Deze studie werd goedgekeurd door de Clinical Research Ethics Committee van Ordu Universiteit (goedkeuringsnummer: 11-09-2017–138). De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met relevante institutionele en nationale ethische richtlijnen, waaronder de Verklaring van Helsinki. Schriftelijke geïnformeerde toestemming werd verkregen van alle deelnemers die in het onderzoek waren opgenomen. De verkregen toestemming geldt expliciet voor huisbezoeken en het verzamelen van huisstofmonsters uit woningen.
1. Studieontwerp
Dit is een dwarsdoorsnede, beschrijvende studie van de prevalentie van huisstofmijt, uitgevoerd in de provincie Ordu, Turkije. Huishoudelijke stofmonsters werden verzameld van specifieke binnenoppervlakken waar mijtophoping vaak wordt verwacht. Er werd gemonsterd met matrassen, beddengoed (kussens en quilts), tapijten en gestoffeerde meubels in slaapkamers en woonkamers. Stof werd verzameld met een draagbare stofzuiger, en monsters van verschillende locaties binnen hetzelfde huishouden werden samengevoegd om een composiet huishoudelijk stofmonster te vormen.
2. Studiepopulatie en definitie van klinische cohorten
De studiepopulatie bestaat uit personen die de Ear, Nose, Throat, and Internal Medicine poliklinieken van het Ordu University Faculty of Medicine Education and Research Hospital hebben bezocht vanwege astma en/of allergische klachten. De inclusiecriteria voor deelnemers waren 18 jaar of ouder, instemmend met het verzamelen van stofmonsters uit hun thuisomgeving, en instemmen met het invullen van de vragenlijst. Personen die geen toestemming gaven voor een huisbezoek, geen schriftelijke toestemming gaven, of voor wie er niet voldoende huisstofmonsters konden worden verkregen, werden uitgesloten van het onderzoek. Klinische diagnoses werden beoordeeld op basis van de zelfrapportages van patiënten en redenen voor polikliniekbezoeken; Er werd geen klinische verificatie of diagnostische tests uitgevoerd. Elke patiënt werd gekoppeld aan een huishouden en analyses werden op huishoudniveau uitgevoerd. De provincie Ordu ligt in de oostelijke regio van de Zwarte Zee van Turkije en heeft een vochtig, gematigd klimaat met het hele jaar door hoge luchtvochtigheid, omstandigheden die het overleven en de verspreiding van huisstofmijten kunnen bevorderen.
3. Bemonsteringseenheid en steekproefmethode
De primaire steekproefeenheid voor deze studie was het huishouden. Meerdere substofmonsters werden verzameld van verschillende binnenlocaties binnen elk huishouden, met bijzondere aandacht voor slaapkamers en woonruimtes. Hoewel deze submonsters afzonderlijk werden verzameld, werden ze samengevoegd en geanalyseerd als één samengesteld huishoudelijk stofmonster in het laboratorium om de totale binnenmijtblootstelling weer te geven. Om de mijtdichtheid te schatten, werd ongeveer 1 g stof van elk samengesteld huishoudmonster verwerkt met behulp van de melkzuurprecipitatiemethode. Alle mijten die werden waargenomen op de voorbereide microscopische preparaten die van dit stofmonster zijn afgeleid, werden geteld. Het totale aantal mijten dat werd gedetecteerd werd vervolgens uitgedrukt als het aantal mijten per gram huisstof.
Elk huishouden werd slechts één keer bemonsterd en er werd geen herhaalde steekproeven uitgevoerd. Huishoudelijke stofmonsters werden verzameld met wegwerpzakken die aan elk bemonsteringsgebied waren toegewezen, en een draagbare stofzuiger met een zuigkracht van 1200 W. De bemonstering werd uitgevoerd met een gestandaardiseerde snelheid van ongeveer 2 min/m² om consistentie en reproduceerbaarheid in alle huishoudens te waarborgen.
4. Laboratoriumprocedures en mijtidentificatie
Zodra de monsters naar het laboratorium werden gebracht, werden ze gezeefd om grove deeltjes te verwijderen. De monsters werden onderzocht met de melkzuurprecipitatiemethode. De melkzuurprecipitatiemethode werd gebruikt om stofmonsters te klaren door organisch afval op te lossen, wat de scheiding en visualisatie van mijten vergemakkelijkte en betrouwbare microscopische detectie en morfologische identificatie mogelijk maakte. Er werd één gram huisstof toegevoegd aan 5 ml 90% melkzuur in reageerbuizen. De buizen werden voorzichtig gemengd en 1 uur geïncubeerd. Na de incubatie werden monsters die zowel van het oppervlak als de bodem van de vloeistof werden verzameld, tussen een glaasglaap en een dekfolie gemonteerd en onderzocht onder een lichtmicroscoop op 100×, 200× en 400× vergrotingenvan 15. Soortidentificatie werd vervolgens uitgevoerd op stofmonsters waarin mijten werden aangetroffen.
Monsters waarin mijten werden gedetecteerd, werden gedefinieerd als "mijtpositief". De aanwezigheid van ten minste één mijt in een ontwikkelingsstadium (larve, nimf of volwassen dier) in een woning werd als voldoende beschouwd om als mijtpositief te worden beschouwd. Voor soortidentificatie in positieve monsters werden mijten die zichtbaar waren onder een stereomicroscoop verzameld met een fijnpuntige insulinespuitnaald na filtratie van het supernatant op filterpapier en gemonteerd in het medium van Hoyer. Voorbereide exemplaren werden onderzocht onder een lichtmicroscoop voor morfologische identificatie. Statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van statistische analysesoftware 16,17,18,19,20. Exemplaren werden geïdentificeerd op soort-, geslachts- of hogere taxonomische niveaus, afhankelijk van het ontwikkelingsstadium en de beschikbaarheid van diagnostische kenmerken. Dermatophagoides-soorten omvatten larvale, protonymf- en deutonymfstadia die niet betrouwbaar op soortniveau konden worden geïdentificeerd. Oribatida vertegenwoordigt mijten die op ordeniveau zijn geïdentificeerd. Ongeïdentificeerde larve en nimf verwijzen naar onvolwassen exemplaren, en ongeïdentificeerde imago naar volwassen exemplaren, die taxonomisch niet konden worden geclassificeerd vanwege onvoldoende of beschadigde morfologische kenmerken. Het totale aantal vertegenwoordigt het cumulatieve aantal mijtindividuen die zijn gedetecteerd in positieve monsters.
5. Surveytoepassing en variabeledefinities
Er werd een enquête met vragen over demografische kenmerken, woningstructuur, omgevingsfactoren en allergische klachten aan de deelnemers afgenomen. De gegevens werden beoordeeld op basis van de verklaringen van de deelnemers en waren niet klinisch geverifieerd.
6. Statistische analyse
De associatie tussen categorische variabelen werd onderzocht met behulp van de chi-kwadraattest, en de verandering in mijtdichtheid volgens demografische en vitale kenmerken werd onderzocht met behulp van de Mann-Whitney U- of Kruskal-Wallis-tests. Binaire logistische regressie werd gebruikt om de associatie tussen de afhankelijke variabele (mitepositiviteit) en de onafhankelijke variabelen te onderzoeken. Odds ratio's (OR's) met 95% betrouwbaarheidsintervallen (BI) werden berekend.