Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Dynamische multiparameter beoordeling van de bloedplaatjesfunctie met behulp van een capacitieve biosensor

1.1K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/66783

⸱

2 mei 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Mechanical Engineering, University of Washington

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Een protocol voor een nieuwe dynamische multiparameter functionele test van bloedplaatjes met behulp van een capacitieve biosensor wordt hier gepresenteerd. Deze benadering, ontworpen in een semi-rigide micro-omgeving om de fysiologische relevantie te vergroten, biedt drie outputparameters die gevoelig zijn voor het aantal bloedplaatjes, stimulatiesterktes en activeringsroutes.

Samenvatting

Bloedplaatjes spelen een fundamentele rol bij de bloedstolling door middel van een reeks gereguleerde reacties, waaronder adhesie, verspreiding, granulaire secretie, aggregatie en cytoskeletcontractie. De huidige tests zijn echter beperkt tot gedeeltelijke analyse van de bloedplaatjesfunctie onder niet-fysiologische omstandigheden. Er is dus een verbeterde test nodig die de dynamische en veelzijdige aard van de bloedplaatjesfunctie in fysiologische omgevingen weerspiegelt. In deze context wordt een nieuwe benadering geïntroduceerd om verschillende belangrijke parameters met betrekking tot de bloedplaatjesfunctie te meten in een meer fysiologisch relevante ex vivo semi-rigide micro-omgeving in vergelijking met traditionele testen. Deze methode maakt gebruik van een geavanceerde elektrische biosensor, de membraancapaciteitssensor (MCS), die unieke inzichten biedt in het stollingsproces door middel van drie verschillende uitlezingen. Deze uitlezingen zijn zeer gevoelig voor variaties in het aantal bloedplaatjes, de stimulatie-intensiteit en specifieke activeringsroutes. Als een puur elektrisch detectieplatform toont het MCS een aanzienlijk potentieel als diagnostisch hulpmiddel voor het detecteren van primaire hemostatische functiestoornissen, het evalueren van de werkzaamheid van therapeutische behandelingen en het bevorderen van een breder begrip van de rol van bloedplaatjes bij hemostase en trombose.

Inleiding

Bloedplaatjes, gespecialiseerde bloedcellen, zijn cruciaal bij het orkestreren van de hemostatische respons om bloedingen na letsel te stoppen en bij het vergemakkelijken van de genezing van bloedvaten1. Bovendien dienen ze ook als cruciale bemiddelaars bij trombose, een belangrijke oorzaak van sterfgevallen door trombo-embolische aandoeningen wereldwijd 2,3,4,5,6. Wanneer een vasculair letsel optreedt, ondergaan bloedplaatjes een reeks complexe, gereguleerde en meerfasige functionele processen. Deze omvatten hechting aan de intimale matrix, een instroom van intracellulair calcium die conformatieveranderingen van bloedplaatjes veroorzaakt, activering, granulesecretie, aggregatie en cytoskeletale contractie, uiteindelijk het vormen en stabiliseren van hemostatische pluggen om de beschadigde plaatsen af te dichten en bloedingen te voorkomen 7,8. Ondanks aanzienlijke vooruitgang op het gebied van bloedplaatjesaggregatieremmers en therapeutische strategieën 9,10,11, blijft het risico op trombose bestaan. De behandeling van plaatjesaggregatieremmers brengt uitdagingen met zich mee, waaronder het risico op iatrogene bloedingen, moeilijkheid om antitrombotische werkzaamheid te bereiken met behoud van hemostase, en variabiliteit in responsiviteit van de patiënt, waaronder resistentie tegen geneesmiddelen12,13.

Hoewel de moleculaire mechanismen die de responsfasen van bloedplaatjes bepalen, goed gedocumenteerd zijn, blijven de huidige methoden voor het testen van de bloedplaatjesfunctie suboptimaal. Traditionele laboratoriumtests schieten vaak tekort omdat ze slechts beperkte aspecten van de bloedplaatjesactiviteit in een vroeg tot middelgroot stadium beoordelen, zoals adhesie, aggregatie of stolselviscositeit 7,14,15,16,17,18. Deze gedeeltelijke analyse kan leiden tot onvoldoende informatie. Bovendien bieden deze tests geen gelijktijdige, continue en snelle beoordeling van meerdere cruciale functionele elementen van bloedplaatjes binnen een enkele test. Bijgevolg belemmert deze beperking de vooruitgang in zowel de klinische als de experimentele hematologie. In de loop van de tijd is er een overvloed aan impedimetrische of capacitieve sensoren ontwikkeld voor verschillende biomedische toepassingen 19,20,21,22,23,24,25,26,27,28.

Hier presenteren we het protocol voor een beoordeling van de gemultiplexte bloedplaatjesfunctie met behulp van een capacitieve biosensor. De voorgestelde aanpak biedt een aantrekkelijke eigenschap door dynamische veranderingen in een breed spectrum van bloedplaatjesfuncties op cellulair niveau gevoelig te volgen. De gepresenteerde aanpak maakt gebruik van een biosensor die bestaat uit twee microchips: een bovenste siliconenchip, die wegwerpbaar is, met een monsterputje voor citrerend bloedplaatjesrijk plasma en een detectie-elektrode gecoat met humaan fibronectine om de hechting van bloedplaatjes te vergemakkelijken, naast een herbruikbare siliciumchip aan de onderkant waarin een referentie-elektrode is ondergebracht. Continue meting van dynamische capaciteitsveranderingen tijdens het hele stollingsproces, inclusief adhesie, activering en post-activering van bloedplaatjes, maakt een gevoelige analyse mogelijk die verband houdt met variaties in het aantal bloedplaatjes, niveaus van activering van bloedplaatjes en de remming van activeringsroutes. De klinische haalbaarheid en bruikbaarheid van deze methode werden aangetoond met behulp van relevante menselijke plasmamonsters, wat het potentieel ervan voor een robuuste beoordeling van de bloedplaatjesfunctie in klinische omgevingen onderstreept.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Het studievoorstel werd goedgekeurd door de Human Subjects Division (HSD) van de Internal Review Board (UW-IRB; Studie-ID: STUDY00005211). Alle vrijwillige proefpersonen die aan het onderzoek deelnamen, gaven schriftelijke geïnformeerde toestemming. De details van de reagentia en apparatuur die in dit onderzoek zijn gebruikt, staan vermeld in de materiaaltabel.

1. Fabricagestappen voor de membraan capacitieve sensor (MCS)

OPMERKING: De MCS-sensor is vervaardigd met behulp van traditionele microfabricagetechnieken. Deze biosensor was samengesteld uit een bovenste (T-) en onderste (B-) membraancapaciteitschipel (MCC). In het kort worden de fabricagestappen weergegeven in figuur 1.

  1. Microfabricagestappen voor T-MCC (Figuur 1A)
    1. Ontwerp de lay-out van de T-MCC met behulp van standaard CAD-lay-outsoftware voor een 4-inch siliciumwafersubstraat.
    2. Breng het ontwerp over op een fotomasker van chroomglas met behulp van het standaard maskerfabricageproces29,30.
    3. Breng op een schoon, dubbelzijdig gepolijst siliciumsubstraat (400 μm dik) 500 nm dik Si3N4 aan met behulp van standaard lagedruk chemische dampafzetting (LPCVD) techniek31. Centrifugeer de laag van 12 μm AZ 9260 fotoresist bij 2000 tpm gedurende 25 s met behulp van een handmatige spincoater.
    4. Gebruik de standaard UV-fotolithografietechniek32 om het patroon van de fotoresist te maken, waarbij de fotoresist wordt belicht met het chroomglazen fotomasker in een UV-aligner en de resist wordt ontwikkeld in een ontwikkelaarsoplossing om het aan UV blootgestelde gebied van de resist te verwijderen.
    5. Patroon de onderliggende 500 nm dikke siliciumnitridelaag met behulp van een reactief ionenetsproces, waardoor het siliciumsubstraat wordt blootgelegd.
    6. Verwijder het blootgestelde 400 μm dikke siliciumsubstraat met behulp van een standaard Bosch-proces: Deep Reactive Ion Si Etch-proces33.
    7. Bereken het gewenste aantal etscycli om 400 μm silicium te verwijderen.
      OPMERKING: Dit is afhankelijk van het gereedschap dat voor het proces wordt gebruikt, omdat dit de etssnelheid beïnvloedt (in dit geval was het 1,8 μm/cyclus).
    8. Om te voorkomen dat de Si3N4-laag per ongeluk wordt geëtst, moet u het droge etsen ten minste 10 μm eerder stoppen (d.w.z. bij 390 μm). Verwijder het resterende silicium met behulp van de traditionele, zeer selectieve KOH bij 80 °C gedurende 5 minuten.
    9. Breng achtereenvolgens 20 nm Cr en 150 nm Au-metaallagen aan met behulp van een E-straalverdampingsproces34 en een schaduwmasker om de detectie-elektrode in de T-MCC te fabriceren.
    10. In dit stadium worden de T-MCC's in de wafer met elkaar verbonden door kleine siliciumhouders. Scheid de T-MCC's door voorzichtig in de kleine houders te prikken.
  2. Microfabricagestappen voor B-MCC (Figuur 1B)
    1. Breng op een schoon, thermisch geoxideerd siliciumsubstraat (400 μm dik) Cr/Au (20 nm, 150 nm) metaallagen aan met behulp van een schaduwmasker, vergelijkbaar met stap 1.1.9.
    2. Gebruik standaard fotolithografie32 met uitlijning aan de achterkant, gevolgd door een KOH-natetsstap om de B-MCC's vrij te geven.
      OPMERKING: De T- en de B-MCC hebben contactpads van 2,5 x 1,5 cm.

2. Biofunctionalisering van de capacitieve sensor

OPMERKING: In het kort gaat deze stap over het coaten van de T-MCC-elektrode met humaan fibronectine (Fn) om de hechting van bloedplaatjes op de sensor te vergemakkelijken.

  1. Reinig de detectie-elektrode vóór het aanbrengen van biomoleculaire coatings gedurende 45 s bij 100 W met zuurstofplasma.
  2. Voeg 1-dodecaanthiol (1 mM) in 200-proof ethanol toe aan het monsterputje op T-MCC's.
  3. Plaats de T-MCC's in een container gevuld met droge stikstof, verzegeld en omwikkeld met parafilm gedurende 24-48 uur.
  4. Spoel het gouden oppervlak af met gedeïoniseerd water en 200-proof ethanol, gevolgd door stikstofdroging bij kamertemperatuur. Bewaar de sensoren in dit stadium bij 2-8 °C in een droge stikstofatmosfeer tot de volgende stappen.
  5. Voeg Fn-oplossing in met fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS, 50 μg/ml) 12 uur vóór de meting toe aan het putje en incubeer gedurende 2-8 uur bij 37 °C.

3. Instelling van de capaciteitssensor

OPMERKING: Figuur 2 geeft de foto van de experimentele opstelling weer.

  1. Gebruik een LCR-meter met micropositioneerders en naaldsondes om elektrisch contact te maken met de sensor.
  2. Gebruik 3D-geprinte plastic armaturen (zie materiaaltabel) om de T- en de B-MCC stevig te plaatsen. De onderste armatuur is uitgerust met stoppers op de x-y-as om een nauwkeurige uitlijning van de T-MCC over de B-MCC te garanderen om een condensator te vormen.
    OPMERKING: Alle gebruikte 3D-printers waren afkomstig van de Universiteit van Washington.
  3. Pas een sinusvormig signaal (0,5 V) toe bij 100 kHz en een bemonsteringsfrequentie van 8 Hz.

4. Preparaat van gecitreerd bloedplaatjesrijk plasma (c-PRP)

OPMERKING: Alle bloedmonsters waren afkomstig van vrijwilligers die aan dit onderzoek hebben deelgenomen. Geen van de deelnemers had een eerder bekende bloedplaatjesafwijking of stollingsstoornis en ze hadden in de twee weken voorafgaand aan de monsterafname geen bloedplaatjesmedicatie gebruikt, waaronder niet-steroïde anti-inflammatoire geneesmiddelen (NSAID's). Een gediplomeerd flebotomist voerde een bloedafname uit met behulp van een naald van 21 G op standaard 3,2% citraatbuisjes. De eerste 1 ml werd weggegooid om besmetting met de weefselfactor te voorkomen. Monsters werden vervoerd in een polystyreencontainer en alle metingen werden binnen 6 uur na bloedafname uitgevoerd.

  1. Centrifugeer het volbloedmonster bij 200 x g gedurende 10 minuten bij 20 °C om c-PRP te verkrijgen.
  2. Breng de c-PRP over in een steriele container en voer het aantal bloedplaatjes uit. Incubeer voor remmerstudies de c-PRP met een vooraf gedefinieerde concentratie van het geneesmiddel in de buffer van Tyrode (zie de sectie Resultaten voor meer informatie).

5. Functionele test van bloedplaatjes

OPMERKING: Het schema voor de gepresenteerde functionele test voor bloedplaatjes wordt weergegeven in figuur 3.

  1. Monteer de T- en de B-MCC in de 3D-geprinte armaturen.
  2. Meet de basislijncapaciteitsmeting gedurende 5 minuten en voeg vervolgens 45 μL c-PRP toe aan het monsterputje in de T-MCC.
  3. Wacht 30 minuten totdat de bloedplaatjes zich hechten aan de Fn-gecoate elektrode in de T-MCC.
  4. Verwijder voorzichtig 30 μL van de c-PRP zonder de bloedplaatjes aan te raken die aan het membraan zijn bevestigd, en vul onmiddellijk aan met de buffer van Tyrode. Herhaal het wassen minstens 5 keer met een interval van 20 s om ervoor te zorgen dat er na activering geen extra bloedplaatjes of macroaggregaten op de detectie-elektrode terechtkomen.
  5. Voeg 10 μl van de agonistoplossing (trombine of ADP) toe in een gewenste concentratie. Reken op 80 minuten evenwichtstijd.

6. Gegevens en statistische analyse voor de signaalmarkeringen

NOTITIE: De capaciteit wordt continu gemeten vanaf stap 5.2-5.5.

  1. Meet voor het capaciteitssignaal tijdens de adhesiefase (stap 5.3) de maximale verandering in capaciteit na de evenwichtstijd van 30 minuten, die wordt aangeduid als ΔCadh.
  2. Meet op dezelfde manier voor de activeringsfase (stap 5.5) de maximale verandering in capaciteit, die wordt aangeduid als ΔC-act, en de helling van de curve tussen 200-300 s na activering, die wordt aangeduid als S-act.
  3. Gebruik variantieanalyse (ANOVA) met Tukey's post-hoc om de resultaten tussen de groepen te vergelijken. Gebruik Shapiro-Wilk Goodness of Fit voor normale verdelingsanalyse.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Deze studie heeft tot doel een dynamische beoordeling van de bloedplaatjesfunctie uit te voeren. Volgens het hierboven beschreven protocol werd de c-PRP-oplossing bereid en werden bloedplaatjes op de Fn-gecoate elektrode in T-MCC geplaatst. De vrij zwevende bloedplaatjes werden tijdens de wasstap weggespoeld en een agonist werd toegevoegd om de aangehechte bloedplaatjes te activeren. Gedetailleerde resultaten en discussies zijn te vinden in ons vorige rapport28.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Deze studie was een pionier in een nieuwe, op capaciteit gebaseerde methode voor het beoordelen van de bloedplaatjesfunctie, die zowel de adhesie als de dynamiek van bloedplaatjes na activering binnen een enkel apparaat evalueert, wat het eerste gerapporteerde voorbeeld van een dergelijke benadering is. Het nieuwe experimentele protocol introduceert een relatief eenvoudige techniek om de effecten van fibrinevorming en plasmastollingsfactoren tegen te gaan door middel van een wash-outproc...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren geen tegenstrijdige belangen.

Dankbetuigingen

De auteurs betuigen hun dankbaarheid aan Dr. Moritz Stolla en Dr. Jason Acker voor hun waardevolle discussies en technische ondersteuning. Ze erkennen ook de Biology Imaging Facility van de Universiteit van Washington voor zijn infrastructuur en ondersteuning. Dit werk ontving gedeeltelijke financiering van het CoMotion Innovation Fund van de Universiteit van Washington (Grant No. 682548, D.Y.G.).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1-DodecanethiolSigma-Aldrich, MO, U.S.A471364-100ML1 mM
200-proof ethanolSigma-Aldrich, MO, U.S.AEX0276-1
3D printerShenzhen Creality 3D Technology Co, Ltd.Ender-3 V3
3D printing materialHATCHBOX 3D, CA, U.S.A3D PLA-1KG-1.75
Adenosine 5'-diphosphateSigma Aldrich, U.S.A01905-250MG-FADP
Aspirin Sigma-Aldrich, MO, U.S.AA2093-100G
Deep Reactive Ion EtchingOmega Engineering, Inc.SPTS Rapier DRIE
Dimethyl SulfoxideSigma-Aldrich, MO, U.S.AD8418-50MLDMSO
High Vacuum Deposition SystemsCHA SEC-600
Human FibronectinSigma-Aldrich, MO, U.S.ACLS356008-1EAFn
KOHSigma-Aldrich, MO, U.S.AP1767-250G
LCR meter Keithley Instruments, Inc., OH, U.S.AKeithley EL 4980AL
LCR meter holdersSignatone Corporation, CA, U.S.ASCA-50-4
Mask Aligner SystemABM, U.S.A, Inc.ABM/6/350/NUV/DCCD/SA
Micro-positionersSignatone, CA, U.S.AS-725
needle probeSignatone Corporation, CA, U.S.ASCAT5T-412.5 μm radius
Phosphate Buffered SalineSigma-Aldrich, MO, U.S.AP4474-1LPBS, pH 7.4
Reactive Ion EtchingPlasma-Therm,U.S.ARIE Vision 320
silicon substrateWafer World IncSKU# 1766
Standard 3.2% citrate tubesTiger Medical, NJ, U.S.A.Covidien / Cardinal Health 8881340478 Monoject
ThrombinEnzyme Research Laboratories, U.S.AHT 1002a
TicagrelorSigma-Aldrich, MO, U.S.APHR2788-400MG
Tyrode’s bufferBoston Bioproducts, U.S.ABSS-375
UV photoresistAZ electronic materials, NC, U.S.A.AZ 926015um

Referenties

  1. George, J. N. Platelets. Lancet. 355 (9214), 1531-1539 (2000).
  2. Wendelboe, A. M., Raskob, G. E. Global burden of thrombosis: Epidemiologic aspects. Circ Res. 118 (9), 1340-1347 (2016).
  3. Heit, J. A. Epidemiology of venous thromboembolism. Nat Rev Cardiol. 12 (8), 464-474 (2015).
  4. Moran, A. E., et al. The global burden of ischemic heart disease in 1990 and 2010: The global burden of disease 2010 study. Circulation. 129 (14), 1493-1501 (2014).
  5. Campbell, B. C. V., et al. Ischaemic stroke. Nat Rev Dis Primers. 5 (1), 70(2019).
  6. Ruggeri, Z. M. Platelets in atherothrombosis. Nat Med. 8 (11), 1227-1234 (2002).
  7. Harrison, P. Platelet function analysis. Blood Rev. 19 (2), 111-123 (2005).
  8. Van Der Meijden, P. E. J., Heemskerk, J. W. M. Platelet biology and functions: New concepts and clinical perspectives. Nat Rev Cardiol. 16 (3), 166-179 (2019).
  9. Bhatt, D. L., Topol, E. J. Scientific and therapeutic advances in antiplatelet therapy. Nat Rev Drug Discov. 2 (1), 15-28 (2003).
  10. Mcfadyen, J. D., Schaff, M., Peter, K. Current and future antiplatelet therapies: Emphasis on preserving hemostasis. Nat Rev Cardiol. 15 (3), 181-191 (2018).
  11. Michelson, A. D. Advances in antiplatelet therapy. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2011, 62-69 (2011).
  12. Sweeny, J. M., Gorog, D. A., Fuster, V. Antiplatelet drug 'resistance'. Part 1: Mechanisms and clinical measurements. Nat Rev Cardiol. 6 (4), 273-282 (2009).
  13. Mega, J. L., Simon, T. Pharmacology of antithrombotic drugs: An assessment of oral antiplatelet and anticoagulant treatments. Lancet. 386 (9990), 281-291 (2015).
  14. Carr, M. E. Development of platelet contractile force as a research and clinical measure of platelet function. Cell Biochem Biophys. 38 (1), 55-78 (2003).
  15. Gresele, P., Bury, L., Mezzasoma, A. M., Falcinelli, E. Platelet function assays in diagnosis: An update. Expert Rev Hematol. 12 (1), 29-46 (2019).
  16. Pakala, R., Waksman, R. Currently available methods for platelet function analysis: Advantages and disadvantages. Cardiovasc Revasc Med. 12 (5), 312-322 (2011).
  17. Paniccia, R., Priora, R., Liotta, A. A., Abbate, R. Platelet function tests: A comparative review. Vasc Health Risk Manag. 11, 133-148 (2015).
  18. Rand, M. L., Leung, R., Packham, M. A. Platelet function assays. Transfus Apher Sci. 28 (3), 307-317 (2003).
  19. Alafeef, M., Dighe, K., Moitra, P., Pan, D. Rapid, ultrasensitive, and quantitative detection of sars-cov-2 using antisense oligonucleotides directed electrochemical biosensor chip. ACS Nano. 14 (12), 17028-17045 (2020).
  20. Chowdhury, A. D., Takemura, K., Li, T. C., Suzuki, T., Park, E. Y. Electrical pulse-induced electrochemical biosensor for hepatitis e virus detection. Nat Commun. 10 (1), 3737(2019).
  21. Park, J. H., et al. Capacitive biosensor based on vertically paired electrodes for the detection of sars-cov-2. Biosens Bioelectron. 202, 113975(2022).
  22. Qureshi, A., Pandey, A., Chouhan, R. S., Gurbuz, Y., Niazi, J. H. Whole-cell based label-free capacitive biosensor for rapid nanosize-dependent toxicity detection. Biosens Bioelectron. 67, 100-106 (2015).
  23. Rassaei, L., Mathwig, K., Kang, S., Heering, H. A., Lemay, S. G. Integrated biodetection in a nanofluidic device. ACS Nano. 8 (8), 8278-8284 (2014).
  24. Wang, L., et al. A sensitive DNA capacitive biosensor using interdigitated electrodes. Biosens Bioelectron. 87, 646-653 (2017).
  25. Zhurauski, P., et al. Sensitive and selective affimer-functionalized interdigitated electrode-based capacitive biosensor for her4 protein tumor biomarker detection. Biosens Bioelectron. 108, 1-8 (2018).
  26. Pourang, S., et al. Assessment of fibrinolytic status in whole blood using a dielectric coagulometry microsensor. Biosens Bioelectron. 210, 114299(2022).
  27. Sekar, P. K., et al. Simultaneous multiparameter whole blood hemostasis assessment using a carbon nanotube-paper composite capacitance sensor. Biosens Bioelectron. 197, 113786(2022).
  28. P, K. S., et al. Comprehensive multiparameter evaluation of platelet function using a highly sensitive membrane capacitance sensor. Biosens Bioelectron. 228, 115192(2023).
  29. Franssila, S. Introduction to microfabrication. , 2nd edn, John Wiley & Sons. (2010).
  30. Syed Rizvi, S. R. Handbook of photomask manufacturing technology. , CRC Press. (2018).
  31. Yota, J., Hander, J., Saleh, A. A. A comparative study on inductively-coupled plasma high-density plasma, plasma-enhanced, and low pressure chemical vapor deposition silicon nitride films. J Vacuum Sci Technol A. 18 (2), 372-376 (2000).
  32. Thompson, L. F. An introduction to lithography. ACS Symp Series. 219, 1-13 (1983).
  33. Laermer, F., Urban, A. Challenges, developments and applications of silicon deep reactive ion etching. Microelectron Eng. 67 - 8, 349-355 (2003).
  34. Harsha, K. S. Principles of vapor deposition of thin films. , Elsevier. eBook ISBN: 9780080480312 (2005).
  35. Lea-Henry, T. N., Carland, J. E., Stocker, S. L., Sevastos, J., Roberts, D. M. Clinical pharmacokinetics in kidney disease: Fundamental principles. Clin J Am Soc Nephrol. 13 (7), 1085-1095 (2018).
  36. Offermanns, S. Activation of platelet function through g protein-coupled receptors. Circ Res. 99 (12), 1293-1304 (2006).
  37. Trejo-Velasco, B., et al. Impact of comorbidities and antiplatelet regimen on platelet reactivity levels in patients undergoing transcatheter aortic valve implantation. J Cardiovasc Pharmacol. 78 (3), 463-473 (2021).
  38. Violi, F., Pignatelli, P., Basili, S. Nutrition, supplements, and vitamins in platelet function and bleeding. Circulation. 121 (8), 1033-1044 (2010).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Membraancapacitieve sensorbloedplaatjesadhesiebloedplaatjesactivatiebloedplaatjesaggregatiehemostasebeoordelingbloedplaatjesrijk plasmaelektrisch sensingsplatformthrombine-activatie
Dynamische multiparameter beoordeling van de bloedplaatjesfunctie met behulp van een capacitieve biosensor
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.