Methodenartikel

Een gemodificeerd muismodel van intracraniaal aneurysma op basis van hemodynamische verandering en hypertensie

DOI:

10.3791/68087

⸱

21 februari 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Neurosurgery, Renji Hospital, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, 2Department of Neurosurgery, The Second Affiliated Hospital, Guangzhou Medical University, 3Department of Neurosurgery, Zaozhuang Municipal Hospital, 4Department of Neurosurgery, the Affiliated Hospital of Guizhou Medical University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Intracraniaal aneurysma (IA) werd bij muizen geconstrueerd met behulp van de risicofactoren hypertensie en hemodynamische veranderingen. Hemodynamische veranderingen werden geïnduceerd door ligerende takken van de halsslagader, terwijl hypertensie werd bereikt door de achterste takken van de nierslagader af te binden. IA-vorming werd gedetecteerd door middel van magnetische resonantie-angiografie, stereomicroscopie en pathologische analyse.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Intracraniaal aneurysma (IA) vormt een aanzienlijk gezondheidsrisico vanwege morbiditeit en mortaliteit geassocieerd met aneurysmaruptuur. De moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling van IA blijven echter onduidelijk en er is een geschikt muismodel nodig. Een muismodel van IA werd opgesteld door de pterygopalatine-slagader (PPA) af te binden om additieve hemodynamische veranderingen te induceren, gecombineerd met hypertensie-inductie. Bij mannelijke muizen met C57BL/6 werden bloedvaten, waaronder de rechter PPA, de externe halsslagader (ECA), de occipitale slagader (OcA) en de linker contralaterale gemeenschappelijke halsslagader (CCA), afgebonden om hemodynamische veranderingen te induceren. Een week later werden de bilaterale achterste takken van de nierslagader (pRA) afgebonden en werd een dieet met 8% zout geïntroduceerd om hypertensie te induceren. Magnetische resonantie-angiografie (MRA), stereomicroscopie en immunohistochemische (IHC) kleuring werden uitgevoerd om de morfologische en pathologische veranderingen in IA drie maanden na inductie te evalueren. In de experimentele groep stierven vier muizen na de eerste inductie. IA op verschillende locaties werd gedetecteerd bij vijf van de elf overgebleven muizen. Zowel microscopisch onderzoek als MRA-onderzoek bevestigden IA-vorming. Pathologische en IHC-analyses toonden verstoring van de interne elastische lamina, ontkoppeling van collageenvezels en infiltratie van CD86-positieve M1-macrofagen, bevindingen die consistent zijn met deze waargenomen bij menselijke IA. Dit muismodel van IA repliceert de pathologische veranderingen die zijn waargenomen in menselijke monsters en kan dienen als een waardevol hulpmiddel voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen van IA-vorming en -progressie.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De prevalentie van intracraniaal aneurysma (IA) wordt geschat op 3,2% van de algemene bevolking1. IA vormt een aanzienlijk gezondheidsrisico vanwege de hoge geassocieerde morbiditeit en mortaliteit. IA is een complexe en multidimensionale pathologische aandoening die wordt beïnvloed door hemodynamische veranderingen, ontsteking en vasculaire remodellering 2,3. Hemodynamische veranderingen en hypertensie zijn betrokken bij de vorming en progressie van aneurysma's 4,5. IA komt vaak voor bij cerebrale bifurcaties met verhoogde hemodynamische schuifspanning6, en bifurcaties met smalle hoeken worden geïdentificeerd als risicofactoren voor IA-ontwikkeling bij mensen7. Ondanks de vooruitgang in endovasculaire behandelingen en chirurgische strategieën, blijft subarachnoïdale bloeding veroorzaakt door IA-ruptuur catastrofaal. Daarom is het onderzoeken van farmacologische behandelingen een veelbelovende benadering om aneurysmacruptuurte voorkomen 8. De mechanismen die aan de basis liggen van de pathologische vorming en progressie van IA blijven echter onduidelijk. Het ontwikkelen van een geschikt muismodel voor IA-vorming en -progressie, gebaseerd op menselijke risicofactoren, is cruciaal om de onderliggende mechanismen bloot te leggen en potentiële therapeutische doelen te identificeren. Deze studie heeft tot doel een model van IA-vorming zonder breuk bij muizen te construeren dat menselijke IA-kenmerken nabootst.

De cirkel van Willis (CW) verbindt en communiceert de rechter interne halsslagader (ICA), linker ICA en bilaterale vertebrobasilaire slagaders. De CW dient als compensatiemechanisme in geval van occlusie of stenose van de ICA of wervelslagader9. De pterygopalatineslagader (PPA) is een tak van de ICA die bloed levert aan het uitwendige deel van de hersenen10. Op basis van de compenserende functie van de CW verhoogt PPA-occlusie de bloedstroom in de ICA. Het combineren van ligatie van de linker gemeenschappelijke halsslagader (CCA), de rechter externe halsslagader (ECA) en de occipitale slagader (OcA) resulteert in een verhoogde bloedstroom in de CW, vooral bij vernauwde hoeken, wat leidt tot hemodynamische veranderingen. In dit model wordt de bloedtoevoer naar de hersenen ondersteund door de vertebrobasilaire slagader en de rechter ICA. PPA-ligatie droeg niet bij aan mortaliteit bij de muizen11.

Om een IA-model op basis van elastase-injectie te induceren, werd hypertensie geïnduceerd door afgifte van angiotensine-II (Ang-II) via een Alzet-pomp of deoxycorticosteronacetaat (DOCA)-zout12,13. De hoge kosten van Alzet en DOCA moeten worden overwogen bij experimenten met een groot aantal dieren. De bereikte niveaus van hypertensie verschilden niet significant tussen ligatie van de achterste en inferieure takken van de bilaterale nierslagaders of alleen de achterste takken van de bilaterale nierslagaders. De eerste benadering resulteerde echter in een grotere nierdisfunctie14. Daarom wordt ligatie van de bilaterale achterste nierslagaders (pRA) voor de meeste onderzoekers als een rationele methode beschouwd.

Elastase werd via een enkele stereotactische injectie12 in het hersenvocht in de rechter basale stortbak geïnjecteerd. Het op elastase-injectie gebaseerde IA-model veroorzaakte 60%-80% IA-ruptuur drie weken na injectie15,16, wat te kort is om IA-vorming en -ontwikkeling te bestuderen. Bovendien zijn er geen aanwijzingen voor verhoogde elastasespiegels bij mensen tijdens IA-vorming. Bovendien wordt stereotactische injectie in de rechter stortbak in verband gebracht met hoge mortaliteit en invaliditeit bij muizen, wat aanzienlijke uitdagingen met zich meebrengt voor beginners.

In deze studie werd een muismodel van IA zonder breuk binnen drie maanden geconstrueerd op basis van menselijke risicofactoren. Dit model elimineert de hoge kosten die gepaard gaan met DOCA en Alzet. Bovendien kan het alleen worden uitgevoerd met behulp van een stereomicroscoop en kan het gemakkelijk onder de knie worden gekregen door beginners.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle operationele procedures bij muizen voldeden aan de criteria van de Ethische Toetsingscommissie en werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee van de Shanghai Jiaotong University. C57BL/6 mannelijke muizen (8 weken oud, 20-25 g) werden gehuisvest bij een temperatuur van 22 °C met een licht/donkercyclus van 12 uur/12 uur. Het operationele proces wordt weergegeven in figuur 1A. Kortom, bij verdoofde dieren werden de linker gemeenschappelijke halsslagader (CCA), de rechter externe halsslagader (ECA), de occipitale slagader (OcA) en de pterygopalatineslagader (PPA) afgebonden om hemodynamische veranderingen te induceren. Hypertensie werd vervolgens geïnduceerd door het afbinden van de bilaterale nierslagaders (bRA) een week na het begin van hemodynamische veranderingen, en de dieren kregen een dieet met 8% zout. Hemodynamische veranderingen en IA-vorming zijn weergegeven in figuur 1B. Details van de reagentia en apparatuur die in dit onderzoek zijn gebruikt, zijn te vinden in de materiaaltabel.

1. Oprichting van muis-UIA op basis van hemodynamische veranderingen en hypertensie

OPMERKING: Muizen werden 12 uur nuchter voor de operatie. Chirurgische instrumenten werden gesteriliseerd door ze minstens 30 minuten in 70% alcohol te laten weken.

  1. Dien anesthesie toe (volgens institutioneel goedgekeurde protocollen) met behulp van een anesthesieapparaat voor kleine dieren met 2% isofluraaninhalatie in een mengsel van O2 (1 l/min) op een verwarmd kussen dat op 37 °C wordt gehouden.
  2. Ligate de linker CCA
    1. Maak een lineaire incisie van 1 cm langs de cervicale middellijn. Ontleed onderhuids weefsel en platysma om de luchtpijp bloot te leggen.
    2. Trek de halsader weg en zoek de halsslagaderschede langs de luchtpijp (Figuur 2A i,ii). Scheid de linker CCA van de nervus vagus. Ligaat de linker CCA met een 6-0 zijden hechtdraad (Figuur 2A iii,iv).
  3. Ligate de juiste ECA en OcA
    1. Leg de anatomische structuur van de CCA, ICA, ECA, OcA, nervus vagus en hypoglossale zenuw aan de rechterkant bloot. Ligaat de rechter ECA met een 6-0 zijden hechtdraad (Figuur 2A iii,iv).
    2. Isoleer de OcA en ligate deze met een 8-0 zijden hechtdraad (Figuur 2A v - viii). Koppel de OcA los met behulp van twee rechte microtangen.
      OPMERKING: De OcA, die proximaal voortkomt uit de ECA, ligt onder de hypoglossale zenuw (Figuur 2A v - viii). Het ontleden van de OcA helpt om de PPA-anatomie effectief bloot te leggen.
  4. Ligate de juiste PPA
    1. Isoleer de hypoglossale zenuw van de ICA. Plaats chirurgisch katoen tussen de hypoglossale zenuw en ICA om de zenuw te beschermen tegen proceduregerelateerd letsel.
    2. Ontleed het perivasculaire weefsel rond de PPA met behulp van een microtang. Klem de PPA vast en trek deze tijdelijk iets omhoog. Plaats een 8-0 zijde hechtdraad tussen de PPA en ICA om de PPA te ligate (Figuur 2A ix,x).
    3. Ligate de PPA en houd voldoende afstand tussen de ligatieplaats en de oorsprong van de PPA om de bloedstroom in de cirkel van Willis te garanderen (Figuur 2A x).
      OPMERKING: De primaire uitdaging in deze stap is het ligen van de PPA in een extreem krappe operatieruimte zonder perifere zenuwen en vasculaire structuren aan te tasten. Vermijd het samendrukken van de luchtpijp tijdens PPA-blootstelling.
  5. Voltooi de bewerking
    1. Steriliseer het operatieveld met povidon-jodium en hecht de wond. Houd muizen in de gaten totdat ze herstellen van de anesthesie.
  6. Hypertensie induceren
    1. Maak een 2 cm lange incisie in de middellijn ter hoogte van de 12ewervel op de rug. Snijd de rugspieren door om de nier bloot te leggen. Klem het vetweefsel met een tang om de nier en bevestig de nier in de spierincisie (Figuur 2B i,ii).
    2. Isoleer het vetweefsel rond de niersteel. Identificeer de pRA in nauw contact met de nierader (Figuur 2B iii,iv). Klem de pRA vast en trek hem omhoog met een rechte microtang. Ontleed de fascia tussen de pRA en de nierader met behulp van een andere microtang (Figuur 2B v,vi).
      OPMERKING: Wees voorzichtig om schade aan de nierader te voorkomen, die kan leiden tot catastrofale bloedingen.
    3. Ligaat de pRA met een 6-0 zijden hechtdraad (Figuur 2B vii,viii). Observeer onmiddellijk na het afbinden de vorming van ischemische haarden in het bovenste deel van de nier (Figuur 2B ix,x). Hecht de spier- en huidincisies.

2. IA-onderzoek via MRA en stereomicroscoop

  1. Voer time-of-flight (TOF) 7,0 T magnetische resonantie-angiografie (MRA) uit drie maanden na inductie van het aneurysma om de IA-vorming te evalueren.
    1. Euthanaseer de muizen via verbloeding en cervicale dislocatie na isofluraan-anesthesie (volgens institutioneel goedgekeurde protocollen). Detecteer IA onder een stereomicroscoop zoals eerder gerapporteerd17.
    2. Doordrenk de monsters met gekoelde PBS, gevolgd door 4% paraformaldehyde en vervolgens Microfil om bloedvaten en aneurysma's te visualiseren.
    3. Definieer een aneurysma als naar buiten uitpuilend 1,5 keer groter dan de moederslagader, zoals waargenomen door twee onafhankelijke neurochirurgen 8,18.

3. Histologische en immunohistochemische analyses

  1. Isoleer de cirkels van Willis onder een microscoop. Fixeer de preparaten met 4% paraformaldehyde bij 4 °C gedurende 24 h19.
  2. Verwerk de monsters tot paraffine en bevroren secties voor histologische en immunofluorescentiekleuring. Bevlek paraffineprofielen met EVG- en Masson-vlekken volgens de instructies van de fabrikant19.
  3. Incubeer de paraffinesecties met een blokkeeroplossing om niet-specifieke binding te minimaliseren.
  4. Incubeer secties met primaire antilichamen tegen CD86 's nachts bij 4 °C. Ontwikkel na incubatie met een secundair antilichaam een bruine kleur door de secties te laten reageren met DAB20.
  5. Voer een tegenkleuring uit met hematoxyline en monteer de secties met een waterige montageoplossing20.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Snelheid van IA-vorming
In de experimentele groep (n = 15) stierven 2 muizen binnen de eerste week na de eerste procedure om onbekende redenen. Eén muis stierf aan een infectie in de rugwond op de derde dag na de tweede procedure, en een andere muis stierf op dag 38 om onbekende redenen, zonder dat er aneurysma's werden gedetecteerd. In de controlegroep (n = 5) overleefden alle 5 de muizen tot het offeren. Onder de overlevende muizen in de experimentele groep (n = 11)...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie presenteert een aangepaste benadering voor het construeren van een muismodel van IA door ligatie van de PPA om additieve hemodynamische veranderingen te induceren in combinatie met hypertensie. MRA-beeldvorming en microscopische analyse toonden significante aneurysmatische veranderingen aan in de cirkel van Willis. De pathologische veranderingen die in dit model worden waargenomen, komen overeen met die in menselijke monsters. Dit muismodel kan dienen als een waardevol hulpmi...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het manuscript is gelezen en goedgekeurd door alle genoemde auteurs, en er zijn geen andere personen die aan de criteria voor auteurschap voldeden, maar niet worden vermeld. De auteurs hebben geen belangenconflicten in verband met het manuscript en er is geen significante financiële steun voor dit werk geweest die de uitkomst ervan zou kunnen hebben beïnvloed. De financiers waren niet betrokken bij het verzamelen van gegevens, data-analyse of het schrijven van papers. Het manuscript is niet eerder online of in gedrukte vorm gepubliceerd, inclusief tijdschriften, websites of blogs.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie werd ondersteund door de National Facility for Translational Medicine (Shanghai TMSK-2021-147), het Shanghai Renji Hospital Research Project (RJTJ-QT-007) en de China Postdoctoral Science Foundation (certificaatnummer: 2024M760658).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
7.0 T magnetische resonantie angiografieBrukerBioSpec 70/20 
C57BL/6 muizenCharles River Laboratoriesgeslacht: mannelijk
CD86 antilichaamCST91882
Elastic Van Gieson (EVG) kleurstofSolarbioG1597
MassonSolarbioG1340
Micro pincetShanghai Jinzhong Instrument Company
MicrofilFlow Tech Inc.MV-120
Nagelanesthesieverrichting RWDR500
Stereo microscoopShanghai Optical Instrument CompanyXYH-6B
HechtdraadShanghai Jinhuan Medical Company6-0, 8-0

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Vlak, M. H., Algra, A., Brandenburg, R., Rinkel, G. J. Prevalence of unruptured intracranial aneurysms, with emphasis on sex, age, comorbidity, country, and time period: A systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol. 10 (7), 626-636 (2011).
  2. Turjman, A. S., Turjman, F., Edelman, E. R. Role of fluid dynamics and inflammation in intracranial aneurysm formation. Circulation. 129 (3), 373-382 (2014).
  3. Shikata, F., et al. Potential influences of gut microbiota on the formation of intracranial aneurysm. Hypertension. 73 (2), 491-496 (2019).
  4. Penn, D. L., Komotar, R. J., Sander Connolly, E. Hemodynamic mechanisms underlying cerebral aneurysm pathogenesis. J Clin Neurosci. 18 (11), 1435-1438 (2011).
  5. Vlak, M. H., Rinkel, G. J., Greebe, P., Algra, A. Independent risk factors for intracranial aneurysms and their joint effect: A case-control study. Stroke. 44 (4), 984-987 (2013).
  6. Alfano, J., et al. Intracranial aneurysms occur more frequently at bifurcation sites that typically experience higher hemodynamic stresses. Neurosurgery. 73 (3), 497-505 (2013).
  7. Idil Soylu, A., Ozturk, M., Akan, H. Can vessel diameters, diameter ratios, and vessel angles predict the development of anterior communicating artery aneurysms: A morphological analysis. J Clin Neurosci. 68, 250-255 (2019).
  8. Starke, R. M., et al. Critical role of TNF-alpha in cerebral aneurysm formation and progression to rupture. J Neuroinflammation. 11, 77(2014).
  9. Vrselja, Z., Brkic, H., Mrdenovic, S., Radic, R., Curic, G. Function of circle of Willis. J Cereb Blood Flow Metab. 34 (4), 578-584 (2014).
  10. Azedi, F., et al. Intra-arterial drug delivery to the ischemic brain in rat middle cerebral artery occlusion model. Bio Protoc. 9 (23), e3438(2019).
  11. Yoshimura, S., et al. Reliable infarction of the middle cerebral artery territory in C57BL/6 mice using pterygopalatine artery ligation and filament optimization - The PURE-MCAo model. J Cereb Blood Flow Metab. , (2024).
  12. Nuki, Y., et al. Elastase-induced intracranial aneurysms in hypertensive mice. Hypertension. 54 (6), 1337-1344 (2009).
  13. Tada, Y., et al. Roles of hypertension in the rupture of intracranial aneurysms. Stroke. 45 (2), 579-586 (2014).
  14. Eldawoody, H., et al. Simplified experimental cerebral aneurysm model in rats: Comprehensive evaluation of induced aneurysms and arterial changes in the circle of Willis. Brain Res. 1300, 159-168 (2009).
  15. Hosaka, K., Downes, D. P., Nowicki, K. W., Hoh, B. L. Modified murine intracranial aneurysm model: aneurysm formation and rupture by elastase and hypertension. J Neurointerv Surg. 6 (6), 474-479 (2014).
  16. Furukawa, H., et al. Mast cell promotes the development of intracranial aneurysm rupture. Stroke. 51 (11), 3332-3339 (2020).
  17. Dungan, C. M., et al. Deletion of SA beta-Gal+ cells using senolytics improves muscle regeneration in old mice. Aging Cell. 21 (1), e13528(2022).
  18. Miyamoto, T., et al. Site-specific elevation of interleukin-1beta and matrix metalloproteinase-9 in the Willis circle by hemodynamic changes is associated with rupture in a novel rat cerebral aneurysm model. J Cereb Blood Flow Metab. 37 (8), 2795-2805 (2017).
  19. Xu, C., et al. CD147 monoclonal antibody attenuates abdominal aortic aneurysm formation in angiotensin II-Infused apoE(-/-) mice. Int Immunopharmacol. 122, 110526(2023).
  20. Taube, J. M., et al. Multi-institutional TSA-amplified multiplexed immunofluorescence reproducibility evaluation (MITRE) study. J Immunother Cancer. 9 (7), e002197(2021).
  21. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: Pathology and mechanisms. Acta Neuropathol. 123 (6), 773-786 (2012).
  22. Cai, J., He, C., Yuan, F., Chen, L., Ling, F. A novel haemodynamic cerebral aneurysm model of rats with normal blood pressure. J Clin Neurosci. 19 (1), 135-138 (2012).
  23. Arnaout, O. M., et al. De novo large fusiform posterior circulation intracranial aneurysm presenting with subarachnoid hemorrhage 7 years after therapeutic internal carotid artery occlusion: case report and review of the literature. Neurosurgery. 71 (3), E764-E771 (2012).
  24. Nagata, I., Handa, H., Hashimoto, N., Hazama, F. Experimentally induced cerebral aneurysms in rats: Part VI. Hypertension. Surg Neurol. 14 (6), 477-479 (1980).
  25. Aoki, T., Kataoka, H., Morimoto, M., Nozaki, K., Hashimoto, N. Macrophage-derived matrix metalloproteinase-2 and -9 promote the progression of cerebral aneurysms in rats. Stroke. 38 (1), 162-169 (2007).
  26. Grunwald, I. Q., et al. An experimental aneurysm model: a training model for neurointerventionalists. Interv Neuroradiol. 12 (1), 17-24 (2006).
  27. Brinjikji, W., Ding, Y. H., Kallmes, D. F., Kadirvel, R. From bench to bedside: Utility of the rabbit elastase aneurysm model in preclinical studies of intracranial aneurysm treatment. J Neurointerv Surg. 8 (5), 521-525 (2016).
  28. Adibi, A., Eesa, M., Wong, J. H., Sen, A., Mitha, A. P. Combined endovascular coiling and intra-aneurysmal allogeneic mesenchymal stromal cell therapy for intracranial aneurysms in a rabbit model: A proof-of-concept study. J Neurointerv Surg. 9 (7), 707-712 (2017).
  29. Liao, B. Y., Zhang, J. Evolutionary conservation of expression profiles between human and mouse orthologous genes. Mol Biol Evol. 23 (3), 530-540 (2006).
  30. Han, Y., et al. Axl promotes intracranial aneurysm rupture by regulating macrophage polarization toward M1 via STAT1/HIF-1alpha. Front Immunol. 14, 1158758(2023).
  31. Wang, S., et al. Rabbit aneurysm models mimic histologic wall types identified in human intracranial aneurysms. J Neurointerv Surg. 10 (4), 411-415 (2018).
  32. Nowicki, K. W., Hosaka, K., Walch, F. J., Scott, E. W., Hoh, B. L. M1 macrophages are required for murine cerebral aneurysm formation. J Neurointerv Surg. 10 (1), 93-97 (2018).
  33. Shi, Y., et al. Nrf-2 signaling inhibits intracranial aneurysm formation and progression by modulating vascular smooth muscle cell phenotype and function. J Neuroinflammation. 16 (1), 185(2019).
  34. Morimoto, M., et al. Mouse model of cerebral aneurysm: experimental induction by renal hypertension and local hemodynamic changes. Stroke. 33 (7), 1911-1915 (2002).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Inductie van hypertensieprocessus pterygopalatinus slagadermagnetische resonantie angiografieimmunohistochemische kleuringinterne elastische laminaM1 macrofagenpathologische analyse
Video binnenkort beschikbaar

Gerelateerde artikelen