Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Beoordeling van microgliale fagocytose van myelinepuin in vitro onder herhaalde magnetische stimulatie

1.6K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/67642

⸱

17 juni 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Rehabilitation Medicine, The Affiliated Suzhou Hospital of Nanjing Medical University, 2Rehabilitation Medicine Center, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Children's Rehabilitation, Linyi People's Hospital, 4Department of Endocrinology, People's Hospital of Dongxihu District, 5Department of Rehabilitation, Hengyang Medical School, The First Affiliated Hospital, University of South China

In dit artikel

Samenvatting

Het huidige protocol is opgesteld om het effect van herhaalde magnetische stimulatie op het vermogen van microglia om myelineresten te fagocytoseren te beoordelen. Hiervoor is een in vitro microglia en myeline-puin co-cultuursysteem opgezet.

Samenvatting

Microglia, de aanwezige fagocyten van het centrale zenuwstelsel (CZS), spelen een cruciale rol bij het handhaven van de integriteit en homeostase van het CZS door beschadigde cellen, celresten en myelineresten te verwijderen. De ophoping van myelineresten is betrokken bij een reeks CZS-aandoeningen, waaronder multiple sclerose, de ziekte van Alzheimer, traumatisch hersenletsel en ruggenmergletsel. De aanwezigheid van myelineresten verergert niet alleen neuro-inflammatie, maar belemmert ook het regeneratieve potentieel van myeline. Daarom is het verbeteren van het vermogen van microglia om myelineresten op te ruimen door middel van fagocytose een veelbelovende therapeutische strategie. Magnetische stimulatie is naar voren gekomen als een innovatieve behandelingsmodaliteit voor aandoeningen van het CZS, met groeiend bewijs dat suggereert dat het potentieel heeft om microgliale fagocytose te bevorderen en het herstel van het CZS te ondersteunen. Om de effecten van magnetische stimulatie op de microgliale klaring van myelineresten verder op te helderen, hebben we een in vitro experiment ontworpen met de co-cultuur van microglia- en myelineresten. De co-cultuur werd onderworpen aan repetitieve magnetische stimulatie om de impact ervan op de microgliale fagocytaire activiteit in de context van CZS-pathologie te beoordelen.

Inleiding

Myeline is een stabiele, buisvormige membraanstructuur rond axonen die wordt geproduceerd door oligodendrocyten in het centrale zenuwstelsel (CZS). Deze myelineschede speelt een cruciale rol bij het vergemakkelijken van de snelle en efficiënte voortplanting van actiepotentialen1. Verschillende neurologische aandoeningen, zoals multiple sclerose (MS), beroerte en traumatisch letsel, waaronder ruggenmergletsel (SCI) en traumatisch hersenletsel (TBI), kunnen echter leiden tot het verlies van de integriteit van myeline. Dit resulteert in het ontstaan van myelineresten als gevolg van de verstoring van de myelineschede en directe schade aan myelinestructuren 2,3,4. De ophoping van myelineresten belemmert niet alleen remyelinisatie en functioneel herstel, maar verergert ook neuro-inflammatie 5,6. Daarom is een effectieve opruiming van myelineresten essentieel voor het oplossen van neuro-inflammatie, het bevorderen van axonale regeneratie en het herstellen van de homeostase in het zenuwstelsel na neurologische aandoeningen.

Myeline-resten worden voornamelijk opgeruimd door fagocyten, zoals macrofagen en microglia in het centrale zenuwstelsel (CZS). Microglia, de residente immuuncellen van het CZS, onderzoeken voortdurend hun omgeving op mogelijke bedreigingen en beschermen het CZS door beschadigde myeline en myelineresten te verwijderen. Bovendien speelt microgliale fagocytose een cruciale rol bij het bevorderen van neurogenese door het opruimen van puin 7,8. Toenemend bewijs suggereert dat het versterken van microgliale fagocytose van myelineresten de schadelijke effecten van ontsteking kan verminderen, CZS-schade kan verminderen en axonale regeneratie na zenuwbeschadiging kan bevorderen. 4,9,10.

Magnetische stimulatietherapie, een niet-invasieve neuromodulatietechniek, wordt op grote schaal gebruikt bij de behandeling van verschillende neurologische aandoeningen11. Met name herhaalde transcraniële magnetische stimulatie (rTMS) is veelbelovend gebleken als een therapeutische benadering voor de ziekte van Alzheimer (AD), hersenletsel en beroerte 12,13,14. Een recente studie heeft aangetoond dat rTMS de microgliale fagocytose van amyloïde-bèta (Aβ) en apolipoproteïne E (ApoE) kan versterken, waardoor de pathologische progressie van AD in diermodellen wordt geremd15. Evenzo bleek uit ons recente werk dat herhaalde transspinale magnetische stimulatie (rTSMS) microgliale fagocytose van myelinepuin bevordert na ruggenmergletsel bij ratten16.

Desalniettemin is de impact van herhaalde magnetische stimulatie op microglia voornamelijk onderbouwd door middel van experimentele modellen bij dieren 17,18,19. Het is inderdaad aangetoond dat magnetische stimulatie de neuronale prikkelbaarheid moduleert door de inductie van stromen20. Bijgevolg kan niet worden voorbijgegaan aan het feit dat de interactie tussen neuronen en microglia de werking van microglia kan beïnvloeden. Bijgevolg zijn in vitro experimenten nodig om vast te stellen of de impact van magnetische stimulatie op microglia onafhankelijk is van de verandering in neuronale prikkelbaarheid. Recente studies hebben in experimentele modellen een modulerend effect van herhaalde magnetische stimulatie op microglia vastgesteld. Sommige onderzoeken hebben aangetoond dat herhaalde magnetische stimulatie de polarisatie van microglia's naar M219,21 kan bevorderen. Verder onderzoek naar de microglia-functie moet echter nog worden opgehelderd. Met name Amelie Eichler et al. intervenieerden in vitro in plakjes hersenweefsel met behulp van magnetische stimulatie van 10 Hz en ontdekten dat magnetische stimulatie van 10 Hz in staat was om de afgifte van cytokinen uit microglia te bevorderen om neurale prikkelbaarheid en plasticiteit te beïnvloeden22. Hoewel deze studie het begrip van de effecten van magnetische stimulatie op microglia heeft uitgebreid, is verder onderzoek op cellulair niveau nodig om de mechanismen ervan volledig op te helderen.

Daarom hebben we een protocol opgesteld om na te gaan of magnetische stimulatie de fagocytose van myelinepuin in vitro kan bevorderen. In tegenstelling tot myelineresten na ziekte of weefselbeschadiging, wat een product is van verwonding, is het myelinepuin dat in dit experiment wordt gebruikt de vorm van de myelineschede nadat deze is afgebroken. Bovendien is het concept van myeline-puin een product van myeline-desintegratie. Als de primaire fagocytische cellen van de hersenen spelen microglia een cruciale rol bij het opruimen van beschadigde cellen en myelineresten23, die in verband worden gebracht met ziekten zoals multiple sclerose en de ziekte van Alzheimer24,25. Het is aangetoond dat de ophoping van myelineresten neuro-inflammatie verergert en de regeneratie belemmert26. Het doel van de studie is het onderzoeken van het potentieel van magnetische stimulatie om de microgliale fagocytose van myelineresten te verbeteren, waardoor neuro-inflammatie wordt verminderd en het herstel van het CZS bij neurodegeneratieve en traumatische aandoeningen wordt ondersteund. Samenvattend maakt de studie gebruik van een co-cultuurbenadering, waarbij microglia worden gekweekt met myelinepuin en herhaalde magnetische stimulatie wordt uitgevoerd om het effect van herhaalde magnetische stimulatie op de fagocytische capaciteit van microglia te verifiëren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Hier werden drie SD-vrouwelijke ratten (2-3 weken oud) gebruikt om myelineresten te extraheren door middel van centrifugatie met sucrosegradiënt. Alle ratten zijn gekocht bij de Animal Core Facility van de Nanjing Medical University, Nanjing, China (Dierlicentie: SYXK (Su) 2021-0023). Alle ratten werden grootgebracht onder controleomstandigheden (temperatuur 22 ± 2 °C, een licht/donker-periode van 12 uur/12 uur, 55% ± 5% relatieve vochtigheid). Alle dierproeven werden goedgekeurd door het Nanjing Medical University Animal Care and Use Committee (nr. IACUC-1903031 en nr. IACUC-2005001) en waren gericht op het minimaliseren van lijden en het aantal gebruikte dieren.

1. Myeline-isolatie

OPMERKING: Myeline-resten werden geëxtraheerd zoals eerder beschreven en er werden enkele wijzigingen aangebracht27. Zorg ervoor dat alle stappen zijn uitgevoerd bij 4 °C en onder steriele omstandigheden.

  1. Isolatie van ruwe myeline
    1. Extractie van hersenweefsel
      1. Beoordeel na anesthesie met pentobarbital (50 mg/kg, intraperitoneale injectie) de diepte van de anesthesie aan de hand van de teenknijpreactie. Onthoofd de vrouwelijke ratten. Ontleed het hele hoofd op ijs en snijd de schedel in tweeën met een schaar om de hersenen volledig bloot te leggen en de verwijdering van de volledige hersenen te vergemakkelijken.
      2. Snijd de vliezen, het cerebellum en de hippocampus op een nauwgezette en aseptische manier weg met een schaar en een tang om besmetting van het sucrosemengsel van hersenweefsel te voorkomen. Reinig de hersenen 3x met PBS om eventueel achtergebleven bloed of weefsel te verwijderen.
      3. Breng de gereinigde hersenen over naar 10 ml 0,32 M steriele sucroseoplossing en knip het hersenweefsel met de microchirurgische schaar in 5 mm3 stukken om een sucrosemengsel van hersenweefsel te verkrijgen.
    2. Homogenisatie van hersenweefsel
      1. Breng het sucrosemengsel van hersenweefsel over in een steriele homogenisator van 50 ml en voeg 30 ml steriele sacharoseoplossing van 0,32 ml toe. Gebruik een glashomogenisator van 50 ml om gedurende 2 minuten te homogeniseren om een glad homogenaat van hersenweefsel te verkrijgen.
      2. Verdun het hersenweefselhomogenaat tot 90 ml met 0,32 M steriele sucroseoplossing, meng en doseer langzaam in het bovenste deel van zes 38,5 ml steriele dunwandige polypropyleen ultracentrifugebuisjes die 20 ml 0,83 M steriele sucroseoplossing bevatten. Voeg 15 ml homogenaat toe aan elke centrifugebuis en egaliseer vervolgens met 0,32 M steriele sucroseoplossing.
    3. Verzameling van ruwe myeline-resten
      1. Koel een ultracentrifugerotor voor bij 4 °C en centrifugeer het monster gedurende 45 minuten bij 75.000 x g . Verzamel na het centrifugatieproces de myelineresten van het grensvlak tussen de twee sucrosedichtheden met behulp van een steriele pasteurbuis.
        NOTITIE: Het is absoluut noodzakelijk om tijdens het verzamelproces voorzichtig te zijn en te voorkomen dat per ongeluk andere componenten van het besmette monster worden verzameld.
  2. Eerste isotone scheiding en zuivering
    1. Breng de verzamelde myeline-afvaloplossing over in een centrifugebuis van 50 ml en stel het volume in op 35 ml met voorgekoelde steriele fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) buffer. Breng de oplossing over in een nieuwe steriele homogenisator van 50 ml en homogeniseer gedurende 2 minuten om een homogenaat te verkrijgen.
    2. Verdeel het myelineresten homogenaat gelijkmatig in zes steriele dunwandige polypropyleen ultracentrifugebuisjes van 38,5 ml en voeg steriele PBS-buffer toe. Centrifugeer de buisjes gedurende 45 minuten bij 4 °C bij 75.000 x g .
  3. Tweede isotone scheiding en zuivering
    1. Gooi na het centrifugeren het bovenstaande weg en suspendeer de vaste witte korrel opnieuw in 10 ml voorgekoelde steriele PBS-buffer om een myeline-puespensie te verkrijgen. Verdeel de suspensie gelijkmatig over twee steriele dunwandige polypropyleen ultracentrifugebuisjes van 38,5 ml, waarbij het volume in evenwicht wordt gehouden door de toevoeging van steriele PBS-buffer.
    2. Centrifugeer de monsters gedurende 45 minuten bij 4 °C bij 75.000 x g .
  4. Gezuiverde myeline collectie
    1. Gooi na het centrifugeren het bovenstaande weg en suspendeer de vaste witte korrel opnieuw in 6 ml steriele PBS-buffer. Verdeel de myeline-suspensie in zes centrifugebuisjes van 1,5 ml en centrifugeer vervolgens gedurende 10 minuten bij 4 °C en 12.000 x g .
    2. Gooi na het centrifugeren het bovenstaande weg en suspendeer de vaste witte korrel opnieuw in 100 μl voorgekoelde steriele fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS).
  5. Kwantificering van myeline-puin
    1. Neem 3 μL van de myeline-suspensie voor het kwantificeren van het eiwitgehalte met behulp van een BCA-eiwitkwantificeringskit. Bewaar de resterende myeline-puinsuspensie bij -80 °C.

2. Fluorescerende etikettering van myelineresten

  1. Incubatie van carboxyfluoresceïnediacetaat N-succinimidylester
    1. Ontdooi het benodigde myelineresten bij 4 °C of ijswater en centrifugeer bij 12.000 x g gedurende 10 minuten bij 4 °C. Gooi het bovenstaande weg en suspendeer het myelineresten in 200 μl carboxyfluoresceïnediacetaat N-succinimidylesteroplossing (CFSE; 50 μM).
    2. Incubeer 30 minuten bij kamertemperatuur in het donker. Na de incubatietijd centrifugeren bij 12.000 x g gedurende 10 minuten bij 4 °C.
    3. Gooi het bovenstaande weg en spoel de monsters 3x met 500 μL steriele PBS-buffer. Na het wasproces suspendeert u het myelineresten opnieuw in 100 μL voorgekoelde steriele PBS-buffer om een suspensie van fluorescerend gelabeld myelineresten te verkrijgen, die bij -80 °C kunnen worden bewaard.

3. Microglia-cultuur

  1. Kweek BV-2-cellen in bevochtigd 5% CO2 bij 37 °C in Dulbecco's gemodificeerde Eagle's medium (DMEM) aangevuld met 10% (v/v) FBS, penicilline (100 E/ml) en streptomycine (100 E/ml). Zaai bijna 50% Bv-2-cellen in de plaat met 12 putjes en de plaat met 24 putjes voor verder onderzoek.

4. In vitro herhaalde magnetische stimulatie

  1. Voer de in vitro herhaalde magnetische stimulatie-interventie uit met de volgende instelling: behandelingsfrequentie van 20 Hz, behandelingsintensiteit van 1% van de maximale outputintensiteit (d.w.z. 0,035 Tesla), stimulatietijd van 5 s, rustperiode van 20 s. Dien 600 pulsen toe met een enkele behandeltijd van 2,5 min.
  2. Plaats tijdens magnetische stimulatie het midden van de spoel in lijn met het midden van de kweekplaat en zorg ervoor dat de spoel goed op de bodem van de kweekplaat past.
    1. Bepaal vooraf de parameters van magnetische stimulatie en bepaal de richting van de magnetische stimulatiespoel om loodrecht op de grond te staan en in opwaartse richting te zijn gericht. Steriliseer de magnetische stimulatiespoel met alcohol om besmetting door cellen te voorkomen.
    2. Hierna haalt u de celkweekplaat uit de broedmachine en plaatst deze boven de magnetische stimulatiespoel voor magnetische stimulatie. Steriliseer de plaat door er alcohol op te spuiten en plaats hem terug in de broedmachine. Houd de plaat tijdens het hele proces afgedekt.

5. Testen van microgliale fagocytose van myelineresten

  1. Herhaalde magnetische stimulatiebehandeling voor LPS+rMS-groep
    1. Gebruik CFSE (50 μM) om myelineresten te labelen om fagocytose te beoordelen. Plaat 1 x 104 BV-2 cellen in platen met 24 putjes 's nachts. Vervang het medium in een serumvrij medium en behandel de cellen gedurende 12 uur met lipopolysaccharide (LPS; 1 μg/ml). Zuig het oude medium voorzichtig op met een ppipette en voeg vervolgens onmiddellijk het nieuwe serumvrije medium toe met behulp van de pipet.
    2. Na een periode van 12 uur LPS-interventie voegt u het myelineresten (100 μg/ml) toe aan het medium voor co-cultuur onder donkere omstandigheden. Onderwerp de cellen aan herhaalde magnetische stimulatie-interventies zoals beschreven in stap 4.2.
  2. Immunofluorescentie en beeldvorming
    1. Was de niet-geadsorbeerde myelineresten voorzichtig met PBS en fixeer de cellen met 4% PFA gedurende 15 minuten. Blokkeer de cellen met PBS met 10% ezelserumalbumine en 0,3% Triton X-100 gedurende 1 uur bij kamertemperatuur, was vervolgens met PBS en incubeer met primair antilichaam (IBA-1, 1:200) bij 4 °C gedurende de nacht.
    2. Incubeer de cellen met secundaire antilichamen (1: 300, muis) gedurende 2 uur bij kamertemperatuur. Maak foto's met een confocale microscoop op 40x en 20x.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

In deze studie hebben we BV-2 microgliacellen in eerste instantie in vitro gevoed door van de hersenen afgeleid myelinepuin te extraheren en herhaalde magnetische stimulatie te gebruiken om hun fagocytische capaciteit te vergroten. Vervolgens werden BV-2 microgliacellen gekweekt en onderworpen aan LPS-interventie voorafgaand aan magnetische stimulatie, waardoor de in vivo toestand van microglia werd nagebootst onder rigoureuze neurologische validatie. Vervolgens werd rM...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Repetitieve magnetische stimulatie (rMS) is een niet-invasieve neurostimulatietechniek die op grote schaal wordt toegepast bij de behandeling van verschillende neurologische en psychiatrische stoornissen, waaronder cognitieve stoornissen, de ziekte van Alzheimer (AD), beroerte, hersenletsel en ruggenmergletsel (SCI). rMS maakt gebruik van een gepulseerd magnetisch veld om het membraanpotentiaal van neuronen te moduleren, waardoor de neurale prikkelbaarheid in het zenuwstelsel selectief w...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door subsidies van de National Natural Science Foundation of China (82302877, 82172541), de Natural Science Foundation of Hunan Province (2023JJ30549).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Antifade Mounting Medium with DAPIBeyotime, ChinaP0131
BCA KitThermoFisher Scientific, America23227
Bv-2 cellATCCCBP60922
Cell culture 12-well platesBiofil, China
Cell culture 24-well platesBiofil, China
Confocal Laser Scanning MicroscopeZeiss, Germany800
Constant temperature incubatorThermoFisher Scientific, America
CFSEMedChemExpress, AmericaHY-158820
DMEM-Culture mediumKeyGen, ChinaKGL1202-500
FBSGibco, America16250078
Iba1Abcam, Americaab48004
Magnetic stimulation apparatusYiruide, ChinaCCY-IA
Magnetic stimulation coilYiruide, China
ParaformaldehydeBioSharp, China
PBSKeyGen, ChinaKGL2210-500
Penicillin-StreptomycinGibco, America15140-122
SucroseMedChemExpress, AmericaHY-B1779
TrypsinKeyGen, ChinaKGL2107-100
UltracentrifugeBeckman, AmericaL-100XP

Referenties

  1. Osso, L. A., Hughes, E. G. Dynamics of mature myelin. Nat Neurosci. 27 (8), 1449-1461 (2024).
  2. Gao, R., et al. Myelin debris phagocytosis in demyelinating disease. Glia. 72 (11), 1934-1954 (2024).
  3. Kopper, T. J., Gensel, J. C. Myelin as an inflammatory mediator: Myelin interactions with complement, macrophages, and microglia in spinal cord injury. J Neurosci Res. 96 (6), 969-977 (2018).
  4. Yu, F., et al. Phagocytic microglia and macrophages in brain injury and repair. CNS Neurosci Ther. 28 (9), 1279-1293 (2022).
  5. Filbin, M. T. Myelin-associated inhibitors of axonal regeneration in the adult mammalian CNS. Nat Rev Neurosci. 4 (9), 703-713 (2003).
  6. Sen, M. K., Mahns, D. A., Coorssen, J. R., Shortland, P. J. The roles of microglia and astrocytes in phagocytosis and myelination: Insights from the cuprizone model of multiple sclerosis. Glia. 70 (7), 1215-1250 (2022).
  7. Jia, J., et al. The role of microglial phagocytosis in ischemic stroke. Front Immunol. 12, 790201(2021).
  8. Kettenmann, H., Hanisch, U. K., Noda, M., Verkhratsky, A. Physiology of microglia. Physiol Rev. 91 (2), 461-553 (2011).
  9. Shen, S., et al. Neutrophil nanovesicle protects against experimental autoimmune encephalomyelitis through enhancing myelin clearance by microglia. ACS. 16 (11), 18886-18897 (2022).
  10. Cignarella, F., et al. TREM2 activation on microglia promotes myelin debris clearance and remyelination in a model of multiple sclerosis. Acta Neuropathol. 140 (4), 513-534 (2020).
  11. Dufor, T., Lohof, A. M., Sherrard, R. M. Magnetic stimulation as a therapeutic approach for brain modulation and repair: Underlying molecular and cellular mechanisms. Int J Mol Sci. 24 (22), 16456(2023).
  12. Martin, D. M., McClintock, S. M., Forster, J. J., Lo, T. Y., Loo, C. K. Cognitive enhancing effects of rTMS administered to the prefrontal cortex in patients with depression: A systematic review and meta-analysis of individual task effects. Depress Anxiety. 34 (11), 1029-1039 (2017).
  13. Kamo, T., et al. Repetitive peripheral magnetic stimulation for impairment and disability in people after stroke. Cochrane Database Syst Rev. 9 (9), CD011968(2022).
  14. Wang, Y., Wang, L., Ni, X., Jiang, M., Zhao, L. Efficacy of repetitive transcranial magnetic stimulation with different application parameters for post-stroke cognitive impairment: A systematic review. Fron Neurosci. 18, 1309736(2024).
  15. Chu, F., et al. Transcranial magneto-acoustic stimulation attenuates synaptic plasticity impairment through the activation of Piezo1 in alzheimer's disease mouse model. Research. 6, 0130(2023).
  16. Zhai, C., et al. Repeated trans-spinal magnetic stimulation promotes microglial phagocytosis of myelin debris after spinal cord injury through LRP-1. Exp Neurol. 379, 114844(2024).
  17. Qin, T., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation ameliorates cognitive deficits in mice with radiation-induced brain injury by attenuating microglial pyroptosis and promoting neurogenesis via BDNF pathway. Cell Comm Signal. 22 (1), 216(2024).
  18. Qian, F., et al. Microglia and astrocytes responses contribute to alleviating inflammatory damage by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats with traumatic brain injury. Neurochem Res. 49 (9), 2636-2651 (2024).
  19. Luo, J., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation improves neurological function and promotes the anti-inflammatory polarization of microglia in ischemic rats. Front Cell Neurosci. 16, 878345(2022).
  20. Jannati, A., Oberman, L. M., Rotenberg, A., Pascual-Leone, A. Assessing the mechanisms of brain plasticity by transcranial magnetic stimulation. Neuropsychopharmacol. 48 (1), 191-208 (2023).
  21. Luo, L., et al. Intermittent theta-burst stimulation improves motor function by inhibiting neuronal pyroptosis and regulating microglial polarization via TLR4/NFκB/NLRP3 signaling pathway in cerebral ischemic mice. J Neuroinflammat. 19 (1), 141(2022).
  22. Eichler, A., et al. Microglial cytokines mediate plasticity induced by 10 Hz repetitive magnetic stimulation. J Neurosci. 43 (17), 3042-3060 (2023).
  23. Kent, S. A., Miron, V. E. Microglia regulation of central nervous system myelin health and regeneration. Nat Rev Immunol. 24 (1), 49-63 (2024).
  24. Yong, V. W. Microglia in multiple sclerosis: Protectors turn destroyers. Neuron. 110 (21), 3534-3548 (2022).
  25. Sarlus, H., Heneka, M. T. Microglia in Alzheimer's disease. J Clin Invest. 127 (9), 3240-3249 (2017).
  26. Cantuti-Castelvetri, L., et al. Defective cholesterol clearance limits remyelination in the aged central nervous system. Science. 359 (6376), 684-688 (2018).
  27. Norton, W. T., Poduslo, S. E. Myelination in rat brain: Method of myelin isolation. J Neurochem. 21 (4), 749-757 (1973).
  28. Gordon, S. Phagocytosis: An immunobiologic process. Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

In vitro co-cultuurcentraal zenuwstelselBV-2 microgliaconfocale microscopielipopolysaccharide-behandelingisolatie van myelinedisbrisneuroinflammatie
Beoordeling van microgliale fagocytose van myelinepuin in vitro onder herhaalde magnetische stimulatie
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.