Methodenartikel

Formulering van nanomaterialen op basis van zink met behulp van het Eucommia ulmoides-schorsextract en hun wondgenezingspotentieel

DOI:

10.3791/67416

⸱

27 december 2024

 ,  ,  , 
1Biological Experiment Center, School of Life Sciences, Central South University, 2Department of Cell Biology, School of Life Sciences, Central South University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier presenteren we een protocol om de zinkoxide (ZnO) nanodeeltjes te synthetiseren met behulp van het polyisopreenrijke waterige extract verkregen uit de boomschors van Eucommia ulmoides . Het wondgenezingspotentieel van de gesynthetiseerde ZnO-nanodeeltjes op menselijke navelstrengader-endotheelcellen (HUVEC's) werd geëvalueerd met behulp van een krastest, een eenvoudige, kosteneffectieve en efficiënte methode.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het waterige extract van de schors van Eucommia ulmoides dient als een rijke bron van bioactieve stoffen met tal van gezondheidsvoordelen. Het protocol hier heeft tot doel de bereiding van zinkoxide (ZnO) nanodeeltjes te onderzoeken met behulp van het Eucommia ulmoides-schorsgemedieerde polyisopreenrijke waterige extract. Ondertussen wordt het voorgestelde protocol geassocieerd met de voorbereiding van wondgenezingsmateriaal door het proces te vergemakkelijken. Bovendien werd het wondgenezingspotentieel van de gesynthetiseerde nanodeeltjes (Eu-ZnO-NP's) geëvalueerd met behulp van een eenvoudige krastest op een monolaag van een endotheelcel van de menselijke navelstrengader (HUVEC). Na 24 uur behandeling met Eu-ZnO-NP's werden de celproliferatie en migratie van HUVEC-cellen beoordeeld. Aan het einde van de studie werden celproliferatie en -migratie waargenomen in gekraste monolaag die werd behandeld met verschillende concentraties Eu-ZnO-NP's, terwijl slechte celmigratie en proliferatiesnelheden werden waargenomen in controlecellen. Van de gekozen concentraties vertoonden 20 μg/ml Eu-ZnO-nanomaterialen een betere celmigratie en een verbeterd wondgenezingspotentieel.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Van geneeskrachtige planten en plantaardige verbindingen is aangetoond dat ze tal van gezondheidsvoordelen vertonen1. De Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) meldde dat 80% van de wereldbevolking afhankelijk is van traditionele geneeskrachtige planten voor de eerstelijnsgezondheidszorg. China wordt algemeen erkend en populair vanwege zijn traditionele Chinese geneeskunde (TCM). Van Chinese geneeskrachtige kruiden is gemeld dat ze verschillende ziekten behandelen en worden gebruikt vanwege hun biologische potentieel. Geneeskrachtige planten dienen als reservoirs voor bioactieve stoffen en hebben meerdere therapeutische rollen. Geneeskrachtige planten zijn ook gebruikt om de wonden te behandelen. Er zijn verschillende soorten benaderingen die worden toegepast om chronische wonden te behandelen2. Uit een recent onderzoek is gebleken dat geneeskrachtige planten betrokken zijn bij het wondgenezingsproces door gunstige voorwaarden te bieden voor genezing, vrij van infecties en het versnellen van weefselregeneratie3. Ondertussen kunnen de antibacteriële en schimmelwerende eigenschappen van bioactieve stoffen die aanwezig zijn in geneeskrachtige planten helpen om wonden te genezen en de efficiëntie van wondgenezing te versnellen4.

Nanomaterialen op basis van metaal krijgen steeds meer aandacht vanwege hun biocompatibele en biologisch afbreekbare eigenschappen. Eucommia ulmoides, gewoonlijk de Chinese rubberboom genoemd, is een inheemse soort uit China. De bladeren en schors van de boom worden gebruikt in medicinale praktijken. Het belangrijkste is dat de plantensoort werd gekweekt in de centrale en westelijke provincies van China5. Peng et al.6meldden dat bladeren, schors en meeldraadbloemen eetbaar waren met therapeutisch potentieel. Bovendien dient E. ulmoides als de beste bron van lignanen, fenylpropanoïden, iridoïden, flavonoïden, aminozuren en sporenelementen. Bovendien is de schors gebruikt voor verschillende biomedische toepassingen, zoals het beheersen van de bloeddruk, het verlagen van vet en het bevorderen van antiosteroporose en hypoglykemische activiteit7. Het is dus ongetwijfeld bewezen dat het schorsextract van E. ulmoides een lange geschiedenis heeft in de traditionele Chinese geneeskunde. Eerdere rapporten suggereerden dat natuurlijk polymeer polyisopreen rijk is aan de schors van Eucommia ulmoides8. Op basis van de bovenstaande informatie heeft het huidige werk tot doel nanomaterialen te fabriceren met behulp van Eucommia ulmoides-schorsextracten . De combinatie van zink met schorsextract is een aantrekkelijke keuze voor het bereiden van nanomaterialen. Over het algemeen was het uiteindelijke doel van dit onderzoek het fabriceren van een nieuw hybride nanomateriaal voor wondgenezingstoepassingen.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

OPMERKING: Voordat het extract werd bereid, werd het verkregen schorsmateriaal twee keer gewassen met gedeïoniseerd water en op een schaduwrijke plaats gedroogd. De in de schaduw gedroogde schors werd opgeslagen in een luchtdichte verpakking.

1. Preparaat van Eucommia ulmoides-schorsextract

  1. Hak de schors van de Eucommia ulmoides-boom met een schaar in kleine stukjes.
  2. Was de gehakte schorsmaterialen twee keer met dubbel gedestilleerd water.
  3. Droog de stukken schors gedurende 24 uur onder 37 °C in de schaduw.
    1. Pas de duur van het droogproces aan op basis van de hoeveelheid schors die voor het onderzoek is gebruikt. Zorg ervoor dat de schors volledig droog is voordat u de schors in kleine stukjes snijdt. Vermijd direct zonlicht.
  4. Breng 20 g schaduwgedroogde schors over in een conische kolf met 220 ml steriel dubbel gedestilleerd water en verwarm gedurende 20 minuten bij 130 °C.
    1. De kleur van de reactieoplossing verandert in lichtgeel. De kleurveranderingen van de oplossing treden op na 10 minuten. Laat de oplossing nog 10 minuten opwarmen. Pas het volume dubbel gedestilleerd water aan op basis van de monsterhoeveelheid.
  5. Bewaar het ruwe extract dat polyisopreen bevat bij 4 °C voor verder gebruik. De vorming van een draadachtige structuur duidt op de aanwezigheid van polyisopreen in de extracten.

2. Biosynthese van E. ulmoides schors-gemedieerde ZnO nanodeeltjes

  1. Voeg 1 M zinknitraatdihydraat Zn (NO3)2 toe aan 50 ml gedeïoniseerd water in een erlenmeyer van 500 ml. Roer continu met behulp van magnetisch roeren (60 RPM). De Zn (NO3)2 heeft 30 minuten nodig om volledig op te lossen.
  2. Voeg druppelsgewijs 15 ml extract van E. ulmoides-schors toe aan 20 ml 1 M zinknitraatdihydraat (Zn (NO3)2) oplossing.
  3. Plaats het afgedekte reactiemengsel op een magnetische roerder, zet de roerder aan en draai gedurende 3 uur op (60 RPM).
  4. Voeg 1 N natriumhydroxide NaOH (3 ml) oplossing druppelsgewijs toe aan het reactiemengsel om de pH op 9 te brengen. Voeg NaOH toe tot het oplossingsmengsel melkachtig wit wordt en de pH niet hoger is dan 9. De oplossing krijgt een melkwitte kleur wanneer ZnO-nanodeeltjes worden gevormd.
    1. De bereiding van 1 M zinknitraatdihydraat Zn (NO3)2 oplossingsvolume kan variëren afhankelijk van de experimentele behoeften. Zorg ervoor dat je de vers bereide schorsextracten gebruikt. Als de pH hoger is dan 10, resulteert dit in aggregatie van nanodeeltjes.
  5. Breng de gesynthetiseerde Eu-ZnO-NP's over in een centrifugebuis van 50 ml en centrifugeer deze gedurende 5 minuten bij 100 x g bij 4 °C.
    OPMERKING: De onzuiverheden kunnen worden vermeden door onmiddellijk te wassen.
  6. Verzamel de gewassen Eu-ZnO-NP's in een glasplaat en droog ze gedurende 1 uur bij 45-50 °C in een heteluchtoven.
    OPMERKING: Als de Eu-ZnO-NP's langer dan 30 minuten worden bewaard, kan dit de fysisch-chemische aard van de nanodeeltjes beïnvloeden

3. Maatbevestiging met TEM

  1. Bereid 1 mg/ml nanodeeltjes in DDH2O en laad 5 μL Eu-ZnO-NP-monster in het koperrooster en wacht tot het volledig is opgedroogd. Vortex het monster voordat het op het koperen rooster wordt geladen.
  2. Laad het koperen raster met Eu-ZnO-NP's op de TEM-monsterhouder en verkrijg afbeeldingen met een vergroting van 50x en 100x.
    OPMERKING: Roosters moeten tijdens deze stap met een pincet worden opgepakt.

4. Beoordeling van de cytotoxiciteit

  1. Zaai 1 × 104 HUVEC's in elk putje van een plaat met 96 putjes en plaats deze in een incubator met 5% CO2 37 °C.
  2. Voeg 10 μl van verschillende concentraties 0, 10, 20, 30, 40 en 50 μg/ml Eu-ZnO-NP's toe aan de 90% confluente cellen en incubeer deze gedurende 24 uur.
  3. Verwijder na de incubatie het oude medium zonder de cellen te verstoren, voeg 10 μL CCK-8-oplossing toe aan elk putje met 90 μL vers DMEM-medium en incubeer in een incubator met 5% CO2, 37 °C.
  4. Meet de absorptie van cellen die zijn behandeld met CCK8-oplossing bij 450 nm met behulp van een spectrofotometer.
    OPMERKING: De extinctie werd onmiddellijk binnen 15 minuten gemeten om veranderingen in de absorptie te voorkomen.

5. Voorbereiding van HUVEC-cellen voor krastest

  1. Zaai een geschikte (1 × 105) hoeveelheid HUVEC's in 12 putjes met Dulbecco's gemodificeerde Eagle-medium met 10% foetaal runderserum (FBS) en 1% penstreptokokken en incubeer deze in een incubator met 5% CO2 37 °C.
    1. Voordat u de krastest uitvoert, controleert u de confluentie met behulp van de omgekeerde microscoop.
      OPMERKING: Voor het uitvoeren van de krastest worden 6 putplaten of 12 platen gebruikt op basis van de vereisten, en de celdichtheid zal variëren voor verschillende kweekplaten. Het gebruik van 70%-80% confluente cellen is ideaal en wordt aanbevolen voor krastesten. Het volume DMEM-medium kan variëren op basis van de kweekplaten die in het onderzoek zijn gebruikt. Platen met 6 putjes hebben bijvoorbeeld 1-1,5 ml kweekmedium nodig en platen met 12 putjes hebben 0,5-1,0 ml groeimedium nodig.
  2. Maak voorzichtig een kras met behulp van een steriele pipetpunt van 200 μl in de representatieve wond met een wondbreedte van 200 μm.
  3. Zorg ervoor dat de punt die wordt gebruikt om krassen op de celmonolaag te maken, contact maakt met het oppervlak van de cellen.
    OPMERKING: Elke keer dat er een kras wordt gemaakt, gebruikt u de steriele punt.
  4. Verwijder het volledige medium en was de HUVEC-monolaag met 1 ml 1x PBS om de losgeraakte cellen te verwijderen.
    NOTITIE: Zorg ervoor dat de losgemaakte monolaagcellen volledig uit de respectievelijke putjes zijn verwijderd. Controleer of er geen schade is opgetreden in het door de wond ontstane gebied.
  5. Om het wondgenezingspotentieel van gesynthetiseerde Eu-ZnO-NP's te evalueren, voegt u concentraties van 0 (controle), 10 en 20 μg/ml Eu-ZnO-nanodeeltjes in combinatie met een compleet medium met 10% FBS toe aan de putjes. Houd de experimentele platen op 37 °C in een 5% CO2 -incubator.
    OPMERKING: Verstoor de celmonolaag niet tijdens het toevoegen van het frisse, complete medium. Zorg ervoor dat de monolaagcellen tijdens de incubatie ongestoord blijven.
  6. Maak een microfoto op 0 uur en 24 uur met behulp van een omgekeerde microscoop. Gebruik de annotatietool om de wondsluiting in verschillende tijdsintervallen te meten.
    1. Bereken het percentage wondsluiting aan de hand van de volgende formule: Wondsluiting (%) = [(celmigratie (in μm) na 0 uur - celmigratie (in μm) na 24 uur)/ celmigratie (in μm) na 0 uur] x 100.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het huidige onderzoek heeft tot doel nanodeeltjes te synthetiseren met behulp van de schors van de Eucommia ulmoides-boom . Het schorsmateriaal werd volledig gedroogd in een schaduwrijke omgeving (Figuur 1). De schorsmaterialen werden gebruikt om het hete water waterige ruwe extract te bereiden door de monsters gedurende 20 minuten op 130 °C te verwarmen. Een kleine verandering in de temperatuur en duur kan de fytoverbindingen verstoren en ze ongeschikt maken voor de bereiding van het waterige extract. De waterige ruwe schorsextracten van E. ulmoides werden bereid en gebruikt voor de synthese van nanodeeltjes (Figuur 2). Het bereide extract kan onmiddellijk worden gebruikt. Het extract dat gedurende een langere periode wordt bewaard, kan het syntheseproces beïnvloeden. Daarom wordt een vers bereid extract aanbevolen voor de bereiding van nanodeeltjes.

De succesvolle synthese van door ruw schorsextract gemedieerde ZnO NP's werd bevestigd door het verschijnen van een melkwitte kleur en een verandering in de pH (Figuur 3). De pH hangt nauw samen met de grootte van de nanodeeltjes, en een pH van meer dan 9 resulteert in agglomeratie en ongelijke grootte. De structuur van gesynthetiseerd nanomateriaal werd bevestigd met behulp van TEM-analyse en de gesynthetiseerde nanodeeltjes vertoonden een deeltjesgrootte van 80-90 nm, zoals weergegeven in figuur 4. De NaOH moet druppelsgewijs worden toegevoegd om een plotselinge verandering in het reactiemengsel te voorkomen. De op metaal gebaseerde nanoformuleringen zijn geschikt, goedkoop en minst giftig. Nanomaterialen op basis van metaal staan echter bekend om hun biologische functies.

De cytotoxiciteit van Eu-ZnO-NP's tegen HUVEC-cellen werd bepaald door middel van een CCK-8-test met de blootstelling van verschillende concentraties Eu-ZnO-NP's gedurende 24 uur. De resultaten gaven aan dat Eu-ZnO-NP's geen merkbare veranderingen in cytotoxiciteit voor HUVEC-cellen vertoonden bij de hogere concentratie van 50 μg/ml (Figuur 5). De juiste hoeveelheid cellen werd geladen en er werd een uniforme grootte van de wonden gemaakt met behulp van een steriele pipetpunt van 200 μl. Het celvolume dat de limiet overschrijdt, kan een verandering in de pH en een langzamere proliferatiesnelheid veroorzaken. De migraties van cellen en het sluiten van de wond werden waargenomen in de behandelingsgroep na 24 uur behandeling, terwijl er geen vergelijkbare veranderingen werden waargenomen in de controlegroep. De resultaten van de wondgenezingsactiviteit toonden aan dat de gesynthetiseerde Eu-ZnO-NP's wondgenezende eigenschappen vertoonden op HUVEC's cellijnen. Een concentratie van 20 μg/ml Eu-ZnO nanomaterialen bevordert een snellere celmigratie en verbeterde wondgenezingseigenschappen. Het belangrijkste was dat de gesynthetiseerde Eu-ZnO-nanodeeltjes een concentratieafhankelijk werkingsmechanisme vertoonden. Bovendien werden na 24 uur behandeling celproliferatie en -migratie waargenomen in bekraste monolaag, terwijl een slechte celmigratie en proliferatiesnelheid werden waargenomen in controlecellen (Figuur 6). Het percentage wondsluiting werd waargenomen als 16% voor controle, gevolgd door 51% voor de behandelde groepen van 10 μg/ml en 81,5% voor de behandelde groepen van 20 μg/ml (Figuur 7).

figure-results-1
Figuur 1: Verzameling van stukken schors van Eucommia ulmoides . Afbeelding van de schors van Eucommia ulmoides, gebruikt voor de bereiding van het waterige warmwaterextract. Voor extractie moeten de schorsen grondig worden gewassen om onzuiverheden te verwijderen en volledig in de schaduw worden gedroogd. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-2
Figuur 2: Preparaat van Eucommia ulmoides-schorsextract : Foto van Eucommia ulmoides-schorsextracten die worden gebruikt voor het synthetiseren van de nanodeeltjes. Het Eucommia ulmoides-schorsextract van 200 ml werd bereid met 20 g stukjes schors. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-3
Figuur 3: Synthese van Eucommia ulmoides schors-gemedieerde ZnO nanodeeltjes. De afbeelding toont de vorming van Eu-ZnO nanodeeltjes en de oplossing met een melkwitte kleur vertegenwoordigt de vorming van Eu-ZnO nanodeeltjes. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-4
Figuur 4: Transmissie-elektronenmicroscopie-analyse: De afbeelding toont verschillende vergrotingen van Eucommia ulmoides-schors-gemedieerde ZnO-nanodeeltjes (A) 100 nm vergroting en (B) 50 nm vergroting. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-5
Figuur 5: Test van de levensvatbaarheid van CCK-8-cellen. De staafdiagrammen geven de levensvatbaarheid weer van cellen na behandeling met verschillende concentraties van 0-50 μg/ml, terwijl de cellen zonder behandeling dienen als negatieve controle. De gegevens vertegenwoordigen het gemiddelde en de standaarddeviatie. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-6
Figuur 6: Krastest voor beoordeling van de wondsluiting. De cellen werden behandeld met gesynthetiseerde EU-ZnO NP's (10 μg/ml en 20 μg/ml) en zonder EU-ZnO NP's (controlegroep) en gedurende 24 uur geïncubeerd. Celproliferatie en -migratie werden waargenomen in de cellen die werden behandeld met EU-ZnO NPs. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-7
Figuur 7: Percentage wondsluiting. De staafdiagrammen geven het wondsluitingspercentage weer op de HUVEC-monolaag met en zonder EU-ZnO NP-behandeling om 0 uur en 24 uur. De gegevens vertegenwoordigen het gemiddelde en de standaarddeviatie. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De E. ulmoides schors, zaad en bladeren worden verondersteld tal van gezondheidsvoordelen te vertonen. Onze resultaten hebben aangetoond dat de synthese van EU-ZnO-nanodeeltjes is bereikt met behulp van een eenvoudige en kosteneffectieve aanpak. Het waterige extract werd gebruikt om de nanodeeltjes te synthetiseren. Het verwarmen van het schorsmateriaal bij hoge temperaturen kan degradatie van sommige fytobestanddelen veroorzaken en de extractie-efficiëntie verlagen. De fytobestanddelen die aanwezig zijn in het waterige kruidenextract kunnen de metaalionen reduceren tot nanodeeltjes. Zinknitraatdihydraat wordt gebruikt voor de bereiding van ZnO-nanodeeltjes vanwege hun biocompatibele en zeer stabiele eigenschappen9. Het gebruik van minimale tot hoge toxiciteit veroorzakende metaalelementen voor het synthetiseren of ontwerpen van de nanomaterialen is riskant en kan niet worden gebruikt voor biomedische claims. Deze synthese kan binnen een dag (24 uur) worden uitgevoerd. Gifvrije metalen en biocompatibele materialen worden echter als veilig beschouwd en worden gebruikt om de efficiëntie van wondgenezing te evalueren. De belangrijkste reden achter de agglomeratie van gesynthetiseerde nanodeeltjes zijn de fytochemische bindingen. De agglomeratie van nanodeeltjes was te wijten aan de aantrekkingskracht van de Van der Waal-interacties en de aantrekkingskrachten tussen het oppervlak10,11. De agglomeratie van nanodeeltjes kan de fysische en optische eigenschappen beïnvloeden. De grootte en vorm van de nanodeeltjes kunnen worden gewijzigd met behulp van calcinatie en gloeien12. De resuspensie van nanomaterialen in gedeïoniseerd water en sonicatie kunnen helpen om de agglomeratie van nanodeeltjes te voorkomen. De aanwezigheid van bioactieve stoffen of functionele groepen in het waterige extract is waarschijnlijk betrokken bij het reductieproces. De opbrengst van nanodeeltjes hangt uitsluitend af van het volume van het reactiemengsel dat voor het syntheseproces wordt gebruikt. Het synthetiseren van nanodeeltjes op grote schaal heeft verschillende beperkingen, waaronder agglomeratie en niet-uniforme deeltjesgrootte.

Vergelijkbaar met onze bevindingen, rapporteerden Aydin Acar et al.13 dat Calendula officinalis bloemextract-gemedieerde ZnO-nanodeeltjes wondgenezende eigenschappen vertoonden op L929-cellen met 69,1% wondsluiting. Bovendien vertoonden Crotalaria verrucosa-bladgemedieerde ZnO-nanodeeltjes wondgenezingspotentieel bij een concentratie van 5 μg/ml op HeLA-cellijnen met 40,45% wondsluiting14. Zhang et al.15rapporteerden dat de ZnO-nanodeeltjes die werden gesynthetiseerd met behulp van Euphorbia fischeriana significante wondgenezende eigenschappen vertoonden bij concentraties van 10 en 15 μg/ml. Deze studies hebben aangetoond dat de gesynthetiseerde nanoformulering kan worden gebruikt als wondgenezend middel. De onderzoeksresultaten van deze onderzoeken toonden aan dat de gesynthetiseerde verbindingen de wond kunnen herstellen en kunnen helpen bij re-epithelisatie in behandelingsgroepen.

Hemostase en celmigratie worden beschouwd als belangrijke processen bij het genezen van wonden. De kras die op de monolaag van HUVEC's is gemaakt, is gemaakt met behulp van pipetpunten om kunstmatige wonden na te bootsen. Verder is het maken van wonden met dezelfde breedte behoorlijk lastig en ingewikkeld. Aan de andere kant is dit een goedkopere methode. In deze test werd waargenomen dat de ontworpen nanodeeltjes uitstekende wondgenezende eigenschappen vertoonden op de HUVEC's bij concentraties van 10-20 μg/ml in vergelijking met de controlegroep. Bovendien hebben de gesynthetiseerde Eu-ZnO-NP's het vermogen om de wond die op de celmonolaag is ontstaan te herstellen zonder toxische effecten te veroorzaken. Deze in vitro experimenten kunnen worden gebruikt om de effectiviteit van gesynthetiseerde nanomaterialen op basis van polymeren te identificeren met behulp van diermodellen.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben niets te onthullen

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs willen het Department of Cell Biology, Central South University, Changsha, China, oprecht bedanken voor het ter beschikking stellen van de instrumentatiefaciliteiten.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
12 well plateNEST703011Gebruikt voor celkweek en test
CentrifugeSCILOGEXSC1406Gebruikt om de nanodeeltjes te scheiden van het colloïdale mengsel
Centrifugebuis – 15 mLBIOFILCFT-312150Om de gesynthetiseerde oplossing te centrifugeren 
Centrifugebuis – 5 mLBiosharp BS-50-CM-SOm de nanodeeltjes op te slaan
CO2 incubatorThermo scientific3010Om de HUVEC-cellen te kweken
Gedemineraliseerd waterMilliporeNiet van toepassing Voor de bereiding van het extract 
DMEM mediumCytivaSH30243.01Gebruikt voor celkweekwerk
TrechterThermo scientific42600060Om het filterpapier vast te houden tijdens het filteren
Glazen bekersBorosilicaat 1102-50Gebruikt om de waterige extract te bereiden
HeteluchtovenGenetimesNiet van toepassing Gebruikt om de nanodeeltjes te drogen en in poedervorm te verzamelen
MagneetroerderKYLIN-BELLGL-5250-AGebruikt voor nanodeeltjessynthese
MicroscoopNikon EclipseTs2Gebruikt om microfotografieën te maken 
PetrischaalNEST753001Gebruikt om de nanodeeltjes te verzamelen 
Pipet 1 mLLab Science YEA17AD0055580Om het specifieke volume van oplossing/extract te nemen/toe te voegen
Pipet tips 1 mLSAINING 3014200-TOm het specifieke volume van oplossing/extract te nemen/toe te voegen
PTFE magnetische roerrepenLAN RANNiet van toepassing Gebruikt voor het nanomateriaalsyntheseproces
NatriumhydroxideSigma Alrich71690Gebruikt om de pH tijdens de synthese aan te passen
Roestvrij schaarDeli6034Gebruikt om de schorsmaterialen te hakken
T25 weefselkweekkolfNEST707001Gebruikt om de cellen te onderhouden 
Weegschaal Radwag AS220R2Gebruikt om de chemicaliën te wegen 
Whatman filterpapier nr.1NewstarGB/T1914-2017Gebruikt om het extract voor synthese te filteren
Zinknitraat Sigma Alrich13778-30-8Gebruikt als voorloper voor de synthese van de nanodeeltjes

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Williamson, E. M., Liu, X., Izzo, A. A. Trends in use, pharmacology, and clinical applications of emerging herbal nutraceuticals. Br. J. Pharmacol. 177 (6), 1227-1240 (2020).
  2. Cedillo-Cortezano, M., Martinez-Cuevas, L. R., López, J. A. M., Barrera López, I. L., Escutia-Perez, S., Petricevich, V. L. Use of medicinal plants in the process of wound healing: a literature review. Pharmaceuticals. 17 (3), 303(2024).
  3. Budovsky, A., Yarmolinsky, L., Ben-Shabat, S. Effect of medicinal plants on wound healing. Wound Repair Regen. 23 (2), 171-183 (2015).
  4. Yazarlu, O., et al. Perspective on the application of medicinal plants and natural products in wound healing: A mechanistic review. Pharmacol Res. 174, 105841(2021).
  5. Zhu, M. Q., Sun, R. C. Eucommia ulmoides Oliver: a potential feedstock for bioactive products. J Agric Food Chem. 66 (22), 5433-5438 (2018).
  6. Peng, M., Zhou, Y., Liu, B. Biological properties and potential application of extracts and compounds from different medicinal parts (bark, leaf, staminate flower, and seed) of Eucommia ulmoides: A review. Heliyon. 10 (6), e27870(2024).
  7. Xing, Y. Y., et al. Inhibition of rheumatoid arthritis using bark, leaf, and male flower extracts of Eucommia ulmoides. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 3260278(2020).
  8. Guo, M., et al. Quantitative detection of natural rubber content in Eucommia ulmoides by portable pyrolysis-membrane inlet mass spectrometry. Molecules. 28 (8), 3330(2023).
  9. Yusof, H. M., Rahman, N. A., Mohamad, R., Zaidan, U. H., Samsudin, A. A. Biosynthesis of zinc oxide nanoparticles by cell-biomass and supernatant of Lactobacillus plantarum TA4 and its antibacterial and biocompatibility properties. Sci Rep. 10, 19996(2020).
  10. Gosens, I., et al. Impact of agglomeration state of nano-and submicron sized gold particles on pulmonary inflammation. Part Fibre Toxicol. 7 (1), 37(2010).
  11. Zare, Y. Study of nanoparticles aggregation/agglomeration in polymer particulate nanocomposites by mechanical properties. Compos A Appl Sci Manuf. 84, 158-164 (2016).
  12. Kim, M. G., et al. Effects of calcination temperature on the phase composition, photocatalytic degradation, and virucidal activities of TiO2 nanoparticles. ACS Omega. 6 (16), 10668-10678 (2021).
  13. Aydin Acar, C., Gencer, M. A., Pehlivanoglu, S., Yesilot, S., Donmez, S. Green and eco-friendly biosynthesis of zinc oxide nanoparticles using Calendula officinalis flower extract: Wound healing potential and antioxidant activity. Int Wound J. 21 (1), e14413(2024).
  14. Sana, S. S., et al. Crotalaria verrucosa leaf extract mediated synthesis of zinc oxide nanoparticles: assessment of antimicrobial and anticancer activity. Molecules. 25 (21), 4896(2020).
  15. Zhang, H., Liang, Z., Zhang, J., Wang, W. P., Zhang, H., Lu, Q. Zinc oxide nanoparticle synthesized from Euphorbia fischeriana root inhibits the cancer cell growth through modulation of apoptotic signaling pathways in lung cancer cells. Arab J Chem. 13 (7), 6174-6183 (2020).

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

ZinkoxidenanodeeltjesEucommia ulmoides extractsynthese van nanomaterialenkrasassayhumane endotheelcellencelmigratiepolyisopreenextractcytotoxiciteitsbeoordelingmagnetisch roeren

Gerelateerde artikelen