Methodenartikel

Gedragstaken voor het onderzoeken van identiteitsherkenning bij muizen

DOI:

10.3791/67547

⸱

7 februari 2025

 ,  ,  , 
1Integrated Program in Neuroscience, McGill University, 2Neuroscience Division, Douglas Research Centre, 3Department of Psychiatry, McGill University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Door negatief of positief gewaardeerde ervaringen te koppelen aan individuele sociale doelen, ontwikkelden we gedragstaken voor het onderzoeken van de identiteitsherkenning van C57BL/6-muizen. Deze taken maken het mogelijk om mechanismen van sociaal geheugen van individuele sociale doelen te bestuderen in gezonde en ziektegerelateerde muismodellen met verminderde sociale cognitie.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sociale dieren zijn, net als knaagdieren, in staat om de identiteit van bekende individuen te herkennen en te onderscheiden. Het herkennen van de identiteit van bekende individuen is belangrijk voor het ontwikkelen van sociale structuren zoals hiërarchie, verwantschap en familie. De mechanismen die ten grondslag liggen aan de erkenning van sociale identiteit blijven echter onduidelijk. De meeste studies van knaagdieren naar sociale erkenning zijn gebaseerd op de neiging van knaagdieren om te interageren met een nieuw sociaal doelwit, een fenomeen dat bekend staat als sociale nieuwigheid. Gedragstaken voor het onderzoeken van sociale nieuwigheid kunnen echter niet de herkenning van bekende soortgenoten onthullen op basis van hun identiteit. Hier worden gedragstaken gepresenteerd die het mogelijk maken om identiteitsherkenning bij C57BL/6-muizen te onderzoeken door twee bekende muizen te associëren met of zonder een valentie-ervaring. Proefpersonen hadden interacties met twee muizen zonder (neutraal) of met een valentie-ervaring (negatief of positief) en raakten vertrouwd met deze muizen. De negatief gewaardeerde muis werd geassocieerd met shocks, terwijl de positief gewaardeerde muis werd geassocieerd met een voedselbeloning. Na training kan de herkenning van de identiteit van deze bekende muizen worden aangetoond in een sociale discriminatietest, die wordt weergegeven als de voorkeur voor de positief gewaardeerde muis en het vermijden van de negatief gewaardeerde muis ten opzichte van de neutrale muis. Gedragstaken voor identiteitsherkenning kunnen nuttig zijn bij het onderzoeken van sociale geheugenmechanismen en de pathofysiologie van stoornissen met verminderde sociale cognitie, zoals autismespectrumstoornis of schizofrenie.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Identiteitsherkenning, of het vermogen om bekende individuen te identificeren op basis van eerdere ervaringen, is van cruciaal belang voor het voortbestaan van sociale dieren1. Bij knaagdieren zijn sociale hiërarchie, herkenning van partners en nakomelingen, territoriale verdediging en het vestigen en onderhouden van groepen gedragingen die nodig zijn voor succesvolle identiteitsherkenning 2,3. Het huidige begrip van het sociale geheugen is gebaseerd op studies van knaagdieren die geworteld zijn in het vermogen om nieuwe versus bekende soortgenoten te identificeren. Deze taken zijn nuttig geweest voor het blootleggen van hersengebieden waarvan wordt gedacht dat ze het sociale geheugen bemiddelen, zoals de hippocampus CA24 en ventrale CA1-regio's5. Dergelijke studies blijven echter beperkt in het ophelderen van de mechanismen die ten grondslag liggen aan identiteitsherkenning, aangezien ze zich beperken tot de categorische erkenning van sociale nieuwigheid.

Identiteitsherkenning is onafhankelijk van sociale nieuwigheid aangetoond via associatieve leerparadigma's waarbij valentie-saillante ervaringen worden geassocieerd met een van de twee (of meer) bekende sociale doelen. Deze taken zijn gebaseerd op het idee dat sociale interacties vaak gekoppeld zijn aan emotionele betekenis, waarbij negatieve ervaringen resulteren in conflictpreventief gedrag, terwijl speelse of verzorgende interacties over het algemeen lonend zijn. Het emotionele affect dat aan interacties is verbonden, wordt sociale valentie genoemd. Mannelijke goudhamsters waren in staat om onderscheid te maken tussen twee bekende soortgenoten wanneer men ze eerder had aangevallen6. Het herkenningsgeheugen van individuele mannelijke Wistar-ratten was ook belangrijk voor het vaststellen van sociale rang7.

Onlangs is identiteitsherkenning onderzocht bij C57BL/6-muizen, de meest gebruikte muizenstam in neurowetenschappelijk onderzoek, door individuele C57BL/6-muizen te associëren met of zonder eetluststimuli8. Deze benadering gebruikte muizen met het hoofd om honderden trainingsproeven te ondergaan, wat het gebruik ervan voor het onderzoeken van naturalistisch gedrag bij vrij bewegende muizen beperkte. In andere studies werd de identiteitsherkenning van C57BL/6-muizen ondersteund door de voorkeur van met ethanol toegediende soortgenoten 9,10. Desalniettemin kan de toediening van stoffen verstorende factoren veroorzaken. Ten slotte zijn er maar weinig van deze onderzoeken gebruikt om identiteitsherkenning bij knaagdieren van beide geslachten te onderzoeken. Een gemakkelijk toe te passen methode die van toepassing is op zowel mannelijke als vrouwelijke C57BL/6-muizen is een hulpmiddel dat cruciaal is voor het bevorderen van de studie van identiteitsherkenning.

Hier worden paradigma's voor identiteitsherkenning gepresenteerd die kunnen worden gebruikt bij zowel mannelijke als vrouwelijke muizen. Om identiteit onafhankelijk van de effecten van nieuwigheid te bestuderen, worden twee bekende sociale doelen gebruikt, en een van deze doelen wordt geassocieerd met een opvallende emotionele ervaring waarvan wordt aangenomen dat deze interactiegedrag informeert. Voor de negatieve sociale valentieassociatie werd een benadering die vergelijkbaar is met sociale angstconditionering aangepast om vermijding uit te lokken naar een specifiek sociaal doel11. Als een negatieve sociale valentie, zoals een aversieve voetschok, wordt geassocieerd met een individu, wordt een verminderde interactie met het sociale doel verwacht. Omgekeerd, als een positieve sociale valentie, zoals een eetlustbeloning, wordt geassocieerd met een specifiek individu, zou bij latere tests een verhoogde interactie met deze muis worden verwacht. Alles bij elkaar kunnen de geschetste gedragstaken gemakkelijk worden toegepast in de meeste laboratoria voor de studie van identiteitsherkenning bij C57BL/6-muizen en andere muizenstammen.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mannelijke volwassen C57BL/6-muizen (8-10 weken oud; lichaamsgewicht: 18-25 g) werden in dit onderzoek gebruikt. Muizen die als sociale doelen werden gebruikt, werden verkregen uit een andere bron (zie Tabel met materialen) om er zeker van te zijn dat ze uit verschillende nesten kwamen en voorheen onbekend waren bij de betrokken muizen. Alle protocollen zijn goedgekeurd door het Facility Animal Care Committee van het Douglas Research Centre en volgden de richtlijnen van de Canadian Council on Animal Care (protocol nr.: DOUG-5935).

1. Materialen (zie figuur 1)

  1. Zet een grote transparante kooi (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) op als neutrale context in het experiment met negatieve sociale valentie
  2. Gebruik een zwartwandige, driehoekige shockbox (lengte van elke zijde = 46 cm; hoogte = 29 cm) als negatieve valentiecontext. Zorg ervoor dat de vloer van de shockbox bestaat uit metalen roosters die zijn aangesloten op een Scrambled Grid Current Generator.
  3. Gebruik een grote transparante kooi (26 cm x 47 cm x 21 cm) als context voor voedselgewenning in het experiment met positieve sociale valentie.
  4. Gebruik een grote kooi met zwarte wanden (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) als neutrale context in het experiment met positieve sociale valentie.
  5. Gebruik een grote kooi met witte wanden (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) met een voedselpoort als context van positieve sociale valentie. Gebruik als voedselpoort een plastic buis (0,5 cm diameter) die door één kant van de muur gaat en plaats een witte plastic schaal onder de buis.
  6. Voorgesneden wit ezelpapier om te gebruiken als de vloer van de neutrale context (neutrale training in zowel negatieve als positieve sociale valentie-experimenten) en positieve sociale valentiecontexten. Knip het pad iets kleiner dan de onderkant van de context om te voorkomen dat de muis van de proefpersoon zich onder het papier nestelt. Vervang de ezelkussens tussen de muizen.
  7. Gebruik stofvrije precisiepellets (20 mg, chocoladesmaak) als beloningssignaal bij interactie met de positief gewaardeerde sociale doelstelling.
  8. Gebruik een weegschaal om proefmuizen dagelijks te wegen voor de duur van de experimenten met positieve sociale valentie.
  9. Gebruik een doos met drie kamers (81 cm x 23 cm x 23 cm), met openingen in de middelste kamer die aansluiten op de linker- en de rechterkamer, voor het testen van sociale discriminatie. Gebruik verwijderbare kamerdeuren om de muis van de proefpersoon tussen de sessies door in de middelste kamer te houden, waardoor stress bij het hanteren wordt voorkomen.
  10. Gebruik twee identieke rechthoekige plexiglas behuizingen (10 cm x 5 cm x 30 cm) voor zowel negatieve als positieve sociale valentietraining.
  11. Gebruik vier ronde draadbekers (8 cm x 8 cm x 10 cm) voor het testen van sociale discriminatie. Hou twee draadbekers leeg tijdens sessie 1 van de sociale discriminatietest. In sessie 2 plaats je de sociale doelen die gebruikt worden bij positieve of negatieve sociale valentietraining in de andere twee draadcups.
    NOTITIE: Label de draadcups (bijv. met tape) om onderscheid te maken tussen identieke draadcups. Gebruik binnen een experiment de draadcups voor hetzelfde doel gedurende de hele duur van het experiment. Als er een ander sociaal doel in de draadbeker moet worden geplaatst, maak de draadbeker dan grondig schoon met water, zeep en een snelwerkend ontsmettingsmiddel op basis van waterstofperoxide.
  12. Plaats twee glazen flessen op de omgevallen draadbekers tijdens sociale discriminatietests om te voorkomen dat de proefmuizen op de draadbekers klimmen.
  13. Zorg ervoor dat de omheiningen in training zijn voorzien van vloeren van niet-geleidend materiaal voor experimenten met negatieve sociale valentie. Gebruik bijvoorbeeld plastic of karton bedekt met isolatietape om ervoor te zorgen dat het negatief gewaardeerde sociale doelwit geen schokken krijgt tijdens de training.
  14. Gebruik een stille timer om externe signalen te vermijden die zouden kunnen ingrijpen in het gedrag van dieren.
  15. Gebruik een webcam met hoge resolutie (1.080 p/30 fps) die is aangesloten op een laptop om muisgedrag vast te leggen tijdens de training en de sociale discriminatietest.
  16. Gebruik een witte ruisgenerator die statische witte ruis genereert met 60 dB, gemeten in het midden van de context.
    OPMERKING: Alle gedragsprocedures moeten worden uitgevoerd met statische witte ruis van 60 dB, gemeten in het midden van de context om omgevingsgeluiden te maskeren die het gedrag van dieren kunnen beïnvloeden.
  17. Gebruik roodlichtlampen voor alle gedragsprocedures.
    OPMERKING: Dit zorgt voor donkere omgevingsomstandigheden, die exploratie bij muizen aanmoedigen en de visualisatie van dierlijk gedrag in video-opnamen mogelijk maken.
  18. Reinig omheiningen, zowel lege als dierhoudende, tussen de muizen met 70% ethanol, dat snel droogt. Reinig trainings- en testcontexten tussen proefmuizen met een snelwerkend ontsmettingsmiddel op basis van waterstofperoxide om mogelijke invloeden op gedrag te elimineren die te wijten zijn aan olfactorische signalen van eerdere proefmuizen.

2. Gedragsprocedures

  1. Negatieve sociale valentie
    1. Context gewenning
      1. Rust de experimentele ruimte uit met witte ruis en rood omgevingslicht voor de duur van het experiment.
      2. Bereid de shockbox voor door een lege plexiglas behuizing met een niet-geleidende vloer in het midden te plaatsen.
      3. Plaats de muis van de proefpersoon in een hoek van de shockbox en laat de muis 5 minuten vrij verkennen.
      4. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi.
      5. Herhaal de gewenning van de shockbox met de resterende muizen.
      6. Herhaal minstens 1 uur later de contextgewenningsprocedure (stappen 2.1.1.1-2.1.1.5) in de neutrale context.
    2. Negatieve valentie training
      1. Begin minstens 1 uur na de gewenning aan beide contexten met negatieve valentietraining.
      2. Bereid de schokdemper voor door de stroom in te stellen op 0.3 mA.
        LET OP: De aanbevolen stroominstelling is gebaseerd op de shockbox die we hebben gebruikt en ons experimentele ontwerp (3 trainingsdagen). Deze instelling kan worden aangepast aan andere experimentele ontwerpen (er kan bijvoorbeeld een sterkere stroom worden gebruikt bij ontwerpen met minder trainingsproeven).
      3. Plaats het negatief gewaardeerde sociale doel in de plexiglas behuizing met een niet-geleidende bodem in het midden van de shockbox.
      4. Start de video-opname en plaats de muis van het onderwerp in een hoek van de shockbox.
      5. Start de timer en laat de muis van het onderwerp vrij verkennen.
      6. Dien na 4 en 4,5 minuten een elektrische schok van 1 s toe.
        OPMERKING: Dit zorgt voor voldoende interactietijd tussen de muis van de proefpersoon en het sociale doel voordat aversieve schokken worden ervaren.
      7. Verwijder de muis van het onderwerp na 5 minuten en stop de opname en timer.
      8. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi.
      9. Desinfecteer de shockbox en herhaal de negatieve valentietraining met de overgebleven muizen.
    3. Neutrale training
      1. Begin ten minste 2 uur na de negatieve valentietraining met neutrale training.
      2. Plaats het neutrale sociale doelwit in de behuizing met een niet-geleidende bodem in het midden van de context.
        OPMERKING: Een niet-geleidende bodem wordt gebruikt om ervoor te zorgen dat de negatieve en neutrale contexten identieke contextuele aanwijzingen hebben. Er wordt geen schok toegediend in neutrale training.
      3. Start de video-opname en plaats de muis van het onderwerp in een hoek van de neutrale context.
      4. Start de timer en laat de muis van het onderwerp vrij verkennen.
      5. Verwijder de muis van het onderwerp na 5 minuten en stop de opname en timer.
      6. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi.
    4. Volgorde van training
      1. Dag 1: Na de gewenning van beide contexten (stap 2.1.1), voer je de neutrale training uit (stap 2.1.3) 2 uur na de negatieve valentietraining (stap 2.1.2).
      2. Dag 2: Herhaling van de training op dag 2 met een omgekeerde trainingsvolgorde (stap 2.1.3 dan 2.1.2; d.w.z. neutrale training uitvoeren en dan 2 uur later negatieve valentietraining).
      3. Dag 3: Herhaling van de training op dag 3 met een omgekeerde trainingsvolgorde (stap 2.1.2 en vervolgens 2.1.3; d.w.z. negatieve valentietraining gevolgd door neutrale training 2 uur later).
  2. Positieve sociale valentie
    1. Voedselgebrek
      1. Weeg elke proefmuis dagelijks voor de duur van het experiment.
        OPMERKING: Als een muis op enig moment meer dan 15% van zijn oorspronkelijke lichaamsgewicht verliest, moet voedselgebrek worden gestopt en moet de muis worden weggegooid van verdere experimenten.
      2. Geef 1 g van het gewone muizenvoer per proefmuis in de thuiskooi.
        OPMERKING: Proefmuizen worden in een groep gehuisvest met 1 g voedsel per muis. Als er bijvoorbeeld vier muizen in een groep worden gehuisvest, wordt er 4 g voedsel in de thuiskooi geplaatst.
      3. Herhaal voedseldeprivatie dagelijks voor de duur van het experiment met positieve sociale valentie (d.w.z. na elke dag van gewenning aan voedselpellets, contextgewenning en positieve valentietraining).
    2. Gewenning van sacharose voedselpellets
      1. Begin 12 uur na het begin van voedselgebrek met het wennen aan voedselpellets.
      2. Rust de experimentele ruimte uit met witte ruis en rood omgevingslicht voor de duur van het experiment.
      3. Plaats de muis van de proefpersoon in een hoek van de context van de voedselgewenning.
      4. Start de timer en lever 1 sucrose voedingspellet/min in de loop van 10 minuten.
      5. Verwijder het onderwerp na 10 minuten en plaats de muis terug in zijn thuiskooi.
      6. Noteer het aantal sucrose-voedselpellets dat door de muis in kwestie wordt geconsumeerd.
      7. Herhaal de gewenning van de sucrose-voedselpellets gedurende in totaal 3 dagen.
        OPMERKING: Er kunnen meer gewenningsdagen worden toegevoegd als muizen na 3 dagen geen sucrose-voedingspellets consumeren.
      8. Verwijder proefpersonen die geen sucrose-voedselpellets consumeren tijdens de gewenning van voedselpellets uit het onderzoek.
    3. Context gewenning
      1. Een dag na de gewenning van de sucrosevoedingspellets (dag 4), bereidt u de positieve valentiecontext voor door een lege plexiglazen behuizing in een hoek van de context te plaatsen.
      2. Plaats de muis van de proefpersoon in een hoek van de context van de positieve valentie en laat de muis 10 minuten vrij verkennen.
      3. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi.
      4. Herhaal de positieve gewenning in de valentiecontext met de resterende muizen.
      5. Herhaal minstens 1 uur later de contextgewenningsprocedure in de neutrale context.
    4. Positieve valentie training
      1. Begin minstens 1 uur na de gewenning aan beide contexten met positieve valentietraining.
      2. Plaats de positief gewaardeerde sociale doelstelling in de behuizing in het midden van de positieve valentiecontext.
      3. Start de video-opname en plaats de muis van de proefpersoon in een hoek van de positieve valentiecontext.
      4. Start de timer en laat de muis van de proefpersoon 10 minuten vrij verkennen.
      5. Bij elke interactie met het sociale doel dat >2 s is, lever je 1 sucrose-voedselpellet af via de voedselpoort. Interactie wordt gedefinieerd als perioden waarin de neus van de muis van de proefpersoon zich <2 cm verwijderd is van de omtrek van de plexiglazen behuizing. De hoofdhoek van het onderwerp moet in de richting van de behuizing zijn gericht.
        OPMERKING: Neusprikken en snuiven kan voorkomen, maar is niet nodig voor de levering van sucrosevoedselpellets.
      6. Verwijder de muis van het onderwerp na 10 minuten en stop de opname en timer.
      7. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi.
      8. Noteer het aantal sucrose-voedselpellets dat via de voedselpoort wordt afgeleverd en het aantal pellets dat door de betreffende muis is geconsumeerd.
      9. Plaats de vloer van de ezel terug, desinfecteer de positieve context en herhaal de positieve valentietraining met de resterende proefmuizen.
    5. Neutrale training
      1. Begin minstens 2 uur na de positieve valentietraining met neutrale training.
      2. Plaats het neutrale sociale doel in de behuizing in een hoek van de neutrale context.
      3. Start de video-opname en plaats de muis van het onderwerp in een hoek van de neutrale context.
      4. Start de timer en laat de muis van de proefpersoon 10 minuten vrij verkennen.
      5. Verwijder de muis van het onderwerp na 10 minuten en stop de opname en timer.
      6. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi.
      7. Plaats de vloer van de ezel terug, desinfecteer de apparatuur en herhaal de neutrale training met de overgebleven muizen.
    6. Volgorde van training
      1. Dag 1-3: Wenning aan voedselpellets uitvoeren (stap 2.2.2).
      2. Dag 4: Na de gewenning van beide contexten (stap 2.2.3) voert u eerst een positieve valentietraining uit (stap 2.2.4) gevolgd door een neutrale training (stap 2.2.5) 2 uur later.
      3. Dag 5: Herhaling van de training op dag 5 met een omgekeerde trainingsvolgorde (stappen 2.2.5 en vervolgens 2.2.4; d.w.z. neutrale training gevolgd door positieve valentietraining 2 uur later).
  3. Test sociale discriminatie
    1. Rust de experimentele ruimte uit met witte ruis en rood omgevingslicht.
    2. Vervoer de proefpersonen naar de experimentele ruimte en laat de ruimte minimaal 1 uur ongestoord wennen.
      LET OP: Zorg ervoor dat sociale doelen tijdens de gewenningsperiode buiten de experimentele ruimte blijven.
    3. Plaats in sessie 1 twee lege draadbekers in de tegenovergestelde hoeken van de linker- en rechterkamer van de driekamerige sociale discriminatiebox.
      OPMERKING: Identieke grote verzwaarde voorwerpen (bijv. glazen flessen) worden bovenop de draadcups geplaatst om ervoor te zorgen dat de muis van de persoon niet op de draadbeker klimt.
    4. Start de video-opname, plaats de muis van het onderwerp in het midden van de middelste kamer en start de timer.
      NOTITIE: Verlaat indien mogelijk de kamer om interferentie van de onderzoeker op de muizen van de proefpersoon tot een minimum te beperken.
    5. Keer na 8 minuten terug naar de testruimte en gebruik, zonder de muis van de proefpersoon aan te raken, de kamerdeuren om de proefpersoon in de middelste kamer te omsluiten.
    6. Vervang de lege draadbekers door een identieke, maar andere set bekers met de sociale doelstellingen.
      LET OP: De sociale doelstellingen zijn de doelstellingen die worden gebruikt in de training met negatieve of positieve sociale valentie.
    7. Verwijder de kamerdeuren en start de timer terwijl de muis van de proefpersoon in sessie 2 op verkenning gaat.
    8. Stop na 8 minuten de opname en breng de muis en sociale doelen van de proefpersoon terug naar hun respectievelijke thuiskooien.
    9. Reinig de bekers met 70% ethanol en reinig de arena met een ontsmettingsmiddel.
    10. Herhaal de test op sociale discriminatie (stappen 2.3.3-2.3.9) met de overige proefmuizen.
    11. Zodra de helft van het cohort klaar is met testen, biedt u tegenwicht aan de locatie van de draadbeker.
      OPMERKING: Sociale doelen moeten worden verplaatst met hun respectievelijke draadcups om tegenstrijdige olfactorische signalen te voorkomen.
    12. Reinig alle draadbekers met water, zeep en ontsmettingsmiddel. Reinig de driekamerbox voor sociale discriminatie met ontsmettingsmiddel.

3. Gedragsanalyse

  1. Opleiding
    1. Analyseer de interactietijd met elk sociaal doel en scoor het aantal interactieperiodes.
      OPMERKING: De analyse kan handmatig worden gescoord (kop van het dier <2 cm van de omtrek van de leefruimte en kophoek van 180°) of met behulp van een geautomatiseerd programma.
    2. Noteer het aantal voedselpellets dat wordt geconsumeerd tijdens positieve sociale valentietraining om ervoor te zorgen dat veranderingen in sociaal gedrag niet te wijten zijn aan verschillen in motivatie om voedselbeloningen te consumeren.
  2. Test sociale discriminatie
    1. Meet de hoeveelheid tijd die de muis van de proefpersoon elk kopje onderzoekt. Een ononderbroken duur van de test van 8 minuten begint zodra de onderzoeker de kamer verlaat.
      OPMERKING: De analyse kan handmatig worden gescoord (dierenkop <2 cm afstand van de omtrek van de draadbeker en kophoek van 180°) of met behulp van een geautomatiseerd programma.
    2. Bereken paarsgewijze analyses om individuele veranderingen binnen testsessies beter vast te leggen. Voer bovendien in twee richtingen herhaalde metingen ANOVA uit (met de factoren sessie en cup) om verschillen in exploratie tussen sessies te detecteren.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We hebben de positieve en negatieve sociale valentietaken gebruikt om identiteitsherkenning bij C57BL/6-muizen te beoordelen (Figuur 2). Vergeleken met dag 1 van de gewenning aan sucrosevoedselpellets (H1, Figuur 2B), consumeerden de meeste muizen alle gegeven pellets op de laatste dag van voedselgewenning (H3). Tijdens trainingssessies (T1 en T2) raakten de proefmuizen vertrouwd met twee CD1-muizen: neutrale (Neu) en positieve valentie-geassocieerde muis (PV) door er afzonderlijk mee te interageren in verschillende contexten. Voedselbeloningen werden pas aan de proefmuizen gegeven na de interactie met muizen-PV. Tijdens de taak voor sociale discriminatie ontdekten we dat getrainde muizen de voorkeur gaven aan interactie met de PV-muis in vergelijking met de neutrale muis (* p < 0,05, gepaarde Student's t-test). De intersessieverhouding van de interactietijd van sessie 2 versus de interactie van sessie 1 onthulde ook een voorkeur voor de PV-muis (* p < 0,05, gepaarde Student's t-test).

We hebben de taak voor negatieve sociale valentie ook gebruikt om de herkenning van identiteiten te onderzoeken (Figuur 2C). De proefmuizen raakten vertrouwd met twee CD1-muizen: Neu en negatieve valentie-geassocieerde muis (NV) door er afzonderlijk mee te interageren in verschillende contexten. Aan het einde van de interactiesessie met de muis NV werden twee elektrische schokken gegeven, terwijl er geen schokken werden gegeven na de interactie met de Neu-muis. We vonden geen verschillen in de interactietijden tussen de proefmuizen en de Neu- of de NV-muizen op elke trainingsdag. We ontdekten echter dat proefmuizen de interactietijd met de NV-muis verminderden tijdens de sociale discriminatietest (* p < 0,05, gepaarde Student's t-test). De intersessieverhouding van de interactietijd van sessie 2 versus de interactie van sessie 1 onthulde ook een voorkeur voor de Neu-muis (* p < 0,05, gepaarde Student's t-test).

figure-results-1
Figuur 1: Apparaat voor identiteitsherkenningstaken. (A) Neutrale valentiecontext voor negatieve sociale valentietesten. Onderaan de context wordt een wit ezelpapier geplaatst. (B) Positieve sociale valentiecontext. Let op de voedselpoort (pijl) in het midden onderaan de doos. (C) Neutrale valentiecontext voor positieve sociale valentietesten. (D) Context van voedselgewenning. Aan de rechterkant van de doos is een poort voor voedselbezorging geïnstalleerd, zoals weergegeven in E (gestippelde cirkel) en F (vergroot). (G) Schok doos. (H) Plexiglas behuizing. (I) Draad beker. (J) Driekamerig vak voor sociale discriminatie voor de sociale discriminatietest. Verwijderbare kamerdeuren voor het bevatten van de muis in de middelste kamer worden weergegeven in K (pijlpunten). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-2
Figuur 2: Ontwerp en verwachte resultaten van taken voor identiteitsherkenning. (A) Schematische diagrammen van positieve (boven) en negatieve sociale valentieversies van identiteitsherkenningstaken (onder). C57BL/6-muizen werden getraind om dagelijks te interageren met de neutrale (muis Neu) en valentie-geassocieerde sociale doelen (muis PV of NV). Een dag na de training werden de proefmuizen in een driekamerapparaat geplaatst voor de sociale discriminatietest. We verwachten dat na positieve en negatieve sociale valentietraining, proefmuizen een voorkeur en vermijding zullen vertonen ten opzichte van respectievelijk positief valentie (groen, muis PV) en negatief gevalente muizen (rood, muis NV). (B) Representatieve gegevens van een experimenteel met positieve sociale valentietraining. Proefmuizen werden getraind om gedurende 2 dagen dagelijks te interageren met de positief gewaardeerde muis (muis PV) en neutrale muis (muis Neu). De volgorde van interactie werd op dag 2 omgekeerd. Links: Histogrammen tonen het percentage geconsumeerde sucrosevoedselpellets tijdens gewenning (H1-3 die gewenningsdagen 1-3 vertegenwoordigen) en training (T1-2 die trainingsdagen 1-2 vertegenwoordigen) met PV van muizen. Rechts: Histogrammen tonen de toename van de sociale interactietijd met de positief valentie van muizen PV tijdens de sociale discriminatietest. Intersessieratio (sessie 2 interactietijd/sessie 1 interactietijd) onthulde de voorkeur voor de positief valentie muizen-PV. * p < 0,05, gepaarde Student's t-toets. (C) Representatieve gegevens van een trainingsexperiment met negatieve sociale valentie. Proefmuizen werden getraind om gedurende 3 dagen dagelijks te interageren met de negatief gewaardeerde muis (muis NV) en neutrale muis (muis Neu). De volgorde van interactie werd dagelijks omgekeerd. Links: Histogrammen tonen de interactietijd met muis Neu en NV tijdens verschillende trainingsdagen. Rechts: Histogrammen tonen de afname van de sociale interactietijd met de negatief gewaardeerde muis NV tijdens de sociale discriminatietest. De intersessieratio toonde het vermijden van de negatief gewaardeerde muis NV. * p < 0,05, gepaarde Student's t-toets. Afkortingen: Neu = neutraal; PV = positieve valentie; NV = negatieve valentie; H = gewenning; T = opleiding. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De paradigma's voor identiteitsherkenning zijn ontworpen om gemakkelijk te worden geïmplementeerd in laboratoria met minimale gespecialiseerde apparatuur en weinig trainingssessies binnen een week. Afhankelijk van de beschikbare middelen en de gewenste onderzoeksvraag kunnen alternatieve valentie-ervaringen worden gebruikt. Zo werd negatief gewaardeerde identiteitsherkenning na aanvallen van een agressief sociaal doelwit voor het eerst beschreven bij goudhamsters en aangepast aan muizen in ons model 6,12.

De paradigma's van valentieherkenning kunnen bredere toepassingen hebben op het gebied van het sociale geheugen. Deze taken kunnen niet alleen worden gebruikt om het sociale geheugen of sociale valentiemechanismen verder te bestuderen, maar ze kunnen ook helpen bij de studie van ziektemodellen waarvan bekend is dat ze sociale herkenningsstoornissen hebben. Stoornissen in identiteitsherkenning liggen ten grondslag aan sociale gedragstekorten bij stoornissen zoals schizofrenie 13,14,15 en autismespectrumstoornis 16,17,18, waarbij naar schatting een derde van de volwassenen met autisme moeite heeft met individuele identiteitsherkenning19. Shank3 knock-outmuizen en Df(16)A+/- zijn bijvoorbeeld muismodellen met autismespectrumstoornis en schizofrenie waarvan bekend is dat ze een verminderde sociale cognitie vertonen 20,21,22. Onze nieuwe paradigma's kunnen tekorten aan sociaal geheugen recapituleren en worden toegepast voor de karakterisering van ziektemodellen en de identificatie van manipulaties of behandelingen die sociale gedragstekorten verbeteren. Levenloze objecten kunnen ook worden bestudeerd ter vervanging van sociale doelen om de mechanismen die het object ondersteunen verder te ontleden, vergeleken met sociale erkenning12.

De sociale doelen die in Figuur 1 zijn gebruikt, zijn CD1-stammuizen van hetzelfde geslacht, maar we hebben vergelijkbare valentie-identiteitsherkenning bereikt met behulp van C57BL/6-doelen van dezelfde stam. Daarom hebben we een gemakkelijk toepasbare methode ontwikkeld, die kan worden gebruikt voor de verdere studie van sociale valentieverwerking, sociale identiteit en tekorten van deze sociale cognitieve functies in diermodellen van hersenziekten.

Paradigma's voor identiteitsherkenning kijken naar het geheugen voor specifieke individuen. Bij het ontwerpen van de experimenten moet men ervoor zorgen dat de trainings- en testsessies totaal verschillend zijn en dat de enige aanwijzing die constant wordt gehouden, de identiteit van de sociale doelen is. De ruimtes waarin training en testen worden uitgevoerd, de omheiningen die de sociale doelen bevatten en de signalen die verband houden met de trainings- en testcontexten moeten bijvoorbeeld allemaal verschillend zijn.

De vier draadbekers moeten identiek zijn aan elkaar, maar zo verschillend mogelijk zijn van de plexiglasbehuizingen. De draadbekers en behuizingen moeten verschillen qua materiaal (bijv. plexiglas versus metaal), vorm (bijv. rechthoekig versus rond) en kleur (bijv. transparant versus roségoud). Dit wordt gedaan om ervoor te zorgen dat de enige aanwijzing die verkennend gedrag tijdens het testen informeert, de identiteit van de sociale doelen is.

De contextgewenning vindt plaats op dag 1 van de training. Dit wordt gedaan om de verkenning van sociale doelen tijdens de training aan te moedigen in plaats van de context, die al bekend zal zijn bij de proefmuis. Bovendien wordt minstens 2 uur wachttijd aanbevolen tussen valentie- en neutrale trainingen. Men denkt dat het geven van tijd aan de proefmuizen tussen trainingssessies de generalisatie vermindert, omdat ervaringen die dichter in de tijd zijn toegewezen, waarschijnlijker zijn gekoppeld23. Om dezelfde reden wordt de training op de volgende dagen herhaald, maar in volgorde gecompenseerd. De herhaling wordt verondersteld de verdere associatie van de ervaring met het respectieve sociale doel aan te moedigen. Idealiter kan meer tijd tussen de trainingssessies de proefmuizen verder in staat stellen om te leren het sociale doel te associëren met hun respectievelijke valentie-ervaring. Om praktische redenen werd besloten de wachttijd op 2 uur te houden, omdat het mogelijk was om zowel neutrale als valentietrainingen op 1 dag plaats te laten vinden in een cohort van 8-12 muizen. Het trainen van 12 muizen kan bijvoorbeeld ongeveer 2 uur duren, waarna de muis die als eerste is getraind, klaar is om aan de volgende trainingssessie te beginnen. Natuurlijk kan het verlengen van de wachttijd de prestaties van de proefmuizen verbeteren, maar het zal meer tijd in beslag nemen voor de onderzoeker.

Proefmuizen en sociale doelen moeten ten minste 7 dagen voor de start van de gedragstraining bij de dierenfaciliteit aankomen om de invloed van transportstress te minimaliseren. Sociale doelen moeten één huis hebben, omdat olfactorische signalen van cagemates de identiteitsherkenning kunnen aantasten. Dezelfde twee sociale doelen kunnen worden gebruikt voor een cohort van maximaal 12 proefmuizen. Belangrijk is dat de sociale doelen tijdens elke schoonmaak- en installatieperiode tussen de proefmuizen naar hun thuiskooi moeten worden teruggebracht. Het is belangrijk om de sociale doelen terug te brengen naar hun thuiskooien, omdat langdurige opsluiting in de verblijven hun gedrag kan veranderen en op zijn beurt de beslissing van de muizen om te communiceren kan beïnvloeden.

Proefmuizen en sociale doelen kunnen soortgenoten zijn van dezelfde of verschillende stammen. Als sociale doelen van dezelfde stam worden gebruikt, is het van cruciaal belang dat ze niet van hetzelfde nest zijn als de muizen in kwestie en dat sociale doelen elkaar niet kennen. Dit kan worden gewaarborgd door proefmuizen en sociale doelen te bestellen bij verschillende dierleveranciers of door dieren van iets verschillende leeftijden te bestellen (d.w.z. muizen van 8 weken oud en sociale doelen van 7 weken oud). Als oormerkprocedures nodig zijn, moeten deze ten minste 24 uur voorafgaand aan de start van de gedragstraining worden uitgevoerd. Dit is om de invloed van externe stressoren op het gedrag van de proefpersoon te minimaliseren. Voor alle gedragstraining en testen wordt aanbevolen om met één muis tegelijk te werken. Hoewel gelijktijdige training en testen van muizen met meerdere proefpersonen tijd kan besparen, verhoogt het ook de olfactorische signalen in de experimentele ruimte die van invloed kunnen zijn op de codering of herinnering aan identiteitsherkenning. Als zodanig raden we cohorten van 8-12 proefpersonen muizen aan. Voor experimenten met positieve sociale valentie wordt aanbevolen om de dieren dagelijks vóór de training te hanteren om hanteringsstress te minimaliseren, die de consumptie van nieuw voedsel kan ontmoedigen. Het wordt ook aanbevolen om 2-3 sucrosevoerkorrels per muis gedurende 3 dagen voorafgaand aan de gewenning in de huiskooi te plaatsen om het gewenningsproces te vergemakkelijken.

Hoewel de gepresenteerde gegevens handmatig zijn gescoord, bestaan er gebruiksvriendelijke en geautomatiseerde opties voor gedragsanalyse die kunnen worden toegepast voor het efficiënter scoren van sociale interacties in trainings- en testvideo's. DeepLabCut is bijvoorbeeld software die gebruikmaakt van door de gebruiker getrainde neurale netwerken voor de markerloze annotatie van de positie van dieren en kan worden geoptimaliseerd voor de nauwkeurige identificatie van frames die voldoen aan onderzoeksgedrag24.

Verdere controle-experimenten kunnen worden gebruikt om te verifiëren dat succesvolle protocollen voor identiteitsherkenning zijn bereikt12. Het terugdraaien van de trainingsvolgorde moet doorgaan met het uitlokken van identiteitsherkenning en bevestigen dat de resultaten niet te wijten zijn aan de volgorde van valentie en neutrale training. Training kan ook worden uitgevoerd zoals beschreven, maar testen kan plaatsvinden met het neutrale en een nieuw sociaal doelwit, waarbij verhoogde interactie met het nieuwe doelwit zou suggereren dat de proefmuizen een sociaal geheugen hebben voor het neutrale doelwit en hebben herkend dat het bekend is. Op dezelfde manier kan testen met twee nieuwe proefmuizen worden gedaan om te bevestigen dat vermijdings- of toenaderingsgedrag in feite specifiek is voor respectievelijk de negatief en positief gewaardeerde sociale doelen. Hoewel het momenteel niet is getest of dezelfde proefmuis zowel negatieve als positieve sociale valentietraining kan ondergaan, zijn we van mening dat het mogelijk is als de onderzoekers toegang hebben tot meerdere sociale doelstammen of trainingscontexten. Het gebruik van dezelfde stam van sociale doelen voor positieve en negatieve valentie-experimenten kan de associatie van een stam met een bepaalde valentie bemoeilijken. Indien mogelijk kan het gebruik van verschillende sociale doelwitten exploratie aanmoedigen en generalisatie tussen positieve en negatieve ervaringen vermijden. Evenzo zou het hergebruik van dezelfde trainingscontexten de generalisatie tussen tegengestelde valentie-ervaringen vergroten en zou het worden geminimaliseerd door het gebruik van verschillende contexten voor training. Als de experimentele tijdlijn het toelaat, wordt ook aanbevolen om de positieve en negatieve valentie-experimenten een paar weken te scheiden.

In het geval dat er problemen zijn met het vaststellen van de protocollen voor identiteitsherkenning, stellen we oplossingen voor vaak voorkomende problemen waarmee we te maken hebben gehad. Muizen met groepshuisvesting kunnen functioneren als uitstervingstraining omdat de valentie die geassocieerd is met een sociaal doelwit uitsterft na normale interactie met de kooi25, maar is noodzakelijk omdat sociaal isolement het sociale geheugen schaadt en sociaal gedrag verandert26,27. In feite ontdekten we dat enkele huisvesting geen identiteitsherkenning opriep bij mannelijke muizen. Er kan echter een enkele huisvesting nodig zijn als dieren herstellende zijn van stereotactische operaties of als ze intracraniële implantaten hebben die gevoelig kunnen zijn voor loslating. In dergelijke gevallen hebben we met succes muizen in grote kooien gehuisvest, gescheiden door een geperforeerde scheidingswand, en hebben we identiteitsherkenning gerepliceerd in deze toestand12.

Voor de taak van positieve sociale valentie is het gebruikelijk dat muizen aarzelen om nieuwe sucrosepellets te consumeren. Om dit probleem op te lossen, is het nuttig om de voedseldeprivatietijd te verlengen of om muizen vertrouwd te maken met de pellets door 2-3 dagen voorafgaand aan de gewenningssessie een paar pellets in hun huiskooi te doen. In sommige situaties waarin een meerderheid van de muizen geen voedselpellets consumeert, kan het ook nuttig zijn om het aantal wenningssessies te verhogen. Hoewel we merkten dat mannelijke muizen over het algemeen minder aten tijdens de gewenning aan voedselpellets dan vrouwelijke muizen, heeft dit geen invloed op hun vermogen om de positief gewaardeerde sociale doelstelling te herkennen.

Ten slotte kunnen de parameters van de taken voor identiteitsherkenning worden gewijzigd om de moeilijkheidsgraad van de taak te verminderen of te vergroten. Om bijvoorbeeld de subtiele impact van biologische factoren op identiteitsherkenning aan het licht te brengen, kan de trainingstijd en het aantal trainingssessies worden verkort om de moeilijkheidsgraad van de taak te vergroten.

De gedragstaken die we in dit protocol hebben gepresenteerd, zijn eenvoudig, gemakkelijk in te stellen en kunnen worden aangepast aan mannelijke en vrouwelijke muizen voor het bestuderen van identiteitsherkenning. Het flexibele gebruik van appetijtieve of aversieve stimuli bij deze taken maakt het ook mogelijk om de rol van sociale valentie bij identiteitsherkenning te onderzoeken. Deze taken zullen nuttig zijn voor het bestuderen van biologische mechanismen van identiteitsherkenning bij gezonde muizen, of tekorten in deze mechanismen in ziektegerelateerde muismodellen die sociale beperkingen vertonen.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren geen belangenconflicten.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We willen mevrouw Alice Wong bedanken voor het leveren van technische ondersteuning en Dr. J. Quinn Lee voor het bouwen van het schokapparaat. We danken en erkennen onze financieringsbronnen: Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (RGPIN-2021-03739), Canadian Institutes of Health Research (PJ8 179866) en Fonds de recherche du Québec – Nature et technologies (326838).

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
70% ethanol
Cage met zwarte wanden (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) neutrale context, positieve sociale valentie-experiment
C57BL/6 muizen Charles River, Jackson LaboratorySociale doelen van Jackson Laboratory
Dustless precision pelletsBioServF0530120 mg, chocoladesmaak
Elektrisch plakband 
Glazen flessen (2)
Waterstofperoxide-gebaseerd ontsmettingsmiddel
Kunststof of karton Niet-geleidend materiaal voor de bodem van de behuizing
Rechthoekige plexiglas-behuizingen (2, 10 cm x 5 cm x 30 cm) Identiek
Shock box (driehoekig, lengte van elke zijde = 46 cm; hoogte = 29 cm)
Stille timer 
Single Output Scrambled Animal ShockerLafayette InstrumentHSCK100AP
Driekamerbox (81 cm x 23 cm x 23 cm), met openingen in de middelste kamer die de linker- en rechterkamers verbindensociaal discriminatieonderzoek
Transparante kooi (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) Negatieve sociale valentie 
Transparante kooi (26 cm x 47 cm x 21 cm) Voedselgewenning (positieve sociale valentie)
WebcamLogitechC920x
Weegschaal 
Witte schilderspapieren Bodem van de neutrale context 
Witte ruisgenerator 60 dB
Witte, plastic schaal
Cage met witte wanden (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) met een plastic buis met een diameter van 1 cm als voedselpoort positieve sociale valentie context
Draadbekers (cirkelvormig, vier, 8 cm x 8 cm x 10 cm) 

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Van Der Kooij, M. A., Sandi, C. Social memories in rodents: Methods, mechanisms and modulation by stress. Neurosci Biobehav Rev. 36 (7), 1763-1772 (2012).
  2. Ferguson, J. N., Young, L. J., Insel, T. R. The neuroendocrine basis of social recognition. Front Neuroendocrinol. 23 (2), 200-224 (2002).
  3. Tibbetts, E. A., Dale, J. Individual recognition: It is good to be different. Trends Ecol Evol. 22 (10), 529-537 (2007).
  4. Hitti, F. L., Siegelbaum, S. A. The hippocampal ca2 region is essential for social memory. Nature. 508 (7494), 88-92 (2014).
  5. Okuyama, T., Kitamura, T., Roy, D. S., Itohara, S., Tonegawa, S. Ventral ca1 neurons store social memory. Science. 353 (6307), 1536-1541 (2016).
  6. Lai, W. S., Ramiro, L. L., Yu, H. A., Johnston, R. E. Recognition of familiar individuals in golden hamsters: A new method and functional neuroanatomy. J Neurosci. 25 (49), 11239-11247 (2005).
  7. Cordero, M. I., Sandi, C. Stress amplifies memory for social hierarchy. Front Neurosci. 1 (1), 175-184 (2007).
  8. Kong, E., Lee, K. H., Do, J., Kim, P., Lee, D. Dynamic and stable hippocampal representations of social identity and reward expectation support associative social memory in male mice. Nat Commun. 14 (1), 2597(2023).
  9. Kent, K., Butler, K., Wood, R. I. Ethanol induces conditioned social preference in male mice. Alcohol Clin Exp Res. 38 (4), 1184-1192 (2014).
  10. Wood, R. I., Rice, R. Ethanol-induced conditioned partner preference in female mice. Behav Brain Res. 243, 273-277 (2013).
  11. Toth, I., Neumann, I. D., Slattery, D. A. Social fear conditioning: A novel and specific animal model to study social anxiety disorder. Neuropsychopharmacology. 37 (6), 1433-1443 (2012).
  12. Larosa, A., et al. Social valence dictates sex differences in identity recognition. bioRxiv. , (2024).
  13. Marwick, K., Hall, J. Social cognition in schizophrenia: A review of face processing. Br Med Bull. 88 (1), 43-58 (2008).
  14. Sachs, G., Steger-Wuchse, D., Kryspin-Exner, I., Gur, R. C., Katschnig, H. Facial recognition deficits and cognition in schizophrenia. Schizophr Res. 68 (1), 27-35 (2004).
  15. Whittaker, J. F., Deakin, J. F., Tomenson, B. Face processing in schizophrenia: Defining the deficit. Psychol Med. 31 (3), 499-507 (2001).
  16. Griffin, J. W., Bauer, R., Scherf, K. S. A quantitative meta-analysis of face recognition deficits in autism: 40 years of research. Psychol Bull. 147 (3), 268-292 (2021).
  17. Carver, L. J., Dawson, G. Development and neural bases of face recognition in autism. Mol Psychiatry. 7 Suppl 2, S18-S20 (2002).
  18. Klin, A., et al. A normed study of face recognition in autism and related disorders. J Autism Dev Disord. 29 (6), 499-508 (1999).
  19. Minio-Paluello, I., Porciello, G., Pascual-Leone, A., Baron-Cohen, S. Face individual identity recognition: A potential endophenotype in autism. Mol Autism. 11 (1), 81(2020).
  20. Peca, J., et al. Shank3 mutant mice display autistic-like behaviours and striatal dysfunction. Nature. 472 (7344), 437-442 (2011).
  21. Piskorowski, R. A., et al. Age-dependent specific changes in area ca2 of the hippocampus and social memory deficit in a mouse model of the 22q11.2 deletion syndrome. Neuron. 89 (1), 163-176 (2016).
  22. Xu, Q. W., Larosa, A., Wong, T. P. Roles of ampa receptors in social behaviors. Front Synaptic Neurosci. 16, 1405510(2024).
  23. Cai, D. J., et al. A shared neural ensemble links distinct contextual memories encoded close in time. Nature. 534 (7605), 115-118 (2016).
  24. Mathis, A., et al. Deeplabcut: Markerless pose estimation of user-defined body parts with deep learning. Nat Neurosci. 21 (9), 1281-1289 (2018).
  25. Zoicas, I., Slattery, D. A., Neumann, I. D. Brain oxytocin in social fear conditioning and its extinction: Involvement of the lateral septum. Neuropsychopharmacology. 39 (13), 3027-3035 (2014).
  26. Ieraci, A., Mallei, A., Popoli, M. Social isolation stress induces anxious-depressive-like behavior and alterations of neuroplasticity-related genes in adult male mice. Neural Plast. 2016, 6212983(2016).
  27. Kogan, J. H., Frankland, P. W., Silva, A. J. Long-term memory underlying hippocampus-dependent social recognition in mice. Hippocampus. 10 (1), 47-56 (2000).

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Sociaal geheugensociale discriminatievalentieassociatieC57BL 6 muizensociale nieuwheidsociale interactieautisme muismodellensociale cognitie

Gerelateerde artikelen