Deze studie is beoordeeld en goedgekeurd door de Medische Onderzoeksethiekcommissie van het Heyuan Volksziekenhuis (Goedkeuringsnummer: YXYJLL-SFKJ202461; Goedkeuringsdatum: 15 mei 2024). Het ethisch certificaat is als een aanvullend bestand geüpload. De patiënt, ouder of voogd van een minderjarige heeft tijdens de registratie een verklaring ondertekend waarin staat: "Ik ga akkoord dat mijn klinische biologische monsters en gegevens zullen worden gebruikt voor wetenschappelijk onderzoek, technologische innovatie en klinisch onderzoek goedgekeurd door de Medical Research Ethics Committee na verwijdering van identificeerbare persoonlijke informatie", en deze analyse zal geen extra risico's voor de patiënt vormen en voldoet aan de relevante regelgeving. Alle materialen die in deze studie zijn gebruikt, staan vermeld in de Materiaaloverzicht.
Vakken
In totaal werden 1.559 mannelijke patiënten die tussen januari 2021 en december 2024 de poliklinische afdeling van het Heyuan People's Hospital bezochten en HPV-testen ondergingen, opgenomen in de studie. De proefpersonen waren tussen 2 en 80 jaar oud (De studiepopulatie bestaat uit alle mannelijke patiënten met geldige HPV-nucleïnezuurtestresultaten van poliklinische bezoeken aan deze medische instelling tussen 2021 en 2024; Het primaire doel is een uitgebreid overzicht te geven van HPV-testen en infectiepatronen onder mannelijke patiënten in de regio; Bovendien omvatten de routes van HPV-infectie niet alleen seksuele activiteit, maar ook wrijving of contact met het huidoppervlak en de slijmvliezen, evenals verticale overdracht van moeder op kind. Daarom werden er geen leeftijdsbeperkingen opgelegd, met een gemiddelde leeftijd van 34,2 ± 10,7 jaar).
Methoden
Deze studie maakte gebruik van een retrospectief dwarsdoorsnedeontwerp om alle mannelijke patiënten te analyseren die de poliklinische afdeling van ons ziekenhuis bezochten en HPV-testen ondergingen; alleen de eerste steekproefresultaten werden opgenomen voor degenen die herhaald werden getest.
Specimencollectie
De geëxfolieerde celmonsters werden verkregen door getrainde clinici met steriele, gespecialiseerde bemonsteringskwasten. Verzamelplaatsen omvatten de dorsale en ventrale oppervlakken van de penis, de interne en externe coronale sulci, de eikelpenis, de distale urethra en eventuele zichtbare verrucous laesies, waarbij de locatiekeuze werd bepaald op basis van individuele bevindingen van de patiënt; Na het verzamelen werden de borstelkoppen gebroken in een speciale monsterconserveringsoplossing. Voorwaarden voor het bewaren van het monster: Na het bemonsteren werden de monsters onmiddellijk in een koelkast bewaard bij 2–8 °C, en de test was binnen 3 dagen afgerond.
DNA-extractie
Na elk monster dat was geslingerd en gemengd, werd 200 μL sequentieel toegevoegd aan het nucleïnezuurextractie- of zuiveringsreagens. DNA-extractie werd uitgevoerd met behulp van magnetische kralentechnologie met het extractie-reagens in het SP96 volledig geautomatiseerde nucleïnezuurextractie-instrument.
HPV-detectie
HPV-DNA-tests werden uitgevoerd met behulp van de human papillomavirus genotyping (type 23) detectiekit, die een combinatie gebruikt van PCR-gebaseerde in vitro amplificatie en DNA-reverse dot blot-hybridisatie voor HPV-genotypering. Specifieke primers werden ontworpen op basis van HPV-genetische kenmerken, en doelfragmenten uit 23 HPV-genotypen werden geamplificeerd. De versterkte producten werden gehybridiseerd met de typeprobes die op het membraan waren bevestigd, waaronder 17 HR-HPV (HPV16,51,52,53,18,58,59,31,33,45,56,66,35,39,68,73,82) en 6 LR-HPV (HPV6,11,42,43,81,83). Op basis van de aanwezigheid of afwezigheid van hybridisatiesignalen werd de infectiestatus van deze HPV-genotypen bepaald. De specifieke laboratoriumprocedure hield in dat een gefilterde pipettip 5 μL geëxtraheerd DNA aan het PCR-reactiemengsel toevoegde, waardoor het totale volume op 25 μL kwam. Vervolgens werd PCR-versterking uitgevoerd. Na amplificatie werden alle versterkte producten toegevoegd aan de isotherme hybridisator met membraanstroken voor colorimetrische hybridisatie. Na voltooiing van de kleurontwikkeling kunnen de resultaten worden geïnterpreteerd.
Statistische analyse
SPSS 23.0-software werd gebruikt voor statistische analyse. De telgegevens werden uitgedrukt als het aantal gevallen (n) en het percentage (%). De vergelijking tussen groepen werd uitgevoerd door de χ2-test . p < 0,05 werd als statistisch significant beschouwd. Van de 23 HPV-genotypen wijst positiviteit voor elk enkel genotype op HPV-infectie; positiviteit voor slechts één genotype duidt op een enkele infectie; en positiviteit voor twee of meer genotypen duidt op een meervoudige infectie. Meervoudige infecties worden verder geclassificeerd op basis van het aantal co-bestaande genotypen in dubbele infectie, drievoudige infectie, viervoudige infectie, vijfvoudige infectie, hexoepelinfectie en hoger." De verhouding tot de totale detectiefrequentie" werd berekend met het totale aantal genotype-detecties (1.238) als noemer, aangezien patiënten met meerdere infecties meerdere genotypen bijdroegen.