Hier beschrijven we een gestandaardiseerd protocol dat is ontworpen om de cellulaire en moleculaire mechanismen op te helderen die ten grondslag liggen aan botremodellering tijdens OTM. Een grondig begrip van deze mechanismen bij muizen vereist een zorgvuldig gepland protocol om nauwkeurigheid en betrouwbaarheid te garanderen 7,11. Studies uitgevoerd door onze onderzoeksgroep hebben aangetoond dat dit protocol de variabiliteit van de operator effectief vermindert door een spanningsmeter en een speciaal ontworpen apparaat op te nemen, waardoor 0,35 N wordt vastgesteld als de optimale kracht voor OTM in een muismodel 4,16,17,18,19,20 . Om de doeltreffendheid van experimentele procedures te verbeteren en het gebruik van diermonsters te maximaliseren, kunnen monsters die worden gebruikt voor micro-CT-analyse ook worden verwerkt voor routinematige histologie. Vervolgens kan OTM worden geëvalueerd in secties van 5 μm, waarbij de CEJ wordt gebruikt als referentiepunt voor metingen16,19. Hematoxyline- en eosinekleuring, naast gespecialiseerde technieken zoals tartraatresistente zure fosfatase (TRAP) en het trichroom van Masson, dienen ook als effectieve methoden voor het beoordelen van de wortelintegriteit en het kwantificeren van osteocyten, osteoclasten en osteoblasten binnen de interessegebieden 4,5,16.
De dynamische veranderingen in de microstructuur van alveolair bot tijdens OTM bij knaagdieren zijn onderzocht met behulp van micro-CT-systemen. Deze evaluaties zijn bedoeld om waardevolle inzichten te bieden voor klinische orthodontische behandeling14,15. Micro-CT is een analytische techniek die in staat is om interne structuren vast te leggen met een hoge resolutie en precisie op micronniveau. Deze methode maakt het mogelijk om kleinschalige monsters te reconstrueren tot gedetailleerde 3D-beelden, waardoor nauwkeurige kwalitatieve en kwantitatieve analyse van monsters mogelijkis 22. In overeenstemming met eerdere studies werd OTM beoordeeld door de lineaire discrepantie tussen de CEJ van de eerste en tweede molaren van de rechterhemi-maxilla te kwantificeren in vergelijking met de linker hemi-maxilla 17,18,19,20. In de context van tandheelkundige beeldvorming biedt micro-CT verschillende voordelen. Het kan kleine defecten op worteloppervlakken identificeren, lineaire tandveranderingen nauwkeurig meten en de trabeculaire en corticale botmorfologie beoordelen22,23. Het is opmerkelijk dat de huidige richtlijn voor het beoordelen van botmicrostructuur bij knaagdieren met behulp van micro-CT de minimale set variabelen benadrukt die wordt aanbevolen voor het beschrijven van trabeculaire en corticale botmorfometrie23. Bovendien is het van cruciaal belang om het optreden van OIIRR, een ernstige complicatie tijdens orthodontische behandeling, te analyseren16,21. Onderzoekers moeten de intensiteit van de wortelresorptie evalueren, aangezien de aanwezigheid van OIIRR aangeeft dat de uitgeoefende kracht buitensporig kan zijn, waardoor aanpassingen nodig zijn 16,21.
Het volgen van kritische stappen in OTM-onderzoek in diermodellen is essentieel voor het verkrijgen van betrouwbare resultaten. Dit omvat een zorgvuldige selectie van dieren, waarbij rekening wordt gehouden met factoren zoals stam, leeftijd, botmetabolisme, groeisnelheid en genetische achtergrond. De keuze van diermodellen heeft een aanzienlijke invloed op de onderzoeksresultaten, aangezien variaties in deze factoren van invloed zijn op de botfysiologie en de reactie op orthodontische krachten. Het timen van de euthanasie van dieren is ook van cruciaal belang omdat het specifieke stadia van botremodellering vastlegt als reactie op orthodontische krachten. Taddei et al.4 voerden bijvoorbeeld moleculaire analyse uit op 0, 12 en 72 uur, met histopathologische analyse op 6 dagen, waardoor temporele veranderingen in botremodelleringsmarkers tijdens OTM konden worden beoordeeld. Daarnaast zijn leeftijdsgerelateerde variaties in OTM onderzocht, wat licht werpt op de invloed van veroudering op botremodelleringsprocessen23.
Het gebruik van een NiTi-spiraalveer is weliswaar effectief in het induceren van tandbeweging, maar heeft bepaalde nadelen die van invloed kunnen zijn op het dierenwelzijn en de experimentele resultaten. Het inbrengen van een NiTi-spiraalveer wordt als tijdrovender en technisch veeleisender beschouwd in vergelijking met alternatieve methoden, zoals het gebruik van elastische banden7. Deze verhoogde complexiteit kan leiden tot een hoger risico op letsel tijdens het inbrengen, wat op zijn beurt kan leiden tot nadelige effecten zoals een hoger verlies van lichaamsgewicht na de procedure en een verhoogd sterftecijfer onder de dieren7. Onze ervaring is dat dagelijkse monitoring van dieren en de implementatie van ondersteunende maatregelen, zoals onthard voer, van groot belang zijn gebleken bij het minimaliseren van nadelige effecten die gepaard gaan met het gebruik van NiTi-schroefveren voor OTM in diermodellen. Deze maatregelen dragen niet alleen bij aan het welzijn van de dieren, maar verbeteren ook de betrouwbaarheid en validiteit van experimentele resultaten door verstorende factoren te verminderen en te zorgen voor consistentie in onderzoeksprotocollen 4,16,17,18,19,20.
Het gebruik van OTM bij muizen, gecombineerd met micro-CT-analyse, biedt een geschikt model voor het onderzoeken van mechanismen van botaanpassing, wortelresorptie en cellulaire reacties op mechanische krachtstimuli. Deze geïntegreerde aanpak biedt waardevolle inzichten in de ingewikkelde processen die ten grondslag liggen aan orthodontische behandeling en vergemakkelijkt de ontwikkeling van nieuwe therapeutische strategieën en interventies.