Registratie van naar binnen rectificerende K+- stromen in vers geïsoleerde gladde spiercellen van de arteria basilaris door middel van patch-clamp-techniek

Pengmei Guo; Weiping Li; Wenqiao An

doi:10.3791/67414

Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Registratie van naar binnen rectificerende K^+- stromen in vers geïsoleerde gladde spiercellen van de arteria basilaris door middel van patch-clamp-techniek

1K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/67414

⸱

7 februari 2025

Pengmei Guo¹ , Weiping Li² , Wenqiao An¹

¹Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ²Research Center, Fenyang College, Shanxi Medical University

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol beschrijft een snelle en efficiënte methode voor het isoleren van gladde spiercellen uit de basilaire slagader van de rat en het registreren van naar binnen gelijkrichtende kaliumkanaalstromen in deze cellen met behulp van de patchklemtechniek voor de hele cel. Het biedt een nieuwe benadering voor onderzoekers die de basilaire slagader en ionenkanalen bestuderen.

Samenvatting

Cerebrovasculaire aandoeningen zijn een veel voorkomende aandoening bij ouderen en de incidentie neemt gestaag toe. De basilaire slagader is een kritiek hersenvat dat de pons, het cerebellum, de achterste hersengebieden en het binnenoor van water voorziet. Kalium (K⁺) kanaalactiviteit speelt een belangrijke rol bij het bepalen van de vasculaire tonus door het celmembraanpotentiaal te reguleren. Activering van naar binnen rectificerende K⁺ (Kir) kanalen, net als andere K⁺ kanalen, leidt tot hyperpolarisatie en vaatverwijding van het celmembraan. In deze studie werden vers geïsoleerde gladde spiercellen uit de basilaire slagader gebruikt om Kir-stromen te registreren via de patchklemtechniek van de hele cel. De effecten van 100 μmol/L BaCl₂, een Kir-kanaalremmer, en 10 μmol/L natriumnitroprusside (SNP), een nitrovasodilatator, op Kir-kanaalstromen werden onderzocht. De resultaten toonden aan dat BaCl₂ de stromen van het Kir-kanaal in de gladde spiercellen van de arteria basilaris remde, terwijl SNP deze stromen versterkte. Dit protocol biedt een uitgebreide gids voor het voorbereiden van vers geïsoleerde arteriële gladde spiercellen en het registreren van Kir-kanaalstromen met behulp van de patchklemtechniek, en biedt een waardevolle bron voor onderzoekers die deze methode onder de knie willen krijgen.

Inleiding

Cerebrovasculaire aandoeningen zijn een veel voorkomende aandoening bij ouderen. Met verbeteringen in de levensstandaard, een hogere levensverwachting en de vergrijzende bevolking neemt de incidentie van cerebrovasculaire aandoeningen gestaag toe¹. De basilaire slagader, een ongepaard vat gevormd door de fusie van de bilaterale wervelslagaders, loopt onder de pons in de schedel en verdeelt zich in twee achterste hersenslagaders. Het voedt de pons, het cerebellum, de achterste delen van de hersenen en het binnenoor. Onvoldoende bloedtoevoer naar de basilaire slagader kan leiden tot episodische duizeligheid, vaak....