Huidlaesies zijn veel voorkomende en belangrijke kenmerken bij veel reumatische aandoeningen, en biopsie met pathologische analyse speelt een cruciale rol bij de diagnose. Dit artikel geeft een gedetailleerd overzicht van de gestandaardiseerde huidbiopsieprocedure en, met discoïde lupus erythematosus als voorbeeld, belicht de essentiële rol van dermatopathologie bij het diagnosticeren van reumatische aandoeningen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Huidbiopsie voor het diagnosticeren van discoïde lupus erythematosus
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Discoïde lupus erythematodes (DLE) is de meest voorkomende variant van cutane lupus erythematodes (CLE). Het tast meestal de hoofdhuid, het gezicht, de oorschelp en de lippen aan. Wanneer laesies zich buiten deze gebieden uitstrekken om de romp en ledematen te betrekken, wordt de aandoening gedissemineerde DLE (DDLE) genoemd. De pathognomonische huidlaesies presenteren zich als goed afgebakende schijfvormige erythemateuze plaques met stevig hechtende schubben of korsten, centrale atrofie, karakteristieke littekenvorming en pigmentveranderingen, mogelijk leidend tot onomkeerbare littekenalopecia. Histopathologisch en immunopathologisch onderzoek van de huidlaesies is instrumenteel bij het diagnosticeren van DLE. Histologisch wordt DLE gekenmerkt door hyperkeratose, folliculaire verstopping van de wervelkolom, focale epidermale verdunning, vacuolaire verandering van de dermo-epidermale interface, verdikking van het epidermale basaalmembraan, en een oppervlakkig en diep perivasculair en periadnexaal lymfocytisch infiltraat, vaak in combinatie met interstitiële mucine. Directe immunofluorescentie (DIF) kan afzettingen van immunoglobulinen en complement aan de dermo-epidermale overgang (DEJ) onthullen. Het volgende artikel schetst de protocollen voor de beoordeling van DLE-laesies, huidbiopsieprocedures, histopathologische en immunopathologische analyse en behandelingsopties, met als doel een uitgebreid, gestandaardiseerd en repliceerbaar diagnostisch en therapeutisch proces te bieden om klinische artsen in de praktijk te helpen.
Inleiding
Huidlaesies zijn veel voorkomende en cruciale manifestaties, die vaak dienen als vroege indicatoren bij veel reumatische aandoeningen. Deze laesies spelen een essentiële rol bij de diagnose en monitoring van de ziekte en worden vaak opgenomen in de classificatiecriteria voor aandoeningen zoals systemische lupus erythematosus, dermatomyositis, sclerodermie, de ziekte van Still bij volwassenen en de ziekte van Behçet1. Een grondig onderzoek van de huid kan helpen bij de vroege diagnose, effectieve behandeling en monitoring van deze aandoeningen, waardoor ernstige complicaties worden voorkomen.
Huidbiopsie is een van de meest uitgevoerde diagnostische procedures bij reumatische aandoeningen met cutane manifestaties. Als een eenvoudige en kosteneffectieve diagnostische modaliteit maakt huidbiopsie de visualisatie mogelijk van morfologische kenmerken die niet zichtbaar zijn voor het blote oog. Histopathologie biedt een gedetailleerd onderzoek van een klein deel van de laesie, loodrecht op het huidoppervlak bekeken. Dit proces is cruciaal voor zowel clinici als pathologen bij het diagnosticeren van bindweefselziekten (CTD).
De in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde techniek is algemeen ingeburgerd en biedt verschillende voordelen, zoals de mogelijkheid om monsters op lange termijn te archiveren en het potentieel voor immunohistochemische verwerking. Hematoxyline en eosine (HE) kleuring is de meest gebruikte kleuring voor histopathologie vanwege het vermogen om zowel normale als abnormale cellulaire en weefselcomponenten te markeren. De hematoxylinecomponent bindt zich aan zure structuren, zoals DNA en RNA, waardoor ze blauw kleuren. In de huid kleurt dit celkernen, ruw endoplasmatisch reticulum en ribosomen2. Eosine kleurt eosinofiele structuren, meestal samengesteld uit intracellulair of extracellulair eiwit (bijv. cytoplasma en de meeste bindweefselvezels), in verschillende tinten rood. Als gevolg hiervan worden alle relevante weefselstructuren in het monster effectief gekleurd3.
Immunofluorescentie (IF) is een cruciaal diagnostisch hulpmiddel bij het evalueren van patiënten met vermoedelijke auto-immuun-, vasculopathische en cutane vesicobulleuze ziekten, omdat het helpt bij het identificeren van antigeengebonden antilichamen in weefsels of lichaamsvloeistoffen. Er zijn twee hoofdtypen IF-testen: directe IF (DIF) en indirecte IF (IIF). De meer algemeen gebruikte DIF-test maakt gebruik van fluorchroom-gelabelde antilichamen om de afzetting van immunoreactanten in de huid van de patiënt te detecteren. Er is gebruik gemaakt van een panel van antilichamen gericht tegen immunoglobuline (Ig) G, IgA, IgM en complement C34.
Discoïde lupus erythematodes (DLE) is de meest voorkomende vorm van cutane lupus erythematodes (CLE), die meestal gebieden zoals de hoofdhuid, het gezicht, de oorschelp en de lippen aantast. Wanneer laesies zich buiten deze regio's uitstrekken en de romp en ledematen betrekken, wordt de aandoening gedissemineerde DLE (DDLE)5 genoemd. Karakteristieke huidlaesies verschijnen als goed afgebakende schijfvormige erythemateuze plaques, vaak vergezeld van stevig hechtende schubben of korsten, centrale atrofie, karakteristieke littekens en pigmentveranderingen, die kunnen resulteren in onomkeerbare alopecia met littekens als ze op de hoofdhuid voorkomen. Hoewel veel patiënten asymptomatisch blijven, kunnen sommigen milde jeuk ervaren 6,7. DLE-laesies worden doorgaans gekenmerkt door epidermale atrofie, folliculaire verstoping, verdikking van het basaalmembraan en lymfatische infiltratie. DIF toont de afzetting van immunoglobuline en complementen langs de dermo-epidermale overgang, aanwezig in zowel laesie als niet-laesiehuid, bekend als de lupusbandtest 8,9. De diagnose van DLE is voornamelijk gebaseerd op klinische presentatie, samen met histopathologische en immunopathologische bevindingen. Wanneer histopathologische en immunopathologische informatie nodig is, wordt een huidbiopsie essentieel.
De keuze van het type biopsie en de locatie heeft een aanzienlijke invloed op de histologische beoordeling. Inzicht in de juiste timing, locatie en techniek van biopsie is cruciaal voor het verkrijgen van nauwkeurige pathologische resultaten. Er moet rekening worden gehouden met verschillende factoren om een nauwkeurige diagnose te garanderen, waarbij het belang wordt benadrukt van het aanpakken van mogelijke uitdagingen in het biopsieproces om zowel de kwaliteit van de biopsie als de nauwkeurigheid van de diagnose te verbeteren. Dit artikel geeft een gedetailleerd overzicht van de gestandaardiseerde huidbiopsieprocedure, met DLE als voorbeeld, en belicht de belangrijkste overwegingen om een nauwkeurige en effectieve diagnose te garanderen.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Dit protocol werd goedgekeurd door de ethische commissie van het Shanghai Dermatology Hospital en er werd schriftelijke geïnformeerde toestemming verkregen van de deelnemers voor de publicatie van klinische beelden en gegevens. Een huidbiopsie verwijst meestal naar de traditionele excisie van huidlaesies met behulp van een fusiforme techniek met een chirurgisch scalpel. Met excisiebiopsie als voorbeeld geeft het volgende protocol een gedetailleerde beschrijving van de chirurgische ingreep voor het uitvoeren van een huidbiopsie (Figuur 1).
Deelnemers kwamen in aanmerking voor opname als ze zich presenteerden met verschillende huidlaesies waarvoor een biopsie nodig was voor een definitieve diagnose, die een normale stollingsfunctie vertoonden en geen tekenen van acute infectie of etterende laesies vertoonden op de beoogde biopsieplaats. Uitsluitingscriteria waren onder meer een bekende neiging tot keloïde of hypertrofische littekenvorming, langdurig gebruik van immunosuppressiva of andere aandoeningen die de wondgenezing zouden kunnen belemmeren. Zwangere vrouwen of vrouwen die borstvoeding geven, werden uitgesloten vanwege mogelijke risico's. Patiënten die niet konden meewerken vanwege een psychische aandoening of andere factoren werden ook uitgesloten van het onderzoek. Alle deelnemers gaven schriftelijke geïnformeerde toestemming en stemden vrijwillig in met het ondergaan van de huidbiopsieprocedure. De details van de gebruikte reagentia en de gebruikte apparatuur staan vermeld in de materiaaltabel.
1. Voorbereiding van de patiënt
- Controleer de identiteit van de patiënt, inclusief naam, medisch dossiernummer en de biopsieplaats.
- Voer een grondige beoordeling uit van de medische geschiedenis van de patiënt, inclusief eventuele bloedingsneigingen, hypertensie, diabetes, hartaandoeningen en het huidige gebruik van anticoagulantia of plaatjesaggregatieremmers.
- Voer preoperatieve evaluaties uit, waaronder routinematige bloedonderzoeken, beoordelingen van de stollingsfunctie en screening op indicatoren van infectieziekten10,11.
- Leg het doel, de methode, de mogelijke complicaties en de voorzorgsmaatregelen van de huidbiopsie duidelijk uit aan zowel de patiënt als zijn familie.
- Zorg ervoor dat de patiënt het formulier voor geïnformeerde toestemming heeft ondertekend.
2. Voorbereiding van apparatuur en materialen
- Bereid een steriele biopsiekit voor met alle benodigde instrumenten, waaronder een scalpel, pincet, schaar en ander nodig gereedschap. Zorg ervoor dat alle instrumenten goed zijn gesteriliseerd.
- Bereid een antiseptische oplossing (bijv. alcohol, jodofoor of chloorhexidine), lokaal anestheticum (bijv. lidocaïne), steriele injectiespuit, steriele naalden, steriele hechtingen, steriele handschoenen, steriel gaasje en verbandmateriaal. Plaats alle benodigde instrumenten en medicijnen binnen handbereik om de efficiëntie te maximaliseren.
3. Voorbereiding van de biopsieplaats
- Selecteer de biopsieplaats zorgvuldig, vooral als er meerdere laesies aanwezig zijn. Kies een niet-behandelde, niet-getraumatiseerde, volledig ontwikkelde laesie die duidelijke karakteristieke kenmerken vertoont. Zorg ervoor dat de biopsie diep genoeg is om de volledige dikte van de laesie vast te leggen, inclusief de epidermis, dermis (vooral de diepe dermis) en een klein deel van aangrenzend normaal weefsel om als controle te dienen.
- Markeer het geplande excisiepad voorafgaand aan de procedure om precisie te garanderen. Scheer indien nodig haar rond de operatieplaats.
- Maak foto's van zowel de laesies als de biopsieplaats voor toekomstig gebruik bij medische besluitvorming en behandelplanning.
- Plaats de patiënt op de juiste manier en zorg ervoor dat de biopsieplaats goed wordt blootgesteld en evenwijdig aan de vloer is uitgelijnd.
4. Biopsie procedure
- Desinfecteer het biopsiegebied
- Desinfecteer het biopsiegebied grondig met een geschikte antiseptische oplossing. Bedek een diameter van minimaal 15 cm. Reinig in een cirkelvormige beweging, beginnend bij de plaats van de chirurgische incisie en naar buiten toe. Laat het antisepticum volledig drogen.
OPMERKING: Gebruik een niet-jodium antisepticum voor patiënten met bekende allergieën.
- Desinfecteer het biopsiegebied grondig met een geschikte antiseptische oplossing. Bedek een diameter van minimaal 15 cm. Reinig in een cirkelvormige beweging, beginnend bij de plaats van de chirurgische incisie en naar buiten toe. Laat het antisepticum volledig drogen.
- Breng een steriel chirurgisch laken aan
- Breng na desinfectie een steriel chirurgisch laken aan om het operatieveld te isoleren.
- Lokale anesthesie toedienen
- Gebruik een 1%-2% lidocaïne-oplossing voor lokale anesthesie. Injecteer subcutaan op de biopsieplaats met een fijne naald (volgens institutioneel goedgekeurde protocollen). Wacht 2-3 minuten voor het volledige effect. Palpeer de plaats voorzichtig om de afwezigheid van pijn te bevestigen.
OPMERKING: Overweeg voor kinderen of angstige patiënten een plaatselijke verdoving naast of in plaats van injecteerbare verdoving.
- Gebruik een 1%-2% lidocaïne-oplossing voor lokale anesthesie. Injecteer subcutaan op de biopsieplaats met een fijne naald (volgens institutioneel goedgekeurde protocollen). Wacht 2-3 minuten voor het volledige effect. Palpeer de plaats voorzichtig om de afwezigheid van pijn te bevestigen.
- Voer de incisie en weefselexcisie uit
- Gebruik een steriel scalpel om een verticale, shuttlevormige incisie te maken die zich uitstrekt tot aan de diepe dermis of het onderhuidse vet. Gebruik een biopsietang om het weefsel voorzichtig te stabiliseren of op te tillen.
- Snijd een representatief deel van de laesie weg, inclusief een kleine marge van het omringende normale weefsel, voor uitgebreide histopathologische evaluatie. Streef naar een weefselgrootte van 3-5 mm.
- Oefen constante druk uit met steriel gaasje gedurende 2-3 minuten of totdat het bloeden volledig stopt.
- Gebruik indien nodig resorbeerbare hechtingen of elektrocauterisatie voor grotere bloedvaten12.
OPMERKING: Bereid hemostatische hulpmiddelen van tevoren voor voor patiënten met een hoog risico.
- Hecht de excisieplaats om genezing te bevorderen en het infectierisico te verminderen. Gebruik voor gezichts- of nekwonden 6-0 monofilament niet-resorbeerbare hechtingen. Gebruik voor wonden aan de romp of ledematen 5-0 niet-resorbeerbare hechtingen. Steek de naald verticaal in en houd een afstand tussen het ingangspunt en de wondrand aan die gelijk is aan de wonddiepte.
- Plaats een steriel verband over de biopsieplaats en zet het vast met plakband.
- Adviseer de patiënt om de wond 24-48 uur droog te houden. Geef gedetailleerde zorginstructies na de procedure, inclusief richtlijnen voor verbandwisselingen en activiteitsbeperkingen.
OPMERKING: Plan vervolgafspraken voor patiënten met een hoog risico om de wondgenezing te controleren.
5. Behandeling van monsters
- Verdeel het uitgesneden weefsel in twee porties met behulp van een steriel scalpel of een schaar voordat u het monster in het juiste transportmedium plaatst. Label elke container duidelijk met de identificatie-informatie van de patiënt en de biopsieplaats. Vul het aanvraagformulier voor pathologie volledig in.
- Plaats de helft van het weefsel in een container met een fixeermiddel (bijv. 10% formalineoplossing) en stuur het naar het pathologielaboratorium voor hematoxyline- en eosine (HE)-kleuring.
- Transporteer de andere helft op gaas gedrenkt in ijskoude fysiologische zoutoplossing voor onmiddellijke verwerking of plaats het in Michel's medium voor vertraagde verwerking. Bereid het monster zo snel mogelijk voor op directe immunofluorescentie (DIF)analyse 13 .
OPMERKING: Van deze opties is snel invriezen de meest gebruikte methode. Bewaar huidbiopsiemonsters niet langer dan 24 uur in met zoutoplossing doordrenkt gaas of langer dan een maand in Michel's medium bij 4-8 °C14.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Histologisch wordt DLE gekenmerkt door hyperkeratose, folliculaire verstoping, afvlakking van de epidermale richels, focale epidermale verdunning, vacuolaire verandering van de dermo-epidermale interface, verdikking van het epidermale basaalmembraan en een oppervlakkig en diep perivasculair en periadnexaal lymfocytisch infiltraat, vaak in combinatie met interstitiële mucine 5,15 (Figuur 2). DIF kan a...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Huidbiopsie is essentieel voor het bevestigen van diagnoses en het onderscheiden van verschillende aandoeningen, omdat het het onderzoek mogelijk maakt van histologische kenmerken die cruciaal diagnostisch bewijs leveren voor vroege opsporing en behandeling van verschillende aandoeningen. Een nauwkeurige diagnose stelt artsen in staat om effectieve behandelplannen op te stellen, waardoor ongepaste therapieën worden voorkomen die het gevolg kunnen zijn van een verkeerde diagnose. Vanwege ...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Er zijn geen belangenconflicten om bekend te maken.
Dankbetuigingen
We danken de volgende personen hartelijk voor hun hulp en bijdragen aan het videoproductieproces: Lili Ma, Ke Xue, Jiaping Qi en Ruilian Lin van de afdeling Reumatologie, Shanghai Skin Disease Hospital, Tongji University School of Medicine.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Injectiespuit 1 mL | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd | www.misawa-medical.co.jp/products.html | 1 mL |
| Neutraal formaline fixatief 10% | Beijing Solaibao Technology Co., Ltd | G2163 | 10% |
| Fysiologische zoutoplossing 10 mL | China Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | www.chinaotsuka.com.cn/class/1 | 10 mL |
| Primacaine adrenaline (Primacaine) | French Bi Lan Company | CIP: 3400956469710 | 1,7 mL: 68 mg Articaine Hydrochloride met 17 g Epinephrine Tartrate (als epinephrine) |
| Steriele handschoenen | Yingke Medical Technology Co., Ltd | www.made-in-china.com/showroom/b7976b8c634a372c/ | |
| Chirurgisch mes | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd | www.sh-jinhuan.com | |
| Chirurgische lakens en gaasjes | Genecome Medical Technology Co., Ltd | www.made-in-china.com/manufacturers/surgical-drapes.html | |
| Chirurgische instrumenten (Mesgreep, Pincetten, Schaartjes) | Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Surgical Instrument Factory | www.smicc.com/en/index.aspx | |
| Chirurgische naalden en hechtdraad | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd | www.sh-jinhuan.com | 1/2 radian, 5×12, 19 mm, 4-0 hechtdraad, |
| Topical jodofoor 1% | Qingdao Hainuo Biological Engineering Co.,Ltd | www.shopshipshake.com/product-detail/haishi-hainuo-iodophor-disinfection-solution-656601234155 | 1% |
Referenties
- Ashrafzadeh, S., Fedeles, F. What the rheumatologist needs to know about skin biopsy. Best Pract Res Clin Rheumatol. 37 (1), 101838(2023).
- Chan, J. K. C. The wonderful colors of the hematoxylin-eosin stain in diagnostic surgical pathology. Int J Surg Pathol. 22 (1), 12-32 (2014).
- Kleczek, P., et al. A novel method for tissue segmentation in high-resolution H&E-stained histopathological whole-slide images. Comput Med Imaging Graph. 79, 101686(2020).
- Reimann, J. D. R., et al. Assessment of clinical and laboratory use of the cutaneous direct immunofluorescence assay. JAMA Dermatol. 157 (11), 1343-1348 (2021).
- Worm, M., et al. S2k guideline: Diagnosis and management of cutaneous lupus erythematosus-Part 1: Classification, diagnosis, prevention, activity scores. J Dtsch Dermatol Ges. 19 (8), 1236-1247 (2021).
- Walling, H. W., Sontheimer, R. D. Cutaneous lupus erythematosus: Issues in diagnosis and treatment. Am J Clin Dermatol. 10 (6), 365-381 (2009).
- Eastham, A. B., Vleugels, R. A. Cutaneous lupus erythematosus. JAMA Dermatol. 150 (3), 344(2014).
- Ali, T., et al. Prevalence and clinical assessment of skin lesions in systemic lupus erythematosus. Cureus. 16 (12), e76404(2024).
- Monroe, E. W. Lupus band test. Arch Dermatol. 113 (6), 830-834 (1977).
- Ah-Weng, A., et al. Preoperative monitoring of warfarin in cutaneous surgery. Br J Dermatol. 149 (2), 386-389 (2003).
- Grayson, W. The HIV-positive skin biopsy. J Clin Pathol. 61 (7), 802-817 (2008).
- Dicker, T. Skin procedures in general practice. Aust J Gen Pract. 53 (8), 529-532 (2024).
- Greenwood, J. D., et al. Skin biopsy techniques. Prim Care. 49 (1), 1-22 (2022).
- Chhabra, S., et al. Immunofluorescence in dermatology. Indian J Dermatol Venereol Leprol. 78 (6), 677-691 (2012).
- Kuhn, A., et al. Lupus erythematosus revisited. Semin Immunopathol. 38 (1), 97-112 (2016).
- Weigand, D. A. Lupus band test: Anatomic regional variations in discoid lupus erythematosus. J Am Acad Dermatol. 14 (3), 426-428 (1986).
- al-Suwaid, A. R., et al. Cutaneous lupus erythematosus: Comparison of direct immunofluorescence findings with histopathology. Int J Dermatol. 34 (7), 480-482 (1995).
- Wark, K. J., et al. How to perform a skin biopsy. Med J Aust. 212 (4), 156-158.e1 (2020).
- Lallas, A., et al. Dermoscopy of discoid lupus erythematosus. Br J Dermatol. 168 (2), 284-288 (2013).
- Yu, H., et al. Clinical and immunological biomarkers for systemic lupus erythematosus. Biomolecules. 11 (7), 928(2021).
- Fasano, S., et al. Precision medicine in systemic lupus erythematosus. Nat Rev Rheumatol. 19 (6), 331-342 (2023).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
