Onderzoeksartikel

Mendeliaanse randomisatieanalyse van NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken en type 2 diabetes en de complicaties daarvan

DOI:

10.3791/71230

⸱

21 augustus 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Laboratory Medicine, Zhongshan People's Hospital, 2Department of Advanced Diagnostic and Clinical Medicine, Zhongshan People's Hospital

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze MR-studie met twee steekproeven identificeerde potentiële associaties van genetisch voorspelde NET-gerelateerde inflammatoire kenmerken met T2DM-complicaties. Genetisch voorspelde IL-6 was omgekeerd geassocieerd met diabetische CAD, terwijl NETs geassocieerd waren met renale en perifere circulatoire complicaties bij T2DM. Sensitiviteitsanalyses ondersteunden over het algemeen de stabiliteit van deze significante associaties.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ontstekingskenmerken geassocieerd met neutrofiele extracellulaire traps (NETs) spelen een belangrijke rol bij diabetes mellitus type 2 (T2DM) en de complicaties daarvan. In het bijzonder is IL-6, een cruciaal inflammatoir cytokine, nauw verbonden met de vorming van NETs en de pathogenese van T2DM en de bijbehorende complicaties. Deze studie beoogde de causale associatie tussen NETs-geassocieerde ontstekingskenmerken en T2DM, evenals de complicaties hiervan, te onderzoeken met behulp van een Mendeliaanse Randomisatie (MR)-benadering. In deze studie werd een two-sample MR-ontwerp gebruikt met gegevens van Genome-Wide Association Studies (GWAS), bestaande uit een grote meta-analyse op basis van een Europese populatie voor T2DM en de complicaties daarvan. De primaire analysemethode was de inverse variance weighted (IVW)-benadering, aangevuld met MR-Egger-regressie, gewogen mediaan en gewogen modus-methoden. Sensitiviteitsanalyses omvatten MR-Egger, MR-PRESSO, Cochran's Q en leave-one-out-methoden om de robuustheid van de bevindingen te beoordelen. De studie wees uit dat genetisch voorspelde spiegels van interleukine-6 (IL-6) omgekeerd geassocieerd waren met diabetische coronaire hartziekte (CAD) (OR = 0,8997, 95% CI: 0,8257–0,9803, P = 0,0158). Daarnaast vertoonden NETs significante associaties met T2DM met renale complicaties (OR = 0,97, 95% CI 0,9428–0,998, P = 0,0358) en T2DM met perifere circulatoire complicaties (OR = 1,0342, 95% CI 1,002–1,0673, P = 0,037). De significante IVW-associaties vertoonden geen bewijs van heterogeniteit of horizontale pleiotropie. Deze studie suggereert dat genetisch voorspelde NETs-geassocieerde ontstekingskenmerken verbonden zijn met specifieke T2DM-complicaties. Genetisch voorspelde IL-6 was omgekeerd geassocieerd met diabetische CAD, terwijl NETs geassocieerd waren met renale en perifere circulatoire complicaties bij T2DM.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Diabetes mellitus type 2 (T2DM), gekenmerkt door insulineresistentie en vaak gepaard gaand met progressieve bètacel-dysfunctie, heeft wereldwijd epidemische proporties bereikt1,2. Deze complicaties van T2DM, waaronder cardiovasculaire aandoeningen, nierfalen, neuropathie en retinopathie, vormen een aanzienlijke belasting, niet alleen voor individuen in termen van hun gezondheid en levenskwaliteit, maar ook voor gezondheidszorgsystemen wereldwijd, wat leidt tot een zwaardere druk op middelen, stijgende kosten en economische impact3,4. Gezien de veelzijdige aard van T2DM is een genuanceerde verkenning van de etiologische factoren noodzakelijk. Toenemend bewijs wijst op een betrokkenheid van neutrophil extracellular traps (NETs) bij de pathofysiologie van diverse metabole stoornissen, in het bijzonder in verband met T2DM.

Neutrofiele extracellulaire traps (NETs) zijn extracellulaire netwerken van gedecondenseerd DNA en granulaproteïnen die krachtige microbicide eigenschappen bezitten5,6. Markers zoals celvrij DNA en gecitrullineerd histon H3 dienen als belangrijke indicatoren van NETosis, wat inflammatoire activiteit weerspiegelt bij verschillende ziekten7,8. Toenemend bewijs suggereert dat diabetes de vorming van NETs bevordert, waardoor inflammatie en weefselbeschadiging worden voortgezet9,10. Klinisch gezien correleren verhoogde NETs-markers met hyperglykemie en ongunstige uitkomsten bij meerdere diabetische complicaties. Zo zijn verhoogde dsDNA-spiegels gekoppeld aan glucose-dysregulatie bij STEMI-patiënten11, terwijl NETs-componenten geassocieerd zijn met de progressie van diabetische retinopathie12 en het amputatierisico bij diabetische voetulcera voorspellen13. Ondanks deze associaties moet de precieze causale relatie tussen NETs en de ontwikkeling van T2DM en de complicaties daarvan nog volledig worden opgehelderd. Toenemend bewijs benadrukt een bidirectionele interactie tussen IL-6 en NETs bij metabole inflammatie. Hyperglykemie primet neutrofielen voor NETosis, waarbij IL-6 dient als een krachtige inductor van dit energieafhankelijke proces14. Klinisch gezien voorspelt IL-6 onafhankelijk verhoogde NETs-markers (bijv. H3Cit en celvrij DNA) bij diabetes type 2, die sterk correleren met prothrombotische toestanden en microvasculaire complicaties zoals diabetische retinopathie15,16. Bovendien kan infectie-geïnduceerde NETosis de IL-6 trans-signaling versterken, waardoor een wederzijdse regulatieve loop ontstaat17. Gezamenlijk onderstrepen deze bevindingen de nauw gekoppelde pathofysiologie van IL-6 en NETs, in het bijzonder binnen het diabetische milieu.

Mendeliaanse randomisatie (MR) is een krachtige statistische methode die gebruikmaakt van natuurlijk voorkomende genetische varianten als instrumentele variabelen om de causale effecten van aanpasbare blootstellingen op gezondheidsuitkomsten te schatten, wat inzicht biedt in complexe ziektepaden18. Deze benadering, geworteld in de erfswetten van Mendel, stelt onderzoekers in staat om in observationele studies causaliteit af te leiden door gebruik te maken van de willekeurige segregatie van allelen tijdens de meiose, waardoor sommige beperkingen van traditionele epidemiologische methoden bij het vaststellen van oorzaak-gevolgrelaties worden omzeild19.

Tot op heden zijn er slechts beperkte rapporten over MR-studies die de causale relatie onderzoeken tussen genetisch voorspelde ontstekingskenmerken geassocieerd met NETs en T2DM en de complicaties daarvan. Daarom beoogt de huidige studie de potentiële causale associaties tussen NETs-geassocieerde ontstekingskenmerken en T2DM, evenals de complicaties daarvan, te verkennen met behulp van een two-sample MR-analysemethode.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Studieopzet

Dit onderzoek maakte gebruik van een twee-steekproeven MR-benadering om de causale relatie tussen NETs-geassocieerde ontstekingskenmerken en T2DM en de complicaties daarvan te onderzoeken. Het MR-raamwerk rust op drie kernaannames20: 1) de genetische variant moet robuust geassocieerd zijn met de blootstelling, 2) de genetische variant mag de uitkomst alleen beïnvloeden via de blootstelling (uitsluiting van pleiotropie), en 3) de genetische variant mag niet geassocieerd zijn met enige verstorende factoren. Voor een gedetailleerd overzicht van het proces van deze studie, zie Figuur 1. Het manuscript houdt zich aan de MR-STROBE-richtlijnen voor het rapporteren van MR-studies, wat strenge normen voor transparantie en reproduceerbaarheid waarborgt21.

Gegevensbronnen

De data van de Genome-Wide Association Studies (GWAS) die in deze MR-analyse zijn gebruikt, zijn afkomstig uit publieke GWAS-databases. Wat betreft de GWAS-samenvattingsgegevens over T2DM werden de grootste meta-analyse van een Europese populatie, bestaande uit 74.124 gevallen en 824.006 controles, own een prospectieve geneste case-cohortstudie uitgevoerd in Europa, met 9.978 gevallen en 12.348 controles, betrokken22. Voor diabetische complicaties, waaronder T2DM met renale complicaties en T2DM met perifere circulatoire complicaties, zijn in deze studie GWAS-samenvattingsstatistieken opgehaald uit studies waarin de gevallen T2DM-patiënten met de specifieke complicatie waren en de controles individuen zonder T2DM waren. Gedetailleerde informatie over de databronnen is te vinden in Aanvullende Tabel 1.

GWAS-data voor ontstekingskenmerken geassocieerd met NETs werden verkregen uit de GWAS catalogus (zie Aanvullende Tabel 2). Om de heterogeniteit in biologische specificiteit aan te pakken, categoriseerde deze studie de opgenomen blootstellingen in twee verschillende groepen op basis van hun functionele rollen in de neutrofielbiologie: (1) Kernfactoren gerelateerd aan NETosis: Deze categorie omvat markers die direct betrokken zijn bij de structurele vorming van NETs of het enzymatische proces van chromatindecondensatie. Specifiek omvatte deze studie de NETs zelf, Myeloperoxidase (MPO), Neutrophil Elastase (NE) en het MPO-DNA-complex. MPO en NE zijn essentiële enzymen voor histondegradatie en chromatindecondensatie, terwijl het MPO-DNA-complex een specifieke surrogaatmarker is voor NETs23. (2) NETs-geassocieerde ontstekingsmediatoren: Deze categorie omvat cytokinen en mediatoren die fungeren als upstream-regulatoren of downstream-effectoren die nauw verbonden zijn met NETosis, maar ook betrokken zijn bij bredere ontstekingsroutes. Deze groep omvat Interleukine-6 (IL-6)24, Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF-α)25, Neutrophil gelatinase-associated lipocalin-niveaus (NGAL)26 en Cellular Communication Network Factor 1 (CCN1)27.

De gegevens die in deze studie zijn gebruikt, zijn afkomstig uit open-access databanken of GWAS die in eerdere studies zijn gepubliceerd; daarom was voor dit onderzoek geen ethische goedkeuring vereist.

Selectie van genetische instrumenten gerelateerd aan NETs

Aangezien de vorming van NETs een dynamisch biologisch proces is dat niet direct wordt gemeten in conventionele GWAS, maakte deze studie gebruik van een gengebaseerde benadering om genetische instrumenten te identificeren voor ontstekingskenmerken geassocieerd met NETs. Een uitgebreide set van 257 genen die naar bekend is cruciaal betrokken bij de vorming en regulatie van NETs, zoals MPO, samen met genen die histonen en neutrofiele granulae-eiwitten coderen, werd samengesteld op basis van gevestigde mechanistische studies en gepubliceerde literatuur28.

Selectie van instrumentele variabelen

Om robuuste genetische instrumenten te identificeren voor ontstekingskenmerken geassocieerd met NETs, implementeerde deze studie een sequentiële filteringsworkflow met gebruik van GWAS-samenvattingsstatistieken. De specifieke operationele stappen waren als volgt:

Initiële screening: Genetische varianten die significant geassocieerd waren met de blootstellingskenmerken werden geëxtraheerd29 op basis van een significantiedrempel van P < 5 × 10⁻6.

Filtering van de minor alleelfrequentie (MAF): Om de statistische kracht te waarborgen, werden Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs) met een MAF ≤ 0,01 uitgesloten30.

Clumping van linkage disequilibrium (LD): Om confounding door linkage disequilibrium (LD) te beperken, werden onafhankelijke SNP's geselecteerd met de clumping-functie, waarbij de parameters waren ingesteld op r2 < 0,001 binnen een venster van 10.000 kb31.

Beoordeling van de instrumentsterkte: De sterkte van elke overgebleven IV werd gekwantificeerd met behulp van de F-statistiek, berekend als F = R2 × (N-2) / (1-R2). Alleen SNP's met een F-statistiek > 10 werden behouden om bias door zwakke instrumenten te minimaliseren32.

Identificatie van proxy SNP's en dataharmonisatie

Om ontbrekende SNP's in de uitkomstdataset aan te pakken, voerde deze studie een proxy-zoekopdracht en een proces van dataharmonisatie uit:

Proxy-substitutie: Wanneer een target SNP uit de GWAS van de blootstelling niet beschikbaar was in de GWAS van de uitkomst, maakte deze studie gebruik van de LDproxy()-functie op basis van het Europese referentiepanel van het 1.000 Genomes Project. Een kandidaat-proxy-SNP werd alleen geselecteerd als deze een hoge LD vertoonde met de oorspronkelijke SNP (r2> 0,8). Als er geen geschikte proxy werd gevonden, werd de SNP uitgesloten.

Harmonisatie: De datasets voor blootstelling en uitkomst werden uitgelijnd met behulp van de functie harmonise_data() uit het TwoSampleMR-pakket (R versie 4.0.5). In deze studie werd de parameter action = 2 ingesteld om automatisch alle SNP's uit te lijnen op de forward strand en palindromische SNP's met een ambigue strand-oriëntatie te verwijderen.

Verificatie: Na de harmonisatie is de geharmoniseerde dataset handmatig gecontroleerd om te bevestigen dat de effectallelfrequenties consistent waren tussen de blootstellings- en uitkomstgegevens.

MR-analyse en sensitiviteitstesten

Causale inferentie werd uitgevoerd met behulp van het TwoSampleMR-pakket (R versie 4.0.5).

Primaire en secundaire analyses: In deze studie werd de Inverse Variance Weighted (IVW)-methode toegepast als primaire benadering33. Aanvullende analyses werden uitgevoerd met behulp van MR-Egger34, de gewogen mediaan en gewogen modus-methoden om de robuustheid te waarborgen35.

Gevoeligheidsanalyses: Heterogeniteit tussen de IV's werd geëvalueerd met de Q-test van Cochran36 via de functie mr_heterogeneity(). Horizontale pleiotropie werd beoordeeld met de MR-Egger34 intercept-test (mr_pleiotropy_test()).

Detectie van uitschieters: In deze studie is het MR-PRESSO-pakket gebruikt om potentiële uitschieters te detecteren37. De functie mr_presso() werd uitgevoerd met 1.000 simulaties. Geïdentificeerde uitschieter-SNP's (P < 0,05) werden verwijderd, waarna de causale schattingen opnieuw zijn berekend om de stabiliteit van de resultaten te verifiëren. Daarnaast is een leave-one-out-analyse uitgevoerd om te bevestigen dat de causale associatie niet werd gedreven door een enkele SNP38.

Statistische correctie

Om rekening te houden met meervoudig testen werden de P-waarden verkregen uit de MR-analyses gecorrigeerd met de False Discovery Rate (FDR)-methode. Dit is uitgevoerd met de P.adjust()-functie in R met de parameter method = "fdr". Associaties met een gecorrigeerde P-waarde (PFDR) < 0,05 werden als statistisch significant beschouwd.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Geselecteerde instrumentele variabelen

In deze studie werd een MR-analyse uitgevoerd met ontstekingskenmerken geassocieerd met NETs als blootstelling. Hiervoor werden in totaal 106 IV's geïdentificeerd, waarvan de details zijn opgenomen in Aanvullende Tabel 3. De F-statistieken van deze IV's hadden een gemiddelde waarde van 26,46, variërend van een minimum van 20,6 tot een maximum van 250,4.

Wanneer T2DM en de verschillende complicaties ervan (diabetische ketoacidose, renale complicaties, ophthalmische complicaties, neurologische complicaties en perifeer circulatoire complicaties) als uitkomsten werden genomen, kon de informatie voor drie SNP's niet worden gekoppeld in de samengevatte gegevens. In deze studie werden proxy-SNP's gebruikt (Aanvullende tabel 4).

Causaal verband tussen NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken bij T2DM en de complicaties daarvan

De belangrijkste resultaten van de IVW-methode worden gepresenteerd in Tabel 1, terwijl Aanvullende Tabel 5 de complementaire MR-schattingen detailleert die zijn afgeleid via de MR-Egger, gewogen mediaan en gewogen modus benaderingen. Opvallend is dat de IVW-resultaten statistisch significante associaties onthulden tussen interleukine-6 (IL-6) spiegels en diabetische CAD (OR = 0,8997, 95% BI 0,8257–0,9803, P = 0,0158), wat consistent is met het resultaat van de gewogen mediaanmethode. Deze bevindingen suggereerden dat IL-6 genetisch geassocieerd was met cardiovasculaire complicaties van diabetes. Daarnaast gaven de resultaten van de IVW-analyse aan dat NETs significant geassocieerd waren met T2DM met renale complicaties (OR = 0,97, 95% BI 0,9428–0,998, P=0,0358) en T2DM met perifere circulatoire complicaties (OR = 1,0342, 95% BI 1,002–1,0673, P = 0,037). De scatterplot en forest plot voor de bovengenoemde positieve resultaten zijn weergegeven in Figuur 2.

De resultaten van de MR Egger-regressie gaven geen bewijs van horizontale pleiotropie in de analyse aan, zoals gedetailleerd in Tabel 2. Op basis van de heterogeniteitsresultaten gepresenteerd in de Q-test van Cochran (Tabel 2) en funnelplots (Figuur 3A–C) is geobserveerd dat geen van de P-waarden voor de Q-statistiek onder de conventionele drempelwaarde van 0,05 liggen, wat duidt op geen significante heterogeniteit tussen de IV's voor de belangrijkste uitkomsten van belang in deze studie.

Bovendien identificeerde de MR-PRESSO-analyse (Tabel 3) een outlier (rs139237904) wanneer CCN1 als exposure en T2DM als uitkomst werd beschouwd; de resultaten bleven niet-significant na de uitsluiting hiervan. Op dezelfde manier werden er, wanneer MPO de exposure en T2DM de uitkomst was, twee outliers (rs10916508 en rs6544660) gedetecteerd, en bleven de niet-significante resultaten aanhouden na verwijdering. Voor NGAL als exposure met T2DM als uitkomst werd één outlier (rs10497219) gevonden, en de negatieve resultaten bleven overeind na de uitsluiting hiervan. In het geval van TNF-α als exposure en T2DM met ketoacidose als uitkomst was er sprake van een enkele outlier (rs10103048), en de uitsluiting veranderde de niet-significante uitkomst niet. Echter, wanneer NGAL werd geassocieerd met T2DM en neurologische complicaties, werden twee outliers (rs10497219 en rs1287048) geïdentificeerd, en na hun verwijdering werden de resultaten positief, wat duidt op een significante associatie. De 'leave-one-out'-analyse (Figuur 3D–F) biedt verder bewijs voor de robuustheid van de bevindingen. Samenvattend suggereert deze MR-analyse een potentiële rol van IL-6 en NETs in de etiologie van diabetische complicaties, wat verdere onderzoek rechtvaardigt.

DATAbeschikbaarheid:

Alle gegevens die tijdens deze studie zijn gegenereerd of geanalyseerd, zijn opgenomen in dit artikel en Aanvullende tabel 1, Aanvullende tabel 2, Aanvullende tabel 3, Aanvullende tabel 4en Aanvullende tabel 5.

figure-results-1
Figuur 1: Studieontwerp in deze MR-studie. (A) MR-analyses zijn afhankelijk van drie kernaannames. (B) Schets van het studieontwerp. NETs: neutrofiele extracellulaire traps; T2DM: diabetes mellitus type 2; SNP: single nucleotide polymorfisme; MR: Mendeliaanse randomisatie; IVW: inverse variance weighted; MR-PRESSO: Mendelian Randomization Pleiotropy RESidual Sum and Outlier Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-2
Figuur 2: Causaal verband tussen NETs-geassocieerde inflammatoire kenmerken en T2DM en de complicaties daarvan. (A) Spreidingsdiagram dat het verband tussen IL-6-niveaus en diabetische CAD laat zien. (B) Spreidingsdiagram dat het verband tussen NETs en T2D met renale complicaties laat zien. (C) Spreidingsdiagram dat het verband tussen NETs en T2D met perifere circulatoire complicaties laat zien. (D) Forest plot van IL-6-niveaus bij diabetische CAD. (E) Forest plot van NETs bij T2D met renale complicaties. F: Forest plot van NETs bij T2D met perifere circulatoire complicaties. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-results-3
Figuur 3: Resultaten van de sensitiviteitsanalyse. (A) Funnel plot van IL-6-spiegels bij diabetische CAD. (B) Funnel plot van NETs bij T2D met renale complicaties. (C) Funnel plot van NETs bij T2D met perifere circulatoire complicaties. (D) Leave-one-out sensitiviteitsanalyse van IL-6-spiegels bij diabetische CAD. (E) Leave-one-out sensitiviteitsanalyse van NETs bij T2D met renale complicaties. (F) Leave-one-out sensitiviteitsanalyse van NETs bij T2D met perifere circulatoire complicaties. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Tabel 1: Primaire causale associatie van NETs-geassocieerde inflammatoire kenmerken bij T2DM en de complicaties daarvan Klik hier om deze tabel te downloaden.

Tabel 2: Resultaten van heterogeniteit en pleiotropie van instrumentele variabelen Klik hier om deze tabel te downloaden.

Tabel 3: Resultaten van MR-PRESSO Klik hier om deze tabel te downloaden.

Aanvullende tabel 1: Gegevensbron van T2DM en de complicaties daarvan Klik hier om dit bestand te downloaden.

Aanvullende tabel 2: Gegevensbron van NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken Klik hier om dit bestand te downloaden.

Aanvullende Tabel 3: Selectie van instrumentele variabelen (IV's) Klik hier om dit bestand te downloaden.

Aanvullende tabel 4: Lijst van proxy-SNP's gebruikt in de MR-analyse Klik hier om dit bestand te downloaden.

Aanvullende Tabel 5: Complementaire MR-schattingen voor de causale associaties tussen NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken en T2DM-complicaties Klik hier om dit bestand te downloaden.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie maakt gebruik van een two-sample MR-benadering om de associaties tussen NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken en T2DM, evenals de complicaties daarvan, te onderzoeken. De belangrijkste resultaten suggereren een statistisch significante inverse associatie tussen genetisch voorspelde IL-6-spiegels en diabetische CAD. Deze bevinding kan de complexe genetische architectuur van IL-6-signaleringspaden weerspiegelen in plaats van een direct beschermend effect van circulerend IL-6 op cardiovasculaire complicaties van diabetes. Daarnaast onthult deze studie associaties tussen NETs en diverse diabetische complicaties, waaronder renale en perifere circulatoire complicaties bij T2DM-patiënten. Deze associaties benadrukken het belang van NETs in de pathogenese van diabetesgerelateerde complicaties en kunnen toekomstige therapeutische strategieën informeren die gericht zijn op deze inflammatoire paden.

De associatie tussen IL-6 en diabetische CAD is onderwerp geweest van aanzienlijk debat, waarbij studies uiteenlopende perspectieven presenteren over de rol van IL-6. Deze studie suggereert dat IL-6 een complexe, negatieve associatie kan hebben met diabetesgerelateerde cardiovasculaire complicaties. Cupido et al.39 bevestigen deze bevindingen en koppelen perturbatie van IL-6-signalering aan een verminderd risico op cardiometabole ziekten. Omgekeerd observeerden Indumathi et al.40 IL-6 hypomethylering en overexpressie bij diabetische proefpersonen, wat wijst op een pathogene rol bij CAD. Dit komt overeen met Shrivastav et al.41 en Chittaragi et al.42, die verhoogde IL-6-spiegels identificeerden als pro-inflammatoire drijvers en prognostische markers bij diabetische CAD. Echter, Liu et al.43 benadrukken de duale aard van adipokinen zoals IL-6 bij atherosclerose; deze contextafhankelijke dualiteit verklaart waarschijnlijk de tegenstrijdige bewijzen in verschillende studies. De discrepantie in de bevindingen kan worden toegeschreven aan verschillende factoren. Ten eerste kunnen de heterogeniteit in studieontwerpen, patiëntenpopulaties en de methoden die zijn gebruikt om IL-6-spiegels te meten, leiden tot uiteenlopende conclusies44. Ten tweede is de temporele relatie tussen IL-6 en de ontwikkeling van CAD complex en kan deze zowel causale als reactieve componenten bevatten, die mogelijk niet volledig worden vastgelegd in cross-sectionele of zelfs sommige longitudinale studies45.

Hoewel de huidige studie en verschillende andere studies wijzen op een significant verband tussen IL-6 en diabetische CAD, blijft de exacte aard van deze relatie complex en kan deze worden beïnvloed door diverse biologische en methodologische factoren. Het is vermeldenswaard dat deze MR-analyse wijst op een statistisch significante negatieve associatie tussen genetisch voorspelde IL-6-spiegels en diabetesgerelateerde CAD (OR=0,8997), wat contrasteert met de gangbare opvatting dat IL-6 cardiovasculaire pathologie bevordert. Dit verschil kan worden toegeschreven aan de complexe dubbele rol van IL-6 bij ontsteking en weefselherstel46, of aan de mogelijkheid dat de genetische instrumenten die in de MR-analyse zijn gebruikt een specifiek biologisch pad van IL-6-signalering weerspiegelen dat verschilt van het algemene systemische effect. De in deze studie waargenomen negatieve associatie moet niet simpelweg worden geïnterpreteerd als een aanwijzing dat IL-6 een cardioprotectief effect heeft; eerder weerspiegelt het waarschijnlijk de complexe genetische mechanismen die ten grondslag liggen aan de IL-6-receptorsignalering. Alternatief zou de waargenomen negatieve associatie beïnvloed kunnen zijn door compensatiemechanismen of negatieve feedbackloops binnen het inflammatoire netwerk die in conventionele observationele studies niet volledig worden vastgelegd. Toekomstig onderzoek moet zich richten op het verduidelijken van deze complexiteiten via goed ontworpen longitudinale studies en door rekening te houden met de multifactoriële aard van de pathogenese van CAD.

De rol van NETs bij diabetische complicaties, met name in de context van nierziekten, wordt in toenemende mate erkend als een belangrijke mediator van ontsteking en weefselschade. Magaña-Guerrero et al.12 koppelen NETs aan hyperglykemie en nierfalen bij diabetische retinopathie, waarbij ze deze positioneren als markers voor ziekteprogressie. In de context van diabetische nierziekte (DKD) tonen Liu et al.47 aan dat upregulatie van midkine nierschade bevordert door de vorming van NETs te versterken, terwijl Zheng et al.48 aantonen dat NETs glomerulaire endotheeldisfunctie en pyroptose induceren, effecten die worden verminderd door behandeling met DNase I. Naast deze experimentele bevindingen hebben recente MR- en transcriptoomanalyses specifieke NETs-gerelateerde genen (bijv. CLIC3, GBP2) geïdentificeerd als causale risicofactoren voor proliferatieve diabetische retinopathie28. Interessant is dat dit genetische bewijs in scherp contrast staat met deze bevindingen van een negatieve associatie met niercomplicaties, wat de weefselspecifieke mechanismen van NETs benadrukt. Collectief vult deze studie dit beeld aan door een significante causale associatie aan te tonen tussen NETs en perifere circulatoire complicaties bij T2DM. Verder onderzoek is essentieel om de complexe wisselwerking van factoren te ontrafelen die de rol van NETs bij diabetische nefropathie kunnen beïnvloeden.

Hoewel deze studie een potentiële associatie heeft aangetoond tussen IL-6 en diabetische CAD, evenals een significante correlatie tussen NETs en andere diabetische complicaties, verdient de interactie tussen deze twee inflammatoire mediatoren verder onderzoek. Hoewel in deze studie geen specifieke MR-analyse is uitgevoerd om het causale pad van IL-6 naar NETs te testen, suggereert een aanzienlijke hoeveelheid experimenteel bewijs dat IL-6 kan fungeren als een upstream-driver van NETs-geassocieerde inflammatoire kenmerken.

Biologisch gezien is IL-6 een cruciaal cytokine in de acute-fase-respons49 en is aangetoond dat het neutrofielen primet voor de vorming van NETs50. Verhoogde IL-6-spiegels, die vaak worden waargenomen in de hyperglykemische micro-omgeving bij diabetes51, kunnen de JAK/STAT3-signaleringsroute binnen neutrofielen activeren52. Deze activatie is een kritieke stap in de transcriptionele upregulatie van peptidylarginine-deiminase 4 (PAD4)53, het enzym dat verantwoordelijk is voor histoncitrullinatie en chromatinedecondensatie54, kenmerken van NETosis54. Daarom is het biologisch plausibel om een sequentiële pathologische as te hypothetiseren: systemische upregulatie van IL-6 bevordert overmatige vorming van NETs, wat op zijn beurt endotheliale schade en trombose verergert, leidend tot diverse diabetische complicaties, waaronder diabetische CAD en renale laesies. Toekomstige studies die gebruikmaken van multivariabele MR of mediatieanalyse zijn nodig om formeel te kwantificeren in welke mate de schadelijke effecten van IL-6 worden gemedieerd via NETs.

Het hier gepresenteerde analytische kader houdt aanzienlijk potentieel in voor toekomstige toepassingen. Methodologisch gezien kan deze workflow worden uitgebreid naar multivariabele MR (MVMR) om de onafhankelijke causale effecten van gecorreleerde blootstellingen te ontleden, waardoor complexe biologische paden uitgebreider in kaart kunnen worden gebracht. Bovendien zou de integratie van colokalisatie-analyses in toekomstige iteraties helpen verifiëren dat de blootstelling en uitkomst dezelfde causale variant delen, wat het risico op linkage disequilibrium-bias verder vermindert. Klinisch biedt deze aanpak een robuust blauwdruk voor de validatie van drugtargets. Door systematisch te filteren op horizontale pleiotropie en de validiteit van instrumenten te waarborgen, kan dit kader therapeutische targets prioriteren met een hogere waarschijnlijkheid van klinisch succes. Uiteindelijk zou het vertalen van deze genetische inzichten naar risicovoorspellingsmodellen precisiegeneeskundige strategieën kunnen faciliteren, waarbij risicogroepen worden geïdentificeerd die het meest baat hebben bij vroegtijdige interventie.

Deze studie maakt gebruik van een twee-steekproef MR-benadering, waarbij genetische varianten als IV's worden aangewend om causaliteit vast te stellen, waardoor een robuust kader wordt geboden om de relatie tussen NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken en T2DM en de complicaties daarvan te onderzoeken. Deze benadering is een verbetering ten opzichte van observationele studies door MR te gebruiken om confounding en reverse causation te beperken. In tegenstelling tot standaard MR-implementaties die uitsluitend vertrouwen op IVW-schattingen, integreerde deze studie robuuste sensitiviteitsanalyses (gewogen mediaan, MR-Egger) en controles op pleiotropie. Dit multi-methode kader waarborgt dat causale schattingen niet worden gedreven door ongeldige instrumenten, wat een grotere validiteit biedt dan enkelvoudige methode-analyses. Bovendien wordt de reproduceerbaarheid van deze benadering gegarandeerd door een gestandaardiseerd, transparant protocol voor dataharmonisatie en kwaliteitscontrole, waarmee wordt ingespeeld op de "replicatiecrisis" die vaak wordt gezien bij complexe genetische analyses. Wat betreft efficiëntie en toepasbaarheid vermindert deze gestroomlijnde pijplijn de computationele last die gepaard gaat met handmatige datacuratie, wat een snelle screening van meerdere fenotypes mogelijk maakt. Deze schaalbaarheid maakt het kader breed toepasbaar voor analyses, maar ook voor high-throughput phenome-wide association scans, waardoor het een veelzijdiger instrument is voor het verkennen van complexe biologische netwerken dan rigide, enkelstaps observationele benaderingen.

De studie is echter niet zonder beperkingen. Het gebruik van genetische instrumenten berust op de aanname dat de geselecteerde varianten via één enkel pad geassocieerd zijn met de betreffende blootstelling en de uitkomst, wat de complexiteit van biologische systemen mogelijk niet volledig weerspiegelt. Ten tweede kan de generaliseerbaarheid van de bevindingen naar andere etnische of geografische populaties beperkt zijn, aangezien deze studie voor de MR-analyse primair vertrouwde op gegevens van Europese populaties. Ten derde, hoewel deze studie potentiële associaties heeft geïdentificeerd tussen ontstekingskenmerken gerelateerd aan NETs en T2DM en de complicaties daarvan, vereven de specifieke moleculaire regulatoire netwerken en onderliggende biologische mechanismen verdere verduidelijking via opeenvolgende experimentele studies. Het is belangrijk op te merken dat significante causale associaties beperkt bleven tot specifieke complicaties, zoals diabetische CAD, renale en perifere circulatoire complicaties, en niet uniform werden waargenomen voor alle geteste diabetische uitkomsten. Daarnaast kan MR confounding verminderen, maar het kan niet corrigeren voor alle potentiële bronnen van bias, zoals niet-gemeten omgevingsfactoren of populatiestratificatie.

Bovendien kan de generaliseerbaarheid van de bevindingen beperkt worden door de specifieke populaties waaruit de genetische gegevens zijn afgeleid, en is replicatie in diverse populaties noodzakelijk om deze resultaten te bevestigen. Hoewel deze studie gebruikmaakt van grootschalige GWAS-samenvattende statistieken, beperkt de afwezigheid van aanvullende multi-omics sequencinggegevens uit klinische cohorten of experimentele modellen de mogelijkheid om de moleculaire mechanismen en transcriptionele veranderingen ten grondslag aan de waargenomen causale associaties te valideren. Deze MR-workflow vereiste specifieke aanpassingen om analytische uitdagingen aan te pakken, met name met betrekking tot allel-harmonisatie en pleiotropie. Om strand-ambiguïteit bij palindromische SNP's te verminderen, is de pipeline in deze studie aangepast om varianten met intermediaire allelfrequenties (>0.42) strikt uit te sluiten. Daarnaast is de MR-PRESSO-outliertest in deze workflow geïntegreerd om potentiële horizontale pleiotropie op te sporen en op te lossen. Dit maakte de iteratieve verwijdering van ongeldige instrumentele variabelen mogelijk, waardoor werd gewaarborgd dat de uiteindelijke causale schattingen robuust waren en niet werden beïnvloed door pleiotrope uitschieters.

De validiteit van de MR-bevindingen is sterk afhankelijk van verschillende kritieke analytische stappen. Ten eerste is de strikte selectie van IV's van fundamenteel belang. Door vast te houden aan strenge drempelwaarden voor genoombrede significantie (P<5×10-6) en clumping voor linkage disequilibrium (r2<0,001), heeft deze studie het risico op bias door zwakke instrumenten geminimaliseerd, waardoor is gegarandeerd dat de geselecteerde SNP's sterk geassocieerd zijn met de blootstelling. Ten tweede is de robuustheid van de causale schattingen afhankelijk van het aanpakken van horizontale pleiotropie. Deze studie vertrouwde op meerdere complementaire methoden, specifiek MR-Egger, gewogen mediaan en MR-PRESSO, die een noodzakelijke waarborg boden; de consistentie tussen deze methoden, samen met niet-significante MR-Egger intercepts, ondersteunt de aanname dat de IV's de uitkomst uitsluitend via de blootstelling beïnvloeden. Hoewel genetische variaties kunnen dienen als proxies voor NET-geassocieerde inflammatoire kenmerken, weerspiegelen ze mogelijk niet volledig de dynamische, real-time fluctuaties van NETosis in vivo, aangezien de regulatoire paden van het kiemlijngenotype naar transcriptionele activatie en eiwitvrijgave complexe biologische processen omvatten die niet strikt lineair zijn. Wat betreft de reproduceerbaarheid, zorgt het gebruik van grootschalige, publiek beschikbare GWAS-samenvattingsstatistieken ervoor dat deze analyse onafhankelijk geverifieerd kan worden. De transparantie van de analytische pipeline, inclusief de specifieke parameters voor harmonisatie en het verwijderen van uitschieters, maakt een exacte replicatie van deze resultaten mogelijk. Deze stappen versterken gezamenlijk de interne validiteit van deze studie en bieden een reproduceerbaar kader voor toekomstig onderzoek.

Concluderend hanteert deze studie een two-sample MR-benadering om de associatie tussen NET-gerelateerde inflammatoire kenmerken en T2DM en de complicaties daarvan te onderzoeken. De resultaten suggereren een significante associatie tussen IL-6-spiegels en diabetische CAD, wat wijst op een potentiële rol voor IL-6 bij de cardiovasculaire complicaties van diabetes. Daarnaast onthult deze studie associaties tussen NETs en diverse diabetische complicaties, waaronder renale complicaties en complicaties aan de perifere circulatie, wat het belang van NET-gerelateerde inflammatoire kenmerken in de pathogenese van diabetesgerelateerde aandoeningen onderstreept. Deze inzichten dragen bij aan het begrip van de complexe wisselwerking tussen inflammatie, glucosemetabolisme en vasculaire gezondheid bij T2DM. Hoewel de studie waardevol bewijs levert voor de rol van NETs bij diabetische complicaties, wordt ook de complexiteit van de betrokken biologische mechanismen erkend, evenals de noodzaak voor verder onderzoek om de precieze pathways en potentiële therapeutische targets te verhelderen.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende belangen hebben.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De studie werd ondersteund door het Social Science and Technology Research Major Project of Zhongshan (subsidienummer: 2021B3013) en het Social Science and Technology Research Project of Zhongshan (subsidienummer: 2022B1080). De financiers hadden geen rol gespeeld bij het ontwerp van de studie, de gegevensverzameling en -analyse, de beslissing om te publiceren of het opstellen van het manuscript.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
CCN1GWAS CatalogGCST90277805http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90277001-GCST90278000/GCST90277805/harmonised/GCST90277805.h.tsv.gz
Diabetische CADGWAS CatalogGCST006405http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST006001-GCST007000/GCST006405/Fall_gwas_results_any_chd_tab.txt.gz
IL-6GWAS CatalogGCST90010146http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90010001-GCST90011000/GCST90010146/harmonised/33303764-GCST90010146-EFO_0007937.h.tsv.gz
MPOGWAS CatalogGCST90087967http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90087001-GCST90088000/GCST90087967/harmonised/35078996-GCST90087967-EFO_0011039.h.tsv.gz
MPO-DNAGWAS CatalogGCST90013658http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90013001-GCST90014000/GCST90013658/harmonised/33717105-GCST90013658-EFO_0005243.h.tsv.gz
MR-PRESSO PackageGitHub (rondolab)Versie 1.0R-pakket gebruikt om causale schattingen te detecteren en te corrigeren voor pleiotropie.
NEGWAS CatalogGCST90162366http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90162001-GCST90163000/GCST90162366/harmonised/GCST90162366.h.tsv.gz
NETsGWAS CatalogGCST90137414http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90137001-GCST90138000/GCST90137414/harmonised/GCST90137414.h.tsv.gz
NGALGWAS CatalogGCST90161504http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST90161001-GCST90162000/GCST90161504/harmonised/GCST90161504.h.tsv.gz
R SoftwareR Foundation for Statistical ComputingVersie 4.0.5Belangrijkste statistische rekenomgeving gebruikt voor alle analyses.
T2DFINN R9T2Dhttps://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r9/summary_stats/finngen_R9_T2D.gz
T2D met ketoacidoseFINN R9E4_DM2KETOhttps://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r9/summary_stats/finngen_R9_E4_DM2KETO.gz
T2D met neurologische complicatiesFINN R9E4_DM2NEUhttps://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r9/summary_stats/finngen_R9_E4_DM2NEU.gz
T2D met oogheelkundige complicatiesFINN R9E4_DM2OPTHhttps://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r9/summary_stats/finngen_R9_E4_DM2OPTH.gz
T2D met perifere circulatoire complicatiesFINN R9E4_DM2PERIPHhttps://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r9/summary_stats/finngen_R9_E4_DM2PERIPH.gz
T2D met renale complicatiesFINN R9E4_DM2RENhttps://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r9/summary_stats/finngen_R9_E4_DM2REN.gz
TNF-aGWAS CatalogGCST004426http://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/gwas/summary_statistics/GCST004001-GCST005000/GCST004426/harmonised/27989323-GCST004426-EFO_0004684.h.tsv.gz
TwoSampleMR PackageGitHub (MRCIEU)Versie 0.6.22R-pakket gebruikt voor het uitvoeren van de Mendeliaanse Randomisatie-analyse.

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tanase DM, et al. The intricate relationship between type 2 diabetes mellitus (T2DM), insulin resistance (IR), and nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). J Diabetes Res. 2020;2020:3920196.
  2. Yan Y, et al. Prevalence, awareness and control of type 2 diabetes mellitus and risk factors in Chinese elderly population. BMC Public Health. 2022;22(1):1382.
  3. Dugani SB, Mielke MM, Vella A. Burden and management of type 2 diabetes in rural United States. Diabetes Metab Res Rev. 2021;37(5):e3410.
  4. Rodriquez IM, O'Sullivan KL. Youth-onset type 2 diabetes: Burden of complications and socioeconomic cost. Curr Diab Rep. 2023;23(5):59-67.
  5. Zhang H, et al. Neutrophil, neutrophil extracellular traps and endothelial cell dysfunction in sepsis. Clin Transl Med. 2023;13(1):e1170.
  6. Hidalgo A, et al. Neutrophil extracellular traps: From physiology to pathology. Cardiovasc Res. 2022;118(13):2737-53.
  7. Goggs R, Jeffery U, Levine DN, Li RHL. Neutrophil-extracellular traps, cell-free DNA, and immunothrombosis in companion animals: A review. Vet Pathol. 2020;57(1):6-23.
  8. Tilley DO, et al. Histone H3 clipping is a novel signature of human neutrophil extracellular traps. Elife. 2022;11.
  9. Shafqat A, et al. Emerging role of neutrophil extracellular traps in the complications of diabetes mellitus. Front Med (Lausanne). 2022;9:995993.
  10. Njeim R, et al. NETosis contributes to the pathogenesis of diabetes and its complications. J Mol Endocrinol. 2020;65(4):R65-76.
  11. Helseth R, et al. Glucose associated NETosis in patients with ST-elevation myocardial infarction: An observational study. BMC Cardiovasc Disord. 2019;19(1):221.
  12. Magana-Guerrero FS, et al. Spontaneous neutrophil extracellular traps release are inflammatory markers associated with hyperglycemia and renal failure on diabetic retinopathy. Biomedicines. 2023;11(7).
  13. Ibrahim I, et al. Neutrophil extracellular traps (NETs) are associated with type 2 diabetes and diabetic foot ulcer related amputation: A prospective cohort study. Diabetes Ther. 2024;15(6):1333-48.
  14. Joshi MB, et al. High glucose modulates IL-6 mediated immune homeostasis through impeding neutrophil extracellular trap formation. FEBS Lett. 2013;587(14):2241-6.
  15. Bryk AH, et al. Predictors of neutrophil extracellular traps markers in type 2 diabetes mellitus: Associations with a prothrombotic state and hypofibrinolysis. Cardiovasc Diabetol. 2019;18(1):49.
  16. Park JH, et al. Evaluation of circulating markers of neutrophil extracellular trap (NET) formation as risk factors for diabetic retinopathy in a case-control association study. Exp Clin Endocrinol Diabetes. 2016;124(9):557-61.
  17. Winslow S, et al. Multi-omics links IL-6 trans-signalling with neutrophil extracellular trap formation and Haemophilus infection in COPD. Eur Respir J. 2021;58(4).
  18. Bowden J, Holmes MV. Meta-analysis and Mendelian randomization: A review. Res Synth Methods. 2019;10(4):486-96.
  19. Birney E. Mendelian randomization. Cold Spring Harb Perspect Med. 2022;12(4).
  20. Sanderson E, et al. Mendelian randomization. Nat Rev Methods Primers. 2022;2.
  21. Skrivankova VW, et al. Strengthening the reporting of observational studies in epidemiology using Mendelian randomization: The STROBE-MR statement. JAMA. 2021;326(16):1614-21.
  22. Liang YC, et al. Association of circulating inflammatory proteins with type 2 diabetes mellitus and its complications: A bidirectional Mendelian randomization study. Front Endocrinol (Lausanne). 2024;15:1358311.
  23. Papayannopoulos V, Metzler KD, Hakkim A, Zychlinsky A. Neutrophil elastase and myeloperoxidase regulate the formation of neutrophil extracellular traps. J Cell Biol. 2010;191(3):677-91.
  24. Kindberg KM, et al. IL-6R signaling is associated with PAD4 and neutrophil extracellular trap formation in patients with STEMI. Int J Mol Sci. 2025;26(11).
  25. Mao CL, et al. Neutrophil extracellular traps in rheumatoid arthritis: Pathogenic mechanisms and therapeutic potential. Front Immunol. 2025;16:1717671.
  26. Li H, et al. Hepatocytes and neutrophils cooperatively suppress bacterial infection by differentially regulating lipocalin-2 and neutrophil extracellular traps. Hepatology. 2018;68(4):1604-20.
  27. Li T, et al. Cellular communication network factor 1 promotes retinal leakage in diabetic retinopathy via inducing neutrophil stasis and neutrophil extracellular traps extrusion. Cell Commun Signal. 2024;22(1):275.
  28. Hao L, et al. Transcriptome sequencing and Mendelian randomization analysis identified biomarkers related to neutrophil extracellular traps in diabetic retinopathy. Front Immunol. 2024;15:1408974.
  29. Wang S, et al. Association between periodontitis and temporomandibular joint disorders. Arthritis Res Ther. 2023;25(1):143.
  30. Yin KJ, et al. No genetic causal association between periodontitis and arthritis: A bidirectional two-sample Mendelian randomization analysis. Front Immunol. 2022;13:808832.
  31. Genomes Project C, et al. A map of human genome variation from population-scale sequencing. Nature. 2010;467(7319):1061-73.
  32. Burgess S, Thompson SG, Collaboration CCG. Avoiding bias from weak instruments in Mendelian randomization studies. Int J Epidemiol. 2011;40(3):755-64.
  33. Burgess S, Butterworth A, Thompson SG. Mendelian randomization analysis with multiple genetic variants using summarized data. Genet Epidemiol. 2013;37(7):658-65.
  34. Burgess S, Thompson SG. Interpreting findings from Mendelian randomization using the MR-Egger method. Eur J Epidemiol. 2017;32(5):377-89.
  35. Bowden J, Davey Smith G, Haycock PC, Burgess S. Consistent estimation in Mendelian randomization with some invalid instruments using a weighted median estimator. Genet Epidemiol. 2016;40(4):304-14.
  36. Greco MF, Minelli C, Sheehan NA, Thompson JR. Detecting pleiotropy in Mendelian randomisation studies with summary data and a continuous outcome. Stat Med. 2015;34(21):2926-40.
  37. Verbanck M, Chen CY, Neale B, Do R. Publisher correction: Detection of widespread horizontal pleiotropy in causal relationships inferred from Mendelian randomization between complex traits and diseases. Nat Genet. 2018;50(8):1196.
  38. Cheng H, Garrick DJ, Fernando RL. Efficient strategies for leave-one-out cross validation for genomic best linear unbiased prediction. J Anim Sci Biotechnol. 2017;8:38.
  39. Cupido AJ, et al. Dissecting the IL-6 pathway in cardiometabolic disease: A Mendelian randomization study on both IL6 and IL6R. Br J Clin Pharmacol. 2022;88(6):2875-84.
  40. Indumathi B, Oruganti SS, Sreenu B, Kutala VK. Association of promoter methylation and expression of inflammatory genes IL-6 and TNF-alpha with the risk of coronary artery disease in diabetic and obese subjects among Asian Indians. Indian J Clin Biochem. 2022;37(1):29-39.
  41. Shrivastav D, et al. Comparative analysis of Nε-carboxymethyl-lysine and inflammatory markers in diabetic and non-diabetic coronary artery disease patients. World J Diabetes. 2023;14(12):1754-65.
  42. Chittaragi GH, Ambali AP, Honnutagi R, Ganesh V. Interleukin-6 and uric acid among type 2 diabetes mellitus patients with coronary artery disease. Bioinformation. 2023;19(12):1134-8.
  43. Liu L, et al. Adipokines, adiposity, and atherosclerosis. Cell Mol Life Sci. 2022;79(5):272.
  44. Hua MJ, Butera G, Akinyemi O, Porterfield D. Biases and limitations in observational studies of long COVID prevalence and risk factors: A rapid systematic umbrella review. PLoS One. 2024;19(5):e0302408.
  45. Savitz DA, Wellenius GA. Can cross-sectional studies contribute to causal inference? It depends. Am J Epidemiol. 2023;192(4):514-6.
  46. Hirano T. IL-6 in inflammation, autoimmunity and cancer. Int Immunol. 2021;33(3):127-48.
  47. Liu G, Ren X, Li Y, Li H. Midkine promotes kidney injury in diabetic kidney disease by increasing neutrophil extracellular traps formation. Ann Transl Med. 2022;10(12):693.
  48. Zheng F, et al. Neutrophil extracellular traps induce glomerular endothelial cell dysfunction and pyroptosis in diabetic kidney disease. Diabetes. 2022;71(12):2739-50.
  49. Schmidt-Arras D, Rose-John S. IL-6 pathway in the liver: From physiopathology to therapy. J Hepatol. 2016;64(6):1403-15.
  50. Xiao Y, et al. Cathepsin C promotes breast cancer lung metastasis by modulating neutrophil infiltration and neutrophil extracellular trap formation. Cancer Cell. 2021;39(3):423-37.e427.
  51. Sater MS, et al. Plasma IL-6, TREM1, uPAR, and IL6/IL8 biomarkers increment further witnessing the chronic inflammation in type 2 diabetes. Horm Mol Biol Clin Investig. 2023;44(3):259-69.
  52. Martino N, et al. Endothelial SOCS3 maintains homeostasis and promotes survival in endotoxemic mice. JCI Insight. 2021;6(14).
  53. Akboua H, Eghbalzadeh K, Keser U, Wahlers T, et al. Impaired non-canonical transforming growth factor-β signalling prevents profibrotic phenotypes in cultured peptidylarginine deiminase 4-deficient murine cardiac fibroblasts. J Cell Mol Med. 2021;25(20):9674-84.
  54. Thiam HR, et al. NETosis proceeds by cytoskeleton and endomembrane disassembly and PAD4-mediated chromatin decondensation and nuclear envelope rupture. Proc Natl Acad Sci U S A. 2020;117(13):7326-37.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Neutrofiele extracellulaire trapsinterleukine 6diabetische complicatiescoronaire hartziekterenale complicatiesperifere circulatoire complicatiesgenoombrede associatie

Gerelateerde artikelen