Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Onderzoeksartikel

Pijnstillende en ontstekingsremmende effecten van het Xueshan Jinluohan-coatingmiddel en het transdermale mechanisme ervan

238 weergaven

⸱

DOI:

10.3791/70480

⸱

30 april 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Qingdao Academy of Chinese Medicinal Sciences, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. Ltd, 4State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 5Laboratory of Epigenetics and Immunology, West China Institute of Women and Children's Health, NHC Key Laboratory of Chronobiology, Department of Obstetric and Pediatric, Key Laboratory of Birth Defects and Related Diseases of Women and Children of MOE, State Key Laboratory of Biotherapy, West China Second University Hospital, Sichuan University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Deze studie presenteert een geïntegreerde benadering om de pijnstillende en ontstekingsremmende effecten van Xueshan Jinluohan Pain-Relieving Coating Agent te evalueren. De effecten waren afhankelijk van gebied en tijd, en transdermale analyse identificeerde benzoylaconine als het primaire permeaterende bestanddeel met diffusiegecontroleerde afgifte.

Samenvatting

Topische traditionele Chinese geneeskunde (TCM) preparaten worden veel gebruikt voor de behandeling van ontstekings- en pijngerelateerde aandoeningen omdat ze lokale therapeutische effecten bieden en mogelijk systemische bijwerkingen verminderen. De farmacodynamische kenmerken en transdermale mechanismen die ten grondslag liggen aan veel klinisch toegepaste formuleringen blijven echter onvoldoende gekarakteriseerd. Xueshan Jinluohan Pain-Relieving Coating Agent (XJCA), een Tibetaanse medicijnformulering, wordt vaak voorgeschreven bij inflammatoire pijn, maar de invloed van toepassingsgebied, werkduur en de relatieve bijdragen van lokale versus systemische effecten zijn niet systematisch geëvalueerd. Deze studie stelt een geïntegreerd in vivo–in vitro methodologisch kader vast om deze parameters te onderzoeken. Meerdere complementaire diermodellen werden gebruikt om centrale en perifere analgetische activiteit en acute ontstekingsreacties te beoordelen, waardoor de effecten die afhankelijk zijn van gebied, tijd en lokaal versus systemisch mogelijk zijn. Parallel daaraan werd een Franz-diffusiecelsysteem gekoppeld aan ultra-high-performance vloeistofchromatografie–tandem massaspectrometrie (UPLC-MS/MS) gebruikt om de percutane absorptiekinetiek van twee hoofdalkaloïden, benzoylaconine en aconitine, te karakteriseren. XJCA toonde significante gebieds- en tijdsafhankelijke pijnstillende en ontstekingsremmende effecten, en grotere toepassingsgebieden waren geassocieerd met een grotere systemische bijdrage aan de analgetische effectiviteit. Transdermale kinetische analyse toonde aan dat benzoylaconine een aanzienlijk hogere constante flux vertoonde en een diffusiegecontroleerde afgifte volgde die consistent is met het Higuchi-model, terwijl aconitine een lagere permeabiliteit en een complexer afgifteprofiel vertoonde. Deze bevindingen koppelen transdermale toedieningsgedrag aan waargenomen farmacodynamische uitkomsten en bieden een gestructureerd kader voor het evalueren en optimaliseren van topische TCM-formuleringen.

Inleiding

Ontsteking en pijn zijn onderling verbonden fysiologische en pathologische reacties die een sleutelrol spelen in de verdediging van het lichaam tegen letsel en infectie1. Echter, aanhoudende of overmatige ontsteking en pijn, zoals artrose, reumatoïde artritis of posttraumatische pijn, kunnen leiden tot weefselschade die de fysieke werking en mentale gezondheid van patiënten ernstig kan aantasten 2,3. Momenteel zijn klinische behandelingen voor ontsteking en pijn voornamelijk afhankelijk van niet-steroïde ontstekingsremmers (NSAID's) (bijv. diclofenac, ibuprofen) en opioïden. Hoewel NSAID's veel worden gebruikt vanwege hun ontstekingsremmende en pijnstillende effecten, veroorzaakt orale toediening vaak irritatie van het maag-darmkanaal, nierschade en cardiovasculaire risico's4. Opioïden, hoewel krachtige pijnstillers, worden geassocieerd met verslaving, ademhalingsdepressie en andere ernstige bijwerkingen 5,6. Daardoor is er een groeiende medische behoefte aan veiligere alternatieven. Topische preparaten, die medicijnen rechtstreeks op de plaats van werking afleveren, bieden een strategische oplossing om deze systemische bijwerkingente beperken 7. Hun werkzaamheid is echter sterk afhankelijk van het vermogen van het medicijn om de huidbarrière te overwinnen, een factor die de vertaalbaarheid van preklinische bevindingen kan beperken, vooral bij grotere moleculen of mensen met een slechte lipofiliciteit 8,9. Daarom is het ontwikkelen van veilige en effectieve alternatieve therapieën, vooral topische preparaten met lokale werking en minimale systemische blootstelling, een onderzoeksfocus in de farmacologie geworden.

Topische TCM-preparaten hebben een lange geschiedenis van toepassing bij de behandeling van ontstekingen en pijn. Hun voordelen omvatten directe werking op de plek van de laesie, verminderde systemische bijwerkingen en een verlengde afgifte van het medicijn10,11. XJCA is een klinisch gebruikte TCM-filmvormende gel die bestaat uit meerdere kruideningrediënten. Het wordt veel gebruikt in China om pijn en ontsteking veroorzaakt door artrose, weke weefsel letsels en neuralgiete verlichten. Het wetenschappelijke bewijs voor de effectiviteit ervan is echter beperkt, en belangrijke farmacodynamische kenmerken, zoals de relatie tussen toepassingsgebied en effectiviteit, de tijdslijn van werking en het verschil tussen lokale en systemische effecten, blijven onduidelijk. Deze hiaten belemmeren de rationele klinische toepassing van XJCA.

Transdermale absorptie is een belangrijke factor die het therapeutische effect van topische preparaten beïnvloedt. Als primaire barrière beperkt de huid de penetratie van medicijnen in de systemische circulatie of lokale weefsels15,16. Voor XJCA is het cruciaal om de transdermale absorptiekenmerken van de actieve ingrediënten te begrijpen om de farmacodynamische effecten te verduidelijken en de doseringsvorm te optimaliseren. Eerdere studies naar TCM-preparaten hebben aangetoond dat alkaloïden (bijv. aconitinederivaten) belangrijke actieve componenten zijn met ontstekingsremmende en pijnstillende effecten17,18. Benzoylaconine en aconitine zijn twee hoofdalkaloïden in XJCA19,20, en hun inhoud en transdermale gedrag kunnen direct invloed hebben op de effectiviteit van de XJCA. Er is echter geen rapport over de transdermale absorptie van deze twee componenten in XJCA, noch over hun kinetische eigenschappen en afgiftemechanismen.

Om deze onderzoekskloof op te vullen, streeft deze studie ernaar een systematisch methodologisch kader te ontwikkelen en te valideren voor het beoordelen van topische TCM-formuleringen, waarbij XJCA als casestudy wordt gebruikt. Het doel was om een geïntegreerde evaluatiebenadering te demonstreren die omvat: (1) in vivo farmacodynamisch model(s) ontworpen om de effecten van toepassingsplaats, behandelingsduur en lokale versus systemische geneesmiddeltoediening op effectiviteit te analyseren; en (2) een in vitro transdermale kinetische evaluatie met behulp van Franz-diffusiecellen en UPLC-MS/MS om percutane absorptie en afgifte van belangrijke actieve alkaloïden te meten. We stelden de hypothese op dat de in vivo effectiviteit van XJCA, met name de afhankelijkheid van gebied en tijd, voornamelijk wordt bepaald door de transdermale kinetiek van de belangrijkste componenten. Door in vivo effectiviteitsparameters te koppelen aan overeenkomstige in vitro kinetische gegevens, biedt deze aanpak een mechanistisch inzicht in hoe transdermale afgifte de farmacodynamiek van topische TCM-preparaten beïnvloedt.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Deze studie is uitgevoerd in overeenstemming met de Richtlijnen voor Ethische Beoordeling van het Welzijn van Proefdieren (GB/T 35892-2018) en de Richtlijnen over de Humane Behandeling van Proefdieren. Alle dierprocedures zijn goedgekeurd door de Ethische Commissie voor Experimentele Dieren van de Chengdu Universiteit voor Traditionele Chinese Geneeskunde (Goedkeuring nr. TCM-09-315).

Proefdieren en huisvesting
Specifieke pathogenevrije (SPF) Kunming-muizen (20~25 g, mannetje/vrouwtje = 1:1) en SPF Sprague-Dawley (SD) ratten (180~200 g) werden gebruikt. De dieren werden onder gecontroleerde omstandigheden gehouden: een licht/donker cyclus van 12 uur, een temperatuur van 23 ± 2 °C en een luchtvochtigheid van 60% ± 5%, met vrije toegang tot voedsel en water. Om het analgetische en ontstekingsremmende profiel van XJCA volledig te evalueren, werd een reeks in vivo muismodellen gebruikt. De warmplaattest beoordeelde centraal gemedieerde pijndrempel; de formalinetest onderscheidde neurogene (Fase I) en inflammatoire pijn (Fase II); De xyleen-geïnduceerde ooroedemtest evalueerde acute ontstekingsremmende activiteit; en de door azijnzuur veroorzaakte kronkeltest modelleerde viscerale ontstekingspijn. Let op: XJCA is een kant-en-klare filmvormende gel. Er is geen extra voorbereiding vereist voorafgaand aan de aanvraag.

Effect van het toepassingsgebied op de effectiviteit van pijnstillende en ontstekingsremmende middelen
SPF Kunming-muizen werden willekeurig verdeeld in 4 groepen (mannetje/vrouwtje = 1:1): normale controlegroep (NC), XJCA kleine oppervlakte (1×1 cm, 1 cm2) groep (XJCASAAG), XJCA medium-area (1×2 cm, 2 cm2) groep (XJCAMAAG) en XJCA large-area (1,5×2 cm, 3 cm2) groep (XJCALAAG). XJCA werd 7 dagen achter elkaar aangebracht bij 0,015 g/cm2 (0,15 mL per muis). De NC-groep kreeg op dezelfde manier normale zoutoplossing. Na 120 minuten na de laatste toediening werd de effectiviteit van het pijnstillende middel geëvalueerd met behulp van de warmplaat- en formalinetests.

Voor de hot plate-test werden muizen vooraf gescreend door ze op een constant-temperatuur warme plaat te plaatsen die op 55 ± 0,5 °C werd gehouden. De onttrekkingslatentie van de poot (PWL) werd geregistreerd, en alleen muizen met een basis-PWL tussen 5 en 30 seconden werden geselecteerd (n = 40, mannetje/vrouwtje = 1:1). Na 7 dagen behandeling werd de PWL 3 keer om 30 minuten gemeten en werd de gemiddelde waarde geregistreerd. Er werd een afkaptijd van 60 seconden toegepast om weefselschade te voorkomen.

Bij de formalinetest (n = 40, mannelijk/vrouw = 1:1) werd na 7 dagen behandeling 1% formaline (1 mL/kg) subcutaan in de rechterachterpoot geïnjecteerd. Direct na de injectie werden muizen in individuele observatiekamers geplaatst. Pijngerelateerd gedrag (likken, tillen en ontsnappen) werd geregistreerd tijdens fase I (0–10 min, neurogene pijn) en fase II (15–30 min, ontstekingspijn). Succesvolle injectie werd bevestigd door zichtbare zwelling van de poot.

Evaluatie van de effectiviteit van tijdsafhankelijke pijnstillers en ontstekingsremmende middelen
Honderdtwintig SPF Kunming-muizen werden willekeurig verdeeld in drie groepen (n = 10 per tijdstip, mannetje/vrouwtje = 1:1): een modelcontrolegroep (MC), een XJCALAAG (1,5×2 cm, 3 cm2) groep en een Diclofenac Diethylamine Emulgel (DDE) positieve controlegroep. De XJCA (0,015 g/cm2, 0,15 mL/muis) en DDE (0,016 g/cm2, 0,15 mL/muis) werden 7 dagen achter elkaar toegepast, terwijl de MC-groep normale zoutoplossing kreeg. Om 2, 4, 6 en 8 uur na de laatste toediening werden zowel de door xyleen veroorzaakte ooroedeem als de door azijnzuur veroorzaakte kronkeltest uitgevoerd.

In de xyleen-geïnduceerde ooroedemtest werd 30 μL xyleen aan beide zijden van het rechteroor toegediend (de MC-groep kreeg normale zoutoplossing), en na 60 minuten werden muizen verdoofd met pentobarbitanatrium (30 mg/kg, i.p.) en geofferd; Oorschijfjes (8 mm diameter) werden vervolgens geponst en gewogen. De mate van oedeem werd berekend als het gewicht van de rechter oorschijf minus het gewicht van de linker oorschijf, en de remmingsgraad van oedeem werd bepaald als [(MC groep oedeem graad – behandelgroep oedeem) / MC groep oedeem graad] × 100%. Een ronde oorpunch (8 mm diameter) werd genomen vanuit dezelfde positie op zowel de linker- als rechter oorspoortjes, en het oorweefsel werd gewogen met een elektronische weegschaal.

In de door azijnzuur geïnduceerde kronkeltest werd 0,6% azijnzuuroplossing (0,1 mL /10 g) intraperitoneaal geïnjecteerd, en werden de wriebelingstijden (achterpootextensie, buikcontractie en rompdraai) binnen 20 minuten geregistreerd. Direct na de injectie van azijnzuur werden muizen in individuele observatiekooien geplaatst. Het remmingspercentage van het kronkelen werd berekend volgens de volgende formule: [(kronkeltijden in de MC-groep – kronkeltijden in de behandelgroep)/kronkelingstijden in de MC-groep]×100%.

Vergelijking van lokale versus systemische analgetische effectiviteit
Om lokaal beperkte analgesie te onderscheiden van effecten die voortvloeien uit transdermale absorptie en systemische distributie, hebben we twee toedieningsregimes met duidelijke operationele definities bedacht. Lokaal effect verwijst naar de werking van het geneesmiddel op een plek die gelokaliseerd is op weefsels direct onder of naast de toepassingsplaats, met weinig bijdrage van het circulerende geneesmiddel. Systemisch effect daarentegen verwijst naar analgesie die wordt gemedieerd door een geneesmiddel dat het bloed is binnengedrongen en werkt op centrale of perifere locaties die ver van de toepassingsplaats liggen. We testten direct de hypothese dat het vergroten van het toepassingsgebied leidt tot een grotere systemische opname van het geneesmiddel en daardoor pijnstillende effecten veroorzaakt die groter zijn dan die door lokale werking alleen, door de dosis per oppervlakte-eenheid constant te houden terwijl het totale behandelde gebied varieert. Dit ontwerp maakt het mogelijk te kwantificeren hoe de ruimtelijke schaal van blootstelling systemische biobeschikbaarheid bepaalt en de resulterende bijdrage van systemisch gemedieerde effecten.

Dertig SPF Kunming-muizen (met een PWL van 5~30 s in de hot plate-test) werden willekeurig verdeeld in 3 groepen (n = 10 per groep, man/vrouw = 1:1): NC-groep, topische medicatiegroep (TMG) en systemische medicatiegroep (SMG). XJCA werd toegediend met een vaste dosis van 0,015 g/cm2, met een volume van 0,15 mL, gedurende 7 opeenvolgende dagen.

Voor de TMG werd de formulering toegepast op een gelokaliseerd gebied van de huid van de achterledemaat. Voor de SMG werd, om verhoogde systemische absorptie te simuleren, de formulering toegepast op een gecombineerd gebied met beide achterpoten en de rughuid, terwijl dezelfde dosis per oppervlakte-eenheid (0,015 g/cm2) behouden bleef. Dit ontwerp zorgde ervoor dat de totale hoeveelheid XJCA die op de SMG-groep werd toegepast proportioneel hoger was dan die van de TMG-groep, waardoor het potentieel voor transdermale absorptie in de systemische circulatie groter werd. Op 120 minuten na de laatste toediening werd PWL gemeten met de hot plate-test (3 keer per 30 minuten, gemiddelde waarde geregistreerd). Door TMG (lokaal effect dominant) en SMG (lokaal + systemisch effect) te vergelijken, konden we de bijdrage van systemische geneesmiddelverdeling aan de algehele analgesie ontleden.

In vitro transdermale absorptiestudie
De studie maakte gebruik van Franz-diffusiecellen met een effectief diffusiegebied van 1,76625 cm2. De Franz-diffusiecel is de gouden standaard voor het beoordelen van percutane absorptie. Het systeem bestaat uit een donorcompartiment (met de testformulering), een receptorcompartiment (gevuld met fysiologische buffer) en verwijderde huid die ertussen is gemonteerd. Geneesmiddelmoleculen diffunderen via de huid naar de receptoroplossing, en monsters worden in de loop van de tijd verzameld om de permeatiekinetiek te kwantificeren. Buikhuid die werd verwijderd van SD-ratten die verdoofd waren met pentobarbitalnatrium (30 mg/kg, i.p.), werd zorgvuldig bereid door onderhuidig vet te verwijderen, gespoeld met normale zoutoplossing en 24 uur in normale zoutoplossing geweekt. Het is van vitaal belang om de integriteit van het stratum corneum te beschermen. Rek, vouw of raak het oppervlak van de opperhuid niet aan. De doorlatendheid van de huid wordt sterk beïnvloed door haar hydratatiestatus. De hydratatietijd levert reproduceerbare resultaten op.

De voorbereide huid werd gemonteerd tussen het donor- en receptorcompartiment, waarbij het stratum corneum naar het donorcompartiment was gericht. De donorzijde ontving 200 μL XJCA (gelijk aan 0,06 g ruwe geneesmiddel), terwijl het receptorcompartiment werd gevuld met 15 mL ontvangsoplossing (30% ethanol: 70% PBS, ontgassend door sonicatie gedurende 15 minuten), gehandhaafd op 32 ± 0,5 °C onder continue magnetische roering bij 350 r·min⁻1. De ontvangende oplossing moet 15 minuten door sonicatie worden ontgassd voordat het wordt gebruikt om bubbelvorming tijdens het experiment te voorkomen.

Er werd één ml monsters genomen uit het receptorcompartiment op 2, 4, 6, 8, 10, 12, 20 en 24 uur, telkens aangevuld met een gelijke hoeveelheid voorverwarmde (32 °C) verse ontvangstoplossing.

Opmerking: De vervangende oplossing moet op dezelfde temperatuur zijn om temperatuurfluctuaties te voorkomen die de diffusiekinetiek kunnen beïnvloeden. De verzamelde monsters werden gefilterd door 0,22 μm microporeuze membranen en vervolgens binnen 24 uur geanalyseerd door UPLC-MS/MS. Vanwege de instabiliteit van aconitine moeten monsters binnen 24 uur na afname worden geanalyseerd, of stabilisatoren worden toegevoegd. Als onmiddellijke analyse niet mogelijk is, aliquot de monsters en bewaar ze bij -80 °C, maar valideer hun stabiliteit onder deze omstandigheden voordat je verder gaat.

UPLC-MS/MS-voorwaarden
Chromatografische analyse werd uitgevoerd met behulp van een Agilent ZORBAX SB-C18 kolom (2,1 × 100 mm, 1,8 μm) die op 40 °C werd gehouden, met een debiet van 0,3 mL/min en een injectievolume van 2 μL. De mobiele fase bestond uit acetonitril (A) en 0,1 mol/L ammoniumacetaatoplossing met 0,5 mL/L glaciaal azijnzuur (B), met het volgende gradiëntprogramma: 0–5 min (26%–45% A), 5–7 min (45%–74% A), 7–10,1 min (74%–90% A), 10,1–12 min (90% A), 12–12,1 min (90%–26% A), en 12,1–15 min (26% A).

Massaspectrometrische detectie werd uitgevoerd met een elektrospray-ionisatie (ESI) bron in positieve ionenmodus onder de volgende instellingen: drooggastemperatuur 500 °C, drooggasstroom 5 L/min, vernevelaarsdruk 50 psi, mantelgastemperatuur 500 °C, mantelgasstroom 11 L/min, capillaire spanning 5500 V en gegevensverzameling in meervoudige reactiemonitoring (MRM) modus. De MRM-overgangen en parameters werden als volgt ingesteld: acolitine (m/z 646,6→586,4, verblijftijd 100 ms, DP 102,930 V, CE 49,810 V) en benzoylaconine (m/z 604,4→105,1, verblijftijd 100 ms, DP 105,120 V, CE 74,270 V).

Methodevalidatie en data-analyse
Methodevalidatie werd uitgevoerd door specificiteit, lineariteit, precisie, stabiliteit en herhaalbaarheid te beoordelen. De specificiteit werd geverifieerd door het analyseren van de blanke ontvangende oplossing, standaardoplossing en monsteroplossing om de afwezigheid van interferentie door endogene stoffen te bevestigen. Voor lineariteit werden standaardcurven geconstrueerd door het piekoppervlak tegen concentratie uit te zetten met behulp van de least squares regressiemethode. De precisie werd geëvalueerd via zowel intra-dag (6 replicaten) als inter-dag (2 replicaties over 3 dagen) assays met een 50 ng/mL standaardoplossing, uitgedrukt als de relatieve standaarddeviatie (RSD) van piekgebieden. De stabiliteit werd beoordeeld door de piekoppervlakte RSD van monsteroplossingen te bepalen op 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 18 en 24 uur. De herhaalbaarheid werd bevestigd door het meten van het piekoppervlak RSD uit zes parallelle monstervoorbereidingen. De standaardoplossingen werden bereid door nauwkeurig elk 2,5 mg benzoylaconine en aconitine te wegen en vervolgens op te lossen in een isopropanol:dichloromethaan (1:1) mengsel om een uiteindelijke concentratie van 25 μg/mL te bereiken. Voor de testoplossing werd een geschikte hoeveelheid van het monster overgebracht in een centrifugebuis en onderworpen aan hogesnelheidscentrifugatie van 12.000 x g gedurende 5 minuten, waarna het supernatant werd verzameld voor analyse.

De cumulatieve permeatiehoeveelheid (Qn, ng/cm2) op elk tijdstip werd berekend met de volgende formule:

Qn = [(Cn × V + ΣCi × Vi) / A]

Waar:
Qn: Cumulatieve permeatiehoeveelheid bij de n-de bemonsteringstijd (ng/cm2).
Cn: Concentratie van het geneesmiddel in de ontvangende oplossing bij de n-de bemonsteringstijd (ng/mL).
Ci: Concentratie van het geneesmiddel in de ontvangende oplossing bij de i-de bemonsteringstijd (ng/mL).
V: Volume van de ontvangende oplossing (15 mL).
Vi: Bemonsteringsvolume op elk tijdstip (1 mL).
A: Effectief diffusiegebied van de Franz-diffusiecel (1,76625 cm2).

De cumulatieve permeatiehoeveelheid-tijd (Q-t) kromme werd uitgezet met Qn als ordinaat en tijd (t, h) als abscissa. Het lineaire deel van de Q-t-kromme werd onderworpen aan lineaire regressie, en de helling van de regressievergelijking werd genomen als de stationaire transdermale flux (Js, ng/cm2/h).

De Q-t-curve werd aangepast aan het nul-orde model (Q = kt + b), het eerste-orde model (ln(Qmax - Q) = -kt + lnQmax) en het Higuchi-model (Q = kt1/2 + b), waarbij Qmax de maximale cumulatieve permeatiehoeveelheid is, k de snelheidsconstante en b het interceptiepunt. De fit werd geëvalueerd met behulp van de correlatiecoëfficiënt (R2), waarbij een hogere R2 een betere fit aangaf.

Statistische analyse
De individuele dierlijke ruwe gegevens voor alle in vivo gedragstests en de ruwe UPLC-MS/MS chromatografische gegevens voor de in vitro permeatiestudie worden respectievelijk als Aanvullende Bestanden 1 en 2 verstrekt. Alle experimentele gegevens werden gepresenteerd als gemiddelde ± standaarddeviatie (x̄ ± SD). De statistische analyse werd uitgevoerd met GraphPad Prism 9.0. Eenrichtingsvariantieanalyse (ANOVA) gevolgd door Dunnetts meervoudige vergelijkingstest werd gebruikt om groepsverschillen te vergelijken. p < 0,05 werd als statistisch significant beschouwd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Afhankelijkheid van de effectiviteit van pijnstillers en ontstekingsremmende middelen van toepassingsgebied
XJCA vertoonde een positieve correlatie tussen toepassingsgebied en de effectiviteit van pijnstillende/ontstekingsremmende middelen in muismodellen, na 7 opeenvolgende dagen toediening met een vaste dosis van 0,03 g/cm2. In de hot plate-test vertoonde de NC-groep de kortste gemiddelde PWL, wat wijst op de sterkste pijnrespons. Daarentegen vertoonden d...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Ontsteking en pijn zijn complexe pathologische processen die meerdere signaalroutes betreffen. Topische preparaten worden steeds meer geprefereerd omdat ze nauwkeurig kunnen inwerken op laesies en systemische bijwerkingen kunnen minimaliseren21,22. Deze studie heeft met succes een systematisch methodologisch kader vastgesteld en gevalideerd voor het evalueren van topische TCM-formuleringen, waarbij XJCA als demonstratiegeval word...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hoeven geen belangenconflicten aan te geven.

Dankbetuigingen

Deze studie werd ondersteund door het Taishan Scholars Program van de provincie Shandong (tsqn20250730), de University (Sichuan University)-Enterprise (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co., Ltd.) Samenwerkingsproject (24H0764, 24H1043) en het Bian Que Scholar Programme van de Shandong University of Traditional Chinese Medicine.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
0.22 μm microporeuze membraanfiltersMilliporeSigma, Burlington, MA, VSGSWP04700
AzijnzuurCNW Technologies GmbHN3800060Chromatografie kwaliteit
AcetonitrilMerck KGaAI1241129242Massaspectrometrie kwaliteit
AconitineChengdu Lemeitian Pharmaceutical Technology Co., Ltd.DSTDW00060220 mg, ≥98% zuiverheid
Agilent ZORBAX SB-C18 kolomAgilent2.1 × 100 mm, 1.8 μm
AmmoniumacetaatGENERAL-REAGENTP1492146Analytische kwaliteit
BenzoylconineChengdu Lemeitian Pharmaceutical Technology Co., Ltd.DSTDB00550220 mg, ≥98% zuiverheid
DichloormethaanCINC Chemical Co., Ltd.P3048495Analytische kwaliteit
Diclofenac Diethylamine Emulgel (DDE)Novartis Pharma Beijing Co., Ltd.H20020176
Formaline oplossingSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.10010061
Franz diffusiecellenShenzhen Ruituo Analytical Instruments Co., Ltd.RT806
GraphPad Prism 9.0 softwareGraphPad Software, Inc.Versie 9.0
IsopropanolGENERAL-REAGENT0530240601DChromatografie kwaliteit
Normaal zoutwaterSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.SY15931
Pentobarbital natriumSigma-Aldrich, St. Louis, MO, VSP3761
Gezuiverd waterGuangzhou Watson's Food and Beverage Co., Ltd.Batchnr. 20240717C
SPF Kunming muizenChengdu Enswell Biotechnology Co., Ltd.Licentie: SYXK (Sichuan) 2019-049
SPF Sprague-Dawley rattenBeijing Speifu Biotechnology Co., Ltd.Licentie: SYXK (Beijing) 2024-0010
UPLC-MS/MS systeemAgilent Technologies, Santa Clara, CA, VSAgilent 1260 Infinity
Xueshan Jinluohan pijnverlichtende coating (XJCA)Tibet Pharmaceutical Co., Ltd.Z20010095
XYleenSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.10023418

Referenties

  1. Kang, S. Y., Ryu, Y. Editorial: Chronic inflammation and related diseases: From mechanisms to therapies. Int J Mol Sci. 24 (13), (2023).
  2. Liu, Y., et al. The analgesic effects of Yu-Xue-Bi tablet (YXB) on mice with inflammatory pain by regulating LXA4-FPR2-TRPA1 pathway. Chin Med. 19 (1), 104(2024).
  3. Lara, C. O., Burgos, C. F., Moraga-Cid, G., Carrasco, M. A., Yévenes, G. E. Pentameric ligand-gated ion channels as pharmacological targets against chronic pain. Front Pharmacol. 11, 167(2020).
  4. Yang, E. L., et al. Abietane-type diterpenoids from Nepeta bracteata Benth and their anti-inflammatory activity. Front Chem. 10, 944972(2022).
  5. Allen, H. N., Hestehave, S., Duran, P., Nelson, T. S., Khanna, R. Uncoupling the CRMP2-Ca(V)2.2 interaction reduces pain-like behavior in a preclinical osteoarthritis model. bioRxiv. , (2024).
  6. Ochandarena, N. E., Niehaus, J. K., Tassou, A., Scherrer, G. Cell-type specific molecular architecture for mu opioid receptor function in pain and addiction circuits. Neuropharmacology. 238, 109597(2023).
  7. Singh, S., Awasthi, R. Berberine HCl and diacerein loaded dual delivery transferosomes: Formulation and optimization using Box–Behnken design. ADMET DMPK. 12 (3), 553-580 (2024).
  8. Madawi, E. A., et al. Polymeric nanoparticles as tunable nanocarriers for targeted delivery of drugs to skin tissues for treatment of topical skin diseases. Pharmaceutics. 15 (2), (2023).
  9. Li, L., et al. Evaluation of physical and chemical modifications to drug reservoirs for stimuli-responsive microneedles. Drug Deliv Transl Res. 15 (7), 2390-2414 (2025).
  10. Wang, Q., et al. Naturally derived anti-inflammatory compounds from Chinese medicinal plants. J Ethnopharmacol. 146 (1), 9-39 (2013).
  11. Kheoane, P. S., et al. Anti-inflammatory effects of orally and topically administered nanoformulations of Malva parviflora root extracts, and Prunus persica and Cupressus sempervirens exudates. Pharmacol Res Mod Chin Med. 17, 100685(2025).
  12. Zhenping, W., Yanxiu, L., Kun, G., Lei, Z. Clinical observation of Xueshan Jinluohan plastic for relieving pain in the treatment of 66 patients with osteoarthritis. J Clin Med Pract. , (2013).
  13. Kui, S., Guiming, L. Xueshan Jinluohan odynolysis plastics for postherpetic neuralgia: Observation of clinical efficacy. China Pharm. , (2007).
  14. Hai-Yan, W., Lei, Z., Ya-Fang, Z., Xue, J. Clinical observation on Xueshan Jinluohan analgesic film in treating 66 patients with rheumatoid arthritis with syndrome of blood stasis and obstructive arthralgia. Tianjin J Tradit Chin Med. , (2014).
  15. Zhao, L., et al. Topical drug delivery strategies for enhancing drug effectiveness by skin barriers, drug delivery systems and individualized dosing. Front Pharmacol. 14, 1333986(2023).
  16. Kathe, K., Kathpalia, H. Film forming systems for topical and transdermal drug delivery. Asian J Pharm Sci. 12 (6), 487-497 (2017).
  17. Xue, M., et al. Illumination on chemical compounds from Qufeng Zhitong capsule and its potential pharmacological mechanism against rheumatoid arthritis based on UHPLC/Q-Orbitrap-MS combined with network pharmacology analysis. Int J Anal Chem. 2022, 7863435(2022).
  18. Zhao, P., et al. Aconitine and its derivatives: Bioactivities, structure-activity relationships and preliminary molecular mechanisms. Front Chem. 12, 1339364(2024).
  19. Ling-Li, L., Lan-Xia, W., Ling, N., Xi, Y. Determination of safflower glucoside I and gentiopicrin in Xueshan Jinluohan pain-relief liniment by HPLC. Chin Tradit Pat Med. 34 (3), 499-502 (2012).
  20. Xiang, G., Guo, S., Wu, C., Wang, S., Zhang, Y. Deciphering the mysteries of Aconitum pendulum: Unique identification of various processed products and characteristic chemical markers. Arab J Chem. 17 (2), 105585(2024).
  21. Yang, C., et al. Development and evaluation of a Chinese herbal gel for analgesic and anti-inflammatory effects. Pak J Pharm Sci. 36 (4 Suppl), 1261-1269 (2023).
  22. Zhang, W., et al. Nicotine in inflammatory diseases: Anti-inflammatory and pro-inflammatory effects. Front Immunol. 13, 826889(2022).
  23. Zhan, M. X., et al. Ulinastatin exhibits antinociception in rat models of acute somatic and visceral pain through inhibiting the local and central inflammation. J Pain Res. 14, 1201-1214 (2021).
  24. Liu, C., et al. Investigation of the permeation enhancer strategy on benzoylaconine transdermal patch: The relationship between transdermal enhancement strength and physicochemical properties of permeation enhancer. Eur J Pharm Sci. 138, 105009(2019).
  25. Jiang, Z., Liu, S., Li, Y., Yuan, S. Study on the absorption mechanism of glucocorticoids in the stratum corneum. Colloids Surf B Biointerfaces. 256 (Pt 1), 114984(2025).
  26. Fabbrocini, G., et al. Skin needling to enhance depigmenting serum penetration in the treatment of melasma. Plast Surg Int. 2011, 158241(2011).
  27. Costa, R., Costa Lima, S. A., Gameiro, P., Reis, S. On the development of a cutaneous flavonoid delivery system: Advances and limitations. Antioxidants (Basel). 10 (9), (2021).
  28. Li, Z., et al. Analgesic and neuroprotective effects of Baimai ointment on diabetic peripheral neuropathy. J Ethnopharmacol. 292, 115122(2022).
  29. Lei, Y., et al. Formulation and evaluation of a drug-in-adhesive patch for transdermal delivery of colchicine. Pharmaceutics. 14 (10), (2022).
  30. Sirisha Mulukuri, N. V. L., et al. Statistical modeling, optimization and characterization of andrographolide loaded emulgel for its therapeutic application on skin cancer through enhancing its skin permeability. Saudi Pharm J. 32 (6), 102068(2024).
  31. Cohen, E., Lee, Y. C. A mechanism-based approach to the management of osteoarthritis pain. Curr Osteoporos Rep. 13 (6), 399-406 (2015).
  32. Boehnke, K. F., Gagnier, J. J., Matallana, L., Williams, D. A. Cannabidiol product dosing and decision-making in a national survey of individuals with fibromyalgia. J Pain. 23 (1), 45-45 (2022).
  33. Pan, S. Y., et al. New perspectives on Chinese herbal medicine (Zhong-Yao) research and development. Evid Based Complement Alternat Med. 2011, 403709(2011).
  34. Sana, E., et al. Topical delivery of curcumin-loaded transfersomes gel ameliorated rheumatoid arthritis by inhibiting NF-κB pathway. Nanomedicine (Lond). 16 (10), 819-837 (2021).
  35. Ya-Nan, H., et al. New understanding of aconitine hydrolysis pathway: Isolation, identification and toxicity evaluation based on intermediate products. Arab J Chem. 15 (11), 104255(2022).
  36. Shakeel, F., et al. Investigating antiarthritic potential of nanostructured clove oil (Syzygium aromaticum) in FCA-induced arthritic rats: Pharmaceutical action and delivery strategies. Molecules. 26 (23), (2021).
  37. Zhou, C., et al. Benzoylaconine modulates LPS-induced responses through inhibition of toll-like receptor-mediated NF-κB and MAPK signaling in RAW264.7 cells. Inflammation. 44 (5), 2018-2032 (2021).
  38. Jin, X., et al. Aconitine – a promising candidate for treating cold and mechanical allodynia in cancer-induced bone pain. Biomed Pharmacother. 161, 114284(2023).
  39. Tao, H., et al. Pharmacokinetics and pharmacology of aminoalcohol-diterpenoid alkaloids from Aconitum species. J Ethnopharmacol. 301, 115726(2023).
  40. Teaima, M. H., et al. Enhanced transdermal delivery of bisoprolol hemifumarate via combined effect of iontophoresis and chemical enhancers: Ex vivo permeation/in vivo pharmacokinetic studies. Pharmaceutics. 13 (5), (2021).
  41. Liu, X., et al. The inhibition of PPARα protein degradation alleviates the cardiotoxicity of Tiebangchui by regulating fatty acid metabolism. J Ethnopharmacol. 348, 119838(2025).
  42. Abdella, S., Afinjuomo, F., Song, Y., Upton, R., Garg, S. Mucoadhesive buccal film of estradiol for hormonal replacement therapy: Development and in vivo performance prediction. Pharmaceutics. 14 (3), (2022).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Analgetische effectentopische TCMpercutane absorptieFranz diffusiecelUPLC MS MSbenzoylaconineaconitine
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleid

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.