Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Preventie van allodynie en hyperalgesie door cannabidiol in een rattenmodel van door chemotherapie geïnduceerde perifere neuropathie

869 weergaven

⸱

DOI:

10.3791/68079

⸱

20 juni 2025

 ,  ,  ,  , 
1Center for Substance Abuse Research, Department of Neural Sciences, Temple University, 2Department of Psychology, Program in Neuroscience Temple University

In dit artikel

Samenvatting

Gelijktijdige toediening van CBD met paclitaxel voorkomt de ontwikkeling van door chemotherapie geïnduceerde perifere neuropathie bij ratten. Dit protocol beschrijft de omgang met cannabinoïden, het induceren van een allodynisch fenotype bij ratten via chemotherapeutische toediening, het beoordelen van mechanische en thermische allodynie en het gebruik van hogesnelheidsvideografie om allodynie en hyperalgesie te onderscheiden.

Samenvatting

Deze studie toont het nut aan van een rattenmodel van door chemotherapie geïnduceerde perifere neuropathie (CIPN) om het vermogen van de niet-psychoactieve cannabinoïde cannabidiol (CBD) om de ontwikkeling van dit syndroom in vivo te moduleren, te beoordelen. De methode maakt gebruik van het chemotherapeutische middel paclitaxel om een allodynisch fenotype bij de dieren te genereren. Deze studie beschrijft hoe CBD moet worden gehanteerd en opgelost, het chemotherapeutisch middel moet worden toegediend, de mechanische en koudegevoeligheid moet worden beoordeeld en de snelle videografie moet worden toegepast om nocifenief gedrag bij dieren te meten. Aan de hand van de geschetste procedures ondersteunen de gegevens dat CBD voorkomt dat het allodynische fenotype zich ontwikkelt bij de behandelde dieren. Er werd geen verschil waargenomen bij de met CBD behandelde dieren van dag 0 (pre-paclitaxel baseline) tot dag 7 (post-sensibilisatie) in mechanische of thermische gevoeligheid, terwijl de met vehiculum behandelde dieren significant gevoeliger werden. Deze respons op de behandeling is duurzaam tot het laatste tijdstip waarop de gegevens zijn verzameld (7 weken). De toevoeging van high-speed videografie maakt een meer gedetailleerde en onbevooroordeelde beoordeling van dit gedragsfenotype mogelijk (bijv. classificatie van analgesie en anti-allodynie). Dit toont zowel het nut van dit model voor de karakterisering van cannabinoïde-geneesmiddelen als de mogelijke rol van CBD bij het verlichten van neuropathische pijn.

Inleiding

Chemotherapie-geïnduceerde perifere neuropathie (CIPN) is een vorm van sensorische neuropathie. Het is een veel voorkomende bijwerking van chemotherapie en komt vooral voor bij geneesmiddelen op basis van taxaan en platina 1,2. Enkele symptomen van CIPN zijn chronische pijn, gevoelloosheid, tintelingen en extreme gevoeligheid voor aanraking en temperatuur 1,2. Deze pijnlijke symptomen verstoren niet alleen het dagelijks leven van een patiënt, maar ook hun kankerbehandeling. Sommige kankerpatiënten streven naar een verlaging van de dosering of een volledige stopzetting van de chemotherapie om de afname van de kwaliteit van leven die met dit syndroom gepaard gaat, te kunnen beheersen3. Momenteel zijn de algemeen klinisch gebruikte behandelingen voor CIPN onvolledig effectief bij symptomatische verlichting en omvatten ze opioïden, die een aanzienlijk misbruikpotentieel vormen4. Er is tot op heden geen remedie voor CIPN, daarom is het essentieel om een veilig en effectief alternatief te vinden 5,6.

Van cannabidiol (CBD) is eerder aangetoond dat het werkzaam is bij het voorkomen van de ontwikkeling van CIPN, zoals gemodelleerd bij muizen 7,8. Dit toont een veelbelovende weg aan om de potentieel langdurige allodynische symptomen van CIPN voor patiënten te vermijden zonder de noodzaak van verlichting via dubbelzinnig effectieve medicijnen of potentieel schadelijke opioïden. De meerderheid van de mensen die CBD gebruiken, vooral voor therapeutische doeleinden zoals het beheersen van epileptische aanvallen, ervaren milde bijwerkingen en het medicijn wordt over het algemeen goed verdragen9. De meeste bijwerkingen zijn dosisafhankelijk en verbeteren vaak naarmate het lichaam zich aanpast.

In dit veelgebruikte model van CIPN10 krijgen ratten paclitaxel toegediend om neuropathie te induceren, die het allodynische fenotype recapituleert dat bij sommige patiënten na chemotherapeutische interventie wordt waargenomen, zoals eerder gerapporteerd11. Het doel van deze inductie is om een translationeel relevant platform te hebben voor het evalueren van dit type sensorische neuropathie in vivo, dat geschikt is voor onderzoekers die mechanismen of interventies voor dit syndroom onderzoeken. Mechanische gevoeligheid wordt gemeten met behulp van de von Frey-test en uitdagingen bij lage temperaturen worden gebruikt om de thermische gevoeligheid10,11 te meten. Dit maakt het mogelijk om het profylactische potentieel van CBD te kwantificeren bij het verminderen van CIPN op de twee klinisch belangrijkste eindpunten voor de kwaliteit van leven voor patiënten. Verdere evaluatie omvatte high-speed videografie-ondersteunde analyse van nocifensief gedrag 12,13. Deze uitgebreide analyse van gedragsreacties op onschadelijke en schadelijke stimuli maakt het mogelijk om onderscheid te maken tussen allodynische en hyperalgetische effecten van toediening van chemotherapie, evenals het vermogen van CBD om deze effecten te moduleren.

Dit protocol beschrijft hoe het CIPN-fenotype kan worden geïnduceerd, mechanische en thermische overgevoeligheid bij ratten kan worden beoordeeld en gekwantificeerd, en videografie kan worden toegepast voor een onbevooroordeelde en meer gedetailleerde evaluatie van allodynie en hyperalgesie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Dit protocol is goedgekeurd en volgt de richtlijnen van het Animal Care and Use Committee van Temple University onder goedgekeurde protocollen voor dieronderzoek. In dit onderzoek werden volwassen mannelijke Sprague-Dawley-ratten (250-300 g) gebruikt. Details over de gebruikte reagentia en apparatuur staan vermeld in de materiaaltabel.

1. Cannabinoïden en chemotherapeutische middelen voorbereiden voor de inductie van CIPN

OPMERKING: Figuur 1 toont het proces van oplosbaarheid van cannabidiol.

  1. Monteer de volgende materialen voor de oplosbaarheid van CBD en verdunning van paclitaxel.
    1. 100% ethanol (EtOH), chremofor (geëthoxyleerde ricinusolie), normale zoutoplossing, amberkleurige glazen injectieflacons (x2), 50 ml conische tube (x2), CBD-poederbouillon, klinische paclitaxelvoorraad (6 mg/ml).
  2. Voeg een geschikte hoeveelheid EtOH toe aan elke conische buis van 50 ml voor een eindoplosmiddelpreparaat van 1:1:18 EtOH: geëthoxyleerde ricinusolie: normale zoutoplossing.
  3. Massa de juiste hoeveelheid CBD weg om een concentratie van 5 mg/kg te creëren voor het aantal te testen dieren.
  4. Los CBD op in EtOH in een van de twee bereide conische tubes van 50 ml.
  5. Vortex CBD-EtOH mengsel op hoge snelheid totdat CBD volledig is opgelost.
  6. Voeg een gelijkwaardige hoeveelheid geëthoxyleerde ricinusolie toe aan elke conische buis van 50 ml.
  7. Draai elke buis met hoge snelheid totdat de geëthoxyleerde ricinusolie in oplossing is met EtOH.
  8. Voeg een geschikte hoeveelheid normale zoutoplossing toe aan elke conische buis van 50 ml voor een uiteindelijke verhouding van 1:1:18.
  9. Vortex totdat er een zoutoplossing in oplossing is.
  10. Breng de voertuigbesturingsoplossing en CBD-oplossing over in amberkleurige glazen flesjes.
  11. Verdun de voorraad paclitaxeloplossing 1:6 in een normale zoutoplossing om de uiteindelijke concentratie in amberkleurige injectieflacons op 1 mg/ml te brengen in het volume dat geschikt is voor het aantal te testen dieren.
  12. Sluit de amberkleurige injectieflacons af met rubberen doppen met aluminium kraag.
    OPMERKING: Indien bereid vóór de start van het experiment, kunnen injectieflacons met medium, medium + CBD en paclitaxel maximaal 7 dagen bij 4-8 °C worden bewaard. Laat de gekoelde injectieflacons op kamertemperatuur komen voordat u ze injecteert. Houd er ook rekening mee dat het van cruciaal belang is om bereide cannabinoïde-reagentia in glas te bewaren, zo niet voor onmiddellijk gebruik, om hechting aan het vat of neerslaan uit de oplossing te voorkomen.

2. Inducerend allodynisch fenotype bij ratten

  1. Monteer de benodigde materialen voor paclitaxel-injectie zoals hieronder vermeld:
    1. Bereid 1 mg/ml paclitaxelstockoplossing, 1 ml wegwerpspuiten (x n ratten), 25 g spuitnaalden (x n ratten), chemotherapeutische afvalcontainer voor scherpe voorwerpen en weegschaal om diergewichten te verzamelen.
  2. Nummer of tag de ratten met unieke identificatiegegevens.
    OPMERKING: De dieren moeten ten minste 1 week voor het begin van de proef aan hun huisvesting hebben gewenken.
  3. Verzamel de gewichten van elk dier.
  4. Bereid spuiten voor met de juiste hoeveelheid paclitaxel (alle dieren) en vehiculum of CBD (per behandelingsgroep). In dit geval komt het injectievolume overeen met 1 μL/g gewicht van de dieren.
  5. Injecteer paclitaxel en vehiculum of paclitaxel en CBD interperitoneaal.
    1. Om de rat in bedwang te houden voor injectie, pakt u de rat vast met niet-dominant vanaf de rug, waarbij de wijsvinger de duim om de nek ontmoet en de middelvinger de duim onder de schouder ontmoet, met behulp van ring- en pinkvingers om het lichaam vast te pakken.
    2. Stabiliseer de achterpoten van de rat tegen het lichaam.
    3. Wees voorzichtig om geen ongemakkelijke druk op het dier uit te oefenen om letsel te voorkomen.
      OPMERKING: Er is altijd een risico op bijten of krabben bij het hanteren van ratten. Om dit risico te verkleinen, kan de onderzoeker extra persoonlijke beschermingsmiddelen dragen in de vorm van bijtbestendige handschoenen.
    4. Terwijl het dier handmatig wordt vastgehouden en gestabiliseerd, kantelt u het dier zodanig dat zijn buik gemakkelijk toegankelijk is voor de spuit.
    5. Injecteer 1 mg/ml paclitaxel in het kwadrant rechtsonder van het dier en gooi de spuit weg in de container voor scherpe voorwerpen voor chemotherapie.
    6. Injecteer het vehiculum of CBD met een gewicht van 1 μl/g in het kwadrant linksonder van het dier en gooi de spuit weg in de gewone naaldencontainer."
      OPMERKING: Het afwisselen van de injectieplaatsen vermindert het ongemak bij dieren en mogelijke irritatie van de injectieplaats.
    7. Dit markeert experimentele dag 1. Herhaal dit proces op dag 2-4 om het allodynische fenotype te induceren. Volg gedurende deze tijd de institutionele behandelingsprotocollen voor chemotherapeutisch besmette kooien.
    8. Voer op dag 0 basismetingen uit voor mechanische en thermische allodynie, zoals beschreven in stap 3. Neem extra stimuli op in het genereren van baseline, zoals beschreven in stap 4. Analyse van dag 0-waarden voor deze stimuli zal nodig zijn om pijnscores te genereren.
    9. Herhaal stap 2.5.8 totdat de dieren een stabiele, herhaalbare basislijn vertonen om heterogeniteit in respons als gevolg van onvoldoende hantering te voorkomen.
      OPMERKING: Onderbreek het proces van het induceren van het allodynische fenotype niet. Als de onderzoeker niet in staat is om injecties in 4 opeenvolgende dagen uit te voeren, kunnen alternatieve doseringsschema's een vergelijkbare inductie van het fenotype bereiken. Het is ook mogelijk en misschien aanbevolen om de injectie van paclitaxel en vehiculum of CBD in één injectie te combineren in plaats van 2 door het volume van het oorspronkelijke medium of de CBD-oplossing op de juiste manier aan te passen om verdunning van paclitaxel in deze mengsels mogelijk te maken, terwijl een eindconcentratie van 5 mg/ml CBD en een concentratie van 1 mg/ml paclitaxel behouden blijft. Wees voorzichtig bij het hanteren van scherpe voorwerpen voor chemotherapie om onbedoelde blootstelling aan de onderzoeker te voorkomen.

3. Beoordeling van mechanische en thermische gevoeligheid na sensibilisatie

OPMERKING: Figuur 2 toont het schematische apparaat dat voor dit onderzoek is gebruikt.

  1. Monteer de volgende materialen voor mechanische en koudegevoeligheidstesten:
    1. Von Frey filamenten (4-100 g), droogijs, 15 ml conische buis, isolatiekamers, draadbodemrooster, 1/4 inch glaspaneel en stopwatch.
  2. Begin met de beoordeling op experimentele dag 7 (bijv. 3 dagen na de laatste injectie van chemotherapeutische/behandelingsconditie).
  3. Monteer von Frey en thermische isolatiekamers.
    1. Plaats de isolatiekamers voor mechanische gevoeligheid (6 kamers gescheiden door kunststof scheidingswanden) op een draadvloerrooster 20 cm boven het werkblad.
    2. Plaats de isolatiekamers voor thermische gevoeligheidstests (enkele kamer) op een 1/4-inch glazen oppervlak 20 cm boven het werkblad.
  4. Plaats de dieren afzonderlijk in isolatiekamers voor mechanische allodynie.
  5. Laat de isolatie gedurende 15 minuten wennen voordat met het testen wordt begonnen.
  6. Voer handmatige von Frey-tests uit voor mechanische gevoeligheid. Deze methode beschrijft handmatige von Frey-tests, maar elektronische von Frey-tests kunnen worden vervangen door handmatige tests14.
    1. Begin met het filament dat overeenkomt met de laagste gram kracht (bijv. 4 g) en oefen druk uit op het midden van de plantaire oppervlak van de rechterachterpoot zodat het filament 6 s in een c-vorm wordt gehouden.
      OPMERKING: Onderzoekers rapporteren weinig verschil tussen de rechter- en linkerachterpoten, maar onderzoekers moeten consistent zijn tussen dieren). Herhaal 5 proeven per stimulus.
    2. Herhaal dit voor elk te testen dier.
    3. Verhoog achtereenvolgens de filamentgrootte en herhaal stap 3.5.1-3.5.2 totdat een pijnreactie wordt waargenomen (bijv. het terugtrekken van de poot) in ten minste 2 van de 5 onderzoeken.
    4. Registreer de filamentgram kracht die de waargenomen pootreactie opriep.
    5. Test het volgende onderste filament opnieuw om te zien of het terugtrekken van de poot wordt waargenomen. Als er geen reactie wordt waargenomen, is de geregistreerde gram kracht definitief.
    6. Als het dier bij deze stap reageert, registreer dan een nieuwe filamentgram kracht en test het volgende onderste filament opnieuw. Herhaal dit totdat de onderste filamenten geen reactie meer uitlokken. Representatieve gegevens worden weergegeven in figuur 3A,C.
  7. Voer gevoeligheidstests voor koude uit.
    1. Haal het dier uit de mechanische gevoeligheidsisolatiekamer en plaats het in een thermische gevoeligheidsisolatiekamer.
    2. Vul 15 ml conische buis met droogijs zodat de uiteindelijke pellet vanaf de bovenkant van de buis uitsteekt.
    3. Leg het droogijs op het glas proximaal van de rechter achterpoot van het dier.
    4. Noteer met een stopwatch de tijd totdat het dier het terugtrekken van de poot vertoont als reactie op de temperatuur. Representatieve gegevens worden weergegeven in figuur 3B.
    5. Herhuisvest de rat in zijn thuiskooi.
    6. Herhaal alle stappen van 3.7 totdat alle dieren zijn getest en weer in hun thuiskooi zitten.
      OPMERKING: Het is ook belangrijk op te merken dat het gedrag en het gewicht van dieren in dit stadium moeten worden gecontroleerd op tekenen van angst. Als de dieren pijngedrag ontwikkelen of lichaamsgewicht verliezen tijdens langere tijdsverloop, moet het onderzoek worden beëindigd en moeten de dieren worden geëuthanaseerd volgens de juiste techniek voor het omgaan met dieren. Als de dieren in de loop van het experiment geen ongemak vertonen, moeten de dieren na de laatste testdag worden geëuthanaseerd.

4. Mechanische gevoeligheidsbeoordeling via high-speed videografie

  1. Monteer de volgende materialen zoals hieronder vermeld voor mechanische gevoeligheidstest en videografie:
    1. Isolatiekamers, draadvloerrooster, wattenstaafje, make-upborstel, pinnen, hogesnelheidscamera, infraroodverlichting, laptop met compatibele analysesoftware.
  2. Beoordeel in combinatie met eerder beschreven mechanische gevoeligheidstesten11of als een op zichzelf staande test zoals hieronder beschreven.
  3. Monteer de isolatiekamers voor mechanische gevoeligheid (enkele kamer) door ze op een draadvloerrooster 20 cm boven het werkblad te plaatsen.
  4. Plaats de camera op een statief in een hoek van ongeveer 45 graden tussen 1 en 2 voet afstand van de isolatiekamer.
  5. Plaats de infraroodlampen op statieven om de kamer te verlichten om te experimenteren en vervolgens te scoren.
  6. Plaats de dieren afzonderlijk in de isolatiekamer voor mechanische stimulusbeoordeling.
  7. Laat de afstelling 15 m voor het begin van de test aan de isolatiekamers wennen.
  8. Voer somatosensorische tests uit op mechanische gevoeligheid met verschillende stimuli (Figuur 4).
    1. Gebruik een laptop met Photron FastCAM-analysesoftware om de isolatiekamer op te nemen met 2000 frames/s voor elke stimulus (druk op de bijbehorende knop om de opname te starten).
    2. Gebruik het wattenstaafje om tijdens het opnemen voorzichtig contact te maken tussen het wattenstaafje en de achterpoot van de rat en stop na het voltooien van de opname.
    3. Gebruik de make-upborstel om van achteren naar voren over de achterpoot te vegen en stop na het voltooien.
    4. Gebruik de pin om pin pinches met lage en hoge druk op de achterpoot van de rat uit te voeren. Voor prikken onder lage druk raakt u de pin voorzichtig aan op de achterpoot, trekt u zich terug na contact tijdens het opnemen en stopt u na voltooiing.
    5. Voor penprikken onder hoge druk drukt u de pin scherp in de achterpoot en trekt u zich terug na contact tijdens de opname en stopt u na voltooiing.
    6. Breng het dier terug naar de thuiskooi.
    7. Herhaal dit voor elk te testen dier.
  9. Beoordeel handmatig geregistreerd nocifensief gedrag via high-speed videografie met behulp van video's die zijn verwerkt met FastCAM-software15, zoals aangetoond in Figuur 5A,B.
    1. Meet de poothoogte (in cm) vanaf de gaasvloer tot het hoogste punt na pootstimulatie. Om dit in de software te doen, navigeert u naar Afmetingen > Afmetingen en selecteert u Twee punten.
      1. Speel de video af gedurende de hele pootbeweging om het moment te bepalen waarop de poot zijn hoogtepunt bereikt tijdens de eerste opwaartse beweging. Selecteer een duidelijk herkenbaar gebied van de poot (bijv. het midden van het plantaire oppervlak, het snijpunt van een cijfer met de poot, hiel, enz.) en stel dit in als het beginpunt.
      2. Spoel de video terug om de positie van dat gebied vóór de stimulatie te lokaliseren en markeer het tweede punt op die locatie langs de y-as. Zorg ervoor dat de meetlijn evenwijdig aan de y-as blijft en niet onder een hoek staat. De hoogte wordt weergegeven in de linkerbovenhoek van het scherm15.
    2. Bepaal de pootsnelheid door de afstand (in cm) te berekenen van de eerste lift tot het hoogste punt, gedeeld door de tijd (in seconden) tussen deze twee punten. Deze meting kan in de software worden uitgevoerd door Dimensies > Afmetingen te selecteren en Twee punten te kiezen.
    3. Speel de video af gedurende de hele pootbeweging om de frames te identificeren waar de poot zijn eerste opwaartse beweging initieert. Meet de pootsnelheid door twee punten op verschillende frames binnen deze beweging te selecteren en de afstand te berekenen gedeeld door het aantal frames of de tijd die is verstreken tussen het begin- en eindframe15.
    4. Evalueer de video's op orbitale aanscherping, pootschudden, pootbeschermer en springgedrag. Als een dier bijvoorbeeld een van deze gedragingen zou vertonen tijdens het toedienen van stimulus, zou hun nocifensieve gedragsscore 1 zijn.
      OPMERKING: Orbitale verstrakking werd gescoord wanneer de ogen tijdens het aanbrengen van de stimulus van volledig open naar gedeeltelijk of volledig gesloten gingen. Pootschudden werd gescoord wanneer hoogfrequent pootterugdeinzen werd waargenomen tijdens het toedienen van de stimulus. Springen werd gescoord wanneer drie of meer poten van de vloer van het draadrooster waren tijdens het toepassen van de stimulus.
    5. Gebruik basislijngegevens van de stimuli om verdelings- en foutschattingen te genereren voor dit cohort dieren, zoals eerder beschreven15. Kortom, neem video's op van elk dier dat in de onderzoeken wordt gebruikt als reactie op statische aanraking, dynamische aanraking, lichte speldenprik en zware speldenprik bij de basislijn vóór de behandeling om het volledige scala aan mogelijke gedragskenmerken vast te leggen.
      1. Bereken het gemiddelde en de standaarddeviatie van elk gedragskenmerk (snelheid, lengte, pijnscore) voor de groep voor alle stimuli (statische aanraking, wattenstaafje, lichte speldenprik, zware speldenprik).
    6. Genereer z-scores op basis van onbewerkte gegevens die in elke video zijn waargenomen met behulp van variabelen die zijn gegenereerd in stap 4.9.4 en de eerder beschreven procedures16.
    7. Combineer alle z-scores tot een eendimensionale eigenwaarde met behulp van hoofdcomponentenanalyse met behulp van statistische analysesoftware17. Hierdoor kan de combinatie van getransformeerde z-scores uit de driedimensionale dataset worden berekend als een enkele gewogen totaalwaarde16.
    8. Zet PCA-gegenereerde pijnscores die deze meerdere gedragsdimensies omvatten uit om gedrag dat verband houdt met schadelijke en onschadelijke stimuli te scheiden (Figuur 5C) met behulp van statistische analysesoftware.
      OPMERKING: Videografie-ondersteund mechanisch testen herhaalt op von Frey-testen door verhoogde dimensionaliteit op te nemen. In de context van CIPN maakt het de beschrijving van en het onderscheid tussen antiallodynie en analgesie mogelijk. Videoscores kunnen ook worden uitgevoerd door partijen die onafhankelijk zijn van de onderzoeker die de sensorische tests heeft uitgevoerd. Dit is een krachtig hulpmiddel dat zowel de vooringenomenheid van de onderzoeker kan verminderen als de diepte van de verzamelde informatie kan vergroten. Het is belangrijk op te merken dat deze methode afhankelijk is van gespecialiseerde hardware, software en statistische technieken. Het dient als aanvulling op de meer toegankelijke methode die in de vorige paragrafen is beschreven. Verder moet worden opgemerkt dat het verzamelen van gegevens tijdrovend is vanwege de grootte van de bestanden die door de camera worden gegenereerd en dat bestandsopslagruimte een beperkende factor kan zijn. Met deze factoren moet aan het begin van het experiment rekening worden gehouden.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De gedragsresultaten die door dit CIPN-model bij ratten worden opgewekt, zijn zeer reproduceerbaar en consistent. Figuur 3A toont de mechanische gevoeligheidsresultaten bij baseline en post-paclitaxel sensibilisatie bij controle- en CBD-behandelde dieren. Bij aanvang beginnen Sprague-Dawley-ratten over het algemeen pootterugtrekking te vertonen bij een kracht van 26-60 g, zoals toegepast door von Frey-filamenten. Dit is in beide behandelgroepen op dag nul wa...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Het rattenmodel van door chemotherapie geïnduceerde perifere neuropathie vat twee van de meest gerapporteerde problemen met de kwaliteit van leven samen voor patiënten die bepaalde soorten chemotherapie krijgen op het gebied van mechanische en thermische gevoeligheid. Met dit model kunnen relatief goedkope en efficiënte methoden deze gevoeligheden kwantificeren via von Frey-filamenttesten en thermische gevoeligheid door blootstelling aan droogijs. Deze methode biedt ook een aanv...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs willen de labs van Ward en Wimmer bedanken voor hun steun in dit project. Dit werk werd ondersteund door het National Institutes of Health, National Institute of Neurological Disorders and Stroke [Grant R42 NS120548-02].

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
CannabidiolCaymen Chemical90080Ann Arbor, MI
ChremophorMillipore-Sigma238470St. Lous, MO
EthanolMillipore-SigmaE7023St. Lous, MO
FastCAM Analysis software Photonhttps://photron.com, open-sourced
High-speed cameraPhotron AX 50 
Infrared lights CMVision IP65 
Normal SalineMillipore-SigmaS0817St. Lous, MO
PaclitaxelTemple University Hospital PharmacyN/APhiladelphia, PA
Sprague-Dawley rats (250–300 g) Taconic Laboratories, Cranbury, NJ

Referenties

  1. Zhang, X., Chen, W. W., Huang, W. J. Chemotherapy-induced peripheral neuropathy. Biomed Rep. 6 (3), 267-271 (2017).
  2. Sałat, K. Chemotherapy-induced peripheral neuropathy: part 1-current state of knowledge and perspectives for pharmacotherapy. Pharmacol Rep. 72 (3), 486-507 (2020).
  3. Velasco, R., Bruna, J. Chemotherapy-induced peripheral neuropathy: An unresolved issue. Neurología (English Edition). 25 (2), 116-131 (2010).
  4. Zajaczkowską, R., et al. Mechanisms of chemotherapy-induced peripheral neuropathy. Int J Mol Sci. 20 (6), 1451(2019).
  5. Cavaletti, G., et al. Cannabinoids: An effective treatment for chemotherapy-induced peripheral neurotoxicity. Neurother. 18 (4), 2324(2021).
  6. Lowe, H., Toyang, N., Steele, B., Bryant, J., Ngwa, W. The endocannabinoid system: A potential target for the treatment of various diseases. Int J Mol Sci. 22 (17), 9472(2021).
  7. Ward, S. J., Ramirez, M. D., Neelakantan, H., Walker, E. A. Cannabidiol prevents the development of cold and mechanical allodynia in paclitaxel-treated female C57Bl6 mice. Anesth Analg. 113 (4), 947-950 (2011).
  8. Ward, S. J., et al. Cannabidiol inhibits paclitaxel-induced neuropathic pain through 5-HT(1A) receptors without diminishing nervous system function or chemotherapy efficacy. Br J Pharmacol. 171 (3), 636-645 (2014).
  9. Iffland, K., Grotenhermen, F. An update on safety and side effects of cannabidiol: A review of clinical data and relevant animal studies. Cannabis Cannabinoid Res. 2 (1), 139(2017).
  10. Bacalhau, C., Costa-Pereira, J. T., Tavares, I. Preclinical research in paclitaxel-induced neuropathic pain: A systematic review. Front Vet Sci. 10, 1-17 (2023).
  11. Ippolito, M. J., Hayduk, S. A., Kinney, W., Brenneman, D. E., Ward, S. J. KLS-13019, a novel structural analogue of cannabidiol (CBD) and GPR55 receptor antagonist, prevents and reverses chemotherapy-induced peripheral neuropathy (CIPN) in rats. J Pharmacol Exp Ther. 391 (2), 231-240 (2024).
  12. Brenner, D. S., Golden, J. P., Gereau, R. W. IV A novel behavioral assay for measuring cold sensation in mice. PLoS ONE. 7 (6), 1-08 (2012).
  13. Zeid, D., et al. Paternal morphine exposure in rats reduces social play in adolescent male progeny without affecting drug-taking behavior in juvenile males or female offspring. Mol Cell Neurosci. 126, 103877(2023).
  14. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10 (284), 1-17 (2017).
  15. Burdge, J., Fried, N. T., Abdus-Saboor, I. Using high-speed videography for objective and reproducible pain measurement on a mouse pain scale. STAR Protoc. 2 (1), 1-16 (2021).
  16. Toussaint, A. B., et al. Chronic paternal morphine exposure increases sensitivity to morphine-derived pain relief in male progeny. Sci Adv. 8 (7), 1-17 (2022).
  17. Abdus-Saboor, I., et al. Development of a mouse pain scale using sub-second behavioral mapping and statistical modeling. Cell Rep. 28 (6), 1-33 (2019).
  18. Faraji, J., et al. Sex-specific stress and biobehavioral responses to human experimenters in rats. Front Neurosci. 16, 1-14 (2022).
  19. Bigelow, L. J., Pope, E. K., MacDonald, D. S., Rock, J. E., Bernard, P. B. Getting a handle on rat familiarization: The impact of handling protocols on classic tests of stress in Rattus norvegicus. Lab Anim. 57 (3), 259-269 (2023).
  20. Bryda, E. C. The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research. Missouri Med. 110 (3), 207-211 (2013).
  21. Gadgil, S., et al. A systematic summary and comparison of animal models for chemotherapy induced (peripheral) neuropathy (CIPN). PLoS One. 14 (8), 1-17 (2019).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

door chemotherapie geïnduceerde neuropathiebehandeling met cannabidiolrattenmodel voor neuropathietoediening van paclitaxelmechanische gevoeligheidkoudegevoeligheidhogesnelheidsvideografienocifensief gedragneuropathische pijnpreventie van allodynie

Dit artikel is gepubliceerd

Video binnenkort beschikbaar

Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.