Bedieningsprocedure en voorzorgsmaatregelen van Lingnan Fire-Needle-therapie bij osteoporosemodelratten

Samenvatting

Hier presenteren we een protocol voor de toepassing van Lingnan Fire-Needle-therapie bij de interventie van osteoporosemodelratten.

Samenvatting

In vergelijking met filiforme naaldtherapie heeft vuurnaaldtherapie zowel de stimulatie van naalden als het verwarmende effect van warmte, waardoor het onverwachte effecten heeft op sommige chronische ziekten en ongeneeslijke ziekten. Osteoporose (OP) komt veel voor bij postmenopauzale vrouwen en mannen van middelbare leeftijd en ouderen, en de behandelingscyclus is lang. Volgens de Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM) heeft Lingnan vuurnaaldtherapie potentieel aangetoond bij de behandeling van osteoporose. Er is echter nog een lange weg te gaan voordat het op grote schaal kan worden gebruikt. Dit artikel richt zich op de toepassing van Lingnan vuurnaaldtherapie bij de interventie van OP bij ratten. Het omvat de selectie van naaldgereedschappen, de selectie van acupunctuurpunten, de positionering van de lichamen van ratten en fixatiemethoden. We schetsen ook de stappen en voorzorgsmaatregelen die moeten worden genomen tijdens en na het naalden met vuurnaalden. Het experiment werd gedaan met drie groepen: een normale groep, een modelgroep en een vuurnaaldgroep, elk met 10 ratten. De ratten in de vuurnaaldgroep werden gedurende zes sessies behandeld met vuurnaaldinterventie. Na de interventieperiode verzamelden we femurmonsters en voerden we micro-CT-scans uit. De resultaten suggereren dat fire needling de botmorfologie en mineraaldichtheid bij OP-ratten kan verbeteren. Deze informatie kan dienen als methodologische basis voor het uitvoeren van fundamenteel onderzoek naar vuurnaaldtherapie.

Inleiding

De Chinese geneeskunde is van mening dat factoren zoals klimaat en omgeving de lichaamsbouw van een persoon kunnen beïnvloeden, wat op zijn beurt het optreden en de ontwikkeling van ziekten beïnvloedt. De Lingnan-regio van China, voornamelijk inclusief Guangdong, Guangxi en het eiland Hainan, ligt in de regio met het tropische moessonklimaat. Als gevolg hiervan zijn mensen die lange tijd in deze regio wonen vatbaar voor een vorm van milttekort. In sommige gevallen verspreidt het zich naar de nieren en de lever, wat leidt tot de prevalentie van osteoporose¹. De milt en maag functioneren bij het transporteren en absorberen van water en granen, die de bron zijn van qi en bloedbiochemie, terwijl de lever helpt bij het onderhouden van het merg. Botvoeding is dus afhankelijk van de toevoer van de milt, maag en lever. In de Chinese geneeskunde is de nier in staat om merg te genereren en botten te versterken, en de vitaliteit ervan heeft een directe invloed op de sterkte en functie van botten. Daarom is nierdeficiëntie direct gerelateerd aan osteoporose. Volgens de TCM zijn leverdeficiëntie (Gan)-nier (Shen) en gebrek aan essentie (Jing) de onderliggende oorzaken. In sommige gevallen kan ondervoeding optreden als gevolg van een tekort aan milt (Pi) en maag (Wei) of een onbalans van beide. Dat wil zeggen, het tekort aan de lever (Gan), nieren (Shen), milt (Pi) en maag (Wei) zijn de hoofdoorzaken, terwijl externe qi (Xie qi) meridianen blokkeert en botten en spieren beschadigt. Volgens de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) is OP een medische aandoening die wordt gekenmerkt door een lage botmassa en weefselverslechtering2^, wat een ernstige zorg is voor ouderen. De selectie van geschikte interventies is cruciaal voor de preventie en behandeling van osteoporose.

Moderne acupuncturisten hebben een uniek Lingnan-kenmerk van vuurnaaldtherapie ontwikkeld door het klimaat van Lingnan en de fysieke kenmerken van Lingnan-mensen^te combineren. Brandnaaldtherapie is een soort behandelmethode waarbij speciale naalden rood worden gebrand en snel in specifieke delen of acupunten van het menselijk lichaam worden doorboord om verschillende aandoeningen te behandelen. Deze methode wordt veel gebruikt bij huidziekten, musculoskeletale en gewrichtsaandoeningen, neurologische aandoeningen en andere systemische ziekten en vertoont een goede werkzaamheid⁴. De behandeling van osteoporose met vuurnaalden wordt al heel lang in klinieken gebruikt en heeft een beter genezend effect dan eenvoudige acupunctuur of orale toediening van traditionele Chinese geneeskunde ^5,6,7. De Lingnan-vuurnaaldtherapie integreert acupunctuur, driesnijdende naalden en littekenmoxibustie. Het kan de qi en bloedcirculatie in de meridianen verbeteren terwijl het de nier verwarmt. Deze behandeling kan zowel bloedstasis als nierdeficiëntie (Shen) aanpakken, die bijdragen aan de pathogenese van OP in TCM. Bovendien heeft het de voordelen dat het goedkoop is, snelle effecten heeft, een korte behandelingsperiode heeft en veilig is. Er is echter een gebrek aan onderzoek naar het mechanisme ervan. Dit artikel introduceert een specifieke procedure van Lingnan Fire-Needle bij osteoporosemodelratten en biedt een methodologische basis voor het uitvoeren van gerelateerd fundamenteel onderzoek.

Protocol

Alle experimenten werden uitgevoerd volgens de National Institutes of Health - Guide for the Care and Use of Laboratory Animals en werden goedgekeurd door de Hubei University of TCM - Institutional Animal Care and Use Committee. Volwassen vrouwelijke Sprague-Dawley (SD) ratten, met een gewicht van 220 ± 20 g, werden gebruikt voor de test. Alle ratten werden gehouden op een licht/donkercyclus van 12 uur bij 23 ± 1 °C en een luchtvochtigheid van 40%-50%, met vrije toegang tot voedsel en water.

1. Preoperatieve voorbereiding

1. Ontwerp van de groep
   1. Na genotypering van 30 vrouwelijke ratten van 3 maanden oud, verdeel je ze willekeurig in drie groepen (n = 10 in elke groep): de normale groep, de modelgroep en de vuurnaaldgroep. Behandel de ratten in de vuurnaald groep met vuurnaald interventie 1x per dag gedurende 6 sessies, met 1 dag rust tussen de sessies.
      OPMERKING: De normale groep en de modelgroep hingen de rat gebonden met een veilige vacht volgens dezelfde frequentie en dezelfde duur als de vuurnaaldgroep, maar zonder de vuurnaaldbehandeling.
2. Voorbereiding van het osteoporosemodel bij ratten
   1. Voor de ratten in de modelgroep en de vuurnaaldgroep, verwijder operatief hun eierstokken om een osteoporosemodel op te stellen zoals beschreven in ^8,9,10.
      1. Voor ovariëctomie dient u anesthesie toe door intraperitoneale injectie van 2% pentobarbital-natrium (0,2 ml/100 g) vóór de operatie, en beschouw de anesthesie als succesvol wanneer dieren niet reageren in een chirurgisch anesthesievlak op basis van een gebrek aan respons van een teenknijptest. Gebruik dierenartszalf op de ogen om uitdroging onder narcose te voorkomen. Injecteer buprenorfine (0,05 mg/kg) subcutaan als pijnstiller vóór de operatie. Zorg voor aseptische omstandigheden tijdens de operatie.
         OPMERKING: Als de operatie niet is voltooid en de rat tekenen van reanimatie vertoont, kan intraperitoneale injectie van 2% pentobarbital-natriumoplossing tijdelijk en op de juiste manier worden toegevoegd, waarbij elke aanvullende dosis niet hoger is dan 20% van de totale geïnjecteerde hoeveelheid.
      2. Plaats de ratten na de operatie op een verwarmingskussen voor kleine dieren en stel de temperatuur in op 32 °C. Laat ratten niet onbeheerd achter totdat ze weer bij bewustzijn zijn en vrij kunnen kruipen. Breng ze niet terug naar het gezelschap van andere dieren totdat ze volledig zijn hersteld.
      3. Wanneer de ratten weer tot leven komen, controleer dan de hechtingen op integriteit en plaats de ratten terug in de kooi. Injecteer alle ratten intramusculair met penicilline-natrium (50.000 E per dag, gedurende 3 dagen) en injecteer intraperitoneaal met 0,1 ml 0,05% diclofenac-natriumoplossing (per dag, gedurende 3 dagen) om infectie te voorkomen en de genezing te versnellen ^9,10.
   2. Observeer de oestrische cyclus volgens het vaginale geëxfolieerde celuitstrijkje van vrouwelijke ratten zoals beschreven in¹¹. Als de cyclus verstoord is, is het model met succes vastgesteld¹¹.
      OPMERKING: Het duurt ongeveer 8-12 weken voordat ratten osteoporose ontwikkelen na ovariëctomie.
3. Selectie van naaldgereedschap
   1. Koop brandnaalden bij fabrikanten van medische hulpmiddelen. Zorg ervoor dat naaldgereedschap is gemaakt van een wolfraam-mangaanlegering, die temperatuurbestendig is, niet kneedbaar is, niet gemakkelijk te vervormen is en gelijkmatig wordt verwarmd. De vuurnaald heeft de vorm van een filamentnaald. Zorg ervoor dat de naald dik is, de punt scherp en recht is en dat het handvat is omwikkeld met koperdraad, dat warmte-isolerend is en de handen niet verbrandt.
   2. Kies een eenkoppige vuurnaald met een afmeting van 0,40 mm x 13 mm, want ratten zijn klein. Controleer of de vuurnaald weerhaken en scheuren heeft.
      OPMERKING: In de klinische praktijk zijn de meeste gebruikte vuurnaalden die zijn ontwikkeld door He Puren, een nationale medische meester¹². Op basis hiervan creëerde Lin Guohua de Lingnan Long-Headed Fire Needle en Lingnan Three-Headed Fire Needle¹³. Kies verschillende maten vuurnaalden op basis van de behoefte van het experiment.
4. Selectie en positionering van acupunten
   1. Selecteer volgens de relevante gegevens en literatuur acupunten voor de behandeling van postmenopauzale osteoporose.
      OPMERKING: De meest gebruikte acupunten zijn, in volgorde van frequentie, Shenshu (BL 23), Zusanli (ST 36), Pishu (BL 20), Xuanzhong (GB 39) en Dazhu (BL 11)^14,15. In fundamenteel onderzoek naar acupunctuurinterventie voor osteoporose bij de-ovulatoire modelratten zijn de meest gebruikte acupunctuurpunten Shenshu (BL 23), Sanyinjiao (SP 6), Guanyuan (CV 4) en Zusanli (ST 36)16,17,18.
   2. Bepaal de acupunten die voor dit experiment zijn geselecteerd. Verwijzend naar de acupunctuurpunten die in eerdere studies 14,15,16,17,18 zijn geselecteerd en de pathogenese van osteoporose, selecteert u vier acupunctuurpunten, namelijk Shenshu (BL 23), Pishu (BL 20), Zusanli (ST 36) en Sanyinjiao (SP 6), voor deze studie. Deze komen overeen met de blaasmeridiaan, de Du-meridiaan, de miltmeridiaan en de niermeridiaan.
      OPMERKING: Het is verboden om vuurnaalden te gebruiken op onderdelen met grote bloedvaten en zenuwstammen.
   3. Scheer de acupunctuurplaats met een elektrische tondeuse voor huisdieren voordat u deze plaatst om het acupunctuurpunt bloot te leggen.
   4. Locatie van acupunten verwijst naar namen en locatie van veelgebruikte acupunten in¹⁹. Lokaliseer de acupunten als volgt: de Shenshu (BL 23) bevindt zich aan de onderste twee zijden van de tweede lendenwervel, 6 mm van de middelste dorsale lijn; de Pishu (BL 20) bevindt zich tussen de ribben aan de onderste twee zijden van de^12e borstwervel, 6 mm van de middelste dorsale lijn; de Zusanli (ST 36) bevindt zich aan de achterste en laterale zijde van de knie, ongeveer 3 mm onder de kleine kop van het kuitbeen; en Sanyinjiao (SP 6) bevindt zich ongeveer 10 mm recht omhoog vanaf de punt van de binnenkant van de enkel van de achterpoot.
   5. Markeer ze met een marker op oliebasis nadat je de punten hebt gevonden.
5. Methode voor het terughouden van ratten
   OPMERKING: Om stress tijdens immobilisatie en behandeling van ratten te verminderen, werd gekozen voor de gesuspendeerde ratten gebonden met een veilige vacht^20,21 als immobilisatiemethode. De ophangmethode voor rattenvacht heeft de volgende voordelen: ten eerste maakt het volledig gebruik van de gewoonte van de rat om de voorkeur te geven aan een donkere omgeving en vermindert het de stressreactie van de rat tijdens fixatie. Ten tweede zijn de hangende ratten stiller en coöperatiever tijdens het hele proces van vuurnaaldbehandeling vanwege het ontbreken van krachtpunten op hun ledematen en tenen. Ten derde waren de acupunten op de rug en ledematen van de ratten voldoende blootgesteld om de behandeling te vergemakkelijken. Een enkele behandeling vereist het in bedwang houden van de rat gedurende 5-10 minuten. Als ze veilig in de vacht zitten, worstelen ratten niet in de fixatie en zijn ze kalm.
   1. Bereid de rattenvacht voor. Naai de gereinigde stof en maak er een buisvormige rattenjas van 50 cm x 13 cm van. Knip gaten voor elk van de vier ledematen en de achterkant van de rattenvacht en naai banden op de vier hoeken.
   2. Trek handschoenen aan, leg de rat op een tafel die niet glad is, houd de staart van de rat vast met de linkerhand en trek voorzichtig terug. Open de poort van de rattenvacht met de rechterhand. Gebruikmakend van de gewoonte van de rat om te duisternissmeren en te graven, plaats het aan de mond van de rattenvacht, de rat zou er zelf in graven.
   3. Wanneer de rat zich in het midden van de rattenvacht nestelt, gebruik dan de linkerhand om beide zijden van de schouderbladen van de rat vast te houden en trek de twee voorpoten van de rat uit met de rechterhand.
   4. Trek de touwen aan de voorkant van de vacht aan, kruis de touwen en wikkel ze om de rug van de rat. Pas de elasticiteit van de touwen aan en leg de knoop op de rug van de rat. Bevestig ten slotte de achterkant van het rattenlichaam op een vergelijkbare manier, zodat de bilaterale achterpoten zich buiten de rattenvacht bevinden.
   5. Voor de ophanging van het swingtype neemt u twee S-haken en haakt u deze in de knoop aan de achterkant van de rattenjas en haakt u de haken aan het ijzeren frame. Op dit punt wordt de rat opgehangen aan de strook stof, in een licht slingerende toestand (Figuur 1).
      OPMERKING: De hoogte van de strook stof vanaf de grond is ongeveer 70 cm, zodat de onderzoeker die op een kruk zit comfortabel en moeiteloos kan werken. Plaats uit voorzorg een dikke vulling op het vlakke oppervlak onder de rat als het dier uitglijdt.

2. Acupunctuur behandeling

1. Desinfectie
   1. Steriliseer de omgeving met 5% jodoforische desinfecterende oplossing 3x voor het acupunctuuren. Voeg alcohol rub toe na elke jodoforische scrub.
2. Brandende naalden
   OPMERKING: Er moeten veiligheidsmaatregelen worden genomen om brandwonden en verwondingen te voorkomen.
   1. Neem de hemostatische tang om het katoenen bal, gedrenkt in 95% alcohol, met de linkerhand op te pakken en steek het aan met een aansteker.
   2. Houd het handvat van de naald vast met de duim, wijsvinger en middelvinger van de rechterhand in een licht gebogen positie, alsof u een pen vasthoudt.
   3. Plaats de naaldpunt en het naaldlichaam op de alcohol wattenbolletjes en verwarm deze; Verwarm eerst het naaldlichaam en verwarm vervolgens de naaldpunt. Brand de naald totdat deze helderwit of rood is, afhankelijk van het doel van de behandeling (Figuur 2).
      OPMERKING: Het naaldlichaam moet volledig helderwit of rood zijn verbrand, anders zal dit de werkzaamheid van acupunctuur beïnvloeden of postoperatieve infectie en andere problemen veroorzaken.
3. Acupunctuur
   OPMERKING: Afhankelijk van de snelheid, diepte, bereik, naaldretentietijd en behandelingsdoel, kan Lingnan Fire-Needle worden onderverdeeld in verschillende operatietechnieken, zoals puntacupunctuur, scatter-acupunctuur, dichte acupunctuur, snelle acupunctuur en langzame acupunctuur²². De sleutel tot het werken met Lingnan Fire-Needle is rood, nauwkeurig en snel.
   1. Wacht tot de naald rood brandt, beweeg de naald weg van de vlam en houd deze boven het acupunt.
   2. Richt de punt van de naald verticaal op het acupunt, prik snel door en trek het eruit. Zorg ervoor dat het hele proces binnen 1 s is voltooid.
   3. De diepte van de penetratie van acupunten is ongeveer 1-2 mm, doorboor alleen de roodgloeiende naaldpunt.
      OPMERKING: De diepte van acupunctuur moet worden bepaald op basis van de toestand, constitutie, leeftijd, spierdikte van het acupunt, de diepte van de bloedvaten en de verdeling van zenuwen.
   4. Prik elk acupunt 3x-5x door. Herhaal dit voor alle acupunten (Figuur 3).
      OPMERKING: Wees bij het uitvoeren van de bewerking volledig gefocust en wendbaar. In dezelfde procedure bij een rat moet dezelfde vuurnaald worden gebruikt, waarbij de naald opnieuw wordt gesteriliseerd door te vlammen tussen elke twee puncties; De naald mag niet worden neergelegd of niet-steriel worden.

3. Beheer na acupunctuur

1. Til de vuurnaald weg van de huid en houd een steriel droog watje vast om het naaldgat in te drukken om bloeden te voorkomen. Na de vuurnaaldtherapie vertoonden de ratten onverminderde mobiliteit en geen waarneembare complicaties.
   NOTITIE: Als er een bloeding optreedt na fire needling, is het niet nodig om het bloeden te stoppen, veeg het gewoon af met een droog watje nadat het op natuurlijke wijze is gestopt.

4. Gegevensverzameling en -analyse

1. Na 6 kuren met vuurnaaldinterventie, euthanaseert u de ratten door middel van een hoge dosis intraperitoneale injectie van pentobarbitalnatrium (150-200 mg/kg). Verzamel dijbeenmonsters en voer micro-CT-scans uit²³.
2. Analyseer de gegevens statistisch met behulp van analysesoftware. Toon metingen als gemiddelde en analyseer met behulp van eenrichtings-ANOVA, waarbij p <0,05 als statistisch significant wordt beschouwd.

Resultaten

De gegevens in Tabel 1 laten zien dat in vergelijking met de normale groep, de dikte van trabeculair bot (Tb.Th), het aantal trabeculair bot (Tb.N) en de statische parameter botvolumefractie van trabeculair bot (BV/TV) in de modelgroep allemaal significant waren verminderd (p <0,05), en de scheiding van trabeculair bot (Tb.Sp) was verhoogd (p <0,05); wat aangeeft dat de botstructuur van trabeculair bot in trabeculair botverrijkte gebieden van de femorale epifyse van de rat significant verstoord was na de-osteoporose, wat wijst op duidelijke schade.

Vergeleken met de modelgroep waren de trabeculaire dikte, het trabeculaire aantal en de trabeculaire statische parameter botvolumefractie van het dijbeen in de vuuracupunctuurgroep significant verhoogd (p <0,05) en de trabeculaire scheiding was afgenomen (p <0,05). Dit suggereerde dat brandnaaldtherapie de schade aan de poreuze botstructuur van het dijbeen kan verbeteren bij osteoporosemodelratten veroorzaakt door botverwijdering.

Figuur 4 toont de driedimensionale structuurbeelden van de cancellous matrix van rattenbotten in elke groep. Figuur 4A is de normale groep, Figuur 4B is de modelgroep en Figuur 4C is de vuurnaaldgroep. Zoals te zien is in de figuur, ging in vergelijking met de normale groep een groot aantal trabeculae verloren in het midden en zelfs de periferie van de dijbeenmatrix in de modelgroep, en verscheen er een groot aantal holtes in het onderste deel. De algehele continuïteit van de botstructuur was beschadigd, met het verschijnen van een deel van de vrije bottrabeculae. Vergeleken met de modelgroep was er een grote toename in dikte van trabeculae in het midden en de periferie van het poreuze bot van het dijbeen in de vuurnaaldgroep, en de continuïteit van de algehele botstructuur was verbeterd. Dit suggereert dat vuurnaalden de trabeculaire structuur van het poreuze bot van het dijbeen kunnen beschermen in het rattenmodel van door ovariëctomie geïnduceerde osteoporose.

Figuur 1: Rattenfixatiemethode: schommelratten vastgebonden met vacht. Nadat de rat in een rattenvacht is gekleed, wordt de rat vastgezet en in de lucht opgehangen door de rattenvacht met twee S-haken vast te haken. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2: Lingnan Fire-Needle. (A) Naaldgereedschap. Kies een fijne vuurnaald met een afmeting van 0,40 mm x 13 mm. (B) Brandnaalden. Leg de naaldpunt en het naaldlichaam op de met alcohol doordrenkte wattenbolletjes en verwarm deze. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3: Acupunctuurprocedure met vuurnaald op vier acupunten. (A) Pishu (BL 20): Bevindt zich tussen de ribben aan de onderste twee zijden van de 12e^borstwervel , 6 mm van de middelste dorsale lijn (B) Shenshu (BL 23): Gelegen aan de onderste twee zijden van de tweede lendenwervel, 6 mm van de middelste dorsale lijn (C) Zusanli (ST 36): Gelegen aan de achterste en laterale zijde van de knie, ongeveer 3 mm onder de kleine kop van het kuitbeen. (D) Sanyinjiao (SP 6): Bevindt zich ongeveer 10 mm recht omhoog vanaf de punt van de binnenkant van de enkel van de achterpoot. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 4: Vergelijking van de driedimensionale structuur van het poreuze bot van het distale dijbeen van ratten in verschillende groepen. (A) De normale groep. (B) De modelgroep. (C) De vuurnaaldgroep. Schaal balken: 500 μm. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Groep	Tb.N (mm)	Tb.Sp (mm)	Tb.Th (mm)	BV/TV
Normale groep	3,29±0,47	0,23±0,06	0,12±0,03	0,39±0,14
Model Groep	0,96±0,78*	0,66±0,44*	0,09±0,01*	0,17±0,11*
vuur-naald groep	2.73±0.76Δ	0.33±0.20Δ	0.12±0.02Δ	0.33±0.16Δ

Tabel 1: Fire needling effect op microstructurele indices van femorale osteoporose. De gegevens tonen het gemiddelde ± SD, n= 10. Voor vergelijking met de normale groep, *p<0,05; Voor vergelijking uitgevoerd met modelgroep, Δp<0.05.

Discussie

Lingnan vuurnaaldtherapie heeft een diepgaande historische achtergrond. Gegevens over vuurnaalden en naaldmethoden zijn terug te voeren op Huangdi Neijing. Moderne acupuncturisten Situ Bell en Zhang Jiawei combineerden het klimaat van Lingnan en de fysieke kenmerken van de mensen om Lingnan vuurnaaldtherapie te creëren³. Lin Guohua vatte de Lingnan Fire-Needle-therapie samen als verwarmend, baggeren, tonificerend, opruimend en eliminerend, met opwarming als de essentie²⁴.

De eerste stap bij het gebruik van vuurnaalden is het selecteren van het juiste type naald. Vuurnaalden kunnen worden onderverdeeld in drie hoofdcategorieën: enkelkoppige naalden, meerkoppige naalden en platte koppen. De eenkoppige vuurnaald wordt veel gebruikt in de klinische praktijk en wordt vaak gebruikt voor multisysteemziekten. De meerkoppige vuurnaald combineert drie fijne of drie middelgrove vuurnaalden in een driehoekige vorm, voornamelijk gebruikt om huidziekten te behandelen. De vuurnaald met platte kop wordt vaak gebruikt om verschillende soorten moedervlekken, wratten en andere overmatige organismen op de huid te verwijderen^25,26. De studie selecteerde naalden met één kop omdat ze een breder scala aan toepassingen en meer functies hebben, waardoor het gemakkelijker wordt om fijne naalden te verkrijgen die geschikt zijn voor de grootte van ratten.

Ten tweede vereist het juiste gebruik van vuurnaaldtherapie kritische criteria voor het dichtschroeien van naalden. Onderzoekers²⁷ hebben ontdekt dat het dichtschroeien van naalden tot een specifieke temperatuur noodzakelijk is voor hun effectiviteit. De stimulatie kan de relevante pathologische veranderingen mogelijk niet verlichten als de temperatuur niet hoog genoeg is. Om het gewenste therapeutische effect te bereiken, moeten de naalden die bij vuurnaaldtherapie worden gebruikt, daarom worden verbrand tot een roodachtige of helderwitte kleur en vervolgens snel in de geselecteerde acupunten of delen worden ingebracht. Bovendien, aangezien de criteria voor het branden van naalden met vuurnaalden variëren afhankelijk van de vuurnaaldinstrumenten, naaldlocaties en de behandelde ziekten, hebben we een uitgebreide reeks criteria samengesteld voor het branden van naalden met vuurnaalden waarnaar kan worden verwezen in Tabel 2. In de huidige studie gebruikten we een enkelkoppige vuurnaald voor multipoint-stimulatie in plaats van een meerkoppige vuurnaald. Dit kwam omdat meerdere naalden die te dicht bij elkaar stonden, er niet voor konden zorgen dat elke naald gelijkmatig zou worden dichtgeschroeid.

Naald gereedschap	Mate van naaldverbranding	Aanwijzingen
Enkelkoppige vuurnaald	Roodachtig rood.	Bot- en gewrichtsaandoeningen en pijnlijke ziekten
Multi-head Fire naald	De punt van de naald is een beetje heet.	Huidziekten zoals Acne
Vuurnaald met platte kop	Helder wit. Het handvat van de naald is een beetje heet.	Neoplasma zoals filiforme wratten

Tabel 2: De criteria voor het verbranden van naalden.

Wat betreft de hoek van het inbrengen van de vuurnaald, deze is meestal verticaal. Wat betreft hoe diep de naald moet worden ingebracht, zijn er nog geen vastgestelde normen. Over het algemeen wordt echter gesuggereerd dat dieper inbrengen beter is voor gebieden met meer spieren en een dikkere huid, terwijl ondieper inbrengen geschikter is voor gebieden met een dunnere huid en spieren. Bovendien zijn veel experts in het veld van mening dat de diepte van fire needling vergelijkbaar moet zijn met die van filiforme needle needling²⁸. Een studie suggereert dat de diepte van vuurnaalden ondieper moet zijn dan filiforme naalden bij het naalden van acupunten en iets dieper dan filiforme naalden bij het naalden van pijnpunten²². Daarom is het raadzaam om met betrekking tot de daadwerkelijke toepassing van vuurnaalden eerst te verwijzen naar de norm voor filiforme naalden en vervolgens de diepte van de naalden te bepalen op basis van klinische ervaring.

Op basis van de collectieve mening van 192 experts in Lingnan is de primaire oorzaak van OP in risicogroepen nierdeficiëntie (Shen), wat leidt tot secundaire bloedstasis. Daarom omvat de behandeling van OP het gelijktijdig aanpakken van zowel de nierdeficiëntie (Shen) als de bloedstasis²⁹. Momenteel is acupunctuur een veel gebruikte behandeling voor OP. De verschillende soorten acupunctuurbehandelingen omvatten filiforme naaldtherapie, moxibustie, warme acupunctuur, elektro-acupunctuur (EA), draadinbeddingstherapie, acupuntinjectie, een combinatie van acupunctuur en geneeskunde, en een combinatie van acupunctuur en moxibustie. Hiervan zijn de meest gebruikte behandelingen in de klinische praktijk draadinbeddingstherapie, moxibustie en een combinatie van acupunctuur en geneeskunde³⁰. Klinisch wordt vuurnaaldtherapie veel gebruikt voor 137 verschillende ziekten die gericht zijn op verschillende orgaansystemen, zoals het motorische systeem, het zenuwstelsel, het endocriene systeem, het spijsverteringsstelsel, de verloskunde en de gynaecologie, waarvan de meest toegepaste motorische ziekten zijn^. De Lingnan vuurnaaldtherapie is een behandeling die de voordelen van acupunctuur, driesnijdende naalden en littekenmoxibustie combineert. Het kan de qi en de bloedcirculatie in de meridianen verbeteren en de nier (Shen) verwarmen. Deze behandeling kan zowel bloedstasis als nierdeficiëntie (Shen) aanpakken, die bijdragen aan de pathogenese van OP in TCM. Bovendien heeft het de voordelen dat het goedkoop is, snelle effecten heeft, een korte behandelingsperiode heeft en veilig is. Klinische onderzoeken tonen ook aan dat het combineren van vuurnaaldtherapie en acupunctuurbehandeling effectiever is bij de behandeling van OP dan eenvoudige acupunctuur of medicatie ^5,6. Gewrichtspijn is een van de typische symptomen van OP en het is bevestigd dat de werkzaamheid van vuurnaaldtherapie aanzienlijk beter is dan filiforme naaldtherapie bij de behandeling van gewrichtspijn³².

De botsterkte is afhankelijk van de botdichtheid, de hoeveelheid bot per volume-eenheid. Het aantal en de verdeling van bottrabeculae, een bestanddeel van de botmassa, heeft een aanzienlijke invloed op het botvolume en bijgevolg op de botdichtheid. Botvolumefractie geeft het percentage botvolume per eenheid weefselvolume aan en is een essentiële referentie voor botmassa²³. Als onderdeel van het skelet is de primaire functie van het poreuze bot het ondersteunen en vergemakkelijken van beweging. Het vergroten van de grootte kan echter de botdichtheid verminderen, waardoor de botsterkte afneemt. De skeletstructuur van poreus bot is sponsachtig en bestaat uit trabeculae. Daarom wordt de structuur van het poreuze bot bepaald door de trabeculae. Om de sterkte van poreus bot te behouden, is het van cruciaal belang om ervoor te zorgen dat er voldoende trabeculae als raamwerk aanwezig zijn. Ten tweede is het noodzakelijk om een relatief adequaat aantal verbindingen tussen de trabeculae te behouden om de structurele stabiliteit van bot te garanderen³³. Om ervoor te zorgen dat de trabeculae een bepaalde hoeveelheid belasting kunnen dragen, moet hun dikte behouden blijven. De structuur van poreus bot wordt geëvalueerd op basis van het aantal aanwezige trabeculae, hun connectiviteit en hun dikte³⁴. Na vergelijking van de structurele parameters van poreus bot (Tabel 1), onthulden onze bevindingen significante verschillen tussen de modelgroep ratten en de normale groep. Het aantal trabeculae, de trabeculaire dikte en de botvolumefractie van het dijbeen waren verminderd, terwijl de trabeculaire scheiding in de modelgroep verhoogd was. Deze bevindingen suggereren dat de poreuze botstructuur de modelgroep verandert, wat mogelijk leidt tot osteoporose of andere botziekten. Op basis van het driedimensionale structurele beeld van het poreuze bot werd waargenomen dat het middelste deel geen trabeculae had en dat ook meer dan de helft van de trabeculae in het bovenste deel van de periferie ontbrak. Dit geeft aan dat de integriteit van de botstructuur van het dijbeen bij ratten na ovariëctomie in het gedrang was gekomen. Vergeleken met de modelgroep vertoonde het dijbeen in de vuurnaaldgroep verhoogde trabeculae, trabeculaire dikte, botvolumefractie en verminderde trabeculaire scheiding. Bovendien, wanneer het driedimensionale structurele diagram van het poreuze bot werd beschouwd, werd waargenomen dat de centrale holte van de vuurnaaldgroep was verkleind en dat de perifere bottrabeculae compleet waren (Figuur 4). Deze studie toont aan dat vuurnaaldtherapie schade aan de poreuze botstructuur van het dijbeen effectief voorkomt en beheerst bij ratten die een ovariëctomie hebben ondergaan.

De beperkingen van de ovariëctomiemodelratten die voor deze studie zijn geselecteerd, zijn als volgt. Oestrogeenreductie is een van de risicofactoren voor primaire OP³⁵. Om deze reden is ovariëctomiechirurgie een betrouwbare methode voor het vaststellen van OP-rattenmodellen ^8,9,10. Bovendien zijn SD-ratten niet alleen gemakkelijk toegankelijk, maar ook volgzaam, met ontspannen voedingsomstandigheden. Daarom hebben we dit model in eerste instantie onderzocht en aanbevolen om fijne vuurnaalden te gebruiken om acupunten te stimuleren. Ons langetermijnplan is om onze onderzoeksreikwijdte uit te breiden door de effectiviteit van vuurnaaldtherapie verder te valideren bij het verlichten van OP in andere modellen, zoals ouder wordende ratten. Ten slotte geeft Tabel 3 een overzicht van de werkzaamheid van acupunctuur alleen op osteoporosemodelratten en het werkingsmechanisme ervan. We zijn van plan om in de nabije toekomst een meer diepgaand onderzoek te doen naar de mogelijke mechanismen 36,37,38,39,40,41,42.

Uitkomst indicator		Werkingsmechanisme				Referentie
resorptie van botten		Acupunctuur voorkomt botverlies en structurele veranderingen door botresorptie te onderdrukken.				36
Sterkte van de botten		Acupunctuur verhoogde het trabeculaire botvolume en de dikte, verlaagde de trabeculaire scheiding van tibiae en beperkte de uitscheiding van fosfor en Dpd, terwijl het de concentraties van serumosteocalcine bevorderde.				37
Botmetabolisme		Acupunctuur kan de serum-ALP-, BGP- en TRAP-niveaus bij OVX-ratten aanzienlijk verlagen.				38
Signalering route		Acupunctuur verbetert de botmineraaldichtheid, verzwakt in vivo de ontstekingsreactie en verhoogt de osteogenese-beïnvloedende factorniveaus bij ratten door de Wnt-signaleringsroute te moduleren.				39,40
Endocriene modulerende werking		Acupunctuur moduleerde de serumspiegels van oestradiol, corticotropine releasing hormoon (CRH), adrenocorticotroop hormoon (ACTH) en corticosteron (CORT).				41
Lichaamsgewicht		Acupunctuur moduleert veranderingen in leptinespiegels om de toename van het lichaamsgewicht op te heffen.				36,41
van de hersenen afgeleide neurotrofe factor		acupunctuur kan de BDNF- en TrkB-expressieniveaus verhogen en het proces van fractuurgenezing na osteoporose versnellen.				42

Tabel 3: Het effect van eenvoudige acupunctuur op de werkzaamheid van osteoporose modelratten.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
75% Alcohol	Shandong Lircon medicaltechnology co., ltd		Desinfectie
95% Alcohol	Shandong Lircon medicaltechnology co., ltd		Brandnaalden
Volwassen vrouwelijke Sprague-Dawley (SD) ratten	Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.	SCXK 2020-0001	Modellering van osteoporose
Deluxe thermostaat verwarmingsmat	Zhenhua Instruments		Voor het handhaven van de lichaamstemperatuur van ratten.
Diclofenac-natriuminjectie	Shandong Province Jianmu Bio-pharmaceutical Co.	150182913	Antipyretisch en pijnstillend
Verhoogde fixatierak	Taizhou Shi Ai Scientific and Educational Instruments and Equipment Co.		Fixeren van ratten
Vuurnaalden	Beijing Luoya Shanchuan Medical Equipment Co., Ltd.	20190240	Een naaldgereedschap
Hemostatische pincet	Qingdao Schultz Biotechnology Co.		Fixeren van ratten
Liguter	Shanghai Machi Trading Co.	H5	Alcohol aansteken
Lodophor desinfectieoplossing	Qingdao Hai's Hainuo Inovation Disinfection Technology Co., Ltd.	2016-0604	Desinfectie
Medische katoenen bal	Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.	20172142357	Desinfectie
pentobarbital-natrium	Beijing Jiehui Biotechnology Co.	P3761	anesthesie
Elektrisch haarklem voor huisdieren	Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory		Het haar van ratten scheren
Zelfgemaakte rattenjas			Fixeren van ratten
Pincet	Qingdao Schultz Biotechnology Co.		Plukken van katoenen ballen