Hier beschrijven we de aangepaste behandelmethoden voor het verspillen van zijdeaapjessyndroom (WMS, ook bekend als inflammatoire darmziekte (IBD)-achtige ziekte) met tranexaminezuur. We laten ook zien hoe de therapeutische middelen oraal, subcutaan en intraveneus moeten worden toegediend.
Methodenartikel
Wijziging van de behandelmethoden voor het verspillen van het zijdeaapjessyndroom met tranexaminezuur en ondersteunende maatregelen
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Wasting Marmoset Syndrome (WMS), een ernstige ziekte in kolonies van gewone zijdeaapjes (Callithrix jacchus) in gevangenschap, wordt in verband gebracht met een hoog sterftecijfer. De specifieke oorzaak van WMS is nog onduidelijk en er zijn weinig effectieve behandelingen. Eerder hadden we een tranexaminezuurtherapie met ondersteunende maatregelen gerapporteerd als een nuttige behandeling voor WMS. In de huidige studie beschrijven we de aangepaste methode: een combinatie van 0,1 ml 5% tranexaminezuur subcutaan vijfmaal per week, 2,0 ml aminozuurformulering driemaal per week intraveneus, 5,0 ml Ringer's lactaat met 0,1 ml van een vitamineformulering subcutaan driemaal per week, en orale toediening van 0,1 ml van een ijzerformulering vijf keer per week. We beschrijven ook hoe de oplossing intraveneus via de vena saphena moet worden toegediend met een tip om het dier in bedwang te houden, evenals de gedetailleerde methoden voor orale en subcutane toediening. De aangepaste methoden hebben een vergelijkbare efficiëntie als de oorspronkelijke WMS-behandelingsmethode.
Inleiding
Wasting marmoset syndrome (WMS) is een ernstige ziekte die uniek is voor gewone zijdeaapkolonies in gevangenschap. De belangrijkste symptomen zijn gewichtsverlies, verminderde spiermassa, bloedarmoede, hypoalbuminemie en chronische enteritis 1,2,3,4. Sommige studies hebben gemeld dat 60,5% van de in gevangenschap geëuthanaseerde zijdeaapjes tekenen van chronische enteritis5 vertoonde, en 31-44% van de sterfgevallen betrof deze ziekte6. De hoge prevalentie van deze ziekte maakte een effectieve behandeling noodzakelijk.
In 2016 rapporteerden we dat tranexaminezuur met ondersteunende maatregelen een effectieve behandeling was voor WMS7. Bovendien werd het intestinale eiwitverlies van door WMS aangetaste zijdeaapjes aanzienlijk verzwakt met deze behandeling8. Hoewel het oorspronkelijke behandelingsprotocol zeker effectief was, omvatte het een enigszins hoog volume intraveneuze injectie, een hoge dosis vitamineformulering en dagelijkse fixatie. Aangezien zijdeaapjes gevoelig zijn voor het met de hand vangen en in bedwang houden, moeten deze acties minder vaak voorkomen. Daarom wilden we de zware belasting voor dieren met enige aanpassingen verminderen.
In dit artikel zullen we de gewijzigde methoden geven: subcutane injectie van onverdund tranexaminezuur 5 keer per week (in plaats van intraperitoneale injectie van 5-voudig verdunde tranexaminezuuroplossing 7 keer per week), 2,0 ml aminozuurformulering voor intraveneuze injectie (in plaats van 3,0 ml), 0,1 ml vitamineformulering voor subcutane injectie (in plaats van 0,5 ml), en orale toediening van IRON FORMULA 5 keer per week (in plaats van 7 keer per week).
Protocol
De huidige studie werd uitgevoerd met goedkeuring (W2023-2-041) van de Commissie Dierproeven van RIKEN (Saitama, Japan) en werd uitgevoerd in overeenstemming met de Institutionele Richtlijnen voor Dierproeven. In de huidige studie werden zes vrouwelijke zijdeaapjes (2-6 jaar oud) gebruikt.
1. Criteria voor het starten van de behandeling
- Start de behandeling wanneer een van de volgende criteria in acht wordt genomen: i) lichaamsgewicht < 300 g of een afname van het lichaamsgewicht met >20 g per maand; ii) hypoalbuminemie (serumalbumine < 3,8 g/dl); iii) bloedarmoede (hematocriet < 35%); iv) chronische diarree zonder Clostridium difficile, enteropathogene Escherichia coli of intestinale protozoa; en v) een duidelijke afname van de spiermassa.
OPMERKING: Vanwege uitdroging en de daaropvolgende hemoconcentratie die gepaard gaat met WMS, kunnen de waarden van serumalbumine en hematocriet kunstmatig verhoogd zijn bij aangetaste dieren.
2. Orale toediening
- Meng 0,1 ml van de ijzerformulering (zie de tabel met materialen) met een stuk biscuitgebak.
- Geef de puree aan het behandelde zijdeaapje.
OPMERKING: Zorg ervoor dat het behandelde zijdeaapje de puree volledig heeft doorgeslikt.
3. Subcutane toediening
- Vang de WMS-aangetaste zijdeaap in de thuiskooi door de staart voorzichtig vast te houden.
- Houd met de andere hand het bovenlichaam van het dier vanaf de achterkant vast.
- Breng het dier naar de behandelkamer.
- Laat het dier zich vastklampen aan de borst of arm van de assistent.
- Reinig het gebied van de rug van het dier met een alcoholdoekje.
- Injecteer 5x per week 0,1 ml tranexaminezuur (5% oplossing, zie de Materiaaltabel) subcutaan in de rug met behulp van een naald van 26 G.
- Injecteer 3x per week 5,0 ml Ringer's lactaat (zie de Materiaaltabel) met 0,1 ml van een vitamineformulering (zie de Materiaaltabel) subcutaan met behulp van een naald van 26 G.
OPMERKING: Elke injectie moet binnen 1 minuut op elke verschillende plek worden toegediend.
4. Intraveneuze toediening van aminozuurformulering
- Vang de WMS-aangetaste zijdeaap in de thuiskooi door de staart voorzichtig vast te houden.
- Houd met de andere hand het bovenlichaam van het dier vanaf de achterkant vast.
- Breng het dier naar de behandelkamer.
- Laat de assistent het bovenlichaam van het dier in bedwang houden door de basis van beide armen vast te houden en het onderlichaam in bedwang te houden door met de andere hand de basis van beide benen vast te houden. Vraag de assistent om de duim die het onderlichaam van het dier in bedwang houdt op de voorkant van de knie van het dier te plaatsen om te voorkomen dat deze buigt.
- Maak het kalf van het dier schoon met een alcoholdoekje.
- Injecteer driemaal per week 2,0 ml van de aminozuurformulering (zie de materiaaltabel) intraveneus via de vena saphena met behulp van een vlindernaald van 27 G.
OPMERKING: De injectie moet zo langzaam mogelijk tot 2 minuten worden uitgevoerd. - Vraag de assistent na de injectie om het gebied met absorberend katoen aan te drukken totdat het bloeden stopt.
5. Meting van het lichaamsgewicht
- Weeg het dier na de behandeling (intraveneuze en/of subcutane injectie) eenmaal per week met een draagtas om het lichaamsgewicht te controleren.
OPMERKING: Weeg het zijdeaapje rond dezelfde tijd, omdat het lichaamsgewicht wordt beïnvloed door de aanwezigheid van voedsel.
6. Volledige analyse van het bloedbeeld (CBC) en serumchemietests
- Vang de WMS-aangetaste zijdeaap in de thuiskooi door de staart voorzichtig vast te houden.
- Houd met de andere hand het bovenlichaam van het dier vanaf de achterkant vast.
- Breng het dier naar de behandelkamer.
- Laat de assistent het bovenlichaam van het dier in bedwang houden door de basis van beide armen vast te houden en het onderlichaam in bedwang te houden door met de andere hand de basis van beide benen vast te houden.
- Vraag de beoefenaar om de poot van het dier vast te houden die niet vastzit.
- Reinig de liesstreek van het dier met een alcoholdoekje.
- Verzamel maandelijks 0,4 ml bloed uit de dijbeenader met behulp van een naald van 26 G.
- Gebruik 0,05 ml van het bloedmonster voor CBC-analyse, inclusief hematocriet.
- Laat de rest van het bloedmonster 1 uur bij kamertemperatuur staan en centrifugeer gedurende 20 minuten bij 1.800 × g .
- Gebruik het serum voor chemische tests, waaronder albumine.
OPMERKING: Het volume van het bloedmonster kan worden verminderd door het aantal parameters voor de serumchemietest te minimaliseren. Pas het volume van het bloedmonster aan op basis van de toestand van het individuele zijdeaapje.
Resultaten
De gewijzigde behandelingsmethoden resulteerden in een verhoogd hematocriet (figuur 1A), serumalbumine (figuur 1B) en lichaamsgewicht (figuur 1C) bij de door WMS aangetaste zijdeaapjes. Significante verschillen in hematocriet (P < 0,05, Wilcoxon matched-pairs signed rank test), serum albumine (P < 0,05, Wilcoxon matched-pairs signed rank test) en lichaamsgewicht (P < 0,05, Wilcoxon matched-pairs signed rank test) werden gezien tussen voor en na de behandeling.
De effecten van de behandeling op het uiterlijk werden ook waargenomen. Figuur 2 toont het uiterlijk van een WMS-aangetaste zijdeaapje. Vóór de behandeling werden tabefactie, gebogen rug, ruwe vacht (Figuur 2A) en alopecia (Figuur 2B) waargenomen, terwijl er na de behandeling geen abnormaal uiterlijk werd gezien (Figuur 2C,D).
Figuur 1: Veranderingen (voor versus na de behandeling) in hematocriet, serumalbumine en lichaamsgewicht in een zijdeaapje dat de gewijzigde behandeling krijgt. (A) Hematocrietwaarden, (B) serumalbuminewaarden en (C) lichaamsgewicht. De stippellijnen geven de criteriumwaarden aan. Afkortingen: Htc = hematocriet; Alb = serumalbumine; BW = lichaamsgewicht. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Representatief uiterlijk van WMS-aangetaste zijdeaapjes. (A) Uiterlijk van het voorbehandelingsdier: tabefactie, gebogen rug en ruwe vacht worden waargenomen. (B) Staart van het voorbehandelingsdier: alopecia wordt waargenomen. (C) Uiterlijk van het dier na de behandeling. (D) Staart van het dier na de behandeling. Afkorting: WMS = wasting marmoset syndrome. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Discussie
In 2016 rapporteerden we dat tranexaminezuur met ondersteunende maatregelen een effectieve behandeling was voor WMS, wat het eerste rapport was dat WMS-therapie aantoonde zonder het gebruik van glucocorticoïden. Bij mensen worden glucocorticoïden beschouwd als de meest effectieve behandeling van IBD. Predonizolon, een van de meest gebruikte glucocorticoïden, is echter niet geschikt voor WMS-behandeling vanwege de nadelige effecten. Hoewel budesonide, een glucocorticoïde, werd gerapporteerd voor WMS-behandeling9, was de therapie relatief ineffectief bij dieren met acute vormen van WMS. Tranexaminezuur is een plasmineremmer die ontstekingsremmende effecten heeft en er werden geen noemenswaardige bijwerkingen gezien in onze oorspronkelijke methoden. Hoewel het oorspronkelijke behandelprotocol zeker effectief was, legde het een zware last op voor dieren en verzorgers.
In de huidige studie werden de aangepaste behandelmethoden voor WMS uitgevoerd om zowel de fysiologische belasting van het dier als de werklast van de verzorgers te verminderen. Bij de gewijzigde methoden werd de toedieningsweg van tranexaminezuur gewijzigd (van intraperitoneaal naar subcutaan), wat bijdroeg aan het verminderen van het risico op letsel aan de buikorganen. De tranexaminezuuroplossing werd in dit protocol niet verdund om het risico op besmetting en de bereidingstijd te verminderen. Bij de oorspronkelijke methoden werd 3,0 ml van de aminozuurformulering intraveneus geïnjecteerd. Het volume was echter wat groot omdat 5,0 ml/kg wordt aanbevolen om als bolus10 te worden toegediend. Daarom werd het volume verminderd in de gewijzigde methoden.
De vitamineformulering die in dit protocol wordt gebruikt, bevat vitamine B en C. In de oorspronkelijke methode bevat 0,5 ml van de vitamineformulering 2,5 mg thiaminechloridehydrochloride, wat 2,5x de vereiste was van in het laboratorium gehuisveste niet-menselijke primaten na het spenen11. Bij de huidige methode werd 0,1 ml van de vitamineformulering toegediend, die 1,0 mg thiaminechloridehydrochloride bevat. De frequentie van toediening van de ijzerformulering en de tranexaminezuuroplossing werd verminderd in de gewijzigde methoden, wat bijdroeg aan de vermindering van de belasting voor zowel de dieren als de verzorgers.
Zoals beschreven in de sectie Representatieve resultaten, waren er significante behandelingseffecten in de gewijzigde methoden. De gemiddelde behandelingsduur was 37,8 ± 25,34 dagen, wat korter was dan die van de oorspronkelijke methoden (56 dagen). Omdat zijdeaapjes gevoelig zijn voor mentale stress, hebben langdurige behandelingen het tegenovergestelde effect op het dier, zoals verminderde eetlust. Daarom raden we aan dat de verzorgers de timing van het beëindigen van de behandeling uitgebreid moeten beslissen, niet alleen op basis van de waarde van elke parameter, maar ook op basis van het gedrag van het dier.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben geen belangenconflicten bekend te maken.
Dankbetuigingen
Dit onderzoek werd gedeeltelijk ondersteund door het Japan Agency for Medical Research and Development (AMED) in het kader van het Brain Mapping by Integrated Neurotechnologies for Disease Studies (Brain/MINDS) project (subsidienummer JP23dm0207001).
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 1.0 mL Spuit | Terumo Corporation, Tokyo, Japan | SS-01T | Voor subcutane injectie van Tranexamzuur |
| 10 mL Spuit | Terumo Corporation, Tokyo, Japan | SS-10SZ | Voor intraveneuze toediening van aminozuurformule |
| 26 G Naald | Terumo Corporation, Tokyo, Japan | NN-2613S | Voor subcutane injectie |
| 27 G Butterflynaald Type D | Terumo Corporation, Tokyo, Japan | SV-27DL | Voor intraveneuze toediening van aminozuurformule |
| 5 mL Spuit | Terumo Corporation, Tokyo, Japan | SS-05SZ | Voor subcutane injectie van Ringer's lactate en Vitamine formule |
| Aminoleban Injectie | Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan | 1942 | Voor subcutane injectie van Ringer's lactate en Vitamine formule |
| C-PARA | Takata Pharma Co., Ltd., Saitama, Japan | 120-31960-0 | Vitamine formule |
| FCV Vloeistof | Minerva Corporation, Saitama, Japan | IJzerformule | |
| Lactec Injectie | Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan | 0714 | Ringer's lactate |
| Vasolamin Injectie | Meiji Seika Pharma Co., Ltd., Tokyo, Japan | DBASOS | Tranexamzuur |
Referenties
- Baxter, V. K., et al. Serum albumin and body weight as biomarkers for the antemortem identification of bone and gastrointestinal disease in the common marmoset. PLoS ONE. 8 (12), e82747(2013).
- Brack, M., Rothe, H. Chronic tubulointerstitial nephritis and wasting disease in marmosets (Callithrix jacchus). Vet Pathol. 18, Suppl 6 45-54 (1981).
- Chalifoux, L. V., Bronson, R. T., Escajadillo, A., McKenna, S. An analysis of the association of gastroenteric lesions with chronic wasting syndrome of marmosets. Vet Pathol Suppl. 7, 141-162 (1982).
- Logan, A. C., Khan, K. N. Clinical pathologic changes in two marmosets with wasting syndrome. Toxicol Pathol. 24 (6), 707-709 (1996).
- Ludlage, E., Mansfield, K. Clinical care and diseases of the common marmoset (Callithrix jacchus). Comp Med. 53 (4), 369-382 (2003).
- Ross, C. N., Davis, K., Dobek, G., Tardif, S. D. Aging phenotypes of common marmosets (Callithrix jacchus). J Aging Res. 2012, 567143(2012).
- Yoshimoto, T., Niimi, K., Takahashi, E. Curative effects of tranexamic acid with supportive measures on wasting marmoset syndrome. Comp Med. 66 (6), 1-6 (2016).
- Niimi, K., et al. Measurement of the α1-proteinase inhibitor (α1-antitrypsin) of common marmoset and intestinal protein loss in wasting syndrome. Biosci Rep. 39 (7), 20190562(2019).
- Otovic, P., Smith, S., Hutchinson, E. The use of glucocorticoids in marmoset wasting syndrome. J Med Primatol. 44 (2), 53-59 (2015).
- Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (5), 600-613 (2011).
- Lewis, S. M., Hotchkiss, C. E., Ullrey, D. E. Chapter 13. Nutrition and nutritional diseases. The Laboratory Primates. Wolfe-Coote, S. , 181-208 (2005).
Herprints en machtigingen
