Associatiestudie van Mir-146a Rs2910164 met de vatbaarheid voor allergische rinitis

Samenvatting

De huidige studie heeft tot doel de relatie tussen het miR-146a rs2910164-polymorfisme en de vatbaarheid voor allergische rinitis (AR) te verduidelijken. Lagere plasma-miR-146a-spiegels en het rs2910164 GG-genotype zijn gekoppeld aan een verhoogd AR-risico, versterkte ontstekingsreacties en ernstigere klinische manifestaties bij AR-patiënten.

Samenvatting

Allergische rinitis (AR) vormt geen bedreiging voor het leven van patiënten, maar tast hun kwaliteit van leven ernstig aan. MicroRNA-146a (miR-146a) is cruciaal voor immuunregulatie en ontstekingsreacties; de relatie tussen het miR-146a rs2910164-polymorfisme en de vatbaarheid voor AR is echter nog onvolledig begrepen. Deze case-controlstudie is ontworpen om de invloed van het miR-146a rs2910164-polymorfisme op de vatbaarheid voor AR te onderzoeken. Deze studie omvatte in totaal 180 vrijwilligers zonder AR en 21 AR-patiënten. De expressie van plasma miR-146a werd gemeten via RT-qPCR; het rs2910164-genotype werd gedetecteerd met de TaqMan-qPCR-methode. ELISA werd gebruikt om de spiegels van serum IgE, IL-4, IL-6 en IL-10 te bepalen. Pearson-correlatieanalyse evalueerde de lineaire correlaties tussen de expressie van miR-146a en de TNSS-score, RQLQ-score, alsook de concentratie van serumfactoren. De risicofactoren voor AR werden geïdentificeerd via logistische regressie. Het GG-genotype en het G-allel van miR-146a rs2910164 kwamen significant vaker voor bij AR-patiënten dan bij gezonde controles. Het plasma miR-146a-niveau was verlaagd bij AR-patiënten. Het plasma miR-146a-niveau was lager bij AR-patiënten met het GG-genotype, waarbij actievere allergische en ontstekingsreacties werden vertoond. De miR-146a-expressie was nauw verbonden met allergische symptomen en de ernst van de klinische manifestaties. Logistische regressie geeft aan dat de spiegels van serum IgE en IL-4 onafhankelijke risicofactoren waren voor AR, terwijl IL-10 en miR-146a-expressie onafhankelijke beschermende factoren waren. Lage plasma miR-146a-niveaus worden waargenomen bij AR-patiënten, en het GG-genotype van miR-146a rs2910164 verhoogt de vatbaarheid voor AR.

Inleiding

Allergische rinitis (AR) is een door allergenen gemedieerde, niet-infectieuze inflammatoire aandoening van het neusslijmvlies. De typische klinische symptomen van AR omvatten een jeukende neus, neusverstopping, helder neusslijm en frequent niezen¹. In ernstigere gevallen kunnen patiënten ook last hebben van een verminderd reukvermogen, wat zelfs de slaapkwaliteit kan beïnvloeden. Epidemiologische gegevens wijzen erop dat de wereldwijde prevalentie van AR jaarlijks toeneemt en ligt tussen de 10% en 25%². Hoewel AR het leven van patiënten niet in gevaar brengt, verstoort het de slaap, het leren en het werk ernstig, vermindert het de kwaliteit van leven aanzienlijk en legt het een zware economische last op individuen en de samenleving³. Onderzoek heeft bevestigd dat AR een risicofactor is voor astma, en naarmate de ziekte vordert, hebben patiënten een grotere kans op het ontwikkelen van sinusitis of neuspoliepen, wat de ziektelast verder verhoogt^4,5. Daarom is de preventie en beheersing van AR een kerntaak geworden binnen het vakgebied van de luchtwegziekten. De pathogenese van AR is echter nog niet volledig opgehelderd. Een grondige exploratie van het pathofysiologische mechanisme van AR en de ontwikkeling van gerichte behandelstrategieën zijn van cruciaal belang. Dit zijn tevens de huidige wetenschappelijke vraagstukken die dringend moeten worden aangepakt.

Het ontstaan van AR is gerelateerd aan omgevings- en genetische factoren⁶. Huidig onderzoek stelt over het algemeen dat het synergetische effect van individuele genetische vatbaarheid en de blootstelling aan allergenen in de omgeving de belangrijkste drijvende factor is voor het ontstaan van AR. Het team van Brozek bevestigde verder dat de wisselwerking tussen de genetische vatbaarheid van het lichaam en omgevingsblootstellingen de fundamentele oorzaak is van AR². In het onderzoek naar het genetische mechanisme van AR is genetisch polymorfisme geleidelijk in het centrum van de aandacht van wetenschappers komen te staan. Single-nucleotide polymorfismen (SNP's), als de meest voorkomende vorm van genetisch polymorfisme, zijn de primaire oorzaak van variaties in genetische informatie bij organismen⁷. Toenemend bewijs wijst erop dat het TT-genotype bij IL-3 rs704343 kan dienen als een potentieel doelwit voor de preventie en behandeling van AR⁸. Daarnaast fungeert het TT-genotype op de C-159T-plaats van de CD14-promotor als een voorspellende marker voor het risico op AR⁹. Dit geeft aan dat SNP's van sleutelgenen kunnen dienen als belangrijke moleculaire doelwitten voor het beoordelen van het risico op AR, het geven van vroege waarschuwingen en het bereiken van precieze preventie en behandeling. Dit biedt cruciale aanwijzingen voor een dieper begrip van het mechanisme van genetische vatbaarheid bij AR.

Talrijke studies hebben aangetoond dat abnormale expressie van microRNA's (miRNA's) een van de belangrijkste drijvende factoren is voor het ontstaan en de ontwikkeling van een breed spectrum aan ziekten¹⁰. miRNA's kenmerken zich door een stabiele aanwezigheid in lichaamsvloeistoffen, waardoor ze zeer gevoelige moleculaire markers zijn voor ziekteconcentratie. miR-146a is een type niet-coderend RNA-molecuul met uitgebreide biologische functies¹. Het rs2910164-polymorfisme bevindt zich in de stem-loop regio van de precursor miR-146a-sequentie. Variatie op deze positie kan de verwerkings- en maturatie-efficiëntie van pre-miR-146a beïnvloeden, waardoor het expressieniveau van matuur miR-146a verandert en downstream immuun- en inflammatoire reacties worden beïnvloed. Eerdere studies hebben bevestigd dat overexpressie van miR-146a de hyperresponsiviteit van de luchtwegen in asthamuismodellen significant kan verminderen en de activatie van gesensitiseerde lymfocyten kan remmen¹². Door de activiteit van de epidermal growth factor receptor (EGFR) te targeten en te remmen, kan miR-146a de inflammatoire schade bij sinusitis effectief verlichten¹³. Bovendien kan overexpressie van miR-146a ook de pathologische symptomen van het AR-muismodel verlichten door de Toll-like receptor 4 (TLR4) signaleringsroute te blokkeren¹⁴. Deze observaties benadrukken de cruciale rol van miR-146a bij het moduleren van ziekten van het respiratoire systeem.

Bestaand bewijs uit studies naar genetisch polymorfisme geeft aan dat de G-allelfrequentie op de miR-146a rs2910164 locus nauw verbonden is met hyperreactiviteit van de luchtwegen¹⁵. Deze SNP wordt ook beschouwd als een potentiële biomarker voor het risico op astma in de Koreaanse populatie¹⁵. Daarnaast heeft het team van Jimenez-Morales verder onthuld dat het CC-genotype op de miR-146a rs2910164 locus bescherming biedt tegen astma¹⁶. Er waren echter geen relevante studies die rapporteerden over de associatie tussen het miR-146a rs2910164 polymorfisme en de vatbaarheid voor AR. Daarom is deze studie erop gericht de invloed van het polymorfisme van miR-146a rs2910164 op AR te verifiëren, om zo een nieuwe theoretische basis te bieden voor de pathogenese, klinische diagnose en behandeling van AR.

Protocol

Ethische verklaring:
Alle deelnemers werden volledig geïnformeerd over het doel van ons experiment en hebben het formulier voor geïnformeerde toestemming ondertekend. Dit onderzoek is goedgekeurd door de ethische commissie van Longyan First Affiliated Hospital of Fujian Medical University (Goedkeuringsnummer LYREC2023-k07-01). Alle procedures zijn uitgevoerd in overeenstemming met de relevante richtlijnen, regelgeving en de Verklaring van Helsinki.

Werving van deelnemers, geschiktheidscriteria en monstername
In totaal werden tussen januari 2023 en mei 2025 211 personen met de diagnose AR en 180 gezonde deelnemers (niet-AR) geworven bij de polikliniek voor KNO van het Longyan First Affiliated Hospital van de Fujian Medical University. De diagnostische criteria voor AR waren gebaseerd op de richtlijnen van de Chinese Society of Allergy voor de diagnose en behandeling van allergische rhinitis¹⁷. Van patiënten werd vereist dat zij minstens twee klinische symptomen van AR vertoonden, waaronder neusjeuk, niezen, neusverstopping of een loopneus. Daarnaast moest bij onderzoek van het neusslijmvlies bleekheid en oedeem zichtbaar zijn, en moest ofwel het resultaat van de Skin Prick Test (SPT) of het resultaat van de serum IgE-test positief zijn. De SPT werd uitgevoerd door gespecialiseerd personeel in de poliklinische kamer voor allergenentesten om de nauwkeurigheid en consistente resultaten te garanderen. Alle patiënten met AR ondergingen met hulp van medisch personeel assessments met de Rhino conjunctivitis Quality of Life Questionnaire (RQLQ) en de Total Nasal Symptom Score (TNSS), waarbij de scores werden genoteerd voor verdere analyse.

Gezonde vrijwilligers die een routinematig lichamelijk onderzoek ondergingen in het ziekenhuis werden geworven voor de non-AR-groep. In aanmerking komende deelnemers hadden geen persoonlijke of familiale geschiedenis van AR, geen geschiedenis van astma of andere allergische aandoeningen, geen chronische sinusitis of andere ontstekingstypen van de neusholte, en geen luchtweginfectie in de voorafgaande maand. Daarnaast werden personen met een geschiedenis van ernstige hartaandoeningen, lever-, long- of nierziekten, of enige maligne tumoren, uitgesloten van de studie.

De perifere veneuze bloedmonsters van de twee groepen vrijwilligers werden verzameld. Een deel van het anticoagulerende veneuze bloed werd gebruikt voor DNA-extractie en voor het extraheren van plasma-RNA. Een ander deel van het veneuze bloed werd gescheiden om serum te verkrijgen, dat werd gebruikt voor de detectie van serum-gerelateerde factoren (immunoglobuline E (IgE), interleukine-4 (IL-4), IL-6 en IL-10).

DNA-extractie:
Voor DNA-extractie werden 200 µL van de perifere veneuze bloedmonsters geëxtraheerd met behulp van de whole blood genomic DNA extraction kit (zie Tabel met materialen). De bloedmonsters werden verzameld in lithiumheparine-anticoagulatietubes, vervolgens verdeeld in aliquoten en voor bewaring ingevroren bij -20 °C. De specifieke uitvoeringsprocedures moeten strikt gebeuren volgens de instructies van de kit. Tot slot werd 10 µL elutiebuffer gebruikt om het DNA te elueren. De zuiverheid van het geëxtraheerde DNA-monster werd bepaald met een nucleïnezuur-/proteïne-analyser (spectrofotometer) (de OD₂₆₀/OD₂₈₀-ratio lag tussen 1,8 en 2,0). Na de detectie werden de DNA-monsters bewaard bij -20 °C voor toekomstig gebruik in de daaropvolgende genotyperingsexperimenten.

Genotypebepaling
Voor het bepalen van de distributie van miR-146a rs2910164-genotypes werd de TaqMan SNP genotyping kit gebruikt. De informatie over de kit is opgenomen in de lijst met verbruiksartikelen. Het totale reactievolume van de PCR was 10 µL, bestaande uit 5 µL Master Mix, 0,5 µL typeringsprobe-primer-mengsel, 10 ng template-DNA en RNase-vrij water. De DNA-amplificatie werd uitgevoerd met het Roche LightCycler 480 II real-time fluorescentie kwantitatieve PCR-instrument. Reactiecondities: pre-denaturatie bij 95 °C gedurende 10 min; 40 cycli (95 °C gedurende 15 seconden, 60 °C gedurende 1 min), waarbij de FAM/VIC-fluorescentie werd uitgelezen bij 60 °C. Na voltooiing van de amplificatie werden de verzamelde FAM/VIC-dubbele fluorescentiesignalen geanalyseerd met LightCycler 480-software en werden de genotypedata statistisch verwerkt. Een enkel FAM-signaal representeert een homozygoot genotype, een enkel VIC-signaal representeert een ander homozygoot genotype, en de aanwezigheid van beide signalen duidt op een heterozygoot genotype. Monsters met abnormale signalen of inconsistente resultaten bij herhaling worden opnieuw getest. Elk experiment werd uitgevoerd met zowel een template-vrije controle als een positieve controle voor kwaliteitscontrole. Alle monsters werden in drie technische replica's verwerkt.

RT-qPCR
De totale extractie van plasma-miRNA werd uitgevoerd uit 100 µL plasma met behulp van een specifieke miRNA-extractiekit. De informatie over de kit is opgenomen in de lijst met verbruiksartikelen. De RNA-concentratie werd bepaald met een spectrofotometer. De OD₂₆₀/OD₂₈₀ de ratio van de geëxtraheerde gekwalificeerde miRNA-monsters varieerde van 1,8 tot 2,0. Voor de reverse transcriptie om cDNA te synthetiseren werd 200 ng RNA gebruikt, waarbij de reactieprocedure werd uitgevoerd volgens de standaardinstructies van de kit. De reverse transcriptie werd uitgevoerd in een totaal volume van 20 µL, inclusief incubatie bij 42 °C gedurende 60 min en inactivatie bij 85 °C gedurende 5 min. De qPCR-reactie werd voorbereid volgens het vastgestelde protocol, met een totaal volume van 20 µLHet reactiemengsel werd als volgt samengesteld: 10 µL van qPCR-premix, 0.4 µL van de forwardprimer, 0.4 µL van de reverse primer, 1 µL van cDNA-template, en 8.2 µL van RNase-vrij water. Er werd gebruikgemaakt van specifieke primers voor miR-146a en het interne referentiegen U6. De amplificatie werd uitgevoerd met het Roche LightCycler 480 II real-time fluorescentie kwantitatieve PCR-instrument. De thermische cyclusparameters voor de qPCR waren: 95 °C voor pre-denaturatie gedurende 30 s, gevolgd door 40 cycli van denaturatie bij 95 °C gedurende 5 s en annealing en extensie bij 60 °C gedurende 30 s. Alle monsters werden in drie technische replica's uitgevoerd. De experimentele gegevens werden geanalyseerd met de LightCycler 480 Software. Gebruik U6 als interne referentie om de variatie tussen de monsters te corrigeren en bereken vervolgens ΔCt (de Ct-waarde van miR-146a - de Ct-waarde van U6), bereken vervolgens ΔΔCt (de ΔCt-waarde van de experimentele groep - de ΔCt van de controlegroep), en tot slot werd het relatieve expressieniveau van miR-146a verkregen via 2^⁻ΔΔCt.

ELISA
De serumspiegels van IgE, IL-4, IL-6 en IL-10 werden bepaald met ELISA-kits. De experimentele procedures zijn gebaseerd op de handleiding. De specifieke stappen waren als volgt: Ten eerste werd de geconcentreerde wasoplossing verdund en werden de standaarden gradueel verdund om werkoplossingen voor de standaardcurve voor te bereiden. Ten tweede werden 50 µL verdunningsvloeistof, standaardoplossing en het te testen monster aan de wells toegevoegd en 60 min incubated bij 37 °C. Na incubatie werden de wells drie keer gewassen met wasbuffer. Vervolgens werd 50 µL werkoplossing van het enzym-geconjugeerde antilichaam toegevoegd en werden de platen 30 min incubated bij 37 °C. Na voltooiing van de incubatie werd de vloeistof afgevoerd en werden de wells opnieuw gewassen, gevolgd door de toevoeging van chromogene oplossing voor een incubatie van 15 min bij 37 °C in het donker. Na toevoeging van de stopoplossing werd de absorbentie gemeten bij 450 nm met een microplatereader. Monsterconcentraties werden berekend aan de hand van de standaardcurve. Elk monster werd drie keer getest. Gegevens met een variatiecoëfficiënt van minder dan 10% werden als geldig beschouwd. Tijdens het experiment werden blanco wells en controle-wells ingericht voor kwaliteitscontrole. Het detectiebereik en de gevoeligheid van de kit voldeden aan de voorschriften in de handleiding van de fabrikant.

Datastatistiek
De experimentele gegevens werden geanalyseerd met de softwarepakketten SPSS en GraphPad Prism 9. De gegevens werden gepresenteerd als gemiddelde ± standaarddeviatie (gemiddelde ± SD). De Shapiro-Wilk-toets werd gebruikt om de normaliteit van continue variabelen te beoordelen, en de toets van Levene werd toegepast om de homogeniteit van de variantie te evalueren. De vergelijking van continue variabelen tussen de twee groepen werd geanalyseerd met de t-toets voor onafhankelijke steekproeven. Voor vergelijkingen tussen meerdere groepen werd een eenweg-ANOVA uitgevoerd, gevolgd door de post-hoc toets van Tukey, en een tweeweg-ANOVA werd toegepast om de hoofdeffecten van twee onafhankelijke factoren en hun interactie-effect te evalueren. Outliers werden geïdentificeerd en uitgesloten op basis van de 3-standaarddeviatie-regel. In deze studie werden geen ontbrekende gegevens aangetroffen. De receiver operating characteristic (ROC)-curve werd gebruikt om de diagnostische effectiviteit van miR-146a voor AR te analyseren. Relevante ROC-parameters en 95% betrouwbaarheidsintervallen werden berekend met behulp van ingebouwde statistische algoritmen. Pearson-correlatieanalyse werd gebruikt om de lineaire correlatie tussen de expressie van miR-146a en de spiegels van serum-gerelateerde factoren te meten. Univariabele en multivariabele logistische regressieanalyses werden uitgevoerd om risicofactoren voor AR te screenen. Variabelen met p < 0.05 in de univariabele analyse werden opgenomen in het multivariabele logistische regressiemodel. p < 0.05 werd beschouwd als statistisch significant.

Resultaten

Kenmerken van de deelnemers en genotypeverdeling
De klinische baselinegegevens van de twee groepen proefpersonen werden statistisch geanalyseerd. De resultaten gaven aan dat de serumspiegels van IgE, IL-4, IL-6 en IL-10 significante verschillen vertoonden. In vergelijking met de controlegroep van vrijwilligers zonder AR waren de concentraties van serum IgE, IL-4 en IL-6 in de groep AR-patiënten verhoogd, terwijl het IL-10-niveau verlaagd was (Tabel 1). De genotypeverdeling van miR-14...

Discussie

AR is een chronische allergische inflammatoire aandoening van de luchtwegen. Het kernmechanisme van AR is dat na blootstelling van het lichaam aan allergenen, inflammatoire laesies in het neusslijmvlies worden gemedieerd door IgE^17,18. De klinische symptomen omvatten voornamelijk neusjeuk, neusverstopping, niezen en heldere neusuitvloeiing, wat de levenskwaliteit van patiënten ernstig verslechtert. Epidemiologische en genetische studies bevestigden dat genetische...

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
15 ml centrifugebuis	Corning	430791	Voor plasmascheiding, monster-subverpakking en nucleïnezuurextractie
Applied Biosystems TaqMan Genotyping Master Mix	Thermo Fisher Scientific	4371355	2× geconcentreerde mastermix geoptimaliseerd voor SNP-genotypering, bestaande uit hot-start Taq-polymerase, dNTP's, magnesiumionen, reactiebuffer en ROX-referentiekleurstof. Geen handmatige systeemvoorbereiding vereist. De mix is compatibel met de bovengenoemde TaqMan SNP Genotyping Assay en biedt een stabiel enzymatisch reactiesysteem voor SNP-amplificatie en fluorescente genotypering met een goede reproduceerbaarheid en duidelijke clusteringresultaten.
Applied Biosystems TaqMan SNP Genotyping Assay (rs2910164, miR-146a)	Thermo Fisher Scientific	C__15946974_10	Vooraf ontworpen primer- en probeset voor SNP-genotypering van de humane miR-146a rs2910164 locus. Het bevat specifieke PCR-primers en twee MGB-fluorescerende probes. VIC labelt het C-allel en FAM labelt het G-allel. Hiermee kunnen drie genotypen (CC, CG, GG) nauwkeurig worden onderscheiden in één enkele reactiebuis, geschikt voor end-point allelische discriminatie op qPCR-instrumenten.
BD lithiumheparine-anticoagulantia bloedafnamebuisjes	BD Vacutainer	367884	Klinische biochemie, spoedtesten en hematologisch onderzoek
Graphpad	VS	/	Professionele wetenschappelijke grafische weergave & statistiekensoftware, standaard voor biologie/geneeskunde, geen programmering vereist. Belangrijkste sterktes: t-toetsen, ANOVA, overlevingsanalyse, niet-lineaire regressie (bijv. dosis-respons-curves); genereert publicatiewaardige grafieken (staafdiagrammen, spreidingsdiagrammen, overlevingscurves) voor qPCR, Western Blot, celassays.
Immunoglobuline E (IgE) ELISA-kit	Jiancheng	H108-1-2	Toepassing: Immuunrespons, onderzoek naar allergische aandoeningen
Interleukine-10 (IL-10) ELISA-kit	Jiancheng	H010-1-2	Toepassing: Ontsteking, immuunregulatie, klinisch biomarkeronderzoek
Interleukine-4 (IL-4) ELISA-kit	Jiancheng	H05-1-2	Onderzoeksveld: Ontsteking, Th2-immuunrespons, allergische reactie
Interleukine-6 (IL-6) ELISA-kit	Jiancheng	H07-1-2	Toepassing: Ontsteking, immuunregulatie, klinisch biomarkeronderzoek
LightCycler 480-software (v1.5 /v1.6)	Roche Diagnostics	/	Officiële Roche-software die met één klik de acquisitie van qPCR-gegevens, kwantitatieve analyse, smeltcurveanalyse en SNP-genotypering (TaqMan end-point methode + HRM) mogelijk maakt.
miRcute Enhanced miRNA cDNA first-strand synthesekit	TIANGEN	KR21-02	Geschikt voor reverse transcriptie van alle mature miRNA's
miRcute Serum/Plasma miRNA Extractie- en Isolatiekit	TIANGEN	DP503	Toepasbare monsters: Menselijk serum, plasma, cel-supernatans
Roche LightCycler 480 Instrument II (Real-Time PCR-systeem)	Roche Diagnostics	05015278001	qPCR-kwantificering + SNP-genotypering (inclusief TaqMan) + HRM-analyse van smeltcurves met hoge resolutie
SPSS 27.0	USA	/	Alles-in-één statistieksoftware voor sociale wetenschappen/medische wetenschappen, menusturing (geen codering), ideaal voor grote steekproeven & complexe designs. Kernfuncties: beschrijvende statistiek, ANOVA, regressie, chi-kwadraat, overlevingsanalyse, betrouwbaarheid, steekproefgrootteberekening; ondersteunt datacleaning & multi-formaatimport (Excel/CSV) voor klinische, survey- en epidemiologische gegevens.
SuperReal PreMix Plus (SYBR Green)	TIANGEN	FP205-02	Hoogspecifieke verbeterde mastermix; geoptimaliseerde buffer met H-bindingsfactor minimaliseert primerdimeren & aspecifieke producten; hot-start Taq + ROX voor LightCycler 480 II; hoge sensitiviteit & reproduceerbaarheid; ideaal voor genen met een lage abundantie, complexe monsters, high-throughput genotypering.
Thermo Scientific Multiskan FC microplaatfotometer	Thermo	51119180	High-end multimode plaatlezer; absorbentie (inclusief 450 nm) + fluorescentie + luminescentie; lineariteit 0–4 Abs (±2%) bij 450 nm, precisie SD&<0,01 Abs; compatibel met 96/384-well platen, automatisch dynamisch bereik; ideaal voor ELISA, celviabiliteit, immunoassays, moleculaire interacties.
Thermo Scientific NanoDrop One UV-Vis spectrofotometer	Thermo	/	Goudstandaard microvolume UV-Vis-spectrofotometer; 1–2 μL monster, geen cuvet nodig; meet direct nucleïnezuren (260 nm), eiwitten (280 nm), OD600 met concentratie & zuiverheidsratio's (A260/A280, A260/A230); full-spectrum scan 190–850 nm, automatische kalibratie, touchscreen; ideaal voor qPCR, NGS, QC van eiwitzuivering.
Extractieset voor genomisch DNA uit volbloed	TIANGEN	DP304-03	Toepasbare monsters: Perifeer volbloed, bloedcellen, weefselmonsters