Method Article

Een protocol voor het construeren van een muismodel van hypertensieve myocardiale fibrose met behulp van angiotensine II

DOI:

10.3791/69409

⸱

November 14th, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital, Southwest Medical University, 2Shenzhen Traditional Chinese Medicine Hospital, 3Guangdong-Macao In-Depth Cooperation Zone in Hengqin, Chinese Medicine Guangdong Laboratory (Hengqin Laboratory), 4State Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Syndrome, Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine, Guangdong Provincial Academy of Chinese Medical Sciences, The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, 5School of Pharmacy, Southwest Medical University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De continue infusie van angiotensine II (Ang II) via osmotische pompen is een van de klassieke methoden voor het construeren van diermodellen van hypertensieve myocardiale fibrose. Dit protocol optimaliseerde systematisch het proces van het construeren van dit model en werkte de belangrijkste punten van de implantatie, positionering en Ang II-concentratieinstelling van de osmotische pomp uit.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De continue infusie van angiotensine II (Ang II) via osmotische pompen is een veelgebruikte benadering voor het opstellen van diermodellen van hypertensieve myocardiale fibrose. Desalniettemin vertoont deze techniek bepaalde beperkingen in de huidige rapporten, zoals de instabiliteit van Ang II, onnauwkeurige plaatsing van de pomp en het ontbreken van een gestandaardiseerde procedure. De huidige rapporten over de methodologie voor de oprichting blijven relatief beperkt. Dit protocol heeft systematisch de opstelling van Ang II osmotische pomp-geïnduceerde hypertensieve myocardiale fibrosemodellen bij muizen geoptimaliseerd, inclusief de gestandaardiseerde bereiding van Ang II-oplossing, kalibratie van dosering, nauwkeurige subcutane implantatie van osmotische pompen en kwantitatieve normen voor modelevaluatie-indicatoren. Experimentele resultaten toonden aan dat Ang II osmotische pomp hypertensieve myocardiale fibrose induceerde bij muizen met hoge overlevingspercentages. Systolische bloeddruk (SBP) stabiliseerde zich op 160 mmHg na zeven dagen subcutane implantatie. De modelmuizen hadden significant verminderde linkerventrikel-ejectiefracties en verhoogde einddiastolische afmetingen van de linkerventrikel. Vergeleken met de groep met schijnchirurgie nam de afzetting van collageen in hypertensief myocardiaal interstitiële weefsel en perivasculaire gebieden toe. Deze studie, gebaseerd op een kleine steekproefomvang (n = 6), valideerde voorlopig de haalbaarheid van het opzetten van een muismodel van hypertensieve myocardiale fibrose met behulp van Ang II in combinatie met een osmotische pomp, en zette een kwantitatief fenotypeverificatiesysteem op.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Myocardiale fibrose (MF), een belangrijk pathologisch gevolg van hypertensie, wordt gekenmerkt door overmatige afzetting van collageenvezels in het beschadigde of gecomprimeerde myocardium. Het vertegenwoordigt een van de belangrijkste vormen van door hypertensie gemedieerde doelorgaanschade en draagt bij aan progressieve hartdisfunctie 1,2. Het opstellen van geschikte diermodellen is essentieel voor het bevorderen van mechanistisch onderzoek en het ontwikkelen van nieuwe therapeutische strategieën voor hypertensieve myocardiale fibrose. Angiotensine II (Ang II), een centrale ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle experimentele procedures werden uitgevoerd volgens de richtlijnen voor de verzorging en het gebruik van proefdieren van de National Institutes of Health en de experimentele protocollen werden goedgekeurd door de Animal Research Committee van de Southwest Medical University (goedkeuringsnummer SWMU2020317).

1. Bereiding van Ang II-oplossing en vullen van de osmotische pomp

  1. Selecteer 12 mannelijke C57BL/6J-muizen van SPF-kwaliteit (zie materiaaltabel) met een gewicht van 20 ± 1 g door dieren van 8 weken oud te selecteren op hun uniformiteit in de ontwikkeling....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Twaalf muizen werden subcutaan geïmplanteerd met osmotische pompen en overleefden. Modelgroep ontwikkelden allemaal hypertensie (n = 6). Zeven dagen na implantatie was de gemiddelde SBP in de modelgroep hoger dan 160 mmHg (Figuur 1A). Op dag 14, 21 en 28 bleef de SBP in de modelgroep consequent boven de 160 mmHg. Daarentegen handhaafde de groep voor schijnchirurgie gedurende het hele experiment normale SBP-waarden (ongeveer 90-110 mmHg) zonder significante v.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit protocol optimaliseerde de belangrijkste stappen die betrokken zijn bij de continue infusie van Ang II om hypertensieve myocardiale fibrose te induceren met behulp van een osmotische pomp en detailleerde de kritieke aspecten, zoals de implantatiepositionering van de osmotische pomp en de instelling van de Ang II-concentratie. De pomp van model 2004 werd gekozen voor de duur van 4 weken en de Ang II-dosis werd berekend op basis van de nominale infusiesnelheid, rekening houdend met min.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle auteurs verklaren dat dit manuscript geen belangenconflicten vertoont.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (82074378), het Project van de afdeling Wetenschap en Technologie van de provincie Sichuan (2022YFS0618), het Project van het Office of Science & Technology en het talentwerk van Luzhou (2023JYJ029), 2024 Traditional Chinese Medicine Guangdong Provincial Laboratory Project (HQCML-C-2024005), Shenzhen Science and Technology Program (JCYJ20230807094603007, JCYJ20240813152440051), Shenzhen Medical Research Fund (A2403028), Sichuan Medical Association Project (Q2025014) en het project van de Southwest Medical University (2024ZKZ007, 2024ZKY073, 2023ZYYQ04). De....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Ang IISigma-Aldrich CorporationSigma, A9525
Animal anesthesia machineShenzhen Reward Life Science Co., LtdR530
Animal ventilatorShenzhen Reward Life Science Co., LtdR415
GraphPad Prism GraphPad Software Inc.Version 9.0
Intelligent non-invasive blood pressure monitorNippon Soft Dragon Co., LtdSoftron, BP-98A
Light microscopeYijingtong Optical Technology (Shanghai) Co., LtdOLYMPUS, SZ61TR
Masson Tricolor Staining Solution and KitBeijing Soleibao Technology Co., LtdSolarbio, G1340
MiceChengdu Dossy Exprimental Animals CO., LtdC57BL/6J
Osmotic pumpsALZA CorporationAlzet,Model 2004
Ultrasound imaging systemsFUJIFILM VisualSonics Corporation, CanadaFUJIFILM, Vevo 3100

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhao, D., Liu, J., Wang, M., Zhang, X., Zhou, M. Epidemiology of cardiovascular disease in China: current features and implications. Nat Rev Cardiol. 16 (4), 203-212 (2019).
  2. Czubryt, M. P., Hale, T. M. Cardiac fibrosis: pathobiology and therapeutic targets. Cell Sign....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Hypertensive Myocardial FibrosisAngiotensin IIOsmotic PumpMouse ModelCollagen DepositionSubcutaneous ImplantationSystolic Blood PressureLeft Ventricular FunctionPhenotype VerificationModel Evaluation
Video Coming Soon

Related Articles