Methodenartikel

Orthotope transplantatie van de voorpoten van ratten

459 weergaven

DOI:

10.3791/68050

22 juli 2025

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Hier presenteren we een protocol om de microchirurgische haalbaarheid van transplantatie van de voorpoten van ratten aan te tonen. Dit model kan dienen als een belangrijk translationeel platform voor VCA-onderzoek.

Samenvatting

Gevasculariseerde samengestelde allotransplantatie (VCA) omvat de transplantatie van meerdere weefseltypen - waaronder huid, spieren, botten en zenuwen - en biedt een veelbelovende reconstructieve optie voor patiënten met ernstige traumatische verwondingen of misvormingen. Ondanks het transformatieve potentieel heeft VCA te maken gehad met aanzienlijke uitdagingen, zoals afstoting van transplantaten, chronische immunosuppressiecomplicaties en de fijne kneepjes van het neuromusculaire herstel.

We gebruiken een model van de voorpoten van ratten als een kosteneffectief en anatomisch relevant platform om deze uitdagingen aan te gaan. De voorpoot van de rat weerspiegelt nauw de anatomie van de menselijke ledematen, waardoor de translationele impact van onze bevindingen wordt versterkt. Eerdere studies hebben dit model gevalideerd voor het betrouwbaar en reproduceerbaar meten van functioneel herstel, waardoor het een belangrijk hulpmiddel is voor het beoordelen van het afstotingstraject van transplantaten van de voorpoot.

Bovendien biedt het model een waardevolle kans om innovatieve therapeutische benaderingen te verkennen en te dienen als een goed translationeel platform voor nieuwe conserveringstechnieken. Door verder onderzoek van dit model willen we ons begrip van de mechanismen achter transplantaatafstoting en neuromusculair herstel verdiepen. Uiteindelijk streeft dit werk ernaar de weg vrij te maken voor het verbeteren van de klinische resultaten van VCA, waarbij zowel de huidige beperkingen als de toekomstige uitdagingen in de transplantatiegeneeskunde worden aangepakt.

Inleiding

Gevasculariseerde samengestelde allotransplantatie (VCA) is een levensveranderende procedure om ernstige weefseldefecten te reconstrueren. VCA verwijst naar de transplantatie van een samengesteld weefsel dat bestaat uit huid, spieren, botten, bindweefsel, bloedvaten en zenuwen. Verdere verfijning en exploratie van VCA-technieken zou patiënten met traumatische verwondingen of misvormingen ten goede komen1. De bredere toepassing ervan wordt echter uitgedaagd door aanhoudende hindernissen zoals afstoting van het transplantaat, complicaties door langdurige immunosuppressie, neuromusculair herstel en peri-transplant....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Chirurgische ingrepen werden uitgevoerd volgens de protocollen die zijn goedgekeurd door het Johns Hopkins University Animal Care and Use Committee (RA18M74) volgens de richtlijnen die zijn opgesteld door de National Institutes of Health en de American Association for the Accreditation of Laboratory Animal Care.

1. Donorprocedure (figuur 1)

  1. Voer de inductie van anesthesie uit via inhalatie van isofluraan in een concentratie van 5% en houd deze gedurende de hele procedure op 1%. Start de procedure nadat u het juiste anesthesieniveau ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De overleving van het transplantaat kan worden gecontroleerd en bepaald door middel van macroscopische observatie. Representatieve foto's van zowel de korte termijn (POD7) als de lange termijn follow-up (POD120) worden getoond in Figuur 3. Het transplantaat kon herstellen zonder duidelijke tekenen van necrose. De overlevingsgegevens zijn weergegeven in figuur 4. Zowel huid- als spiermonsters worden geoogst op het aangewezen eind.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Orthotope transplantatie van de voorpoot bij ratten is een veelgebruikt model bij experimentele reconstructieve transplantatie, omdat het niet alleen gevasculariseerde composietweefsels bevat, maar ook de beoordeling van functioneel herstel mogelijk maakt. Een conventionele hechttechniek voor vasculaire anastomose is zeer complex en vereist geavanceerde microchirurgische vaardigheden die jarenlange microchirurgische training vereisen. Om de tijd en kosten sterk te verminderen, werd een v.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Gerald Brandacher is medisch adviseur van X-Therma en Ossium Health.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door Grant 1R43HL158398 (NIH), 5R44AI145782 (NIH) en Maryland stamcel 2020-MSCRFL-5414. We willen onze labmanager, Angela Estevez, bedanken voor haar steun bij deze studie.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
10-0 Non-Sterile Micro SutureAROSurgicalTK-107038
4-0 Sharpoint Nylon BlackesuturesA1667N
4-0 Sharpoint Polysyn TaperesuturesG214N
5 mL-spuitenMDC2045
6-0 zijdeFisher ScientificNC9742105
ABB-22 V Dubbele Micro VaatS&T00480
B-1 V Enkele Micro VaatklemS&T00462
BD Quincke Spinale naaldesutures405073
Castroviejo Micro NaaldhoudersF.S.T12061-02
Chatilon DFE II krachtmeter AmetekDFE II-serie
Katoen met puntJH Supply store100252
Fijne schaar - Tungsten CarbideF.S.T14569-09
PincettenS&TFRS-15 RM-8
Gaas SpongesFisher Scientific22-362178
Halsted-Mosquito Hemostatische KlemmenF.S.T13009-12
HeparineJHH PharmacyNDC 63323-540-05
I.V. Katheter Radiopaque 24 GesuturesSMTH5053
Bipolare Coagulerende Pincetten voor Juweliers, Roestvrij StaalASSI103000BPS03
Ronde Handgreep Vannas VeerschaarF.S.T15400-12
Special-ForcepsS&TFRAS-15 RM-8
Vessel Dilators - Gebalanceerde InstrumentenF.S.T18602-15

Referenties

  1. Schneeberger, S., et al. First forearm transplantation: outcome at 3 years. Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).
  2. Heinzel, J. C., et al. Evaluation of functional recovery in rats after median nerve resection and aut....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Gevasculariseerde Composiete AllotransplantatieRattenvoorpootmodelGraftafstotingNeuromusculair HerstelChronische ImmunosuppressieFunctioneel HerstelLedemaattransplantatieTransplantatiegeneeskundeWeefseltransplantatie
Video binnenkort beschikbaar

Gerelateerde artikelen