Methodenartikel

Opstelling en evaluatie van een Candida albicans wateroplosbaar extract-geïnduceerd muizenmodel van met de ziekte van Kawasaki geassocieerde coronaire arteritis

543 weergaven

⸱

DOI:

10.3791/69041

⸱

7 november 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Laboratory, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 2Department of Anesthesiology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Pathology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 44Department of Pediatrics, Huai'an First People's Hospital, Huai'an Clinical College of Xuzhou Medical University, 5Department of Pediatrics, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University

In dit artikel

Samenvatting

Het CAWS-geïnduceerde muismodel simuleert effectief de progressie van de ziekte van Kawasaki van acute ontsteking naar chronische fibrose, onthult belangrijke pathologische en immunopathologische kenmerken en kan de ontwikkeling van gerichte therapeutische strategieën voor de ziekte van Kawasaki vergemakkelijken.

Samenvatting

De ziekte van Kawasaki (KD) is een systemische vasculitis die voornamelijk kinderen treft, waarbij laesies van de kransslagader de ernstigste complicatie zijn. In deze studie werd een geoptimaliseerd KD-muismodel opgesteld met behulp van het in water oplosbare extract van Candida albicans (CAWS). Myocardiale ontsteking en gerelateerde pathologische veranderingen werden geëvalueerd met behulp van HE-kleuring en Masson-trichrome kleuring. De immunofluorescentietechniek detecteerde de infiltratie van immuuncellen in hartweefsel. De expressie en lokalisatie van VDAC1-eiwit in myocardweefsel werden gedetecteerd door immunohistochemie. In vitro werd een fagocytisch model opgesteld door RAW264.7-macrofagen samen te kweken met sporen van Candida albicans , en de vorming en functie van autofagolysosomen werden beoordeeld met behulp van LC3-immunofluorescentiekleuring en een Lyso-Tracker Red-sonde. Door middel van dosisscreening werd vastgesteld dat 8 mg de optimale modelleringsdosis was voor het induceren van kransslagaderontsteking, met een matig sterftecijfer bij deze dosis. HE-kleuring toonde aan dat CAWS-injectie stabiel kransslagaderlaesies induceerde die consistent waren met de kenmerken van de menselijke ziekte van Kawasaki bij muizen. Masson-kleuring bevestigde dat er een significante afzetting van collageenvezels was rond de kransslagaders en aorta in de CAWS-groep van muizen, die nauw samenviel met het ontstekingsgebied, en een statistisch significant verschil werd waargenomen ten opzichte van de controlegroep na 14 dagen (p < 0,001). Immunofluorescentie toonde aan dat op de 14e dag van modellering de infiltratie van meerdere immuuncellen in het hartweefsel van de CAWS-groep significant was toegenomen (p < 0,001). De immunohistochemische resultaten toonden aan dat op de 28e dag van modellering de expressie van het VDAC1-eiwit in het myocardweefsel van de CAWS-groep significant was opgereguleerd (p < 0,001). In vitro-experimenten hebben aangetoond dat bij macrofagen die zijn geïnfecteerd met Candida albicans-sporen , de vorming van autofagolysosomen in het vroege stadium toeneemt, terwijl de autofagische stroom in het latere stadium wordt geblokkeerd, wat wijst op een functionele stoornis.

Inleiding

De ziekte van Kawasaki (KD), een vorm van mucocutaan lymfekliersyndroom, is een auto-immuunziekte die voorkomt bij kinderen jonger dan 5 jaar en gepaard gaat met febriele vasculitis 1,2,3. Studies tonen aan dat onbehandelde of behandelingskuren van meer dan 10 dagen van ernstige KD vatbaar zijn voor het veroorzaken van ernstige cardiovasculaire complicaties, voornamelijk waaronder coronaire aneurysma's en kransslagaderstenose 4,5. Het scheuren van coronaire aneurysma's kan leiden tot cardiogene shock of zelfs plotselinge dood, wat de belangrijkste oorzaak is van verworven hartaandoeningen bij kinderen 6,7. Hoewel de toepassing van intraveneus immunoglobuline de prognose aanzienlijk heeft verbeterd, blijven de etiologie en pathogenese onduidelijk, wat de ontwikkeling van gerichte therapeutische strategieën beperkt 8,9. Daarom is het opstellen van diermodellen die de kenmerken van menselijke ziekten nauwkeurig kunnen simuleren, een dringende behoefte geworden voor huidig onderzoek.

Momenteel is een groot obstakel in het onderzoek naar de ziekte van Kawasaki de afwezigheid van goed gekarakteriseerde diermodellen die de pathologie van menselijke ziekten volledig samenvatten. Van de verschillende modellen die nu zijn ontwikkeld, is het vasculitismodel geïnduceerd door Lactobacillus casei celwandextract (LCWE) een relatief volwassen systeem, en dit model kan coronaire arteritis veroorzaken. Het wordt veel gebruikt om het mechanisme van immuunontregeling en specifieke cytokines in KD-achtige vasculitiden te bestuderen10,11. Het vasculitismodel geïnduceerd door het in water oplosbare extract van Candida albicans (CAWS) heeft ook veel aandacht getrokken vanwege de grote gelijkenis met de pathologische kenmerken van de menselijke ziekte van Kawasaki12,13. Na systematische optimalisatie en verbetering door meerdere onderzoeksteams heeft het CAWS-geïnduceerde model zich ontwikkeld tot een belangrijk hulpmiddel voor onderzoek naar de ziekte van Kawasaki14. Hoewel CAWS coronaire hartontsteking kan veroorzaken via intraperitoneale injectie, heeft het beperkingen omdat het het exacte pathologische proces van menselijke KD-vasculitis niet volledig kan reproduceren. Er werden bijvoorbeeld geen neutrofielen gevonden in de late pathologie van humaan KD15, maar neutrofieleninfiltratie vond nog steeds plaats in dit model tot 16 weken na CAWS-injectie16. Bovendien is het mechanisme van vasculitis veroorzaakt door CAWS op dit moment niet volledig opgehelderd, wat het diepgaande begrip en de toepassing van model9 beperkt. Deze studie heeft tot doel een gestandaardiseerd diermodel van KD op te zetten door het inductieprotocol van CAWS te optimaliseren, het ziektemechanisme op te helderen en de ontwikkeling van gerichte therapieën te vergemakkelijken.

Deze studie maakte gebruik van CAWS om een meer gestandaardiseerd diermodel van de ziekte van Kawasaki op te stellen. Door middel van systematische experimenten met dosisoptimalisatie werd vastgesteld dat intraperitoneale injectie van 8 mg per dag gedurende vijf opeenvolgende dagen het optimale toedieningsschema was. Dit regime kan stabiel laesies van de kransslagader induceren met behoud van een hoog overlevingspercentage bij dieren. Daarnaast hebben we de rol van mitochondriale disfunctie bij de vorming van fibrose tijdens de chronische fase van KD verder onderzocht, met een focus op het mogelijke mechanisme van spanningsafhankelijk anionkanaal 1 (VDAC1), een belangrijk eiwit dat mitochondriale apoptose reguleert, tijdens de overgang van ontsteking naar fibrose17. Het is vermeldenswaard dat, door middel van autofagosoom/lysosoom co-lokalisatieanalyse in deze studie, een abnormale autofagiefunctie werd waargenomen in dit model. Dit geoptimaliseerde model biedt een belangrijk hulpmiddel voor het systematisch bestuderen van de pathogenese van kransslagaderlaesies bij de ziekte van Kawasaki en het evalueren van nieuwe behandelingsstrategieën.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle onderzoeksexperimenten met diergegevens werden goedgekeurd door de ethische commissie van het Affiliated Huai'an No.1 People's Hospital van de Nanjing Medical University (KY-2024-250-01). De gebruikte reagentia en de gebruikte apparatuur staan vermeld in de materiaaltabel.

1. Voorbereiding van CAWS

  1. Inoculeer Candida albicans in Sabouraud dextrosebouillon volgens het vastgestelde protocol van Duong et al.18. Kweek de geënte bouillon vervolgens anaëroob bij 37 °C gedurende 48 uur in een afgesloten anaërobe kamer met een gasmengsel.
    OPMERKING: Om de steriliteit van het kweekmedium te garanderen, moet de anaërobe kweektoestand bij 37 °C strikt worden gecontroleerd om besmetting door diverse bacteriën te voorkomen.
  2. Herhaaldelijk spoelen met C-beperkend medium en 48 uur bij 37 °C incuberen met een toerental van 4,5 x g.
  3. Voeg een gelijke hoeveelheid watervrije ethanol toe en laat het een nacht bij 4 °C staan.
  4. Centrifugeer bij 4,5 x g gedurende 15 minuten bij 4 °C, verwijder het supernatant, voeg een gelijke hoeveelheid watervrije ethanol toe aan het neerslag en laat het een nacht bij 4 °C staan.
  5. Gooi na het centrifugeren het supernatant weg, voeg 50 ml aceton toe aan het neerslag, centrifugeer en droog het neerslag. Los het neerslag op in steriele normale zoutoplossing voor later gebruik.

2. Het construeren van een muismodel van de ziekte van Kawasaki

  1. Selecteer tachtig mannelijke C57BL/6-muizen van SPF-kwaliteit in de leeftijd van 4-6 weken en huisvest ze onder gecontroleerde omstandigheden met vrije toegang tot voedsel en water.
    OPMERKING: Om de mogelijke interferentie van fluctuaties in de oestrogeenspiegel op immuun- en ontstekingsreacties te minimaliseren, werden alleen mannelijke muizen gebruikt in deze voorlopige modelopstelling en karakteriseringsstudie19.
  2. Verdeel de muizen gelijkmatig in 4 groepen volgens de methode met willekeurige getallentabellen, inclusief 3 CAWS-injectiegroepen met verschillende doses (4 mg, 8 mg, 12 mg) en 1 controlegroep met normale zoutoplossing, met 20 muizen in elke groep.
  3. Bereid CAWS-poeder in drie concentraties van 40 mg/ml, 80 mg/ml en 120 mg/ml met behulp van steriele normale zoutoplossing (0,9% NaCl). Injecteer de experimentele groep 's ochtends van de 1e tot de 5e dag van het experiment met 0,1 ml CAWS en dien volgens hetzelfde schema een gelijk volume normale zoutoplossing toe aan de controlegroep.
    OPMERKING: Intraperitoneale injectie werd uitgevoerd met behulp van een insulinespuit van 1 ml. Plaats de muis tijdens het gebruik met het hoofd lager en de staart hoger om schade aan organen zoals de dikke en dunne darm te voorkomen wanneer de spuit wordt ingebracht.
  4. Gebruik elke dag om 9 uur 's ochtends een elektronische weegschaal om tegelijkertijd het resterende voer in de feeder te wegen en de 24-uurs voedselconsumptie voor elke kooi muizen te berekenen.
  5. Selecteer en offer op de 3e, 7e, 14e en 28e dag na de laatste injectie willekeurig 3 muizen uit elke groep op elk tijdstip.
  6. Plaats de muizen in een gesloten kamer die is voorgevuld met kamerlucht. Breng gecomprimeerde CO2 toe met een debiet van 30% van het kamervolume per minuut. Na 5 minuten werd cervicale dislocatie uitgevoerd om het overlijden te bevestigen.
  7. Verzamel en weeg hartmonsters. Observeer inflammatoire laesies van het hart en de bloedvaten door HE-kleuring.

3. HE kleurings- en sorteernormen

  1. Het hart en de aortaboog (ongeveer 3 mm × 3 mm) werden snel geïsoleerd. Voer een mediane sternotomie uit volgens de beschreven methode20. Scheid snel het hart van de aortaboog (ongeveer 3 mm × 3 mm). De verzamelde weefsels werden gedurende 24 uur gefixeerd in 10% neutraal gebufferde formaline.
  2. Na fixatie dehydrateer de weefsels door een graduele ethanolreeks (70% ethanol gedurende 1 uur, 80% ethanol gedurende 1 uur, 95% ethanol gedurende 1 uur en 100% ethanol gedurende 1 uur), helder in xyleen en ingebed in paraffine. Verdeel ten slotte de blokken in doorlopende plakjes van 5 μm.
  3. Voor H&E-kleuring, kleurt u de secties gedurende 5 minuten met hematoxyline, spoelt u ze 10 minuten af met stromend water, gaat u 2 minuten tegen met eosine en gaat u vervolgens verder met uitdroging en montage21.
    OPMERKING: Afhankelijk van de mate van vasculair intimaal letsel wordt het ingedeeld in drie graden: Graad I wordt voornamelijk gekenmerkt door endotheliale zwelling en neutrofielenaggregatie; Graad II manifesteert zich als degeneratie van gladde spieren, infiltratie van ontstekingscellen en organelschade; Graad III presenteert zich met ernstige laesies zoals endotheliale necrose en uitscheiding, en fibrineafzetting.

4. Masson trichrome kleuring

  1. Na fixatie dehydrateer de weefselmonsters door middel van een gesorteerde ethanolreeks, helder in xyleen en ingebed in paraffine.
  2. Hydrateer de secties na het ontwaxen door middel van een gegradueerde ethanolreeks tot gedestilleerd water ter voorbereiding op het kleuren.
  3. Kleur de kernen gedurende 5 minuten met het ijzerhematoxyline van Weigert, spoel grondig af onder stromend water en kleur vervolgens het cytoplasma gedurende 5 minuten met Lichun Red acid fuchsin.
  4. Differentieer met 1% fosfomolybdinezuur gedurende 1 minuut en kleur vervolgens de collageenvezels direct met anilineblauw gedurende 3 minuten. Spoel snel af met 1% ijsazijn.
    OPMERKING: Controleer strikt de timing van de differentiatiestap om de specificiteit van de kleuring te garanderen.
  5. Na dehydratatie met ethanol en xyleen, transparant wordend, sluit u de neutrale film af.
  6. Spoel de bevlekte delen af onder stromend water om overtollige kleurstof te verwijderen.
  7. Dehydrateer de secties door een gegradeerde ethanolreeks, helder in xyleen en monteer met neutrale gom.
  8. Bekijk de secties onder een lichtmicroscoop met een consistente vergroting. Collageenvezels moeten blauw lijken, spiervezels en cytoplasma rood en kernen diepblauw.

5. Immunofluorescentie kleuring

  1. Fixeer cel- of weefselsecties en blokkeer met 5% BSA gedurende 1 uur om niet-specifieke binding te verminderen.
  2. Gebruik normaal serum van dezelfde soort als het secundaire antilichaam, verdun het met PBS in een verhouding van 1:10 en laat het op het monster vallen. Sluit het 30 minuten af op kamertemperatuur. Spoel na het afdichten voorzichtig twee keer af met PBS.
  3. Incubeer de coupes met het primaire antilichaam een nacht bij 4 °C. Voeg na het wassen met PBS het fluorescerende secundaire antilichaam toe en incubeer gedurende 1 uur in het donker.
  4. Kleuring van de kern met DAPI, afdichting met anti-doofmiddel en observatie onder confocale microscopie.

6. Immunohistochemie

  1. Na het verwijderen van was en hydratatie van paraffinesecties, voert u antigeenreparatie uit en blokkeert u de endogene peroxidase.
  2. Antilichaamincubatie en kleurontwikkeling: Blokkeer eerst met normaal serum, incubeer vervolgens het primaire antilichaam en het HRP-gelabelde secundaire antilichaam in volgorde, en ten slotte DAB-kleurontwikkeling. Controleer de reactiegraad onder een microscoop.
  3. Kleurt de celkernen opnieuw met hematoxyline. Sluit na uitdroging en transparantie de platen af en observeer het bruingele positieve signaal onder een microscoop.
    OPMERKING: Het experiment moet controles instellen en de voorwaarden voor herstel en kleurontwikkeling strikt controleren.

7. Detectie van autolysosomen

  1. Co-cultuur RAW264.7 macrofagen met Candida albicans sporen in een geschikte verhouding (10:1), en incubeer bij 37 °C en 5% CO2 gedurende 4 uur, 8 uur, 12 uur, 16 uur, 20 uur, 24 uur, 28 uur, 32 uur, 36 uur, 40 uur, 44 uur en 48 uur om een fagocytisch model op te stellen.
  2. Was drie keer met voorgekoelde PBS om de niet-fagocytische sporen te verwijderen.
  3. Blokkeer eerst de monsters met 5% BSA gedurende 30 minuten. Incubeer vervolgens achtereenvolgens met het primaire antilichaam tegen LC3 (verdunning 1:200) bij kamertemperatuur gedurende 1 uur, gevolgd door het Alexa Fluor 488-gelabelde secundaire antilichaam bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten.
  4. Voeg de Lyso-Tracker Red lysosoomsonde rechtstreeks toe aan de cellen om de lysosomale lokalisatie te visualiseren. Contra-indicator ten slotte de kernen met DAPI (1 μg/ml) gedurende 5 minuten.
    OPMERKING: Het gehele operatieproces moet in het donker worden uitgevoerd om ervoor te zorgen dat de incubatietijd en concentratie van het antilichaam nauwkeurig worden gecontroleerd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

In eerste instantie evalueerden we systematisch de myocardiale pathologische veranderingen veroorzaakt door verschillende doses CAWS bij muizen. Er werden geen sterfgevallen waargenomen in de PBS-controlegroep, de 4 mg CAWS-groep en de 8 mg CAWS-groep (n=20 in elke groep). Daarentegen was de ontstekingsreactie in de groep van 4 mg mild en voldeed niet aan de modelleringsvereisten. Het sterftecijfer was hoger in de 12 mg CAWS-groep (9/20, 45%) en sterfgeva...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Coronaire arterie-aneurysma's (CAA) en myocardiale fibrose bij KD zijn de belangrijkste oorzaken van cardiovasculaire gebeurtenissen op de lange termijn. Ondanks de vooruitgang die is geboekt bij de behandeling in de acute fase, ontwikkelt ongeveer 5% van de patiënten nog steeds aanhoudende CAA28,29. Het mechanisme van deze vertraagde pathologische verandering is nog steeds onduidelijk en er is dringend behoefte aan diermodellen ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dank aan de teamleden voor hun steun en bijdrage aan dit experiment. Het onderzoek werd ondersteund door de volgende projecten: Algemeen project van het Ontwikkelingsfonds van het Xuzhou Medical University Affiliated Hospital (XYFM202234) en Natural Science Specialized Soft Project over het leven en de gezondheid van Huai'an City (2023KX0006).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
a goat secondary antibody to Rabbit IgG Alexa Fluor 488abcamab15081a goat secondary antibody to Rabbit IgG Alexa Fluor 488
Anaërobe kamerThermo ScientificThermo ScientificAnaërobe kamer
Anilin blauwSolarbioG3668Anilin blauw
anti-LC3abcamab192890het primaire antilichaam tegen LC3
Biologische veiligheidskastThermo Scientific1500Biologische veiligheidskast
BSASolarbioA8020BSA
Candida albicans (stam)NBRC1385Candida albicans (stam)
CD3eBD Bioscience561827FITC Hamster Anti-Mouse CD3e(145-2C11)
CD86BD Bioscience105013CD86
CD8aBD Bioscience100713CD8a
CelkweekincubatorThermo Scientific311Celkweekincubator
CentrifugeThermo ScientificST4R PlusCentrifuge
Confocale microscoopOlympusIX73Confocale microscoop
DAPIBeyotime Biotechnology P0131-25mlDAPI
DMEMGibco11965126DMEM
InbeddingsmachineP.S.J MEDICALBM450AInbeddingsmachine
EosineSolarbio G1100Eosine
F4/80BD Bioscience123109F4/80
FBSGibco16000044FBS
FormaldehydeSolarbio P1110Formaldehyde
Volautomatische weefselontwateringsmachineLeica BiosystemsASP3005Volautomatische weefselontwateringsmachine
Glas microscoopglazenCitotest250124A1Glas microscoopglazen
H&E kleurstofBeyotime Biotechnology C0105MH&E kleurstof
IHC KitAbsin Biotechnologyabs996-5mlIHC Kit
LC3 sondeBeyotime Biotechnology C3018MLC3 sonde
Low Profile Microtome BladesThermo Fisher3052835Low Profile Microtome Blades
Lysosoom sondeBeyotime Biotechnology C1046Lysosoom sonde
MarkerpenDeliSK109Markerpen
Masson kleurstofBeyotime Biotechnology C0189MMasson kleurstof
MicrotoomLeica BiosystemsHistoCore BIOCUTMicrotoom
Neutrale gomSolarbi G8590Neutrale gom
NK1.1BD Bioscience561117NK1.1
Optische microscoopNikonNikonOptische microscoop
ParaffineSolarbio YA0012Paraffine
ParaffinewasSolarbioYA0012Paraffinewas
PBSSolarbioP1020PBS
FosfomolybdinezuurSolarbioG3472Fosfomolybdinezuur
VDAC1Abcamab34726Anti-VDAC1

Referenties

  1. Jone, P. -N., et al. Update on diagnosis and management of Kawasaki disease: A scientific statement from the American Heart Association. Circulation. 150 (23), e481-e500 (2024).
  2. Goel, A. R., Yalcindag, A. An update on Kawasaki disease. Curr Rheumatol Rep. 27 (1), 4(2024).
  3. Sapountzi, E., et al. disease: An update on genetics and pathophysiology. Genet Test Mol Biomarkers. 28 (9), 373-383 (2024).
  4. Beltran, J. V. B., Lin, F. -P., Chang, C. -L., Ko, T. -M. Single-cell meta-analysis of neutrophil activation in Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children reveals potential shared immunological drivers. Circulation. 148 (22), 1778-1796 (2023).
  5. Assempoor, R., et al. Different antithrombotic strategies to prevent cardiovascular complications in Kawasaki patients: A systematic review and meta-analysis. BMC Pediatr. 24 (1), 738(2024).
  6. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children: Common inflammatory pathways of two distinct diseases. Rheum Dis Clin North Am. 49 (3), 647-659 (2023).
  7. Li, W., et al. Impact of platelet glycoprotein Ia/IIa C807T gene polymorphisms on coronary artery aneurysms of KD patients. Cardiol Res Pract. 2021, 4895793(2021).
  8. Gorelik, M., et al. American College of Rheumatology/Vasculitis Foundation guideline for the management of Kawasaki disease. Arthritis Care Res (Hoboken). 74 (4), 538-548 (2022).
  9. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease: Pathophysiology and insights from mouse models. Nat Rev Rheumatol. 16 (7), 391-405 (2020).
  10. Li, R., et al. Lactobacillus casei cell wall extract and production of galactose-deficient IgA1 in a humanized IGHA1 mouse model. J Am Soc Nephrol. 36 (1), 60-72 (2025).
  11. Wei, K., et al. Mitochondrial DNA release via the mitochondrial permeability transition pore activates the cGAS-STING pathway, exacerbating inflammation in acute Kawasaki disease. Cell Commun Signal. 22 (1), 328(2024).
  12. Xu, H., et al. Characterization of inflammatory factors and T cell subpopulations in a murine model of Kawasaki disease induced by Candida albicans cell wall extracts (CAWS). Med Sci Monit. 28, e936355(2022).
  13. Miyabe, C., Miyabe, Y., Miyata, R., Ishiguro, N. Pathogens in vasculitis: Is it really idiopathic. JMA J. 4 (3), 216-224 (2021).
  14. Sato, W., Ishibashi, K. -I., Yamanaka, D., Adachi, Y., Ohno, N. Effects of natural and chemically defined nutrients on Candida albicans water-soluble fraction (CAWS) vasculitis in mice. Med Mycol J. 58 (2), E47-E62 (2017).
  15. Takahashi, K., Oharaseki, T., Yokouchi, Y. Histopathological aspects of cardiovascular lesions in Kawasaki disease. Int J Rheum Dis. 21 (1), 31-35 (2018).
  16. Lombardi Pereira, A. P., et al. Long-term cardiovascular inflammation and fibrosis in a murine model of vasculitis induced by Lactobacillus casei cell wall extract. Front Immunol. 15, 1411979(2024).
  17. Tian, G., et al. Voltage-dependent anion channel 1 (VDAC1) overexpression alleviates cardiac fibroblast activation in cardiac fibrosis via regulating fatty acid metabolism. Redox Biol. 67, 102907(2023).
  18. Duong, T. T., Silverman, E. D., Bissessar, M. V., Yeung, R. S. M. Superantigenic activity is responsible for induction of coronary arteritis in mice: An animal model of Kawasaki disease. Int Immunol. 15 (1), 79-89 (2003).
  19. Miller, L. R., et al. Considering sex as a biological variable in preclinical research. FASEB J. 31 (1), 29-34 (2017).
  20. Miyamoto, H. D., et al. Iron overload via heme degradation in the endoplasmic reticulum triggers ferroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury. JACC Basic Transl Sci. 7 (8), 800-819 (2022).
  21. Ding, J., et al. Myeloid-specific blockade of Notch signaling ameliorates nonalcoholic fatty liver disease in mice. Int J Biol Sci. 19 (6), 1941-1954 (2023).
  22. Xie, Z., et al. Atlas of circulating immune cells in Kawasaki disease. Int Immunopharmacol. 102, 108396(2022).
  23. Menikou, S., Langford, P. R., Levin, M. Kawasaki disease: The role of immune complexes revisited. Front Immunol. 10, 1156(2019).
  24. Xu, S., et al. Ketogenic diets inhibit mitochondrial biogenesis and induce cardiac fibrosis. Signal Transduct Target Ther. 6 (1), 54(2021).
  25. Peng, F., et al. 2-APQC, a small-molecule activator of Sirtuin-3 (SIRT3), alleviates myocardial hypertrophy and fibrosis by regulating mitochondrial homeostasis. Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 133(2024).
  26. Lin, L. -C., et al. Mitochondrial quality control in cardiac fibrosis: Epigenetic mechanisms and therapeutic strategies. Metabolism. 145, 155626(2023).
  27. Yuan, M., et al. IP3R1/GRP75/VDAC1 complex mediates endoplasmic reticulum stress-mitochondrial oxidative stress in diabetic atrial remodeling. Redox Biol. 52, 102289(2022).
  28. Kim, J. -J., et al. Sex-specific susceptibility loci associated with coronary artery aneurysms in patients with Kawasaki disease. Korean Circ J. 54 (9), 577-586 (2024).
  29. Anzai, F., et al. Crucial role of NLRP3 inflammasome in a murine model of Kawasaki disease. J Mol Cell Cardiol. 138, 185-196 (2020).
  30. Ohashi, R., et al. Characterization of a murine model with arteritis induced by Nod1 ligand, FK565: A comparative study with a CAWS-induced model. Mod Rheumatol. 27 (6), 1024-1030 (2017).
  31. Wang, Z., et al. Single-cell RNA sequencing of peripheral blood mononuclear cells from acute Kawasaki disease patients. Nat Commun. 12 (1), 5444(2021).
  32. Yang, J., et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 16 (1), 1160(2025).
  33. Niu, B., et al. Protecting mitochondria via inhibiting VDAC1 oligomerization alleviates ferroptosis in acetaminophen-induced acute liver injury. Cell Biol Toxicol. 38 (3), 505-530 (2022).
  34. Shoshan-Barmatz, V., Krelin, Y., Chen, Q. VDAC1 as a player in mitochondria-mediated apoptosis and target for modulating apoptosis. Curr Med Chem. 24 (40), 4435-4446 (2017).
  35. Ham, S. J., et al. Decision between mitophagy and apoptosis by Parkin via VDAC1 ubiquitination. Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (8), 4281-4291 (2020).
  36. Prabhu, S. D., Frangogiannis, N. G. The biological basis for cardiac repair after myocardial infarction: From inflammation to fibrosis. Circ Res. 119 (1), 91-112 (2016).
  37. Lin, M., et al. MCM8-mediated mitophagy protects vascular health in response to nitric oxide signaling in a mouse model of Kawasaki disease. Nat Cardiovasc Res. 2 (8), 778-792 (2023).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Candida Albicans extractcoronaire arterielaesiesmyocardiale ontstekingHE kleuringMasson trichroomkleuringimmunofluorescentiekleuringVDAC1 expressie

Gerelateerde artikelen