Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Fabricage van antibacterieel grafeenoxide/koper nanocomposieten

1.7K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/66762

⸱

4 oktober 2024

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Integrative Engineering, Chung-Ang University, 2Feynman Institute of Technology, Nanomedicine Corporation, 3Department of Chemical Science and Engineering, Tokyo Institute of Technology, 4Department of Chemical Engineering, Kumoh National Institute of Technology

In dit artikel

Samenvatting

Hierin introduceren we grafeenoxide/koper (GO/Cu) nanocomposieten als antibacterieel nanomateriaal. De antibacteriële effectiviteit van de GO/Cu-nanocomposieten werd geëvalueerd tegen zowel antibioticaresistente grampositieve als gramnegatieve bacteriën.

Samenvatting

Antibiotica zijn momenteel de meest gebruikte antibacteriële behandeling voor het doden van bacteriën. Bacteriën ontwikkelen echter resistentie wanneer ze voortdurend te veel worden blootgesteld aan antibiotica. Het ontwikkelen van antimicrobiële middelen die bestaande antibiotica kunnen vervangen, is essentieel omdat antibioticaresistente bacteriën resistentiemechanismen hebben voor alle huidige antibiotica en nosocomiale infecties kunnen bevorderen. Om deze uitdaging aan te gaan, stellen we in deze studie grafeenoxide/koper (GO/Cu) nanocomposieten voor als antibacteriële materialen die de bestaande antibiotica kunnen vervangen. GO/Cu nanocomposieten worden gekenmerkt door transmissie-elektronenmicroscopie en scanning-elektronenmicroscopie. Ze laten zien dat koper (Cu) nanodeeltjes goed groeien op de grafeenoxidevellen. Daarnaast wordt een microverdunningsbouillonmethode gebruikt om de werkzaamheid van de antimicrobiële stof tegen methicilline-resistente Staphylococcus aureus (MRSA) en Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), die vaak betrokken zijn bij nosocomiale infecties, te bevestigen. In het bijzonder wordt 99,8% van MRSA en 84,7% van P. aeruginosa geëlimineerd door 500 μg/ml GO/Cu nanocomposieten. Metalen nanocomposieten kunnen antibioticaresistente bacteriën uitroeien door ionen vrij te geven, reactieve zuurstofsoorten te vormen en de bacteriën fysiek te beschadigen. Deze studie toont het potentieel aan van antibacteriële GO/Cu-nanocomposieten bij het uitroeien van antibioticaresistente bacteriën.

Inleiding

Bacteriële infecties hebben een aanzienlijke impact op de volksgezondheid. Vooral pathogene bacteriën kunnen de beschermende mechanismen van het lichaam omzeilen en ziekten veroorzaken1. Antibiotica worden veel gebruikt om bacteriële infecties te behandelen. Het ongepaste gebruik van antibiotica heeft echter de opkomst van antibioticaresistente bacteriën versneld. Momenteel hebben nosocomiale infecties die kunnen worden toegeschreven aan antibioticaresistente bacteriën opmerkelijke complicaties veroorzaakt in zorginstellingen2. Helaas hebben bacteriën resistentiemechanismen voor alle huidige antibiotica3. Daarom is de ontwikkeling van nieuwe antibiotica essentieel, hoewel de kans ook groot is dat er resistentiemechanismen zullen ontstaan.

Metalen nanodeeltjes zijn naar voren gekomen als veelbelovende middelen voor het bestrijden van antibioticaresistente bacteriën vanwege hun effectieve antibacteriële eigenschappen 4,5,6. Het is moeilijk voor bacteriën om resistentiemechanismen te ontwikkelen tegen metalen nanodeeltjes, omdat ze zich niet binden aan specifieke bacteriële receptoren7. Met name zilver-, koper- en zinkoxide-nanodeeltjes zijn de focus van uitgebreid onderzoek vanwege hun opmerkelijke antibacteriële werkzaamheid 8,9,10,11,12,13. De toxiciteit van metalen nanodeeltjes voor bacteriën wordt toegeschreven aan drie primaire mechanismen: 1) de afgifte van metaalionen, 2) de generatie van reactieve zuurstofsoorten (ROS), zoals •OH en •O2−, en 3) fysieke interactie en aanhechting 4,14.

In deze studie werden grafeenoxide/koper (GO/Cu) nanocomposieten ontwikkeld als antimicrobieel middel. Koper (Cu) doodt efficiënt ziekteverwekkers die het oppervlak tegenkomen en verstoort de replicatie van bacteriële genen. Het is echter een essentieel micro-element in het menselijk lichaam en het is minder giftig voor zoogdiercellen omdat het homeostatische mechanismen heeft die de concentraties van Cu in de cellen reguleren4. Wanneer Cu-nanodeeltjes worden geoxideerd, genereren ze Cu-ionen, die een relatief hoge affiniteit hebben voor negatief geladen bacteriën15,16. Cu-ionen binden zich aan de cellulaire structuren (bijv. eiwitten, membranen en DNA), waardoor de celfuncties worden verstoord17. Door Cu-nanodeeltjes op het oppervlak van grafeenoxide (GO) te synthetiseren, kan de afgiftesnelheid van metaalionen worden gecontroleerd 18,19,20. GO vertoont ook een antibacteriële werking door bacteriële hechting met een ruw oppervlak te voorkomen door oxidatieve stress of door ROS21,22 te vormen. Bovendien geven GO/Cu-nanocomposieten meer ROS af dan GO door de chemische werking van Cu2+, die bacteriële eiwitten en DNA beschadigt, wat leidt tot de dood van bacteriën23,24.

Dit artikel schetst het protocol voor het synthetiseren van GO/Cu-nanocomposieten en introduceert een antimicrobiële testbenadering tegen klinische bacteriën MRSA en P. aeruginosa, de meest voorkomende multiresistente bacteriestammen die nosocomiale infecties veroorzaken25. Dit protocol heeft tot doel een gemakkelijke chemische reductiemethode te introduceren voor het synthetiseren van GO/Cu-nanocomposieten die de groei van antibioticaresistente bacteriën kunnen belemmeren. We gebruiken koper(II)chloride (CuCl2) en natriumboorhydride (NaBH4) als respectievelijk voorloper en reductiemiddel. Het protocol beschrijft ook de specifieke kenmerken van het toepassen van deze nanocomposieten op bacteriën met behulp van de microverdunningsbouillonmethode. Om fouten als gevolg van de absorptie-interferentie van metalen nanodeeltjes uit te sluiten en nauwkeurige evaluaties te maken, wordt het antibacteriële vermogen geëvalueerd met behulp van de kolonietelmethode.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Bereiding van de GO/Cu nanocomposieten

OPMERKING: De grootte en morfologie van Cu-nanodeeltjes die op de GO-nanosheets groeien, worden bepaald door de mate van GO-oxidatie, de concentratie van de Cu-voorloper en de concentratie van het reductiemiddel26.

  1. Bereid 10 ml 1 mg/ml GO suspensie in een glazen fles. Sonificeer de GO-suspensie gedurende 1 uur totdat GO goed is gedispergeerd in gedestilleerd (DI) water.
  2. Bereid een 20 mM CuCl2-oplossing in een glazen injectieflacon. Sonificeer de CuCl2-oplossing totdat CuCl2 goed is gedispergeerd in DI-water.
  3. Voeg 10 ml van de 20 mM CuCl2-oplossing toe aan de GO-oplossing en sonificeer het mengsel gedurende 1 uur bij 70 °C.
  4. Bereid een 20 mM NaBH4-oplossing voor.
    LET OP: Deze procedure moet worden uitgevoerd in een chemische zuurkast. Een redoxreactie treedt op zodra het reductiemiddel NaBH4 in water wordt gebracht. Bereid de NaBH4-oplossing direct voor het experiment.
  5. Bereiding van het mengsel van NaBH4, GO en CuCl2
    1. Voeg 20 ml van de 20 mM NaBH4-oplossing toe aan het mengsel van GO en CuCl2 terwijl u roert met een magnetische staaf op 200 tpm. Roer na het toevoegen van de NaBH4-oplossing continu gedurende 30 minuten.
      LET OP: Deze procedure moet worden uitgevoerd in een chemische zuurkast.
  6. Centrifugeren van het mengsel
    1. Breng het mengsel van stap 1.5.1 over in een centrifugebuis. Centrifugeer de oplossing bij 23.000 × g gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. Gooi het supernatant weg.
      LET OP: Wanneer u de centrifuge bedient, moet u altijd het evenwicht bewaren door buisjes van gelijk gewicht te plaatsen.
  7. Resuspendeer het GO/Cu-nanocomposietmengsel met 10 ml DI-water en soniceer ze zodat het neerslag gelijkmatig door de oplossing kan worden verspreid.
  8. Centrifugeer de oplossing bij 23.000 × g gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur; Verwijder vervolgens de supernatant.
  9. Herhaal stap 1.7-1.8 nog een keer om de niet-gereageerde chemicaliën te verwijderen.
  10. Voeg 1 ml gedestilleerd water toe aan de GO/Cu-nanocomposieten en sonicaat het mengsel om het sediment gelijkmatig over de vloeibare fase te verspreiden.
    OPMERKING: Verzamel alle GO/Cu nanocomposietoplossingen in één conische buis.
  11. Vriesdroog de oplossing een nacht onder vacuüm bij -60 °C totdat de GO/Cu-nanocomposieten volledig zijn opgedroogd en GO/Cu-nanocomposietpoeder verkrijgen.
  12. Bewaar het GO/Cu nanocomposiet poeder bij -20 °C tot gebruik.

2. Voorbereiding van bacteriën voor de antibacteriële test

LET OP: Deze procedure moet worden uitgevoerd in een biologische veiligheidskast met een alcohollamp. Bacterieel afval moet worden geautoclaveerd voordat het wordt weggegooid. Bij het hanteren van antibioticaresistente bacteriën moeten handschoenen, jassen en maskers worden gedragen en moeten de handen na het experiment worden gewassen met zeep of handdesinfecterend middel. Altijd grondig desinfecteren; Als er besmetting optreedt in het experimenteergebied, desinfecteer het dan onmiddellijk met 70% ethanol.

  1. Bereiding van bacteriekweekmedia
    1. Meng 20 g tryptische soja-agar en 500 ml gedestilleerd water in een kolf. Steriliseer het mengsel in een autoclaaf bij 121 °C gedurende 15 min.
    2. Bereid de agarplaat voor door 15 ml van de agar-oplossing in een petrischaal te gieten voordat de agar hard wordt. Bewaar de agarplaat bij 4 °C tot gebruik.
      OPMERKING: Dit moet snel gebeuren voordat de agar-oplossing hard wordt. Om besmetting te voorkomen, steriliseert u de agarplaat tijdens het uitharden gedurende 15 minuten met UV.
    3. Meng 15 g tryptische sojabouillon (TSB) en 500 ml gedestilleerd water in een kolf. Steriliseer het mengsel in een autoclaaf bij 121 °C gedurende 15 min.
    4. Doe 40-50 ml van de bouillonoplossing in een conische buis van 50 ml. Bewaar de bouillon bij 4 °C tot gebruik.
      OPMERKING: Om besmetting te voorkomen, steriliseert u de gealiquoteerde bouillon gedurende 15 minuten met UV.
  2. Bacteriecultuur
    1. Inoculeer de MSRA- of P. aeruginosa-bouillonoplossing op de agarplaat met behulp van een lus. Incubeer de agarplaat bij 37 °C met behulp van een schudincubator gedurende 24 uur.
    2. Inoculeer een kolonie van de bacteriën in 10 ml van de bouillon met behulp van een lus. Incubeer de bouillon bij 37 °C met behulp van een schudincubator bij 200 tpm gedurende 24 uur.
    3. Herhaal de stappen 2.2.1-2.2.2 nog een keer om bacteriën met dezelfde eigenschappen te verkrijgen.
    4. Verdun de bacteriële oplossing na 24 uur serieel tienvoudig met steriel gedestilleerd water. Inoculeer 100 μL van de verdunde bacteriële suspensie op de agarplaat en verdeel het met een strooier. Incubeer de agarplaat bij 37 °C met behulp van een schudincubator gedurende 24 uur.
      OPMERKING: Het verdunningsniveau is afhankelijk van de bacteriën. Probeer minder dan 100 kolonies in een agarplaat te bereiden.
    5. Tel de bacteriekolonies na de incubatie van 24 uur om de kolonievormende eenheid (CFU) te bepalen met behulp van vergelijking (1).
      figure-protocol-1 (1)
    6. Herhaal stap 2.2.4-2.2.5 minstens 3x om te controleren of de CFU van de bacteriën relatief constant is.

3. Antibacteriële test met behulp van de microverdunningsbouillonmethode

  1. Dag 1) Inoculeer een kolonie van de bacteriën van de agarplaat in 10 ml van de bouillon met behulp van een lus. Incubeer de bouillon bij 37 °C met behulp van een schudincubator bij 200 tpm gedurende 24 uur.
  2. Dag 2) Bereid het GO/Cu nanocomposietmengsel in ten minste drie concentraties met behulp van Dulbecco's fosfaatgebufferde zoutoplossing (DPBS). Sonificeer de GO/Cu nanocomposiet suspensie totdat de GO/Cu nanocomposieten goed gedispergeerd zijn in DPBS.
    OPMERKING: In dit protocol werden 500, 250, 125 en 62,5 μg/ml van het GO/Cu-nanocomposietmengsel getest.
  3. Bereid de controleoplossingen voor. De negatieve controle is DPBS en de positieve controle is 1% van een penicilline/streptomycine-oplossing in DPBS die de bacteriën zal doden.
  4. Voeg 100 μl van de GO/Cu nanocomposiet suspensie en de controleoplossingen toe aan platen met 96 putjes. Voeg alle monsters in drievoud toe.
    OPMERKING: Steriliseer monsters gedurende 15 minuten met UV voordat u ze op bacteriën aanbrengt.
  5. Verdun op basis van de kve na 24 uur incubatie de bacteriële suspensie met TSB tot 1 ×10 6 kve/ml.
    OPMERKING: De initiële MRSA- en P. aeruginosa-cultuursuspensieconcentraties in onze studie, volgens stap 2.2.5, zijn respectievelijk 4,5 × 109 kve/ml en 3 × 109 kve/ml. Bacteriële concentraties van 1 × 106 kve/ml worden verkregen door de culturen respectievelijk 4.500x en 3.000x te verdunnen.
  6. Inoculeer 100 μl van de 1 × 106 kve/ml verdunde bacteriële suspensie in de monsterputjes in de platen met 96 putjes. Incubeer de platen met 96 putjes bij 37 °C met behulp van een schudincubator bij 200 tpm gedurende 24 uur.
    OPMERKING: De uiteindelijke concentratie van bacteriën is 5 × 105 kve/ml na menging met 100 μL monster.
  7. Dag 3) Meng het monster en de bacteriële suspensies krachtig met een micropipetpunt van 200 μl. Verdun het monster-bacteriemengsel serieel tienvoudig met steriel gedestilleerd water.
    OPMERKING: Het verdunningsniveau is afhankelijk van de bacteriën. Probeer minder dan 100 kolonies in een agarplaat te bereiden.
  8. Inoculeer 100 μL van de verdunde bacteriële suspensie op de agarplaat en verdeel het met een strooier. Incubeer de agarplaat bij 37 °C met behulp van een schudincubator gedurende 24 uur.
  9. Dag 4) Tel de bacteriekolonies en bepaal de CFU-waarden om de antibacteriële activiteit van de GO/Cu-nanocomposieten te bevestigen met behulp van vergelijking (2).
    figure-protocol-2 (2)

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Transmissie-elektronenmicroscopie (TEM), scanning-elektronenmicroscopie (SEM) en energiedispersieve röntgenspectroscopie (EDS) -analyses werden uitgevoerd om de vorming van GO/Cu-nanocomposieten te bevestigen. Figuur 1A,B laat zien dat heterogene Cu-nanodeeltjes werden gekweekt op de GO-vellen. Zoals te zien is in figuur 1C, bevestigde de EDS-mapping dat de deeltjes op de GO-plaat Cu-nanodeeltjes waren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Hierin rapporteren we een goedkope en eenvoudige methode voor het bereiden van GO-nanosheets afgezet met Cu-nanodeeltjes, wat een potentieel efficiënte methode zou zijn om antibioticaresistente bacteriën uit te roeien. De cruciale stap bij het synthetiseren van GO/Cu-nanocomposieten is het grondig dispergeren van GO en CuCl2 in de oplossing en het handhaven van een verhoogde temperatuur tijdens het mengen. Verder moet de redoxstap snel worden uitgevoerd omdat het reductiemidde...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Dr. Jonghoon Choi is de CEO/oprichter, en Dr. Yonghyun Choi is de CTO van het Feynman Institute of Technology bij de Nanomedicine Corporation.

Dankbetuigingen

Dit onderzoek werd in 2022 (tijdens het sabbatical leave van professor Jonghoon Choi) ondersteund door de onderzoeksbeurs van de Chung-Ang University. Dit onderzoek werd ook ondersteund door het Basic Science Research Program via de National Research Foundation of Korea (NRF), gefinancierd door het Ministerie van Onderwijs (nr. RS-2023-00275006), en de subsidie van het Korea Environment Industry & Technology Institute (KEITI), gefinancierd door het Koreaanse ministerie van Milieu (MOE) (nr. 2022002980003). Klinische MRSA en P. aeruginosa werden verkregen van het Chung-Ang Universitair Ziekenhuis.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Antibiotic-AntimycoticGibco15240062
Clinical MDR bacterial strains Chung-Ang University Hospital (Seoul, South Korea)
Copper(II) chloride dihydrateDuksan10125-13-0
Field Emission Scanning Electron Microscope (FE-SEM)Carl ZeissSIGMA
Graphene oxideSigma796034
Sodium BorohydrideSigma71320
Transmission Electron Microscopy (TEM)JEOLJEM-2100
Tryptic Soy AgarBD difco236950
Tryptic Soy BrothBD difco211825

Referenties

  1. Doron, S., Gorbach, S. L. Bacterial infections: Overview. International Encyclopedia of Public Health. , 273-282 (2008).
  2. Van Duin, D., Paterson, D. L. Multidrug-resistant bacteria in the community: An update. Infect Dis Clin North Am. 34 (4), 709-722 (2020).
  3. Blair, J. M. A., Webber, M. A., Baylay, A. J., Ogbolu, D. O., Piddock, L. J. V. Molecular mechanisms of antibiotic resistance. Nat Rev Microbiol. 13 (1), 42-51 (2015).
  4. Sánchez-López, E., et al. Metal-based nanoparticles as antimicrobial agents: An overview. Nanomaterials (Basel). 10 (2), 292(2020).
  5. Makabenta, J. M. V., et al. Nanomaterial-based therapeutics for antibiotic-resistant bacterial infections. Nat Rev Microbiol. 19 (1), 23-36 (2021).
  6. Liang, X., Govindaraju, S., Yun, K. Dual applicability of polyaniline coated gold nanorods: A study of antibacterial and redox activity. BioChip J. 12 (2), 137-145 (2018).
  7. Niño-Martínez, N., Salas Orozco, M. F., Martínez-Castañón, G. A., Torres Méndez, F., Ruiz, F. Molecular mechanisms of bacterial resistance to metal and metal oxide nanoparticles. Int J Mol Sci. 20 (11), 2808(2019).
  8. Kim, J., Choi, Y., Park, J., Choi, J. Gelatin-gallic acid microcomplexes release go/cu nanomaterials to eradicate antibiotic-resistant microbes and their biofilm. ACS Infect Dis. 9 (2), 296-307 (2023).
  9. Jang, J., et al. Development of antibiofilm nanocomposites: Ag/cu bimetallic nanoparticles synthesized on the surface of graphene oxide nanosheets. ACS Appl Mater Interfaces. 12 (32), 35826-35834 (2020).
  10. Jang, J., Choi, Y., Tanaka, M., Choi, J. Development of silver/graphene oxide nanocomposites for antibacterial and antibiofilm applications. J Ind Eng Chem. 83, 46-52 (2020).
  11. Bankier, C., et al. Synergistic antibacterial effects of metallic nanoparticle combinations. Sci Rep. 9 (1), 16074(2019).
  12. Mendes, C. R., et al. Antibacterial action and target mechanisms of zinc oxide nanoparticles against bacterial pathogens. Sci Rep. 12 (1), 2658(2022).
  13. Yoon, S., et al. Biologically benign multi-functional mesoporous silica encapsulated gold/silver nanorods for anti-bacterial applications by on-demand release of silver ions. BioChip J. 13 (4), 362-369 (2019).
  14. Slavin, Y. N., Asnis, J., Häfeli, U. O., Bach, H. Metal nanoparticles: Understanding the mechanisms behind antibacterial activity. J Nanobiotechnology. 15 (1), 65(2017).
  15. Ismail, N. A., et al. Sonochemical synthesis of a copper reduced graphene oxide nanocomposite using honey and evaluation of its antibacterial and cytotoxic activities. Front Mol Biosci. 9, 995853(2022).
  16. Tu, Y., et al. Remarkable antibacterial activity of reduced graphene oxide functionalized by copper ions. Adv Funct Mater. 31 (13), 2008018(2021).
  17. Li, M., et al. Toward a molecular understanding of the antibacterial mechanism of copper-bearing titanium alloys against staphylococcus aureus. Adv Healthc Mater. 5 (5), 557-566 (2016).
  18. Yang, Z., et al. Long-term antibacterial stable reduced graphene oxide nanocomposites loaded with cuprous oxide nanoparticles. J Colloid Interface Sci. 533, 13-23 (2019).
  19. Yang, Y., et al. Graphene oxide/copper nanoderivatives-modified chitosan/hyaluronic acid dressings for facilitating wound healing in infected full-thickness skin defects. Int J Nanomedicine. 15, 8231-8247 (2020).
  20. Mao, M., et al. Graphene oxide-copper nanocomposites suppress cariogenic streptococcus mutans biofilm formation. Int J Nanomedicine. 16, 7727-7739 (2021).
  21. Ravikumar, V., Mijakovic, I., Pandit, S. Antimicrobial activity of graphene oxide contributes to alteration of key stress-related and membrane bound proteins. Int J Nanomedicine. 17, 6707-6721 (2022).
  22. Afreen, G., Shoeb, M., Upadhyayula, S. Effectiveness of reactive oxygen species generated from rgo/cds qd heterostructure for photodegradation and disinfection of pollutants in waste water. Mater Sci Eng C. 108, 110372(2020).
  23. Yang, F., et al. Fabrication of graphene oxide/copper synergistic antibacterial coating for medical titanium substrate. J Colloid Interface Sci. 638, 1-13 (2023).
  24. Rajapaksha, P., et al. Antibacterial properties of graphene oxide-copper oxide nanoparticle nanocomposites. ACS Appl Bio Mater. 2 (12), 5687-5696 (2019).
  25. Sachdeva, C., Satyamoorthy, K., Murali, T. S. Microbial interplay in skin and chronic wounds. Curr Clin Microbiol Rep. 9 (3), 21-31 (2022).
  26. Ramos, M. K., Zarbin, A. J. G. Graphene/copper oxide nanoparticles thin films as precursor for graphene/copper hexacyanoferrate nanocomposites. Appl Surf Sci. 515, 146000(2020).
  27. Fivenson, E. M., et al. A role for the gram-negative outer membrane in bacterial shape determination. PNAS. 120 (35), e2301987120(2023).
  28. Wu, C., et al. Copper-containing mesoporous bioactive glass scaffolds with multifunctional properties of angiogenesis capacity, osteostimulation and antibacterial activity. Biomater. 34 (2), 422-433 (2013).
  29. Zhang, W., et al. Graphene oxide-copper nanocomposite-coated porous cap scaffold for vascularized bone regeneration via activation of hif-1α. Adv Healthc Mater. 5 (11), 1299-1309 (2016).
  30. Labauve, A. E., Wargo, M. J. Growth and laboratory maintenance of pseudomonas aeruginosa. Curr Protoc Microbiol. 25 (1), 6E.1.1-6E.1.8 (2012).
  31. Lin, J., et al. The icmf3 locus is involved in multiple adaptation- and virulence-related characteristics in pseudomonas aeruginosa pao1. Front Cell Infect Microbiol. 5, 70(2015).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Antibacteriële nanocomposietenantibioticaresistentiemetaalnanocomposietentransmissie-elektronenmicroscopiescanning-elektronenmicroscopiemethicilline-resistente Staphylococcus aureusPseudomonas aeruginosamicrodilutiemethode in bouillon
Fabricage van antibacterieel grafeenoxide/koper nanocomposieten
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.