Dit protocol beschrijft een reproduceerbare methode voor het bereiden van mechanisch verwerkt SVF-verrijkt microvet uit autoloog vetweefsel en het injecteren in holte-type traumatische zachte weefseldefecten voor klinische reconstructie.
Method Article
Dit protocol beschrijft een reproduceerbare methode voor het bereiden van mechanisch verwerkt SVF-verrijkt microvet uit autoloog vetweefsel en het injecteren in holte-type traumatische zachte weefseldefecten voor klinische reconstructie.
Traumatische zachte weefseldefecten vormen aanzienlijke uitdagingen voor reconstructie door weefselverlies, verminderde vasculariteit en moeilijkheden om duurzame dekking te bereiken. Vetweefsel biedt een praktische autologe weefselbron, en mechanisch verwerkt stromale vasculaire fractie (SVF)-verrijkte microvet kan intraoperatief worden voorbereid zonder enzymatische vertering.
Deze studie presenteert een gestandaardiseerd klinisch protocol voor het oogsten van autoloog vetweefsel en het verwerken ervan tot SVF-verrijkte microvet voor injectie in holte-achtige traumatische zachte weefseldefecten. Vet wordt handmatig uit het dij of buik gewonnen onder lage negatieve druk, mechanisch gefragmenteerd door snijden en spuit-naar-spuit emulgeer, gefilterd om een uniforme microvetconsistentie te bereiken en gecentrifugeerd om de SVF-houdende fractie te isoleren. Het verwerkte microvet wordt in een meerlaags patroon door de wondholte geïnjecteerd. Postoperatieve beoordeling omvat seriële klinische evaluatie, fotografische documentatie en meting van wondverkleining tot epithelialisatie.
In een kleine cohort was de methode geassocieerd met progressieve wondcontractie en volledige epithelialisatie binnen ongeveer 4-8 weken, zonder grote complicaties. Hoewel de cellulaire samenstelling en levensvatbaarheid niet werden gekwantificeerd, bood de techniek een haalbare intraoperatieve benadering die geschikt was voor omgevingen zonder toegang tot enzymatische verwerking of laboratoriumfaciliteiten. Dit protocol biedt een praktische, minimaal gemanipuleerde methode om SVF-verrijkte microvet toe te dienen bij het behandelen van traumatische gaatjesafwijkingen en kan dienen als basis voor verdere gecontroleerde studies.
Traumatische holte-achtige zachte weefseldefecten blijven een grote reconstructieve uitdaging omdat ze weefselverlies, een verminderde lokale perfusie en een hoog risico op infectie en doodruimte combineren. Conventionele dekkingstechnieken, zoals split-thickness huidtransplantaties of flaptransfers, bieden in veel gevallen duurzame dekking. Ze worden echter vaak beperkt door morbiditeit op donorlocaties, technische complexiteit en variabele langetermijnuitkomsten, vooral in besmette of getekende bedden 1,2,3.
Vetweefsel is een overvloedige, gemakkelijk toegankelijke bron van een heterogene celpopulatie die wordt aangeduid als de stromale vasculaire fractie (SVF). SVF omvat mesenchymale stromale cellen, endotheliale voorlopers, pericyten en ondersteunende stromale elementen. Wanneer het in vetdeeltjes wordt vastgehouden, blijft de native extracellulaire context van SVF behouden tijdens het hanteren en de klinische toediening4. Klinisch gezien is gerapporteerd dat vettransplantaten verrijkt voor SVF (SVF-verrijkte microvet) de retentie van de transplantatie verbeteren en geassocieerd zijn met versnelde wonde-epithelialisatie bij verschillende indicaties 5,6,7.
Er bestaan twee hoofdstrategieën om SVF te verkrijgen via lipoaspiratie. Enzymatische vertering levert doorgaans hogere nucleaire celaantallen per volume-eenheid op, maar vereist speciale reagentia, laboratoriuminfrastructuur, langere verwerkingstijden en is in veel rechtsgebieden onderworpen aan regelgevende beperkingen 4,8. Daarentegen omvatten mechanische verwerkingsmethoden snijden, spuit-naar-spuit emulgatie, filtratie en het gebruik van gesloten mechanische systemen. Deze benaderingen maken snelle intraoperatieve bereiding van SVF-verrijkt microvet mogelijk met minimale manipulatie en kortere doorlooptijden 6,9,10,11. Recente mechanische systemen hebben verwerkingstijden van <15 minuten gerapporteerd en opbrengsten die in sommige series dichtbij die van enzymatische methoden liggen, hoewel het aantal gemeten cellen en levensvatbaarheid per apparaat en operatorkan variëren.
Ondanks de groeiende literatuur over mechanisch verwerkte SVF en over vettransplantatie bij chronische zweren en diabetische voetziekte, zijn gestandaardiseerde, reproduceerbare protocollen die specifiek gericht zijn op holte-type traumatische zachte weefseldefectenschaars 7,12. Gepubliceerde klinische rapporten behandelen vaak chronische zweren, diabetische wonden of esthetische vettransplantatie. Echter, slechts enkele bieden een intraoperatief stapsgewijs protocol dat oogstparameters, emulgatie-eindpunten, filtratieporiëngroottes, centrifugatiekracht (× g), dosering per wondgebied en wondgereedheidscriteria voor injectie in trauma-instellingenspecificeert 7,13.
Praktische toepasbaarheidsrichtlijnen zijn daarom belangrijk voor chirurgische teams die deze aanpak overwegen. Op basis van de beschikbare literatuur en onze operatieve ervaring zijn typische intraoperatieve aspiratievolumes voor een enkele holte ~20-40 mL. Dit volume levert doorgaans voldoende bewerkt microvet op om kleine tot matige gaatjes te vullen. Daarentegen vallen reconstructies op grote volumes waarschijnlijk buiten het bereik van machineverwerking op het punt van zorg en kunnen ze gefaseerde procedures of alternatieve strategieën vereisen 9,12. Mechanische SVF-benaderingen zijn ook minder geschikt voor ernstig besmette wonden totdat de infectie onder controle is; In dergelijke gevallen moeten aanvullende debridement en infectiebeheer (inclusief gerichte antibiotica en, waar passend, negatieve drukwondtherapie) voorafgaan aan transplantatie7.
Het huidige werk heeft als doel een gedetailleerd, reproduceerbaar intraoperatief protocol te bieden voor de bereiding van SVF-verrijkte microvet door mechanische verwerking en voor het injecteren van dit product in holte-type traumatische zachte weefseldefecten. Het protocol legt de nadruk op expliciete operationele parameters (oogst, mechanische fragmentatie en emulgering, filtratie, centrifugatie uitgedrukt als × g, injectietechniek en objectieve wondmeeting) zodat andere chirurgische teams de methode in hun eigen omgeving kunnen toepassen en valideren.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Alle procedures zijn goedgekeurd door de Institutionele Ethische Commissie (Goedkeuringsnummer KL-2025062) en uitgevoerd in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki. Schriftelijke geïnformeerde toestemming werd van alle patiënten verkregen voorafgaand aan de deelname.
1. Patiëntselectie en preoperatieve beoordeling
2. Preoperatieve voorbereiding
3. Vetoogst
4. Mechanische verwerking van SVF-verrijkte microvet
5. Injectie in de defectplaats
6. Postoperatieve zorg en vervolg
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
In totaal werden acht patiënten met holte-type traumatische zachte weefselafwijkingen behandeld volgens het beschreven protocol.
Cohortkenmerken
De cohort bestond uit vijf mannen en drie vrouwen, met een gemiddelde leeftijd van 51,5 ± 11,7 jaar (bereik 38-74 jaar). Defecten bevonden zich op de onderarm (n = 5), bovenst...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Deze studie beschrijft een klinisch toepasbaar en reproduceerbaar protocol voor de mechanische verwerking en transplantatie van SVF-verrijkte microvet bij het behandelen van traumatische holte-type zachte weefseldefecten. Het protocol is bedoeld voor de implementatie van het punt van zorg in een standaard operatiekameromgeving en geeft prioriteit aan procedurele eenvoud, veiligheid en haalbaarheid boven biologische karakterisering. In deze kleine klinische serie vertoonden alle behandeld...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
De auteurs hoeven geen belangenconflicten aan te geven.
Deze studie werd ondersteund door het Hubei Provinciale Regionale Wetenschaps- en Technologie-innovatie Special Program for International Science and Technology Cooperation (subsidienummer 2023EHA043) en de afdeling Trauma en Microorthopedie, Zhongnan Zhospital van de Universiteit van Wuhan, het Nationaal Sleutelproject voor Klinisch Onderzoek 2025 (Projectnr.: 2025LCYJZX-ZD003). De auteurs bedanken Dr. Qi Baiwen oprecht voor zijn eerdere werk dat deze studie inspireerde en voor het bieden van waardevolle richtlijnen over klinische methodologie. We erkennen ook de verpleegkundige en chirurgische teams van Zhongnan Ziekenhuis voor hun hulp bij patiëntenzorg en follow-up.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0,9% normale zoutoplossing | Baxter Healthcare (of equivalent) | Verschillend | Gebruikt als basisoplossing voor tumescerende oplossing |
| Injectiecanule met stompe punt (22G × 50 mm) | CONPUVON ( ), China | DZ 22×50-C5 | Gebruikt voor meerlaagse injectie van SVF-verrijkt microvet |
| Centrifuge | Longtime Biotechnology ( ), China | LTA-1600 | Klinische centrifuge die ongeveer 400 × g kan genereren |
| Digitale camera / Smartphone | Willekeurig | N/A | Gestandaardiseerd wondfotografie tijdens follow-up |
| Epinefrine | Lokaal ziekenhuisapotheek | Verschillend | Toegevoegd aan zoutoplossing om een eindconcentratie van 1:500.000 te bereiken |
| ImageJ software (versie 1.53 of later) | National Institutes of Health (USA) | Gratis software | Gebruikt voor planimetrische wondoppervlaktemeting |
| Liposuctiecanule (2-3 mm) | Standaard medische leverancier | N/A | Gebruikt voor het oogsten van vetweefsel van de donorplaats |
| Luer-lock connector (vrouwelijk-op-vrouwelijk) | Becton Dickinson (of equivalent) | Verschillend | Gebruikt voor mechanische emulsificatie van spuit-op-spuit |
| Luer-lock spuit (1, 5, 10, 20 mL) | Hongda Medical Devices ( ), China | Niet gespecificeerd (institutionele levering) | Gebruikt voor aspiratie, mechanische verwerking en injectie |
| Steriele dressing / verband | Ziekenhuisapotheek | N/A | Voor postoperatieve wonddekking |
| Chirurgische schaar (sterieel) | Guangzhou Baitang Medical Devices Co., Ltd. | BT00301 (of soortgelijk representatieve model) | Gebruikt voor mechanische fragmentatie van vetweefsel |
| Vaseline gaas (10 cm × 10 cm) | Huaxi Medical Dressing Co., Ltd. ( ), China | Niet gespecificeerd (institutionele levering) | Niet-aanklevend verband gebruikt voor postoperatieve wondverzorging |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission
), China
), China
), China
), China