippocampal neurogenesis and tau hyperphosphorylation in rat brain. J Alzheimers Dis. 51 (2), 605-617 (2016).
  23. Research progress of Shenshu (BL 23). Zhongguo Zhen Jiu. 37 (8), 845-850 (2017).">Gao, S., Li, R., Tian, H. H. Research progress of Shenshu (BL 23). Zhongguo Zhen Jiu. 37 (8), 845-850 (2017).
  24. Sripanidkulchai B. Curcuma comosa improves learning and memory function on ovariectomized rats in a long-term morris water maze test. J Ethnopharmacol. 130 (1), 70-75 (2010).">Su J, S. K., Wyss, J. m Sripanidkulchai B. Curcuma comosa improves learning and memory function on ovariectomized rats in a long-term morris water maze test. J Ethnopharmacol. 130 (1), 70-75 (2010).
  25. Whole animal perfusion fixation for rodents. J Vis Exp. (65), e3564(2012).">Gage Gj, K. D., Shain, W. Whole animal perfusion fixation for rodents. J Vis Exp. (65), e3564(2012).
  26. Removal of discrete fresh regions of the rat brain. Brain Res. 80 (1), 111-115 (1974).">Jacobowitz, D. M. Removal of discrete fresh regions of the rat brain. Brain Res. 80 (1), 111-115 (1974).
  27. Assessing spatial learning and memory in rodents. Ilar j. 55 (2), 310-332 (2014).">Vorhees, C. V., Williams, M. T. Assessing spatial learning and memory in rodents. Ilar j. 55 (2), 310-332 (2014).
  28. Methodology of morris water maze for detecting animal learning and memory levels. Chinese Journal of gerontology. 37 (24), 4(2017).">Zhou, J., et al. Methodology of morris water maze for detecting animal learning and memory levels. Chinese Journal of gerontology. 37 (24), 4(2017).
  29. Effectiveness and safety of acupuncture for the treatment of Alzheimer's disease: A systematic review and meta-analysis. Front Aging Neurosci. 12, 98(2020).">Wang, Y., et al. Effectiveness and safety of acupuncture for the treatment of Alzheimer's disease: A systematic review and meta-analysis. Front Aging Neurosci. 12, 98(2020).
  30. Acupuncture for patients with mild to moderate alzheimer's disease: A randomized controlled trial. BMC Complement Altern Med. 17 (1), 556(2017).">Jia, Y. J., et al. Acupuncture for patients with mild to moderate alzheimer's disease: A randomized controlled trial. BMC Complement Altern Med. 17 (1), 556(2017).
  31. Experimental evidence of the benefits of acupuncture for alzheimer's disease: An updated review. Front Neurosci. 14, 549772(2020).">Yu, C. C., et al. Experimental evidence of the benefits of acupuncture for alzheimer's disease: An updated review. Front Neurosci. 14, 549772(2020).
  32. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of tfeb (transcription factor eb). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).">Zheng, X., et al. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of tfeb (transcription factor eb). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).
  33. Treatment of alzheimer's disease by using "tongdu qishen" acupuncture therapy. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 22 (8), 2634-2640 (2020).">Hu, J., Zhao, J., Lu, M., Li, Z. Treatment of alzheimer's disease by using "tongdu qishen" acupuncture therapy. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 22 (8), 2634-2640 (2020).
  34. Visualization analysis of literature on acupuncture-moxibustion treatment of alzheimer's disease based on citespace. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 24 (10), 3998-4006 (2022).">Liang, X., et al. Visualization analysis of literature on acupuncture-moxibustion treatment of alzheimer's disease based on citespace. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 24 (10), 3998-4006 (2022).
  35. Acupoint selection rules in treating alzheimer's disease with acupuncture and moxibustion in china and abroad based on data mining. Journal of Yunnan University of Chinese Medicine. 44 (02), 46-52 (2021).">Xia, Y. W., et al. Acupoint selection rules in treating alzheimer's disease with acupuncture and moxibustion in china and abroad based on data mining. Journal of Yunnan University of Chinese Medicine. 44 (02), 46-52 (2021).
  36. Effects of serum acetyl choline and amyloid-beta protein by using acupuncture baihui ( gv20) and yongguan ( ki1) acupoint to treat patients with alzheimer disease. World Chinese Medicine. 13 (11), 2855-2857 (2018).">Zhang, H., Zhu, M., Zhang, W. Effects of serum acetyl choline and amyloid-beta protein by using acupuncture baihui ( gv20) and yongguan ( ki1) acupoint to treat patients with alzheimer disease. World Chinese Medicine. 13 (11), 2855-2857 (2018).
  37. effect of electroacupuncture of different acupoint groups on learning-memory ability and expression of il-1β and tnf-α in hippocampus and prefrontal cortex in rats with alzheimer's disease. Zhen Ci Yan Jiu. 45 (8), 617-622 (2020).">Wang, Y. Y., et al. effect of electroacupuncture of different acupoint groups on learning-memory ability and expression of il-1β and tnf-α in hippocampus and prefrontal cortex in rats with alzheimer's disease. Zhen Ci Yan Jiu. 45 (8), 617-622 (2020).
  38. study on standardization of thread-embedding technique: Elucidation on the establishment of the national standard standardized manipulation of acupuncture and moxibustion, part x, thread-embedding. Zhongguo Zhen Jiu. 29 (5), 401-405 (2009).">Guan, L., Zuo, F., Song, Q., Shi, X. study on standardization of thread-embedding technique: Elucidation on the establishment of the national standard standardized manipulation of acupuncture and moxibustion, part x, thread-embedding. Zhongguo Zhen Jiu. 29 (5), 401-405 (2009).
  39. bibliometric analysis on key elements of clinical application of acupoint catgut embedding therapy in recent ten years. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (9), 830-836 (2022).">Cheng, L., et al. bibliometric analysis on key elements of clinical application of acupoint catgut embedding therapy in recent ten years. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (9), 830-836 (2022).
  40. Experimental study on the effects of acupoint thread burial and acupoint injection on insulin resistance and islet morphology in diabetic rats. Hubei University of Traditional Chinese Medicine. , (2015).">Dan, Y. Experimental study on the effects of acupoint thread burial and acupoint injection on insulin resistance and islet morphology in diabetic rats. Hubei University of Traditional Chinese Medicine. , (2015).
  41. To investigate the regulation of th1/th2 balance in rats with allergic rhinitis by acting on dc at yingxiang acupoint thread burial. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).">Huang, Y. To investigate the regulation of th1/th2 balance in rats with allergic rhinitis by acting on dc at yingxiang acupoint thread burial. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).
  42. Influence of catgut implantation at acupoints on splenic lymphocyte nuclear factor (nf-κb p65) and correlated signaling molecules (β2ar) in rats with experimental colitis. World J Acupuncture-Moxibustion. 20 (4), 48-53 (2010).">Zhang, X. Y., Shen, L., Fan, H., Liao, Y., Liang, L. Influence of catgut implantation at acupoints on splenic lymphocyte nuclear factor (nf-κb p65) and correlated signaling molecules (β2ar) in rats with experimental colitis. World J Acupuncture-Moxibustion. 20 (4), 48-53 (2010).
  43. Experimental study on the effect of acupoint thread insertion combined with moxibustion on il-6/jak/stat3 signaling pathway in rats with ulcerative colitis. Guizhou Medical University. , (2020).">Yu, Q. H. Experimental study on the effect of acupoint thread insertion combined with moxibustion on il-6/jak/stat3 signaling pathway in rats with ulcerative colitis. Guizhou Medical University. , (2020).
  44. Effect of moxibustion combined with acupoint catgut embedding on il-6/jak/stat3 signaling pathway in colonic mucosa of ulcerative colitis rats. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (6), 525-530 (2022).">Wang, Y. J., et al. Effect of moxibustion combined with acupoint catgut embedding on il-6/jak/stat3 signaling pathway in colonic mucosa of ulcerative colitis rats. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (6), 525-530 (2022).
  45. Application development of acupoint embedding line body and needle. China J Tradl Chinese Med Pharm. 35 (11), 5644-5647 (2020).">Ke, C., et al. Application development of acupoint embedding line body and needle. China J Tradl Chinese Med Pharm. 35 (11), 5644-5647 (2020).
  46. Regulatory effect of acupoint thread-embedding therapy at the shu points of the five organs on the hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis in senescent rats under stress. Hunan J Tradl Chinese Med. 34 (05), 180-182 (2018).">Yue, Y. R., et al. Regulatory effect of acupoint thread-embedding therapy at the shu points of the five organs on the hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis in senescent rats under stress. Hunan J Tradl Chinese Med. 34 (05), 180-182 (2018).
  47. Experimental study on the intervention of acupoint thread insertion in the expression of bcl-2 and bax in cochlear spiral ganglion cells in presbycus mice. Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).">Bao, J. Experimental study on the intervention of acupoint thread insertion in the expression of bcl-2 and bax in cochlear spiral ganglion cells in presbycus mice. Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
  48. Effect of acupoint thread insertion on nasal mucosa th1/th2, treg/th17 in rats with allergic rhinitis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2013).">Liu, M. Effect of acupoint thread insertion on nasal mucosa th1/th2, treg/th17 in rats with allergic rhinitis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2013).
  49. Acupoint catgut embedding improves lipid metabolism in exercise-induced fatigue rats via the ppar signaling pathway. Animals (Basel). 13 (4), 558(2023).">Song, Y., et al. Acupoint catgut embedding improves lipid metabolism in exercise-induced fatigue rats via the ppar signaling pathway. Animals (Basel). 13 (4), 558(2023).
  50. Acupoint catgut embedding diminishes fibromyalgia pain through trpv1 in the mouse brain. J Integr Neurosci. 22 (4), 97(2023).">Lai, P. C., Yen, C. M., Hsiao, I. H., Chen, Y. H., Lin, Y. W. Acupoint catgut embedding diminishes fibromyalgia pain through trpv1 in the mouse brain. J Integr Neurosci. 22 (4), 97(2023).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Thread Embedding TherapyAcupuncture TherapyAlzheimer DiseaseLearning And MemoryMorris Water MazeAcupoint SelectionBiodegradable SutureAnimal ModelSpatial MemoryHistological Examination

Related Articles