Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Evaluatie van het mechanisme van een traditionele kruidensiroop voor de behandeling van bloedarmoede met behulp van levermetabolomics

669 weergaven

⸱

DOI:

10.3791/67225

⸱

30 augustus 2024

 ,  ,  , 
1School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Chinese Medicine, 2School of Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, 3Xinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.

In dit artikel

Samenvatting

Deze studie introduceert voornamelijk de toepassing van levermetabolomics bij het onderzoeken van de effectiviteit van Shi-Liu-Bu-Xue-siroop bij de behandeling van bloedarmoede.

Samenvatting

Als bekend Oeigoers medicijn wordt Shi-Liu-Bu-Xue Syrup (SLBXS) al meer dan 20 jaar veel gebruikt om bloedarmoede in China te behandelen. De onderliggende mechanismen van de effectiviteit ervan bij de behandeling van bloedarmoede blijven echter onduidelijk. In deze studie werd levermetabolomics voornamelijk gebruikt om de mogelijke regulerende mechanismen van SLBXS bij de behandeling van bloedarmoede te bepalen. Levermetabolomics-profilering werd uitgevoerd om het werkingsmechanisme van SLBXS te karakteriseren in een door acetylfenylhydrazine geïnduceerd muismodel van anemie. SLBXS bleek de leverindex, het aantal witte bloedcellen en het aantal bloedplaatjes te verlagen, terwijl het aantal rode bloedcellen, hemoglobine en hematocriet toenam. Kerndoelen werden geselecteerd voor verificatie met behulp van Western blotting. SLBXS toonde een significant therapeutisch effect op bloedarmoede, voornamelijk door het reguleren van het galactosemetabolisme en de HIF-1-signaleringsroute, zoals aangegeven door de downregulatie van HIF-1α-, NOS3-, VEGFA- en GLA-eiwitten in de leverweefsels van anemische muizen. Deze studie verduidelijkt de mogelijke regulerende mechanismen van het levermetabolisme door toediening van SLBXS bij de behandeling van bloedarmoede.

Inleiding

Bloedarmoede is een urgent en wijdverbreid wereldwijd gezondheidsprobleem, dat 25% van de wereldbevolking en mensen van alle leeftijden treft, met name adolescenten en zwangere vrouwen 1,2,3. Het wordt in verband gebracht met een verhoogd risico op vroeggeboorte en moedersterfte en kan leiden tot lichamelijke ontwikkelingsstoornissen en verminderde cardiovasculaire prestaties4. Deze aandoening kan ook een negatieve invloed hebben op de gezondheidstoestand van adolescenten, wat kan leiden tot infecties en hartfalen5. De huidige behandelingen omvatten voornamelijk bloedtransfusie, ijzersuppletie en behandeling met erytropoëtine. Deze behandelingen hebben echter nadelen en nadelige bijwerkingen, zoals anafylaxie, gastro-intestinale klachten, ijzerstapeling en netelroos1. Daarom is het van cruciaal belang om effectieve geneesmiddelen met minder bijwerkingen voor de behandeling van bloedarmoede te identificeren.

Traditionele Chinese geneeskunde, inclusief Oeigoerse geneeskunde, biedt verschillende voordelen, zoals formuleringen met meerdere ingrediënten, multi-doeleffecten, multi-link-interacties en minder bijwerkingen bij het voorkomen en behandelen van multifactoriële ziekten. Shi-Liu-Bu-Xue-siroop (SLBXS) is een opmerkelijk traditioneel middel in de Oeigoerse geneeskunde dat wordt gebruikt voor bloedtonics en bloedproductie. Het wordt erkend als een bloedregulerend geneesmiddel dat de leverwarmte kan verminderen en is opgenomen in de richtlijnen voor het klinische gebruik van geneesmiddelen uit minderheidsgroepen voor de behandeling van bloedarmoede. Het heeft ook een vergunning van de Chinese State Food and Drug Administration (Z20026094)6,7,8. In de afgelopen twee decennia is SLBXS in China op grote schaal gebruikt om bloedarmoedegerelateerde aandoeningen te behandelen. De mogelijke mechanismen voor de behandeling van bloedarmoede blijven echter onbekend en vereisen verder onderzoek. Metabolomics, dat de dynamische metabole reacties van biologische systemen op ziekten, medicamenteuze interventies of omgevingsomstandigheden onderzoekt9, wordt in toenemende mate gebruikt om de werkingsmechanismen van de traditionele Chinese geneeskunde op te helderen door veranderingen in metabole biomarkers in biologische monsters te evalueren na externe stimuli 9,10.

Dienovereenkomstig werd in deze studie een levermetabolomics-benadering toegepast om de onderliggende therapeutische mechanismen van SLBXS bij de behandeling van bloedarmoede te bepalen. Eerst werd een acetylfenylhydrazine (APH)-geïnduceerd muismodel van bloedarmoede vastgesteld. Vervolgens werden de metabole routes van endogene metabolieten onderzocht met behulp van levermetabolomics met gaschromatografie-massaspectrometrie (GC-MS) en multivariate datamethoden na toediening van SLBXS. Ten slotte werden de belangrijkste doelen experimenteel geanalyseerd om de anti-anemische effecten en moleculaire mechanismen van SLBXS op te helderen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle experimentele procedures zijn goedgekeurd door de Ethische Commissie Proefdieren van de Hubei University of Chinese Medicine (HBUCMS201912015). Mannelijke C57BL/6-muizen (gewicht 20-22 g) werden gehuisvest in een specifieke pathogeenvrije ruimte met een relatieve vochtigheid van 50%-60% en een temperatuur van 22 °C ± 2 °C, onderworpen aan een cyclus van 12 uur licht / 12 uur donker, en voorzien van vrije toegang tot voedsel en water. Voordat het experiment begon, kregen alle muizen een week de tijd om te acclimatiseren aan de omgeving. Muizen werden willekeurig toegewezen aan een van de volgende vier groepen (n = 12): controle, model, Fu-Fang-E-Jiao Syrup (FFEJS, een positief geneesmiddel, intragastrisch toegediend in een dosis van 7,8 ml/kg) en SLBXS (intragastrisch toegediend in een dosis van 11,7 ml/kg). Muizen in de controle- en modelgroep kregen gelijke hoeveelheden zoutoplossing. Muizen in alle groepen kregen gedurende 2 weken eenmaal daags intragastrische toediening van de overeenkomstige geneesmiddelen. Details van de medicijnen, reagentia en apparatuur die in dit onderzoek zijn gebruikt, staan vermeld in de materiaaltabel.

1. Opstelling van een bloedarmoedemodel bij muizen

  1. Weeg 2 g acetylfenylhydrazine (APH) af met behulp van een elektronische weegschaal en doe dit in een bekerglas van 150 ml. Voeg 100 ml zoutoplossing toe en roer met een glazen staaf tot de APH volledig is opgelost.
  2. Stel het muismodel van bloedarmoede vast door subcutaan 2% APH te injecteren zoals bereid in stap 1.1 op de1e,4e en 7edag in doseringen van respectievelijk 200 mg/kg, 100 mg/kg en 100 mg/kg11.
    OPMERKING: Vanaf de eerste dag kregen muizen in de groepen FFEJS (7,8 ml/kg) en SLBXS (11,7 ml/kg) eenmaal daags intragastrische toediening gedurende 2 weken. Muizen in de controle- en modelgroep kregen gedurende 2 weken eenmaal daags gelijke hoeveelheden zoutoplossing.

2. Bepaling van de leverindex

  1. Weeg aan het einde van het experiment elke muis met behulp van een elektronische weegschaal.
  2. Verdoof de muizen door 2% isofluraan in te ademen. Knijp in de oogbol van de muizen om deze hyperemisch en uitpuilend te maken. Verwijder snel de oogbol met een tang en verzamel het bloed in gehepariniseerde monsterbuisjes.
  3. Zet de verdoofde muizen vanaf stap 2.2 vast op een chirurgische manipulatieplaat.
  4. Maak een volledige incisie langs de middellijn van de buik met een scalpel. Ontleed en isoleer het intacte leverweefsel12 zorgvuldig en meet vervolgens het gewicht met een elektronische balans.
    OPMERKING: De leverindex van elke muis wordt berekend met behulp van de volgende formule: Leverindex = levergewicht/lichaamsgewicht.

3. Hematologische analyse

  1. Schud voorzichtig het buisje met het gehepariniseerde bloedmonster uit stap 2.2 om bloedstolling te voorkomen.
  2. Plaats het bloedmonster onder de injectienaald om ervoor te zorgen dat het volledig in de naald wordt ondergedompeld.
  3. Klik op de knop Automatisch detecteren om het aantal rode bloedcellen (RBC), hematocriet (HCT), het aantal witte bloedcellen (WBC), het hemoglobinegehalte (HGB) en het aantal bloedplaatjes (PLT) te meten met behulp van een volautomatische hemocytenanalysator.

4. Lever metabolomics studie

  1. Voorbereiding van levermonsters
    1. Homogeniseer leverweefselmonsters (50 mg) uit stap 2.4 met 1 ml voorgekoelde methanol. Centrifugeer bij 18.759 x g gedurende 10 minuten bij 4 °C om het neerslag te verwijderen.
    2. Breng 200 μl van het bovenstaande middel met behulp van een pipet over in een injectieflacon en droog deze gedurende 2 uur vacuüm in een vriesdroger bij 35 °C.
    3. Laat de gedroogde monsters reageren met 40 μl van een 40 mg/ml oplossing van methoxyaminehydrochloride in pyridine gedurende 90 minuten bij 30 °C. Voeg vervolgens 80 μl N-methyl-N-(trimethylsilyl)trifluoracetamide (MSTFA) met 1% trimethylchloorsilaan (TMCS) toe en incubeer gedurende 60 minuten bij 37 °C.
    4. Voeg 10 μL n-hexaan toe aan de injectieflacon om de derivatiseringsreactie te beëindigen.
  2. Lever metabole analyse
    1. Analyseer de afgeleide monsters (1 μL) met behulp van een GC-MS-systeem. Scheid de derivaten met behulp van een DB-5MS capillaire kolom (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm).
      OPMERKING: De voorwaarden van het oventemperatuurprogramma zijn als volgt ingesteld: 60 °C gedurende 1 min; verhogen tot 325 °C met een snelheid van 10 °C/min en 10 minuten aanhouden. De injector-, ionenbron- en MS-temperaturen werden ingesteld op respectievelijk 250 °C, 230 °C en 150 °C. Helium (99,999%) werd gebruikt als draaggas met een debiet van 1,1 ml/min en de splitsingsverhouding werd vastgesteld op 10:1. Er werd een elektronenbundelenergie van 70 eV en een oplosmiddelvertragingstijd van 5,9 minuten gebruikt.
  3. Gegevensverwerking en -analyse
    1. Verkrijg en converteer onbewerkte GC-MS-gegevens met behulp van de compatibele MassHunter-software.
    2. Voer spectrale analyse uit met behulp van het Automated Mass Spectral Deconvolution and Identification System (AMDIS) tool12.
    3. Identificeer alle metabolieten met behulp van de NIST- en HMDB-databases (zie Materiaaltabel).
    4. Importeer de gegevens in de MetaboAnalyst-tool voor gedeeltelijke kleinste kwadraten-discriminantanalyse (PLS-DA), t-tests, pathway-analyse en netwerkanalyse12.

5. Analyse van de westernvlek

  1. Extraheer het totale aantal eiwitten uit het leverweefsel van muizen
    1. Voeg 50 mg leverweefsel uit stap 2.4 en 250 μl cellysaat toe aan een glashomogenisator van 1 ml en maal 5 minuten op ijs.
    2. Breng het homogenaat van het leverweefsel van stap 5.1.1 met behulp van een pipettor over op een microcentrifugebuisje van 1,5 ml en centrifugeer gedurende 10 minuten bij 18.759 x g bij 4 °C. Breng het bovenstaande vervolgens over in een nieuwe buis van 1,5 ml met behulp van een pipettor.
  2. Bepaal eiwitconcentraties en pre-process eiwitmonsters
    1. Voeg 2 μl supernatans uit stap 5.1.2, 18 μl PBS en 180 μl BCA-werkoplossing toe aan een microtiterplaat met 96 putjes8.
    2. Oscilleer de plaat 30 s op een oscillator, laat deze 30 minuten bij 37 °C staan en bepaal de extinctie bij 562 nm met behulp van een microplaatlezer.
  3. Scheid het totale aantal eiwitten met behulp van SDS-PAGE, breng over naar polyvinylideenfluoridemembranen en blokkeer met 5% magere melk8.
  4. Incubeer de membranen vanaf stap 5.3 met primaire antilichamen tegen HIF-1α (1:1000), VEGFA (1:1000), GLA (1:1000), NOS3 (1:1000) en β-actine (1:5000) 's nachts bij 4 °C.
  5. Plaats de membranen uit stap 5.4 in een antilichaamincubatiedoos, voeg 10 ml TBST toe en schud horizontaal op 111 x g bij kamertemperatuur om ongebonden primaire antilichamen drie keer gedurende elk 5 minuten af te spoelen.
  6. Voeg 200 μL geitenanti-konijn IgG (H + L)-HRP (1:1000) toe aan elk membraan uit stap 5.5 en incubeer gedurende 2 uur bij kamertemperatuur. Herhaal vervolgens stap 5.5 om ongebonden secundair antilichaam (geitenanti-konijn IgG (H + L)-HRP) af te wassen.
  7. Voeg vanaf stap 5.6 200 μL ultragevoelige ECL-chemiluminescente oplossing toe aan het oppervlak van elk membraan en visualiseer onmiddellijk eiwitbanden met behulp van een automatisch chemiluminescentiebeeldvormingsanalysesysteem.

6. Statistische analyse

  1. Analyseer de gegevens met behulp van statistische en grafische software met eenrichtings-ANOVA gevolgd door de Tukey-test.
  2. Presenteer de resultaten als gemiddelde ± standaarddeviatie (SD) en beschouw een P-waarde < 0,05 als statistisch significant.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Om de succesvolle vaststelling van het muismodel van bloedarmoede te bevestigen en het effect van SLBXS op bloedarmoede te analyseren, werden eerst de leverindex en hematologische parameters onderzocht. Figuur 1 illustreert dat de modelgroep een significante afname (P < 0,01) vertoonde in het aantal rode bloedcellen (RBC), hemoglobine (HGB) en hematocriet (HCT) in vergelijking met de controlegroep. Omgekeerd waren de leverindex, het aantal witte blo...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Bloedarmoede is een veel voorkomende aandoening die wereldwijd veel mensen treft, vooral in ontwikkelingslanden1. In China gebruiken patiënten vaak traditionele Chinese geneeskunde, waaronder Oeigoerse geneeskunde, om de tekenen en symptomen van bloedarmoede te verlichten. SLBXS is een Oeigoers medicijn dat al vele jaren in de klinische praktijk wordt gebruikt; Het exacte werkingsmechanisme tegen bloedarmoede blijft echter slecht begrepen13...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door het Special Training Plan for Minority Science and Technology Talents, Natural Science Foundation of Xinjiang Oeigoerse Autonome Regio (2020D03021), de Funds for Key Program for Traditional Chinese Medicine van Hubei University of Chinese Medicine (2022ZZXZ004) en Tianshan Innovation Team Program (2020D14030).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
AcetylfenylhydrazineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C13979660
Automatisch chemiluminiscenese beeldanalysesysteemShanghai Tanon Life Science Co., Ltd.Tanon-5200
Bicinchoninezuur assay kitThermoFisher ScientificQPBCA-1KT
Capillaire kolomAgilent J&W Scientific, Agilent Technologies, Inc.DB-5MS
Cel lysis buffer voor Western en IPBeyotime BiotechnologyP0013
ChloortrijmethylsilaanShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C104814
Elektronische weegschaalMettler-Toledo International Inc.ME203E
Elektronische schaalMettler-Toledo International Inc.LE104E
Fu-Fang-E-Jiao SiroopDong E E Jiao Co., Ltd.214020031
Volledig automatisch hemocytometerShenzhen Mindray Animal Care Technology Co., Ltd.IDEXX ProCyte Dx
GC-MS systeemAgilent Technologies, Inc.7890B-5977B 
GLA primaire antistofBioworld TechnologyBS77041
Glas homogenisatorShanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-013001
Glas staaf Shanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-003904
GraphPad Prism software GraphPad, La JollaVersie 9.0
Hepariniseerde monsterbuisjesChangde BKMAM Biotechnology Co., Ltd.B-ACT1P5
HIF-1α primaire antistofBioworld TechnologyBS3514
HMDB databasehttp://www.hmdb.ca/—
IsofluraanHebei Jindafu Pharmaceutical Co., Ltd.20231202
Mannelijke C57BL/6 muizenLiaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd.Nr. SCXK [Liao] 2015-0001
MassHunterAgilent Technologies, Inc.B.08.00
MetaboAnalyst 5.0https://www.metaboanalyst.ca/—
Methoxyamine hydrochlorideShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.E1818113
n-hexaanShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C14878803
NIST databasehttp://webbook.nist.gov/chemistry/—
NOS3 primaire antistofBioworld TechnologyBS3625
PyridineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C13026996
SalieneBIOSHARP LIFE SCIENCES2308262009
Shi-Liu-Bu-Xue SiroopXinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.211277
Chirurgische manipulatieplaatDIXSGZK-JPB-A
VEGFA primaire antistofBioworld TechnologyAP0742
β-actineABclonal (Shanghai) Trading Co., Ltd.AC026

Referenties

  1. Munoz, M., Gomez-Ramirez, S., Bhandari, S. The safety of available treatment options for iron-deficiency anemia. Expert Opin Drug Saf. 17 (2), 149-159 (2018).
  2. Soliman, A. T., De Sanctis, V., Yassin, M., Wagdy, M., Soliman, N. Chronic anemia and thyroid function. Acta Biomed. 88 (1), 119-127 (2017).
  3. Pivina, L., Semenova, Y., Dosa, M. D., Dauletyarova, M., Bjorklund, G. Iron deficiency, cognitive functions, and neurobehavioral disorders in children. J Mol Neurosci. 68 (1), 1-10 (2019).
  4. Lumbiganon, P., et al. Indirect causes of severe adverse maternal outcomes: a secondary analysis of the WHO Multicountry Survey on Maternal and Newborn Health. BJOG. 121 (Suppl 1), 32-39 (2014).
  5. Shaddy, R. E., et al. Systematic literature review on the incidence and prevalence of heart failure in children and adolescents. Pediatr Cardiol. 39 (3), 415-436 (2018).
  6. China Medical Association of Minorities. Guidelines for clinical use of minority drugs. , Chinese Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2018).
  7. Yu, W. Q. Clinical efficiency of Pomegranate blood-enriching syrup in the treatment of iron deficiency anemia. J Med Pharm Chin Minor. 26 (11), 11-12 (2020).
  8. Zhang, D. N., et al. Mechanism of Shiliu Buxue Syrup for anemia using integrated metabolomics and network pharmacology. Anal Biochem. 653, 114774(2022).
  9. Nielsen, J. Systems biology of metabolism. Annu Rev Biochem. 86, 245-275 (2017).
  10. Wang, M., et al. Metabolomics highlights pharmacological bioactivity and biochemical mechanism of traditional Chinese medicine. Chem Biol Interact. 273, 133-141 (2017).
  11. Ben, C. N. Establishment and experimental research of "Blood Deficiency" animal model. Lab Animal Sci. (03), 5-10 (1994).
  12. Cao, S., et al. Integrative transcriptomics and metabolomics analyses provide hepatotoxicity mechanisms of asarum. Exp Ther Med. 20 (2), 1359-1370 (2020).
  13. Yang, H. Y., Liu, M. L., Luo, P., Yao, X. S., Zhou, H. Network pharmacology and metabolomics in the study of traditional Chinese medicine for cardiovascular diseases. Phytomedicine. 104, 154268(2022).
  14. Croci, S., Pedrazzi, G., Passeri, G., Piccolo, P., Ortalli, I. Acetylphenylhydrazine induced haemoglobin oxidation in erythrocytes studied by Mossbauer spectroscopy. Biochim Biophys Acta. 1568 (1), 99-104 (2001).
  15. Liebowitz, J., Cohen, G. Increased hydrogen peroxide levels in glucose 6-phosphate dehydrogenase deficient erythrocytes expose to acetylphenylhydrazine. Biochem Pharmacol. 17 (6), 983-988 (1968).
  16. Tarasenko, T. N., McGuire, P. J. The liver is a metabolic and immunologic organ: A reconsideration of metabolic decompensation due to infection in inborn errors of metabolism (IEM). Mol Genet Metab. 121 (4), 283-288 (2017).
  17. Topalovic, A., Knezevic, M., Gacnik, S., Mikulic-Petkovsek, M. Detailed chemical composition of juice from autochthonous pomegranate genotypes (Punica granatum L.) grown in different locations in Montenegro. Food Chem. 330, 127261(2020).
  18. Legua, P., et al. Total phenols and antioxidant capacity in 10 Moroccan pomegranate varieties. J Food Sci. 77 (1), C115-C120 (2012).
  19. Rodrigo, R., Miranda, A., Vergara, L. Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease. Clin Chim Acta. 412 (5-6), 410-424 (2011).
  20. Hussain, T., et al. Oxidative stress and inflammation: What polyphenols can do for us. Oxid Med Cell Longev. 2016, 7432797(2016).
  21. Sudheesh, S., Vijayalakshmi, N. R. Flavonoids from Punica granatum--potential antiperoxidative agents. Fitoterapia. 76 (2), 181-186 (2005).
  22. Riaz, A., Khan, R. A. Anticoagulant, antiplatelet and antianemic effects of Punica granatum (pomegranate) juice in rabbits. Blood Coagul Fibrinolysis. 27 (3), 287-293 (2016).
  23. Balasubramani, S. P., Varghese, R. K., Vishnuprasad, C. N., Venkatasubramanian, P. Pomegranate juice enhances iron dialysability and assimilation in in-vitro cell-free and cell-based models. Plant Foods Hum Nutr. 75 (2), 272-278 (2020).
  24. Jilani, T., Iqbal, M. P. Does vitamin E have a role in treatment and prevention of anemia. Pak J Pharm Sci. 24 (2), 237-242 (2011).
  25. Farrell, P. M., Bieri, J. G., Fratantoni, J. F., Wood, R. E., di Sant'Agnese, P. A. The occurrence and effects of human vitamin E deficiency. A study in patients with cystic fibrosis. J Clin Invest. 60 (1), 233-241 (1977).
  26. Ukab, W. A., Sato, J., Wang, Y. M., van Eys, J. Xylitol mediated amelioration of acetylphenylhydrazine-induced hemolysis in rabbits. Metabolism. 30 (11), 1053-1059 (1981).
  27. Ahuja, V., et al. Biological and pharmacological potential of xylitol: A molecular insight of unique metabolism. Foods. 9 (11), 1592(2020).
  28. Nikas, I. P., Paschou, S. A., Ryu, H. S. The role of nicotinamide in cancer chemoprevention and therapy. Biomolecules. 10 (3), 477(2020).
  29. Katayoshi, T., Yamaura, N., Nakajo, T., Kitajima, N., Tsuji-Naito, K. Porcine placental extract increases the cellular NAD levels in human epidermal keratinocytes. Sci Rep. 12 (1), 19040(2022).
  30. Bartoszewski, R., et al. Primary endothelial cell-specific regulation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1 and HIF-2 and their target gene expression profiles during hypoxia. Faseb J. 33 (7), 7929-7941 (2019).
  31. Lee, S. H., Golinska, M., Griffiths, J. R. HIF-1-independent mechanisms regulating metabolic adaptation in hypoxic cancer cells. Cells. 10 (9), 2371(2021).
  32. Sato, T., Takeda, N. The roles of HIF-1α signaling in cardiovascular diseases. J Cardiol. 81 (2), 202-208 (2023).
  33. Ratcliffe, P. J. Oxygen sensing and hypoxia signalling pathways in animals: The implications of physiology for cancer. J Physiol. 591 (8), 2027-2042 (2013).
  34. Li, L. J., Huang, Q., Zhang, N., Wang, G. B., Liu, Y. H. miR-376b-5p regulates angiogenesis in cerebral ischemia. Mol Med Rep. 10 (1), 527-535 (2014).
  35. Tejero, J., Shiva, S., Gladwin, M. T. Sources of vascular nitric oxide and reactive oxygen species and their regulation. Physiol Rev. 99 (1), 311-379 (2019).
  36. Fujii, J., et al. Erythrocytes as a preferential target of oxidative stress in blood. Free Radic Res. 55 (5), 562-580 (2021).
  37. Huang, J. W., et al. High expression of HIF-1α alleviates benzene-induced hematopoietic toxicity and immunosuppression in mice. Environ Pollut. 311, 119928(2022).
  38. Zhang, Z., Yao, L., Yang, J., Wang, Z., Du, G. PI3K/Akt and HIF-1 signaling pathway in hypoxia-ischemia (Review). Mol Med Rep. 18 (4), 3547-3554 (2018).
  39. Del Balzo, U., et al. Nonclinical characterization of the hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor roxadustat, a novel treatment of anemia of chronic kidney disease. J Pharmacol Exp Ther. 374 (2), 342-353 (2020).
  40. Bhatia, S., Singh, A., Batra, N., Singh, J. Microbial production and biotechnological applications of α-galactosidase. Int J Biol Macromol. 150, 1294-1313 (2020).
  41. Conte, F., van Buuringen, N., Voermans, N. C., Lefeber, D. J. Galactose in human metabolism, glycosylation and congenital metabolic diseases: Time for a closer look. Biochim Biophys Acta Gen Subj. 1865 (8), 129898(2021).
  42. Wang, Y. Y. Investigate the effect of galacto-oligosaccharide supplementation on intestinal absorption of iron in rats. [Master's Thesis]. , Southern Medical University. (2019).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Shi-Liu-Bu-XueHIF-1-signaleringgalactosemetabolismeWestern blotmuismodelhepatisch metabolismeproteïnedownregulatie

Dit artikel is gepubliceerd

Video binnenkort beschikbaar

Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.