Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Kwantitatieve micro-CT-analyse van longparenchymale en luchtwegremodellering in een fretmodel van pulmonale fibrose

160 weergaven

⸱

DOI:

10.3791/71220

⸱

31 juli 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics and Human Development, College of Human Medicine, Michigan State University, 2Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Corewell Health, 3Department of Electrical and Computer Engineering, University of Iowa, 4Department of Radiology, College of Human Medicine, Michigan State University, 5Department of Medicine, College of Human Medicine, Michigan State University, 6Department of Radiology, University of Iowa

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Hier presenteren we een protocol voor het gebruik van micro-CT om de kenmerken van bleomycine-geïnduceerde longfibrose in een fretmodel kwantitatief te beoordelen. Dit fretmodel toont een sterk translationeel potentieel voor het begrijpen van pulmonale fibrose en het testen van nieuwe therapieën.

Samenvatting

Longfibrose (PF) is een chronische en progressieve longziekte die wordt gekenmerkt door herhaald alveolair letsel dat leidt tot parenchymale verdikking, littekenvorming en ademhalingsstoornissen. Huidige knaagdiermodellen, met name die welke bleomycine (BLEO) gebruiken, hebben beperkte translationele relevantie voor humane idiopathische pulmonale fibrose (IPF) vanwege anatomische verschillen zoals het ontbreken van respiratoire bronchiolen. Om deze beperking aan te pakken, hebben we een grootdiermodel ontwikkeld van pulmonale fibrose bij fretten, die respiratoire bronchiolen bezitten die lijken op die bij mensen. Drie maanden oude wildtype-fretten kregen intratracheale installatie van BLEO. De longen werden 8 weken na de behandeling geoogst voor micro-computertomografie (micro-CT) en histologische evaluatie. Vanwege de beperkte ruimtelijke resolutie van multidetector CT (MDCT) bij het visualiseren van de kleine luftwegen van de fret, werden verwijderde longen ex vivo gefotografeerd met een micro-CT-scanner bij gecontroleerde luchtwegdrukken (0 cmH2O en 25 cmH2O) om uitademings- en inademingscondities te simuleren.

Micro-CT-beeldvorming toonde duidelijke structurele verschillen aan tussen normale en met BLEO behandelde frettenlongen. Normale longen vertoonden een lage attenuatie en behouden architectuur, terwijl met BLEO behandelde longen een duidelijk verhoogde verzwakking vertoonden die consistent is met fibrose. Kenmerken die kenmerkend zijn voor menselijke fibrotische longziekte, waaronder honingraat met cystische ruimtes, verdikte interlobulaire septa en glasopaciteiten die wijzen op vroege fibrotische of inflammatoire veranderingen, waren zichtbaar. Met behulp van kwantitatieve micro-CT-analyse werd waargenomen dat de luchtwegen in BLEO-behandelde fretlongen significant verminderde radiale expansie, longitudinale uitrekking en volumeverandering vertoonden bij beide toegepaste luchtdrukken. Bovendien toonde generatie-gematchte analyse een significante verdikking van luchtwegwanden in gebieden met visueel zichtbare fibrose. Histologische beoordeling, waaronder Masson's tricchrome kleuring, bevestigde uitgebreide collageenafzetting en fibrose.

Deze studie toont aan dat met BLEO behandelde fretten radiologische, mechanische en histopathologische kenmerken ontwikkelen die lijken op menselijke pulmonale fibrose. Bovendien maakt micro-CT een hoogresolutiebeoordeling mogelijk van fibrotische distributie, luchtwegdynamiek en longvolumeveranderingen. Deze bevindingen benadrukken het potentieel van de fret als translationeel model voor het bestuderen van PF-pathogenese en het evalueren van nieuwe therapeutische strategieën.

Inleiding

Longfibrose (PF) is een chronische en progressieve interstitiële longziekte waarbij herhaalde alveolaire beschadiging leidt tot parenchymale verdikking, fibrose en progressieve respiratoire disfunctie1. Longfibrose kan worden veroorzaakt door verschillende blootstellingen, waaronder medicijnen, omgevingstoxines, infecties, onderliggende auto-immuunziekten, of het kan idiopathischzijn. Hoewel medicijnen zijn ontwikkeld om de voortgang van de ziekte te vertragen, vooral bij patiënten met idiopathische pulmonale fibrose (IPF), blijft pulmonale fibrose ongeneeslijk, met een overlevingskans van 3–5 jaar nadiagnose 1,2. In de meeste gevallen is de enige definitieve behandeling een longtransplantatie; Daarom is er een dringende behoefte om nieuwe en effectievere therapeutische opties te ontwikkelen.

Bleomycine is een medicijn dat vaak bij mensen wordt gebruikt voor de behandeling van maligniteit; het gebruik ervan wordt echter beperkt door pulmonale toxiciteit, die snel kan overgaan in pulmonale fibrose3. Na de ontdekking van deze bijwerking werd bleomycine gebruikt in onderzoek om diermodellen van pulmonale fibrose te ontwikkelen. Muizen zijn hiervoor vaak gebruikt 4,5,6 met verschillende methoden van Bleomycine-toediening, waaronder IV en intratracheale instillatie 7,8. Hoewel fibrose zich ontwikkelt in deze modellen, omvat geen van hen alle kardinale kenmerken van pulmonale fibrose die bij mensenwordt gezien 8. Knaagdiermodellen van pulmonale fibrose weerspiegelen geen belangrijke kenmerken van gevorderde ziekte, waaronder honingraatcystvorming en bronchiolisatie van de distale alveoli9. Daarnaast hebben studies aangetoond dat door bleomycine veroorzaakte longschade spontaan begint te verdwijnen bij knaagdieren ongeveer 28 dagen na bleomycinebehandeling10 dagen. Bovendien heeft geen van de middelen die in deze modellen fibrose remmen, een gelijkwaardig effect bij mensen gehad, waardoor onze therapeutische optiesbeperkt zijn.

Huisfretten (Mustela putorius furo) worden steeds vaker gebruikt in respiratoirbiomedisch onderzoek vanwege hun anatomische overeenkomsten met het menselijke ademhalingssysteem12. Daarnaast zijn ze vatbaar voor vergelijkbare respiratoire pathogenen die mensen infecteren, waaronder respiratoire syncytiale virus (RSV) en influenza, wat hun fysiologische overeenkomsten12 aantoont. Frettenmodellen van bleomycine tonen bronchiolisatie, de vorming van fibrotische foci en de aanwezigheid van aberrante basaloid-achtige (KRT7+/KRT17+/KRT5–/TP63+) cellen9 aan. Een enkele dosis bleomycine veroorzaakte langdurige longfibrose bij fretten, met beperkende fysiologie en fibrotische longafwijkingen die minstens 22 wekenaanhielden. Deze bevinding verschilt aanzienlijk van het veelgebruikte muisbleomycinemodel, waarbij fibrose over het algemeen zelfbeperkend is en na ongeveer 28 dagen begint te verdwijnen, met aanzienlijke regressie na 6–8 weken, wat suggereert dat het fretmodel de chronische en progressieve aard van menselijke pulmonale fibrose beter kan recapituleren. Bovendien zijn fretten recentelijk gebruikt in onderzoek naar taaislijmziekte, een systemische aandoening die het meest het ademhalingssysteem treft, vanwege hun gelijkenis met mensen14. Daarom kunnen deze dieren betere modellen voor PF zijn dan eerdere knaagdiermodellen.

Deze huidige studie was bedoeld om een diermodel van pulmonale fibrose te ontwikkelen dat meer lijkt op de menselijke conditie. We gaven intratracheale bleomycine aan tamme fretten. Na 8 weken vertoonden deze fretten radiografische en histologische veranderingen vergelijkbaar met die waargenomen bij mensen met pulmonale fibrose.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle dierprocedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften van het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) aan de Michigan State University (Animal protocol approval nr. PROTO202300066). Dierenverzorgings- en experimentele protocollen zijn goedgekeurd door Michigan State University en uitgevoerd in overeenstemming met institutionele normen voor ethisch gebruik van dieren in onderzoek.

1. Bronchoscopische installatie van bleomycine bij fretten

  1. Koop mannelijke fretten die in de leeftijdscategorie van 3–4 maanden zijn. Het gemiddelde gewicht van een mannelijke fret op deze leeftijd zou ongeveer 0,9–1,6 kg moeten zijn. Houd de dieren onder 21 °C met 40%–50% luchtvochtigheid.
  2. Dien 3%–5% isoflurangas toe aan de fret met behulp van een precisie-verdamper-anesthesiemachine.
  3. Houd de anesthesie door de neus van de fret te bedekken met een neuskegel en blijf isoflurangas toedienen in een concentratie van 3%–5%.
  4. Wanneer de fret voldoende gesedeerd en liggend is, start je de bronchoscopie met een bronchoscoop met een buitendiameter van 2,7 mm.
  5. Geef via het werkkanaal een mengsel van bleomycine (2 U/kg lichaamsgewicht) en zoutoplossing in de distale luchtpijp om diffuse verspreiding van de bleomycine mogelijk te maken. Zorg ervoor dat het totale volume niet meer dan 1 ml bedraagt. Breng de fretten terug naar hun respectievelijke woonunits en houd het 8 weken in de gaten.
    OPMERKING: De installatie mag niet langer dan twee minuten duren.
  6. Dien isofluraan toe met een precisie-vaporizer-gasanesthesiemachine. Bedek de neus van de fret met een neuskegel en geef 1%–5% isofluraan totdat de fret ligt liggen. Ga door met blootstelling aan gasen totdat de schijnbare klinische dood kan worden bevestigd. Geef een intraveneuze euthanasieoplossing in een dosis van 90 mg/kg en monitor de vitale functies totdat de dood is bevestigd.
  7. Oogst de longen 8 weken na behandeling voor micro-computertomografie (micro-CT) en histologische evaluatie.

2. Hoogresolutie micro-CT beeldvorming van frettenlongen

  1. Bereid verwijderd longweefsel voor voor beeldvorming door overtollig weefsel en bloed via de incisie in de inferieure vena cava te verwijderen om bloedafvoer mogelijk te maken. Voer de CT direct uit nadat de longen zijn voorbereid.
  2. Verkrijg tomografische micro-CT-beelden met een micro-CT-systeem met de volgende beeldinstellingen: 90 keV, 88 μA, vermogensinstelling met een 60 μm koperen en 500 μm aluminium röntgencollimatorfilter, met een 72 mm gezichtsveld (FOV) bij 144 μm isotrope beeldresolutie.
  3. Verkrijg in totaal 5 beelden op 18 seconden standaard gangtijden met behulp van een geautomatiseerd stitching-protocol om dubbele slices te overlappen, te borduren en te verwerpen om een definitief gestitched beeld te maken voor luchtwegpipeline-analyse; dit resulteert in een cilindrische diameter FOV x 186 mm totale geborduurde beelddiepte (Z-vlak) met een voxelresolutie van 144 μm, waardoor het volledige vastleggen van het gehele ex vivo ferret-longblok mogelijk is.
    1. Herhaal dit beeldvormingsprotocol voor elke set ex vivo ferretlongen bij zowel 0 cmH2O als 25 cmH2O longdruk.
    2. Gebruik een drukmeetsysteem dat direct op de long is aangesloten om de luchtwegdruk tijdens beeldvorming nauwkeurig te regelen en te behouden.
    3. Koppel de drukmeter aan een gereguleerde luchtstroombron om continue aanpassing van de intrapulmonale druk mogelijk te maken.
    4. Stel het systeem vóór de beeldvorming in op het gewenste drukniveau (0 cmH₂O of 25 cmH₂O) en blaas de long op met een constante luchtstroom.
    5. Gebruik tijdens het beelden de drukmeter om realtime feedback te geven over de luchtwegdruk en om kleine drukfluctuaties te compenseren met behulp van de luchtstroombron.

3. Beeldverwerking en segmentatie

  1. Laad de gereconstrueerde micro-CT-beeldvolumes in DICOM-formaat, die worden omgezet naar een neuroimaging informatics technology initiative (NIfTI)-formaat, in de luchtwegsegmentatiepijplijn.
  2. Definieer het interessegebied (ROI) in het micro-CT-beeld door axiale sneden aan het bovenste uiteinde handmatig bij te snijden om de buis en andere tracheale inserts uit te sluiten (zie Figuur 1A).
  3. Voer luchtwegsegmentatie uit met behulp van het geautomatiseerde Freeze-and-Grow-algoritme15,16 beschreven in de volgende belangrijke stappen.
    1. Plaats een zaad in de luchtpijp op de bovenste axiale beeldsnede binnen de ROI; een lege beeldarray met invoerbeeldgrootte creëren om het initiële confident luchtwegvolume (CAV) weer te geven met alle voxels toegewezen aan '0'; en voeg de zaadvoxel toe aan CAV door de waarde op '1' te zetten.
    2. Stel een initiële conservatieve micro-CT intensiteitsdrempel in t = -1000 HU voor segmentatie van het luchtweglumen.
    3. Maak een lege afbeeldingsarray met invoerbeeldgrootte om het verboden volume (FV) te representeren met alle voxels geïnitialiiseerd op '0'.
    4. Herhaal iteratieve segmentatie totdat de convergentie van luchtweglumensegmentatie is gedefinieerd door een van de twee vlaggen: 1) het volledige drempelbereik (-1000 tot -600 HU) is gecontroleerd, of 2) alle '0'-voxels die aan '1'-voxels in het CAV-beeld grenzen, zijn in de FV-afbeelding als '1' gemarkeerd.
      1. Bereken CAV centerline boom17 en identificeer eindpunten van de terminale tak18.
      2. Pas binaire drempeling toe op het micro-CT-beeld bij de huidige waarde t en bereken het nieuwe lumen-verbonden volume18 met CAV als seeds over het drempelgebied (voxelwaarde ≤ t), terwijl FV wordt uitgesloten.
      3. Voor elk CAV-eindpunt bereken je de bijbehorende voxels binnen het nieuwe lumenvolume, met uitzondering van CAV die dichter bij dat eindpunt liggen dan bij andere CAV-eindpunten.
      4. Detecteer het CAV-eindpunt met een groot volume aan bijbehorende voxels (>150 voxels, gelijk aan 0,5 mm3) als potentiële leklocaties in het nieuwe lumenvolume.
      5. Bevestig een mogelijke lumenlekkage met behulp van de geautomatiseerde criteria gedefinieerd in Nadeem et al.15.
      6. Verwijder eventuele lekkages in het lumenvolume door het subboomvolume distaal van de lekwortels te verwijderen, en voeg voxels toe rond lekwortels om FV te versterken met behulp van de eerder beschreven algoritmen15.
      7. Wijs het door lek verwijderde lumenvolume toe om de CAV bij te werken met behulp van de eerder beschreven algoritmen15.
      8. Verhoog de drempel t met '1'.
      9. Ga naar stap 3.3.4.
  4. Voer de berekening uit van een luchtweg-middenlijnboom van één voxel met behulp van een eerder gevalideerd geautomatiseerd algoritme17 dat in de volgende belangrijke stappen wordt beschreven.
    1. Voer de gesegmenteerde luchtwegboom in als een binaire NIfTI-afbeelding.
    2. Bereken de initiële luchtweg-middenlijnboom met behulp van een mediaal geprefereerde minimumkostenpadbenadering17 , beschreven in de volgende hoofdstappen.
      1. Maak een lege skeletafbeeldingsarray met invoerbeeldgrootte waarbij alle voxels aan '0' worden toegewezen; Voeg het geautomatiseerde seed van stap 3.3.1 toe als de initiële skeletvoxel met waarde '1'.
      2. Maak een lege beeldarray met de invoerbeeldgrootte waarbij alle voxels aan '0' worden toegewezen om het gemarkeerde luchtwegvolumebeeld weer te geven.
      3. Identificeer de voxel in het ongemarkeerde luchtwegvolume dat het verst van het huidige skelet ligt en bereken het mediaal voorkeurs-minimumkostenpad dat dit punt verbindt met het huidige skelet met het eerder beschreven algoritme17.
      4. Voeg het resulterende pad toe als een nieuwe skelettak aan de skeletbeeldarray en werk het door de luchtweg gemarkeerde volume bij door lokale schaaladaptieve dilatatie langs de tak toe te passen, zoals eerder beschreven17.
      5. Herhaal stappen 3.4.2.3–3.4.2.4 totdat het gemarkeerde luchtwegvolume is gevuld.
    3. Snoei ongewenste topologische takken terwijl je de werkelijke luchtwegmiddenlijnen bewaart met behulp van een lokale schaalgebaseerde selectiestrategie op de lengte van de tak, zoals eerder beschreven17.
    4. Elimineer eenvoudige punten19 in de middenlijn van de luchtweg die geen vertakkingseindpunten zijn (d.w.z. die grenzend aan meer dan één middenlijnvoxel) om topologische consistentie te waarborgen en een enkelvoudig voxel-dikke middenlijn te behouden.
  5. Voer segmentatie van longparenchym uit in microbeelden van frettenlongen bij 0 cmH2O.
    1. Handmatig afbakense longparenchym op elke vijfde coronale beeldsnede met behulp van computationele algoritmen en grafische interfaces die zijn ingebed in ITK-SNAP20.
      OPMERKING: Het micro-CT intensiteitscontrast tussen het longparenchym en de omliggende achtergrond bij de inflatie van 25 cmH2O was onvoldoende, waardoor een betrouwbare segmentatie van het longvolume onmogelijk werd.
    2. Pas beeldinterpolatie toe om een segmentatie van longparenchym te genereren bij tussenliggende beeldsneden.
    3. Voer een secundaire kwaliteitscontrole uit om structurele continuïteit van parenchymale segmentatie langs zowel axiale als sagittale richtingen te waarborgen.
    4. Sluit luchtweglumen en wandgebieden uit van het longparenchym met behulp van een lokale schaalgebaseerde dilatatie van het lumenvolume, en trek vervolgens het verwijdde volume af van het longparenchym.
  6. Kwantificeer mechanische metingen van luchtwegen21.
    1. Kwantificeer de door ademhaling gerelateerde radiale expansie van individuele luchtwegen door veranderingen te meten in ruimtelijk gematchte luchtweglumen dwarsdoorsnede-oppervlakte (CSA) tussen inspiratorische (25 cmH2O-inflatie) en uitademingsvolume (0 cmH2O-inflatie). Bereken de radiale expansie bij een luchtwegtak b, aangeduid met Δair-R(b), als:
      figure-protocol-1(1)
      waarbij CSAins(b) en CSAexp(b) de luchtweglumen CSA aangeven bij de inademings- en uitademingslongvolumes. CSA bij b wordt berekend met behulp van radiale lijntracering en lokaal adaptieve half-max methoden over de centrale helft van de tak b22.
    2. Kwantificeer ademhalingsgerelateerde longitudinale uitrekking van individuele luchtwegen als volgt:
      figure-protocol-2(2)
      waarbij Lins(b) en Lexp(b) de geodetische padlengtes van de luchtwegtak b bij respectievelijk inspiratorische en uitademende longvolumes aanduiden. De geodetische padlengte van een tak wordt berekend door het middenlijnpad van de carina naar het distale eindpunt van de tak21 te volgen.
  7. Kwantificeer intensiteitsgebaseerde metingen van longparenchym.
    1. Visualiseer ruimtelijk de micro-CT intensiteitsverdeling van het longparenchym bij gezonde en fibrotische fretten door een "look-through 3D volumeweergave" van het longparenchymvolume te genereren in de context van de luchtwegboom. Bereik het look-through-effect met micro-CT intensiteitsgedefinieerde transparantiemapping en kleurcodering. Pas dezelfde transparantiemapping en kleurcoderingsschalen toe op zowel gezonde als fibrotische fretlongen. De volgende stappen worden toegepast om de look-through 3D-volumeweergave te genereren.
      1. Gebruik 3D Slicer23 om het driedimensionale (3D) NIfTI-beeld van luchtwegsegmentatie bij 0 cmH2O inflatie te openen als een "segmentatie".
      2. Genereer een 3D-luchtwegrepresentatie met behulp van de Segmentatiesmodule . Selecteer het luchtwegvolume als ingang en klik in het tabblad Representaties op Creëren onder de optie Gesloten oppervlak .
      3. Importeer het micro-CT intensiteitsbeeld met gescheiden longparenchym in 3D Slicer als Volume. Op deze afbeelding zijn de oorspronkelijke micro-CT intensiteitswaarden behouden voor longvoxels, terwijl alle niet-longvoxels een waarde van -2000 HU hebben toegewezen.
      4. Configureer kleur- en transparantiemapping voor longparenchymale intensiteiten met behulp van de Volume Rendering-module . Kaartintensiteitswaarden van -1500 HU, -600 HU, 0 HU en 1500 HU naar zwart, groen, geel en rood, met dichtheden van respectievelijk 0, 0,15, 0,3 en 1.
    2. Gebruik het algoritme dat in deze studie is ontwikkeld om het aandeel ziek weefsel binnen het longparenchym te schatten door de waargenomen intensiteitsverdeling uit micro-CT-beeldvorming te analyseren. De methode gaat ervan uit dat de intensiteitswaarden van gezonde parenchymale gebieden een Gaussische verdeling volgen. Daarentegen vervormen fibrotische gebieden, met karakteristiek hogere intensiteiten, de Gaussianiteit van de rechterzijde van het waargenomen histogram. Voltooi deze taak in de volgende stappen.
      1. Bereken het histogram voor een geïsoleerd longparenchymalbeeld in stap 3.7.1.3 met 50 bins over het intensiteitsbereik van -1500 HU tot 500 HU.
      2. Bereken het gemiddelde van de doel-Gaussische verdeling als de modus van het histogram en leid de standaarddeviatieparameter af met behulp van de intensiteitswaarden links van de modus op het histogram.
      3. Kwantificeer het volume van fibrotisch weefsel als het overtollige oppervlak aan de rechterkant van het waargenomen histogram dat boven de verwachte Gaussische verdelingscurve ligt, gedefinieerd door de gemiddelde en standaarddeviatieparameters verkregen in stap 3.7.2.2.
      4. Bereken de fractie van het zieke weefsel als de verhouding van het fibrotische weefselvolume tot het totale aantal histogrammen dat het volume van de parenchymale regio vertegenwoordigt.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Van de vijf fretten werden de verwijderde longen van één gezonde fret en één fibrotische fret gefotografeerd met een micro-CT-scanner bij gecontroleerde luchtwegdrukken van 0 cmH2O en 25 cmH2O om respectievelijk uitademings- en inademingslonginflaties te simuleren.

Figuur 1 illustreert de tussenresultaten van de beeldverwerkingspijplijn voor het micro-CT-beeld (Figuur 1A<...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Deze studie beschrijft een protocol waarbij intratracheale bleomycine toegediend wordt bij fretten gecombineerd met hoogresolutie ex vivo micro-computertomografie (micro-CT) om structurele en mechanische kenmerken van pulmonale fibrose te karakteriseren. Micro-CT kan kleine luchtwegen detecteren tot 0,2 mm en volumes, luchtwegdikte, dichtheid en morfologie meten. Toegenomen weefseldichtheid, volumeverlies en regionale heterogeniteit komen nauw overeen met de histopathologie. Het...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

MATK ontving een honorarium als consultant van InflaRx om deel te nemen aan de IMV/ECMO Adviesraad voor opgenomen COVID-19-patiënten in 5/2024. Deze kosten zijn gedoneerd aan de Corewell Health Foundation.

Dankbetuigingen

De auteurs verklaren dat er financiële steun is ontvangen voor het onderzoek, het auteurschap en/of de publicatie van dit artikel. De financiering voor deze studie werd deels verstrekt door de subsidie van de R01 HL153165-01A1 (aan X.P.L.) en het Helen DeVos Children's Hospital Pediatric Research Fund.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1 mL Luer locking syringeBD309628
10 mL Luer locking syringeBD303134
24 G ´ 3/4" Exel safelet catheterEXELINT INTERNATIONAL CO.26751
3 mL Luer locking syringeBD309657
30 mL Luer locking syringeBD302832
5 mL Luer locking  syringeBD309647
BD Precision glide needle 18 G ´ 1 1/1" BD305196
BD Precision glide needle 20 G ´ 1"BD305175
BD Precision glide needle 23 G ´ 1" BD305145
Dulbecco's phosphate-buffered saline (DPBS -/-) Gibco14190250
Endotracheal intubation tubes with cuff oxygen catheterCaphstion2.0MM
ET Tube, Uncuffed, 2.0Teleflex5-10404
Ethicon Permahand silk suture, Size 2-0, No Needle, 18", 36/Box, A185HFisher Scientific50-209-2809
Invitrogen RNAlater stabilization solutionFisher ScientificAM7021
IsofluraneCovetrus11695-6777-2
Lubricant PM ointment AACE Pharmaceuticals71406-124-35Oogzalf
MADgic 700 atomizerTeleflexMAD700
Manometer, Professional air pressure meterLeatonT168
Rodent ventilator model 683Harvard Apparatus, Inc. 55-3438
Sterile saline, 0.9%CellProDS0329
Veterinary pulse oximeteruPM60VUVMI

Referenties

  1. Jiang M, et al. Pulmonary fibrosis: from mechanisms to therapies. J Transl Med. 2025;23(1):515.
  2. Glass DS, et al. Idiopathic pulmonary fibrosis: Current and future treatment. Clin Respir J. 2022;16(2):84-96.
  3. Mohammed SM, et al. Mechanisms of bleomycin-induced lung fibrosis: a review of therapeutic targets and approaches. Cell Biochem Biophys. 2024;82(3):1845-70.
  4. Izbicki G, Segel M, Christensen T, Conner M, Breuer R. Time course of bleomycin-induced lung fibrosis. Int J Exp Pathol. 2002;83(3):111-9.
  5. Ayilya BL, et al. Insights on the mechanism of bleomycin to induce lung injury and associated in vivo models: a review. Int Immunopharmacol. 2023;121:110493.
  6. Moore BB, et al. Animal models of fibrotic lung disease. Am J Respir Cell Mol Biol. 2013;49(2):167-79.
  7. Gul A, et al. Pulmonary fibrosis model of mice induced by different administration methods of bleomycin. BMC Pulm Med. 2023;23(1):91.
  8. Moore BB, Hogaboam CM. Murine models of pulmonary fibrosis. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2008;294(2):L152-L160.
  9. Wu S, et al. Ferret model of bleomycin-induced lung injury shares features of human idiopathic pulmonary fibrosis. NPJ Regen Med. 2025;10(1):53.
  10. Ishida Y, Kuninaka Y, Mukaida N, Kondo T. Immune mechanisms of pulmonary fibrosis with bleomycin. Int J Mol Sci. 2023;24(4):3149.
  11. Moeller A, Ask K, Warburton D, Gauldie J, Kolb M. The bleomycin animal model: a useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis? Int J Biochem Cell Biol. 2008;40(3):362-82.
  12. Smith RE, Choudhary S, Ramirez JA. Ferrets as models for viral respiratory disease. Comp Med. 2023;73(3):187-93.
  13. Peabody Lever JE, et al. A ferret model demonstrates sustained fibrosis, restrictive physiology, and airway proximalization. NPJ Regen Med. 2025;10(1):55.
  14. Sun X, et al. Disease phenotype of a ferret CFTR-knockout model of cystic fibrosis. J Clin Invest. 2010;120(9):3149-60.
  15. Nadeem SA, et al. A CT-based automated algorithm for airway segmentation using freeze-and-grow propagation and deep learning. IEEE Trans Med Imaging. 2021;40(1):405-18.
  16. Nadeem SA, Comellas AP, Hoffman EA, Saha PK. Airway detection in COPD at low-dose CT using deep learning and multiparametric freeze and grow. Radiol Cardiothorac Imaging. 2022;4(6):e210311.
  17. Jin D, Iyer KS, Chen C, Hoffman EA, Saha PK. A robust and efficient curve skeletonization algorithm for tree-like objects using minimum cost paths. Pattern Recogn Lett. 2016;76:32-40.
  18. Saha PK, Strand R, Borgefors G. Digital topology and geometry in medical imaging: a survey. IEEE Trans Med Imaging. 2015;34(9):1940-64.
  19. Saha PK, Chaudhuri BB. Detection of 3-D simple points for topology preserving transformations with application to thinning. IEEE Trans Pattern Anal Mach Intell. 1994;16(10):1028-32.
  20. Yushkevich PA, et al. User-guided 3D active contour segmentation of anatomical structures: significantly improved efficiency and reliability. Neuroimage. 2006;31(3):1116-28.
  21. Nadeem SA, et al. Automated CT-based measurements of radial and longitudinal expansion of airways due to breathing-related lung volume change. Med Phys. 2025;52(4):2316-29.
  22. Nadeem SA, et al. Locally adaptive half-max methods for airway lumen-area and wall-thickness and their repeat CT scan reproducibility. 2020 IEEE 17th International Symposium on Biomedical Imaging; Iowa City, IA, USA. 2020: 10.1109/ISBI45749.2020.9098558.
  23. Fedorov A, et al. 3D Slicer as an image computing platform for the quantitative imaging network. Magn Reson Imaging. 2012;30(9):1323-41.
  24. Nathani A, Dincer HE. Advancements in imaging technologies for the diagnosis of lung cancer and other pulmonary diseases. Diagnostics (Basel). 2025;15(7):826.
  25. Sverzellati N. Highlights of HRCT imaging in IPF. Respir Res. 2013;14 Suppl 1:S3.
  26. Nandy S, et al. Diagnostic accuracy of endobronchial optical coherence tomography for the microscopic diagnosis of usual interstitial pneumonia. Am J Respir Crit Care Med. 2021;204(10):1164-79.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

GeneeskundeEditie 233Editie 233Lege waardeEditieLongfibroseBleomycinegroot diermodel
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.