Hier wordt een minimaal invasieve chirurgische ingreep getoond, waarbij de laser-Doppler-sonde op de schedel wordt geplaatst over het distale gebied van de middelste hersenslagader (MCA), een periorbitale locatie die geschikt is voor ratten en muizen, om de bloedstroom te beoordelen tijdens voorbijgaande MCA-occlusie.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Periorbitale plaatsing van een laserdoppler-sonde voor monitoring van de cerebrale bloedstroom voorafgaand aan occlusie van de middelste hersenslagader in knaagdiermodellen
In dit artikel
Erratum-melding
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Samenvatting
Samenvatting
Occlusie van de middelste hersenslagader (MCAO) is de gouden standaardmethode voor preklinische modellering van ischemische beroerte bij knaagdieren. Succesvolle occlusie wordt echter niet gegarandeerd, zelfs niet door de meest bekwame chirurgische handen. Fouten treden voornamelijk op wanneer het filament niet op de juiste diepte wordt geplaatst en omvatten gevallen van geen infarct of perforatie van bloedvaten, wat de dood kan veroorzaken. Laser Doppler flowmetrie (LDF) is een betrouwbare techniek die real-time feedback geeft over de regionale cerebrale bloedstroom (CBF) tijdens de MCAO-procedure. Hier demonstreren we een snelle techniek voor periorbitale plaatsing van een laser Doppler-sonde voor het meten van CBF bij zowel muizen als ratten. Onze grondgedachte was om de implementatie van LDF te vereenvoudigen en wijdverbreid gebruik aan te moedigen voor verbeterde chirurgische betrouwbaarheid. De techniek elimineert de noodzaak van schedelverdunning en gespecialiseerde apparatuur, met plaatsing in het periorbitale gebied in plaats van dorsale plaatsing, wat de efficiëntie en het gemak van adoptie bevordert. Het hier beschreven protocol omvat preoperatieve voorbereidingen, plaatsing van de periorbitale Doppler-sonde en postoperatieve zorg. Representatieve resultaten omvatten visuele afbeeldingen van procedurele elementen, samen met representatieve LDF-traceringen die succesvolle MCAO-operaties illustreren, waarbij gevallen van mislukte plaatsing van filamenten tot complicaties leiden. Het protocol illustreert LDF bij het bevestigen van de juiste plaatsing van filament en biedt een vereenvoudigde procedure in vergelijking met alternatieve methoden.
Inleiding
De methode voor occlusie van de middelste hersenslagader (MCAO) is op grote schaal gebruikt bij knaagdieren sinds ze in 1986 in de wetenschappelijke gemeenschap werd geïntroduceerd voor toepassing op ratten1 met de Longa-aanpassing beschreven in 19902, en aanpassingen voor muizen kort daarna3. Hoewel niet beschreven in de publicatie van Longa, werd het gebruik van een laser Doppler flowmetry (LDF) signaal om de plaatsing van het filament te bevestigen al snel beschreven in de literatuur4. LDF-tewerkstelling tijdens de MCAO-procedure is prom....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Volwassen muizen en ratten werden gebruikt om dit protocol te illustreren (25 g, C57BL/6J, Jackson Laboratories; 250 g, Sprague Dawley, Envigo). Dierbehandeling en experimentele procedures werden uitgevoerd met goedkeuring en in overeenstemming met de University of Arizona Institutional Animal Care and Use Committee, nationale wetten en volgens de principes van proefdierverzorging11. Ratten en muizen werden gehuisvest met een 12-uurs licht/donker-schema (7-7 uur) met voedsel en water dat ad libitum beschikbaar was.
1. Preoperatieve voorbereiding
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De plaatsing van de laser-Doppler-sonde in het MCA-gebied wordt visueel weergegeven in figuur 1, biedt een pictogram van het vaatstelsel en dient als visuele gids vanuit sagittaal en dorsaal perspectief. Figuur 2 geeft een overzicht van de kritieke stappen voor de plaatsing en resultaten van de laserdopplersonde in de muis. Figuur 2A toont een afbeelding van een verdoofde en voorbereide muis met een.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
De MCAO is de gouden standaardprocedure voor het modelleren van occlusie en reperfusie van de cerebrale slagader bij knaagdieren en is de hoeksteen geweest van preklinisch onderzoek naar beroertes, waardoor de inductie van focale ischemie bij knaagdieren mogelijk is om de pathofysiologie van menselijke beroertes na te bootsen. Het is een veeleisende chirurgische ingreep met aanzienlijke variabiliteit tussen en zelfs binnen de chirurg. Hoewel er geen bewijs is dat de toepassing van LDF de.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Dit onderzoek werd gefinancierd door NINDS 1R41NS124450. Biorender: KT26JWLYF6
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| gebogen lenteschaartjes | Castroviejo | 1501710 | |
| tang #5 | Fine science tools | 11250-20 | |
| tang #5/45 | Fine science tools | 1151-35 | |
| Forcepts Cauterie-instrument | Conmed | M18019-01 | |
| Laboratoriumtape | Fisherbrand Labeling Tape | 15-950 | |
| Laser Doppler Monitor | Moore Instruments | MOORVMS-LDF | |
| LDF software | Perisoft voor Windows of moorSOFT | NA | |
| Muisknippen | Philips Norelco | MG7910 | |
| Periflux System 4000, sonde 407 | Perimed | apparatuur niet langer beschikbaar | |
| plastic folie | Glad | press n seal | |
| Rat clippers | oster | A5 of vergelijkbaar | |
| Kleine knaagdieranesthesie | JD Medical | op maat gemaakt | |
| kleine schaar | excelta | 362 Sissors of vergelijkbaar | |
| Temperatuurmonitorsysteem met sonde | Physitemp | TCAT-2AC Controller |
Referenties
- Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).
- Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
Erratum
Formal Correction: Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models
Posted by JoVE Editors on 3/18/2025. Citeable Link.
This corrects the article 10.3791/66839
